脂肪酸的鉴定与应用
脂肪酸的检测方法
脂肪酸的检测方法
脂肪酸的检测方法主要有以下几种：
1. 毛细管气相色谱法（Capillary gas chromatography，CGC）：通过气相色谱仪分离和定量脂肪酸。
首先脂肪酸样品被甲醇和硫酸甲酯化，生成甲酯化产物。
然后将甲酯化产物通过气相色谱柱分离，并通过检测器进行定量测量。
2. 高效液相色谱法（High-performance liquid chromatography，HPLC）：先将脂肪酸样品经过酯化反应，生成酯化产物。
然后将酯化产物通过高效液相色谱柱进行分离，并通过紫外检测器或荧光检测器进行定量。
3. 核磁共振（Nuclear magnetic resonance，NMR）：利用核磁共振技术对脂肪酸样品进行分析。
通过分析样品中的脂肪酸的质谱图谱、化学位移和峰面积等信息，可以定量和鉴定脂肪酸。
4. 质谱法（mass spectrometry，MS）：将脂肪酸样品经过适当的前处理后，通过质谱仪进行分析。
质谱仪可以测定样品中脂肪酸的分子量、分子结构和相对丰度等信息。
以上列举的方法只是脂肪酸检测的常见方法，实际上还有其他一些方法，如红外光谱法、荧光光谱法等。
在实际应用中，选择合适的检测方法取决于需要分析的
样品类型、所需的分析精度和设备条件等因素。
37种脂肪酸标准品使用方法
37种脂肪酸标准品使用方法37种脂肪酸标准品是用于脂肪酸的分析和质量控制的基准化学品。
这些标准品的使用对于准确分析样品中脂肪酸含量和分布非常重要。
本文将详细介绍37种脂肪酸标准品的使用方法。
一、获取37种脂肪酸标准品1.到指定化学品供应商或网站购买（例如Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等）。
2.根据实验室的需要选择购买适量的标准品。
3.确认标准品的稳定性和有效期，避免损失和分析误差。
二、制备37种脂肪酸标准品的工作溶液1.按需要配制标准品的不同浓度（例如浓度为100、50、10和1毫克/毫升）的工作溶液。
2.使用适当的溶剂稀释标准品，如氯仿、碳酸氢钠溶液等。
三、质量控制1.为了确保获得可重复的结果，应在任何新实验或批次开展实验前进行质量控制。
2.使用多个标准品，以不同浓度的进行质量控制，确保不同的分析条件下分析结果的准确性。
3.使用相同的制备方法和条件，每个工作日测试一次标准品的精密度和准确度。
四、分析37种脂肪酸标准品1.将样品和标准品一起进行分析。
2.将标准品注入色谱柱，使用高效液相色谱法（HPLC）进行分析，并在所选脂肪酸的保留时间处测量峰高。
3.使用质谱法（MS）可以鉴定和确定脂肪酸的结构和含量。
五、解释结果1.比较实验结果和标准品的峰高度和准确数值。
2.使用标准品的确切脂肪酸含量作为参考值，计算实验样品中脂肪酸含量的百分比。
3.根据标准品的含量计算实验样品中不同脂肪酸的含量和分布。
结论37种脂肪酸标准品是质量控制和渐进调整分析方法的基准，在脂肪酸分析和质量控制中具有重要意义。
正确使用37种脂肪酸标准品不仅可以提高实验的准确性和精确性，而且可以帮助分析人员更好地理解脂肪酸的分布和变化。
脂肪酸检测
脂肪酸检测脂肪酸，按碳链长短，可分为短链脂肪酸（2-4个碳原子）、中链脂肪酸（6-12个碳原子）和长链脂肪酸（14个以上碳原子）。
按碳氢链饱和与不饱和，可分为饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸。
棕榈酸、硬脂酸、花生酸等属于饱和脂肪酸，肉豆蔻酸、棕榈油酸、油酸、芥酸等属于单不饱和脂肪酸，亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸等属于多不饱和脂肪酸。
