液相色谱-串联质谱(LCMSMS)方法 - 岛津中国
液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)设备安全操作规程
液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）设备安全操作规程1. 前言：液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）是分析化学的一种重要手段，它具有高灵敏度、高分辨率、高准确度、高特异性等优势，广泛应用于环境、医药、制药、化工、食品、农业等领域的分析和检测。
然而，LC-MS作为一种特殊的化学分析仪器，在操作中存在潜在的危险，若不遵循正确的操作规范，不仅容易引起设备损坏，还可能对人员造成伤害。
为了保障人员安全，实现设备的正常运行，特制定本操作规程，供液相色谱-质谱联用仪的使用者参考。
2. 设备基本情况：液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）是由主机、气源、布图仪、气液控制器等部分组成的，具体情况如下：•主机：负责液相和质谱数据的采集和处理；•气源：提供质谱需要的空气或氮气；•布图仪：由我们提供样品，通过特定的方法将样品尽量分离，并且将其从液体中进入气态；•气液控制器：控制样品的流动，以便样品进入到质谱分析中。
3. 设备安全操作规程：3.1 设备运行前的检查在每次使用之前，操作人员必须进行设备的检查，确保设备状态正常，无任何故障，具体操作如下：•检查主机的电源线和通讯线是否连接牢固；•检查各个部分的仪器是否通电，是否工作正常；•检查设备的气源是否给予充足，如供气压力、纯度是否符合要求。
3.2 操作前的准备操作人员在开始操作前，必须完成以下准备工作：•佩戴实验室的个人防护用品，包括手套、防护眼镜、口罩等；•将操作手册材料准备齐全，保持操作手册对设备的清洁程度；•检查样品的来源和容器包装，保证样品的完整性。
3.3 操作时的注意事项操作人员在实验操作中，必须注意以下事项：•在操作前认真阅读操作手册，并按照操作手册上的步骤进行操作；•操作过程中，必须正确设置设备的参数，并按照标准的操作流程进行操作；•在使用设备时，必须遵守操作规范，领先实验室人员的统一指挥。
3.4 操作后的注意事项操作人员在完成操作后，必须进行以下事项：•断开电源，关掉气源，离开安全区域；•将设备周围的样品容器归位，并整理好样品的相关文件；•检查设备的状态，是否存在漏洞、损坏等情况，并及时进行相应的处理。
液相色谱——串联质谱法
液相色谱——串联质谱法液相色谱——串联质谱法1. 概述液相色谱——串联质谱法（LC-MS）是一种用于快速鉴定和定量分析大量小分子物质和链状有机化合物的一种惰性重排技术。
这种技术通过将液相色谱和质谱两大仪器技术的优越性能有机结合，实现了液体中微量物质的快速鉴定、分离和测定。
这套技术比单独使用液相色谱成像分析，可以提高检测限下限，解决液相色谱分离后质谱加速定性分析的问题，因而更加实用。
2. 技术原理LC-MS系统由液相色谱分离柱，检测装置，与两个机构负责操纵液相色谱组分提取等主要部件组成。
样品分离和分析步骤就是将样品溶解在适当的溶剂中，经液相色谱－质谱就可以分析出单分子组分的物化性质和表观分子量，以及细微程度的组成差别。
检测装置实现了LC-MS连续启动程序，得到样品组分的全谱图谱，获取检测信息，实现LS-MS技术的数据处理，实现样品鉴别，定量计算，同时获取实时的检测数据，保证检测的准确性和准确度。
3. 优势（1）具备高敏感性和低检出限，可以检测非常稀少的物质，提高检测的灵敏度。
（2）可以实现快速和自动化操作，大大提高测定速度。
（3）LC-MS能实现样品分离前质谱加速定性分析、消除高纯度物质混杂分离困难、采样测定对比分析等特点，从而提高检索精确度和结果准确度。
（4）结合液相色谱分离和双离子检测质谱技术，可以自动化连续运行，来自动调整参数实现高灵敏度测定和高分辨率分离。
4. 应用领域LC-MS主要用于有机物、抗生素、毒素、毒物、化合物的研究以及在生物信息学和医学方面的研究等。
当前有机物、抗生素、毒素、毒物在药物研究、毒理、环境污染检测和药物开发等领域都有广泛的应用，以及药剂学、兽医学、分子毒理学和菌类学领域的研究。
5. 结论液相色谱——串联质谱法（LC-MS）是一种结合液相色谱和质谱技术，可以用于鉴定薄分子物质和链状有机化合物的惰性重排技术。
该技术可以飞快地连续运行，自动调整参数，从而实现了高灵敏度测定和高分辨率分离，同时也可以检测非常稀少的物质，具有广泛的应用领域。
岛津串联液质课件
Ch1 Ch1 Vol. Data
Ch2 Ch2 Ch1 Ch1 Vol. Data Vol. Data
Ch2 Ch2 Vol. Data
延迟时间 驻留时间
实际离子强度
如果采用较短的延迟时间:
重现性更好
如果采用较长的延迟时间:
重现性变差。
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
为分析物 1 / 碎片 1 设定 Q1, 碰撞室和 Q2 电压
等待片刻 (切换时间或扫描延迟时间)
监测碎片1的信号 (驻留时间)
为分析物 1 / 碎片 2 设定 Q1, 碰撞室和 Q2 电压
等待片刻
(切换时间或扫描延迟时间)
为分析物 2 / 碎片 1 设定 Q1, 碰撞室和 Q2 电压
等待片刻
(切换时间或扫描延迟时间)
positive ion mode 6
4
2
15msec
High voltage [kV]
HV power supply(+)
HV power supply(-)
0
-2
-4
negative ion mode
-6
5 msec/div
Ionization HV cable probe
专利申请中: PCT/JP2005/016526
17
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
超快速MRM和超快速极性切换技术的融合
Ch1 Data
Ch2 Vol.
Ch2 Data
Ch26 Data
NEG Ch27Ch27 Vol. Vol. Data
Ch1 POS Ch1 Ch1 Vol. Vol. Data
岛津公司液质联用仪LCMS操作手册LCMStrainingmaterial.pdf
LCMS简易操作手册前 言感谢您选择岛津公司的液质联用仪LCMS, 此本简易手册包括七节内容，供您学习参考。
学习LCMS之前，要求对高效液相色谱有一定的了解和熟悉。
更详细的软件功能及参数请参考软件说明书。
目录第一节 LCMS简易操作流程第二节 完全开关机和日常开关机第三节 系统配置第四节 方法设置和进样分析第五节 LCMSsolution定量分析第六节 LCMS调谐操作第七节 报告制作第一节：LCMS简易操作流程一 抽真空1．打开质谱右侧电源开关。
2．打开计算机。
3．打开LC-MS工作站，点击instrument 1,进入LCMS Real Time Analysis 界面。
4．点击左侧System Control按钮，进入抽真空界面，点击Auto startup,开始抽真空，直到Ready指示灯由黄变绿。
真正样品分析一般需要抽真空8小时以后才能进行。
以上步骤一般情况下不做，只有在卸真空后，重新开机时，才必须完成的步骤。
二 调谐MS1．配备调谐液及调谐液流动相。
2．连接好流路，ESI源调谐时，前端可以连阻尼管。
APCI源调谐时，可以直接PEEK管连接。
3. 进入LCMS Real Time Analysis 界面，点击Tuning，进入调谐界面。
4. 先保存调谐报告（File-Save Report as），而后点击Fill up,气泡排干净。
之后点击AutoTuning 开始进行调谐。
4. 调谐完成，虚拟打印调谐报告成PDF格式，保存。