脂肪酸迪信泰检测平台采用液相质谱联用(LC-MS)的方法，使用Thermo Scientific的U3000快速液相色谱对样品进行分离，Thermo Scientific™ Q Exactive™对样品进行鉴定，可高效、精准的检测脂肪酸的含量变化。
对于部分脂肪酸，也可采用高效液相色谱(HPLC)或气相质谱联用(GC-MS)进行检测，以满足您的不同需求。
脂肪酸类检测项目肉豆蔻酸（MA,C14:0）检测棕榈酸（PA,C16:0）/软脂酸检测棕榈油酸（C16:1）检测十七碳酸/十七烷酸（C17:0）检测十七碳烯酸（C17:1）检测硬脂酸（SA,C18:0）检测油酸检测亚油酸检测亚麻酸（LA,C18:3）检测十八碳四烯酸（C18:4）检测十九碳酸（C19:0）检测花生酸（C20:0）检测花生烯酸（C20:1）检测花生二烯酸（C20:2）检测花生三烯酸（C20:3）检测花生四烯酸（AA/ARA,C20:4）检测二十碳五烯酸/花生五烯酸（EPA,C20:5）检测二十一烷酸（C21:0）检测二十二烷酸/山嵛酸（C22:0）检测芥酸（C22:1）检测二十二碳二烯酸（C22:2）检测二十二碳三烯酸（C22:3）检测二十二碳四烯酸（C22:4）检测二十二碳五烯酸（DPA,C22:5）检测二十二碳六烯酸（DHA,C22:6）检测二十三碳酸/二十三烷酸（C23:0）检测二十四碳酸/木焦油酸（C24:0）检测神经酸/鲨鱼酸（C24:1）检测二十五碳烯酸（C25:1）检测二十六碳烯酸（C26:1）检测LC-MS测定脂肪酸样本要求：1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL，测定样品不返还，请您保留备份。
磷脂脂肪酸分析方法及其在土壤微生物多样性研究中的应用_颜慧
*土壤与农业可持续发展国家重点实验室基金(055122)资助通讯作者,E -mai l:zhongwenhui@作者简介:颜 慧(1982~),女,汉族,江苏淮安人,硕士研究生,主要从事土壤微生物学和生物化学研究。
E -mail:hui xiaoyan@hotmai l.c om 收稿日期:2005-10-31;收到修改稿日期:2006-03-22磷脂脂肪酸分析方法及其在土壤微生物多样性研究中的应用*颜 慧1 蔡祖聪2 钟文辉1,2(1南京师范大学化学与环境科学学院,南京 210097)(2土壤与农业可持续发展国家重点实验室(中国科学院南京土壤研究所),南京 210008)摘 要 磷脂脂肪酸(PLFA)是活体微生物细胞膜的重要组分,不同类群的微生物可通过不同的生化途径合成不同的PLFA 。
一些PLFA 可作为分析微生物量和微生物群落结构变化的/生物标记0。
在土壤微生物分析中,越来越多地采用了PLFA 方法。
本文介绍了表征微生物的一些PLFA 、从土壤中提取PLFA 的方法以及用GC -MS 分析PLFA 的原理。
本文还将常用的研究微生物多样性的几种方法进行了比较。
传统的分析土壤微生物群落的方法依赖于培养技术,只能培养和分离出一小部分微生物群落;Biolog 方法可用于研究土壤微生物群落生理多样性,即可反映微生物群落如何利用各种碳源底物,但对快速生长和适合在Biolog 实验条件下生长的小部分群落成员有强烈的选择性;核酸分析方法的主要缺点是不能对土壤微生物进行定量分析;而PLFA 方法相对于上述几种方法有诸多优势。
本文通过一些实例证明PLFA 方法的特色或独到之处,也分析了其缺点。
采用PLFA 方法并结合其他方法有助于获取土壤微生物群落多样性的更多和更全面而完整的信息。
关键词 土壤微生物;磷脂脂肪酸;生物量;群落结构;GC -MS(气相色谱-质谱);多样性中图分类号 X172 文献标识码 A土壤微生物参数很可能最早被用于表征土壤质量[1]。