以上步骤一般情况下不做，只有长时间未用、重新开机或仪器经过大的调整时，才必须完成的步骤。
三 联机1．开机前打开氮气发生器。
2．开泵、脱气机、系统控制器、柱温箱及PDA电源，点击instrument 1,进入LCMS Real Time Analysis 界面。
3．联机成功，显示Ready；操作失败，显示Not Connection。
四 建立分析方法1．在LCMS Real Time Analysis 界面，所有参数设置均在界面下半部分，如：MS、Interface，Data Acquisition LC Time Prog. Pump Column Oven.分别设置各操作参数， 保存方法文件。
液相色谱电喷雾质谱联用仪使用方法说明书
液相色谱电喷雾质谱联用仪使用方法说明书使用方法说明书1. 概述液相色谱电喷雾质谱联用仪（以下简称LC-MS）是一种先进的分析仪器，它能够同时进行液相色谱和质谱分析，广泛应用于生物化学、临床医学、环境科学等领域。
本说明书将详细介绍LC-MS的使用方法，以便用户正确高效地操作仪器。
2. 仪器准备2.1 确保仪器处于稳定的工作环境，远离振动和电磁干扰。
2.2 检查LC-MS各部分的连接是否紧固，并检查气源、溶剂、离子源等是否充足。
2.3 打开电源，启动LC-MS系统，让其进行自检和预热，待系统完全准备好后方可进行下一步操作。
3. 参数设置3.1 打开软件界面，在菜单栏中选择“方法设置”。
3.2 在方法设置界面中，根据样品的特性和实验需求，设置相应的参数，如柱温、流速、采集范围等。
3.3 确认参数设置无误后，保存参数并返回主界面。
4. 样品准备4.1 根据样品的性质，选择合适的样品制备方法，如溶解、稀释等。
4.2 准备样品注射器，将样品按照设定的体积注入。
4.3 将样品放入样品托盘中，并按下合适的注射方法，如自动、手动等。
5. 分析操作5.1 在软件界面点击“运行”菜单，选择“样品分析”功能。
5.2 确认样品装载完毕后，点击“开始运行”按钮，仪器开始进行样品分析。
5.3 观察分析过程中的仪器状态，如气流、电压、流速等，确保正常运行。
5.4 分析完毕后，保存分析结果，关闭软件界面。
5.5 关闭电源，切断气源，并进行仪器的清洗、维护等操作。
6. 数据处理6.1 打开数据处理软件，导入保存的分析结果。
6.2 根据实验要求，进行数据处理、质量校正等操作。
6.3 绘制数据图表，进行结果展示和分析。
6.4 根据需要，将数据导出保存或打印出来。
7. 注意事项7.1 操作中需注意安全，避免溶剂溅出、电流过大等情况。
7.2 使用前务必检查仪器状态，如气源、溶剂余量等，确保仪器正常工作。
7.3 操作过程中如出现异常情况，应及时停机排除故障或咨询专业人员。
液相色谱-质谱联用（LC-MS）使用指南及注意事项
液相⾊谱-质谱联⽤（LC-MS）使⽤指南及注意事项液相⾊谱-质谱联⽤（LC-MS）使⽤指南及注意事项⾼洁⽣物站A308 仪器型号: 岛津LCMS-20201.开机1.1 开机前准备确认氮⽓畅通，液氮罐GAS出⼝压⼒表指针在0.7~0.8MPa之间。
压⼒不够时，将其对⾯的增压阀拧⼤，使压⼒达到要求，若压⼒还不够，说明需要更换液氮。
确认流动相溶剂瓶内液体够⽤（流动相A-娃哈哈⼩瓶装纯净⽔，B为⼄腈，分别加千分之零点三五的HPLC级三氟⼄酸），液⾯要没过吸滤头。
打开UV检测器箱门，将三通与质谱分流接头连接。
1.2 开机过程开机顺序为1 2 3 4 5 6，关机顺序为6 5 4 3 2 1。
1.3 打开电脑之后打开分析程序。
将MS配置到程序中。
⽅法如下：Main→System Configuration→LCMS→上⽅蓝箭头→OK听到“滴”⼀声后，页⾯显⽰液相与质谱绿⾊ready状态，说明LC与MS均与程序连接良好。
2.1样品准备浓度：0.1 mg/ml 左右溶剂：流动相（⼄腈⽔甲醇），若以上均不溶，⽤少量DMSO溶解再稀释到以上溶剂中过滤膜！！样品瓶要确保⽆尘2.2仪器准备打开之前设定好的Method File→Download（⽬的是将仪器参数从程序配置到仪器） ?如果刚刚开机的话，各个部件还未预热，需要把各个部件打开。
打开顺序为：1234567（7打开后8和9⾃动打开）1）如果⽅法中的分⼦量扫描范围不是你需要的，重新设置：在下图中，Scan（+）Scan（-）分别为正负离⼦扫描设置。
扫描速度=扫描范围/ 扫描周期，扫描速度在1000u/second 左右⽐较好，所以改变扫描范围之后，要相应地改变扫描周期，使扫描速度在1000左右。
扫描范围为m/z 50-2000，⼀般设置100以上起始，因为溶剂中100以下⼩分⼦杂质较多，终⽌分⼦量⼀般为⽬标分⼦量的⼆倍稍⾼。
2）LC洗脱程序设置，设置⽅法与HPLC相似。
高效液相色谱质谱联用仪使用方法说明书
高效液相色谱质谱联用仪使用方法说明书一、仪器概述高效液相色谱质谱联用仪（以下简称LC-MS）是一种先进的仪器设备，结合了高效液相色谱（LC）和质谱（MS）技术，广泛应用于生物分析、环境监测、药物研发等领域。
本说明书旨在介绍LC-MS的使用方法，以帮助用户正确操作该设备。
二、仪器安装1. 确保工作环境安静、干燥，温度适宜（推荐温度范围为20℃-25℃）。
2. 按照仪器说明书的指导，将LC-MS按正确方式连接至电源，确保电源连接可靠。
3. 连接好所有必要的外接设备，如气源、进样器、数据处理系统等。
4. 打开气源，检查气源压力是否符合要求。
5. 开机并等待仪器初始化完成。
三、仪器操作1. 样品准备a) 根据待测样品的性质和目的，选择合适的前处理方法，如萃取、纯化、稀释等。
b) 遵循实验室安全规范，佩戴适当的防护设备。
c) 调整样品pH值、浓度等参数，以适合LC-MS分析需求。
2. 进样操作a) 将样品转移到进样器中，确保进样量在仪器规定范围内。
b) 选择合适的进样模式，如定量进样或定性进样。
c) 设置进样速度和持续时间，确保进样过程稳定、准确。
3. 色谱条件设置a) 根据实验需求，选择合适的色谱柱和流动相。
b) 设定流动相流速、梯度程序等参数。
c) 检查色谱柱是否安装正确，确保流动相通畅。
4. 质谱条件设置a) 选择合适的离子源和检测器。
b) 设置离子源温度、碰撞能量、离子化模式等参数。
c) 调整质谱仪的扫描范围和灵敏度，以获得最佳的信号质量和峰形。
5. 数据采集与分析a) 启动数据采集系统，确保数据记录正常进行。
b) 设置合适的检测时间、数据采集速率等参数。
c) 对采集到的数据进行初步处理和分析，如峰识别、质谱图解析等。
d) 可根据需要，进行数据后处理，如定量计算、峰面积积分等。
6. 仪器维护与保养a) 每日操作结束后，及时清洗进样针和色谱柱，以保证仪器性能。
b) 定期检查仪器的气路、流路、电路等，确保其正常工作。
2. LC-MSMS操作流程
LC-MSMS操作流程启动液质联用装置：接通电源：确保质谱主机、液相色谱各单元和电脑已经接通电源（请务必确定电源的稳定和不会出现突然断电的情况！！），依次打开质谱主机、液相色谱各单元和电脑的电源开关（质谱主机电源键位于仪器背后的红色按钮，液相色谱各单元的电源开关位于各单元正面的左下方），此时可观察到各单元的绿色指示灯依次亮起【注：若有某个单元的红色指示灯亮起，请及时联系岛津工程师进行处理】。
检查氮气与氩气的使用情况，氮气正常压力水平为0.69MPa-0.8MPa，氩气正常压力水平为0.5MPa-0.8Mpa，打开氩气钢瓶和液氮罐的阀门。
一、质谱主机的开启：电脑开机完毕后，请确认电脑右下方的相关图标为绿色。
【注：如果该图标为黄色，说明系统正在启动，请稍等片刻。
如果该图标为红色，表示有错误产生，请重启电脑。
】二、启动真空系统：注：抽真空时只需打开CID气（氩气），调谐时氩气与氮气均需打开。