脂肪酸的测定方法
脂肪酸的测定方法脂肪酸是一类具有长链的羧酸，常见于生物体内的脂类中。
脂肪酸的测定方法主要包括气相色谱法、液相色谱法、核磁共振法和质谱法等。
以下将分别介绍这些脂肪酸的测定方法。
首先是气相色谱法（GC）。
GC是一种常用的分离和测定脂肪酸的方法，其原理是利用气相色谱柱对样品中的脂肪酸进行分离，并通过检测器检测脂肪酸的浓度。
GC法的优点是分离效果好，分析速度快，并且适用于各种不同种类的脂肪酸。
但是，GC法需要样品预处理，包括提取和甲酯化反应。
此外，GC法还需要使用气相色谱仪等专业设备，成本较高。
第二种是液相色谱法（HPLC）。
HPLC是一种基于液相的分析技术，利用高效液相柱对样品中的脂肪酸进行分离，并使用紫外光谱检测器进行定量分析。
与GC 法相比，HPLC法不需要样品预处理，分析过程简单可靠。
其缺点是对于高沸点的脂肪酸分离效果较差。
为了克服这个问题，可以使用HPLC-MS结合技术进行测定，提高了分析的灵敏度和选择性。
第三种是核磁共振法（NMR）。
NMR是一种基于化学位移和耦合常数的分析方法，可以用于脂肪酸的结构鉴定和定量分析。
与GC和HPLC相比，NMR法不需要样品预处理，操作过程相对简单。
但是，NMR法的分析时间较长，且需要昂贵的NMR设备，因此在实际应用中使用较少。
最后是质谱法（MS）。
质谱法是一种利用质谱仪测定脂肪酸组分和结构的方法。
质谱法的主要优点是灵敏度高、分辨率好，并且可以通过质谱图对脂肪酸的种类和含量进行准确的定量。
然而，质谱法的仪器成本较高，操作复杂，对操作人员的技术要求较高。
除了上述方法外，在脂肪酸的测定中还可以使用化学分析方法，如酶法和比色法等。
酶法通过酶的作用将脂肪酸转化为其他化合物，再利用吸光度、荧光强度等性质进行定量测定。
比色法利用脂肪酸与某些试剂反应产生有色化合物，通过测定产物的吸光度进行定量测定。
综上所述，脂肪酸的测定方法有气相色谱法、液相色谱法、核磁共振法、质谱法以及化学分析方法等。
油和脂肪中的〔天然〕脂肪酸化学分析方法
油和脂肪中的〔天然〕脂肪酸化学分析方法气相色谱法是一种分离和定性脂肪酸的常用方法。
它基于脂肪酸的物理化学性质，在气相色谱柱上进行分离，并使用检测器检测分离的化合物。
下面是使用气相色谱法进行油和脂肪中的脂肪酸分析的步骤：1.样品制备：将油或脂肪样品转化为甲酯化的脂肪酸甲酯。
这一步骤是为了使脂肪酸与气相色谱柱相容，并提高分离和检测的灵敏度。
一般使用甲酸或甲酸甲酯进行甲酯化反应。
2.脂肪酸的分离：将甲酯化的样品通过气相色谱柱进行分离。
气相色谱柱通常是高分子量的二元硅氧烷柱，具有较好的热稳定性和化学惰性。
分离的条件包括柱温、载气流速和分离程度。
3.检测和定量：采用适当的检测器进行脂肪酸的检测和定量。
常见的检测器包括火焰离子化检测器（FID）和质谱检测器（MS）。
火焰离子化检测器是一种通用的检测器，可以用于大部分脂肪酸的定量。
质谱检测器则可以提供更高的灵敏度和选择性，可以鉴定并量化一种特定的脂肪酸。
在使用气相色谱法进行油和脂肪中脂肪酸的分析时，有一些注意事项需要遵守：1.样品制备时需要避免氧气、光线和高温等因素的影响，以免导致脂肪酸的氧化和降解。
2.分离柱的选择应根据样品的性质和需要分离的脂肪酸的种类来确定。
柱的温度和载气流速需要进行优化以获得最佳的分离效果。
3.检测器的选择取决于需要检测的脂肪酸的种类和浓度范围。
火焰离子化检测器是一种常用的检测器，但质谱检测器可以提供更高的选择性和灵敏度。
总结起来，气相色谱法是一种常用的油和脂肪中脂肪酸化学分析方法。
它通过将样品转化为甲酯化的脂肪酸甲酯，然后通过气相色谱柱进行分离，并使用适当的检测器进行检测和定量。
在进行分析时需要注意样品制备、分离条件和检测器的选择。