1. 双击电脑桌面上的图标，等待，直到出现下面的界面，用户名为默认设置，密码为空，点击“确定”启动分析程序；2. 打开质谱右后方的开关，打开CID（氩气）；3. 在新出现的窗口中点击左侧的“仪器”，再双击右侧的“MSMS”，在新出现的窗口中点击左侧的“主项目”，再点击“主项目”最下方的“系统控制”，然后在弹出的小窗口中点击“手动操作”按钮；将CID GAS 右侧的“打开”按钮按下，以便打开碰撞气。
之后点击“自动启动”进行抽真空，等待小窗口中绿色进度条走完之后，真空检测的进度条恢复成原始的灰色（此过程大约需要30min），关闭CID气总阀门（使用前打开），再抽24h方可进样分析。
三、调谐：（在“LC-MS操作流程及维护说明”下“LCMS-8040的维护说明视频6”）。
1. 打开氩气与氮气；2. 去掉DL管上的堵针器，将调谐液与离子源上的进样口连接；3. 在桌面上点击“仪器”图标，再双击右侧的“MSMS”，在新出现的窗口中点击左侧的“主项目”，再点击“主项目”最下方的“系统控制”，然后在弹出的小窗口中点击“手动操作”按钮，将CID GAS 右侧的“打开”按钮按下，以便打开碰撞气。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
液相色谱-串联质谱（LC/MS/MS）法测定癫痫患者血清中卡马西平的浓度谢 华Ì，王 荣，贾正平∗， 徐丽婷（兰州军区兰州总医院临床药理基地，兰州 730050）摘要目的：本文建立了液相色谱-串联质谱（LC/MS/MS）法测定患者血清中的卡马西平浓度的方法。
方法：色谱柱：Zorbax Extend-C18柱（150×4.6 mm I.D，5μm）；流动相：甲醇-0.01mmol·L-1乙酸胺溶液（80:20，v/v）；流速：0.3 mL·min-1。
结果：卡马西平浓度在2～40 ng·mL-1范围内，峰面积与浓度线性关系良好，平均回收率为101.1%，日内精密度、日间精密度的RSD分别为3.39%和4.11%。
并测定了10名患者血清中卡马西平的浓度。
结论：本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度及专属性，结果准确，重现性好，易于操作，可用于患者血清中卡马西平浓度的测定。
关键词卡马西平；LC/MS/MS；血清Content Determination of Carbamazepine in epileptic patient serum by Liquid Chromatographic Tandem Mass SpectrometryXIE Hua, JIA Zheng-ping*, WANG Rong, XU Li-ting (Base of Clinic Pharmacology, Lanzhou General Hospital, Lanzhou Command, Lanzhou 730050, China)ABSTRACT OBJECTIVE:An analytical method based on Liquid Chromatography with tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS) detection was developed for the content determination of carbamazepine in epileptic patient serum. METHODS: The method included that the column was Zorbax Extend-C18(150×4.6 mm I.D.