这种方法具有分离度高、灵敏度高和操作简便等优点，被广泛应用于科学研究和食品行业中。
食品分析脂肪及脂肪酸的测定解析讲课课件
概述
罗兹-哥特里法（Rose-Gottlieb） 、重量法测定乳脂肪
（3）食品中脂肪量： 5厘米，容积100ml抽脂瓶中加入10ml水（液体样品不需要）
90 所以, 10格
高脂食品：动植物油、核桃仁、全脂 回收溶剂，烘干，称重。
差异较大，所以不可能有通用的提取剂。
酸价是反映油脂酸败的主要指标。
乳粉等； 适用范围：各类食品中脂肪的测定，对固体、半固体、粘稠液体或液体食品，特别是加工后的混合食品，容易吸湿结块不易烘干的食
品，不能采用索氏提取法，用此法效果较好。
GB/T 5009. 2）半固体或液体样品：称取
低脂食品：大米、脱脂粉、蔬菜、水
果等； 2）溶剂回收时不能完全干涸，否则脂类难以溶解于石油醚而使结果偏低；
碱性乙醚法测脂肪
罗兹-哥特里法（Rose-Gottlieb） 、重量法测定乳脂肪 基本原理：利用氨-乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪 球膜，使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中，而脂肪游离 出来，再用乙醚-石油醚提取出脂肪，蒸馏去除溶剂， 残留物即为乳脂肪。 适用范围：各种液体乳（生乳、加工乳等）；乳制品； 豆乳及加水呈乳状的食品。 此法是乳及乳制品脂类定量的国际标准法。 (ISO)、 (FAO／WHO)
鱼、肉、家禽等样品的测定。 （4）无水乙醚+石油醚
样品的预处理
（1）样品烘干、磨细；注意干燥温度与方法； 温度低——酶活力高，脂肪易降解。 温度高——脂肪易氧化成结合态。 较理想的方法是冷冻干燥法。
（2）结合脂肪如鱼肉样品可先用酸（硫酸或盐酸）加热 下水解，使脂肪游离，再用乙醚抽提；
（3）牛乳中的脂肪以脂肪球形式存在，它的周围有一层膜 以使脂肪球在乳中稳定，可采用一定浓度的硫酸或浓 氨水使非脂成份溶解，乳中酪蛋白钙盐转变成可溶性 重硫酸酪蛋白或酪蛋白铵盐，脂肪球膜被软化破坏， 脂肪游离出。
脂肪酸标准品
脂肪酸标准品脂肪酸是构成脂肪的主要成分，对于人体健康具有重要意义。
脂肪酸标准品作为一种重要的化学试剂，在脂肪酸分析领域具有广泛的应用。
本文将就脂肪酸标准品的定义、分类、应用以及选购注意事项进行探讨。
一、脂肪酸标准品的定义。
脂肪酸标准品是指已知结构和纯度的脂肪酸化合物，通常用于分析测试中作为定量分析的参照物质。
脂肪酸标准品的纯度、结构和稳定性对于脂肪酸分析的准确性至关重要。
二、脂肪酸标准品的分类。
根据其来源和性质，脂肪酸标准品可以分为天然脂肪酸标准品和合成脂肪酸标准品。
天然脂肪酸标准品主要来源于动植物的脂肪中提取，具有较高的生物活性和代谢特性；而合成脂肪酸标准品则是通过化学合成手段得到，其结构和纯度可以进行精确控制。
三、脂肪酸标准品的应用。
脂肪酸标准品在食品、医药、化工等领域具有广泛的应用价值。
在食品行业，脂肪酸标准品常用于食用油脂的质量控制和检测；在医药领域，脂肪酸标准品则可用于药物的研发和质量监控；在化工行业，脂肪酸标准品也被广泛应用于合成洗涤剂、润滑油等产品的生产过程中。
四、脂肪酸标准品的选购注意事项。
在选购脂肪酸标准品时，需要注意以下几点，首先，确保选择具有良好信誉和资质的供应商，以保证产品的质量和稳定性；其次，了解产品的纯度、结构和稳定性等关键参数，选择符合实验要求的标准品；最后，妥善保存和使用脂肪酸标准品，避免受潮、受热和受光等因素影响其质量。
综上所述，脂肪酸标准品作为一种重要的化学试剂，在脂肪酸分析领域具有重要的应用价值。
选择合适的脂肪酸标准品，并合理使用和储存，将有助于提高脂肪酸分析的准确性和可靠性，推动相关领域的科研和产业发展。