，5μm ); mobile phase was methanol-0.01mmol·L-1amine acetic acid (80:20，v/v) at a flow rate of 0.3 mL·min-1. RESULTS: The method was proved to be linear in the range of 2~40ng·mL-1 with a regression confficient of 0.9976. The average recovery rate was 101.1%(n=5). The RSD of average contents of intra-day and inter-day was 3.39% and 4.11% respectively. The carbamazepine concentrations of ten epileptic patient’s serums were detected. CONCLUSION: This method is accurate, precise, sensitive and specific to be used in the content determination of carbamazepine serum.KEY WORDS Carbamazepine; LC/MS/MS; Serum∗基金项目：国家科技部重大项目（2008ZXJ09014-010）Ì主管药师。
研究方向：临床治疗药物监测。
电话：(0931)8994675; E-mial: xiehua-72@Ä通讯作者：教授，主任药师，博士。
研究方向：临床药学。
电话：(0931)8994652。
卡马西平是临床常用于治疗癫痫、三叉神经痛及心率失常治疗药物。
癫痫是一种以中枢神经系统功能失常为主要表现的常见综合症，患者需长期服药才能控制病情，有的则要终生用药，临床上用于治疗精神运动性癫痫疗效好；同时它具有膜稳定作用, 临床上也广泛用于三叉神经痛的治疗。
但因其治疗窗窄，药物的治疗血药浓度及半衰期的个体差异大，长期用药会产生不良反应，加之其自身诱导代谢和其他药物诱导的代谢，都能使卡马西平的血药浓度和药物动力学过程发生较大改变，而且很难获得最佳疗效，若剂量和用法不当可导致疗效不佳或出现严重毒副反应。
上市剂型主要为片剂，现已作为预防、治疗癫痫的一线药物。
因此，为了提高用要的安全性和有效性，需进行治疗药物监测。
文献报道[1-6]多用HPLC法进行血清中抗癫痫药物的血药浓度测定，临床主要以荧光偏振免疫（FPIA）进行监测[7-8]，分离时间长，同时因费用高，患者难以承受。
但目前未见文献报道运用液相色谱-串联质谱（LC/MS/MS）测定患者血清中卡马西平方法，本文建立了测定癫痫患者血清中的卡马西平浓度的LC/MS/MS方法，为血药浓度监测和体内卡马西平研究提供更为准确和便捷的方法。
1仪器与试药API 3200 型四极杆串联质谱仪，配有离子喷雾离子化源以及Analyst 1.4.2 数据处理软件（美国Applied Biosystem公司）；岛津超高速液相（UFLC）色谱系统，包括LC-20AD 二元输液泵，DGU-20A3混合器，SIL-20A自动进样器，CBM-20A 控制器（日本岛津）。
卡马西平对照品（中国药品生物制品检定所，批号： 0142-9503）。
甲醇，乙腈为默克公司色谱纯，其它试剂均为分析纯。
血样来源于兰州军区兰州总医院门诊和住院患者，均获得知情同意。
2方法与结果2.1 样品的处理2.1.1 卡马西平对照品精密称取卡马西平对照品0.5mg（中国药品生物制品检定所，批号：0142－9503），置于5ml的容量瓶中甲醇至刻度作为贮备液。
2.1.2血样处理取血清100μL于0.5ml离心管中，加入200μL甲醇，混匀，涡旋1min，10000 r·min-1离心5min，取上清液，60℃水浴中氮气吹干，用甲醇200uL溶解混匀，涡旋1min，10000 r·min-1离心5min，取上清液并进样。
2.2 分析方法2.2.1色谱条件色谱柱：Zorbax Extend-C18 柱，5 μm 粒径，150×4.6 mm I.D.，美国Agilent公司；流动相：甲醇-0.01mmol·L-1乙酸胺溶液（80:20，v/v）；流速：0.3 mL·min-1；柱温：室温；进样量：10 μL。
2.2.2质谱条件离子源：电喷雾离子化源(ESI)；离子喷射电压：4800 V；温度：600°C；源内气体1（GS1，N2）压力：70 psi；气体2（GS2，N2）压力：60 psi.；空气压缩机压力：0.4MPa；正离子方式检测；扫描方式为正离子监测；DP 电压：70 V；EP 电压：10 V； CXP 电压：3.2 V；碰撞气（N2）压力：3 psi；卡马西平的碰撞诱导解离（CID）电压为30V；用于定量分析的离子反应分别为m/z 237.2→m/z194.2。
2.3分析方法确证2.3.1 质谱分析将卡马西平标准品溶于流动相中，按“质谱条件”项操作，相应的二级全扫描质谱图见图1。
图1卡马西平[M+H]+的二级全扫描质谱图Fig 1 MS2 full scan mass spectrograms of carbamazepine2.3.2 方法的专属性取流动相1.0 mL，进样10 μL作空白图谱，得色谱图2 a；取一定浓度的卡马西平对照品溶液1.0 mL，进样10 μL作对照图谱，得色谱图2 b，卡马西平的保留时间分别为2.97 min；取卡马西平血清提取物供试样品，进样10 μL作样品图谱，得色谱图2 c。
结果表明，空白中的内源性物质不干扰卡马西平的测定。
图2 LC/MS/MS测定卡马西平的典型色谱图Fig 2 Typical chromatograms of Carbamazepinea 空白样品(blank ) b卡马西平对照品(control) c 空白血清+卡马西平对照品 d 患者血清中卡马西平(sample)2.3.3 基质效应以卡马西平为研究对象，在空白全血中加入卡马西平标准溶液，使得成为含卡马西平为12ng/ml的溶液来考察基质效应对测定卡马西平影响。
按“2.1.2”项下处理后进行LC-MS/MS分析，得峰面积A，保留时间为2.97 min；同样对12ng/ml卡马西平标准溶液进行分析，得到相应的峰面积B，保留时间为3.01min；以A/B接近1的方法考察其基质效应，结果表明本方法无基质效应。
2.3.4标准曲线的制备取空白血样1.0 mL，加入对照品贮备溶液，按“血样处理”项下操作，依次配置浓度为2.0, 4.0，6.0，8.0，10.0，12.0，16.0，20.0和40ng·mL-1，制备标准曲线。
以待测物浓度为横坐标，待测物的峰面积比值为纵坐标，进行回归运算，求得的直线回归方程，即得标准曲线: y=212x+2.12×105 (r=0.9974)。
线性范围为2.0～40ng·mL-1，定量下限为2ng·mL-1(S/N=10)。
2.3.5 精密度按“标准曲线的制备”项下操作, 制备卡马西平低、中、高三个浓度（分别为2.0,8.0，20.0n g·mL-1）的质量控制（QC）样品，每一浓度进行5 次分析，连续测定三天，根据当日的标准曲线，计算QC 样品的测得浓度，根据QC 样品结果计算本法的准确度与精密度，结果见表1。
表1 LC/MS/MS测定卡马西平含量的日间精密度与日内精密度（n=5）Tab l The intra-day and intre-day precision of Tacrolimus in capsules浓度ng·mL-1日内精密度(n=5)Intra-day precision日间精密度(n=5)Intre-day precision2.0 1.99±0.803.25% 1.94±0.984.18%8.0 7.98±0.62 2.02% 8.01±1.43 3.04%20.0 19.76±2.58 4.89% 20.01±2.79 5.10%3.39%4.11%2.3.6 回收率取空白1.0 mL，按“血样处理”项下操作，加入标准品贮备液制备低、中、高三个浓度（卡马西平分别为2.0, 8.0, 20.0 ng·mL-1）的样品，每一浓度测定5次。