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3 塑料
• 在塑料工业中脂肪酸及其衍生物的用途 主要是作为乳化聚合用表面活性剂、 主要是作为乳化聚合用表面活性剂、增塑 稳定剂、抗氧化剂、润滑剂、防腐剂、 剂、稳定剂、抗氧化剂、润滑剂、防腐剂、 抗静电剂、防浊剂等。 抗静电剂、防浊剂等。
4 造纸、纸浆 造纸、
造纸工业是以木质纤维或草本植物纤维 为原料的化学加工工业。在制浆、漂白、 为原料的化学加工工业。在制浆、漂白、 打浆、抄造及后加工的全过程中， 打浆、抄造及后加工的全过程中，都离不 开各种化学品。 开各种化学品。与脂肪酸衍生物有关的有 施胶剂、废纸脱墨剂、脱树脂剂等。 施胶剂、废纸脱墨剂、脱树脂剂等。
脂肪酸及其衍生物之所以在化妆品工业 中占有重要的位置， 中占有重要的位置，除了是构成化妆品的 油性成分外，它们还可作为乳化剂、 油性成分外，它们还可作为乳化剂、洗净 润湿剂、增塑剂、柔软剂等使用。 剂、润湿剂、增塑剂、柔软剂等使用。近 20年来 年来， 20年来，脂肪酸及其衍生物对表面活性剂 工业的进步起到了巨大的作用。 工业的进步起到了巨大的作用。
6 纤维工业
• 脂肪酸及其衍生物在纤维工业上的应用， 脂肪酸及其衍生物在纤维工业上的应用， 首推肥皂作为洗涤剂，用于羊毛的清洗。 首推肥皂作为洗涤剂，用于羊毛的清洗。 为使洗过的羊毛具有润湿性， 为使洗过的羊毛具有润湿性，曾使用过橄 榄油、油酸。 榄油、油酸。为了克服肥皂作为染色助剂 时存在的缺点， 时存在的缺点，以后又开发了硫酸化油 妥尔油）。自此， ）。自此 （妥尔油）。自此，促进了新的合成表面 活性剂的开发， 活性剂的开发，进而向纤维加工助剂领域 渗透。 渗透。
•
脂肪酸主要用作雪花膏、 脂肪酸主要用作雪花膏、冷霜等膏霜类 的油性原料， 的油性原料，同时又可作为膏霜类产品的 乳化剂。此外还可用作富脂剂、柔软剂、 乳化剂。此外还可用作富脂剂、柔软剂、 清洁皮肤的溶剂，膏体的光泽剂等。 清洁皮肤的溶剂，膏体的光泽剂等。因此 对脂肪酸的质量就有一定的要求， 对脂肪酸的质量就有一定的要求，如色泽 要浅（白色产品要纯白），无臭味（ ），无臭味 要浅（白色产品要纯白），无臭味（化妆 品不能有恶臭），稳定性好（ ），稳定性好 品不能有恶臭），稳定性好（长期存放不 变质），对皮肤无毒无刺激等。 ），对皮肤无毒无刺激等 变质），对皮肤无毒无刺激等。
2 化妆品
作为化妆品的原料， 作为化妆品的原料，脂肪酸及其衍生物 占有重要的位置。 占有重要的位置。由于化妆品直接与人体皮 肤接触， 肤接触，自古对原料的质量及产品的安全性 有严格的要求。 有严格的要求。一般作为安全性的数据无疑 是指毒性、刺激性、 是指毒性、刺激性、过敏性及微量杂质引起 的致癌性。 的致癌性。
6 液相色谱法分析脂肪酸的组成
植物油中多含不饱和脂肪酸组分， 植物油中多含不饱和脂肪酸组分， 样品经皂化后，不用溶剂萃取， 18样品经皂化后，不用溶剂萃取，以18寇醚- 作催化剂， 寇醚-6作催化剂，使得到的酸酯化成 对溴代苯酰甲酯。 对溴代苯酰甲酯。这些酯用辛基硅烷 链合的硅胶柱，波长254nm 254nm处的紫外检 链合的硅胶柱，波长254nm处的紫外检 测器测定。 测器测定。
3 脂肪酸的比色测定
样品经索氏抽提法提取后， 样品经索氏抽提法提取后，加 乙酸铜溶液处理，在波长640nm 640nm处 乙酸铜溶液处理，在波长640nm处 比色测定。 比色测定。
4 气相色谱法测定非挥发性有机 酸和脂肪酸
样品经硫酸甲醇溶液和氯仿液萃取。 样品经硫酸甲醇溶液和氯仿液萃取。用 肉豆蔻酸作内标物， 肉豆蔻酸作内标物，以气相色谱法测定样 品中乳酸、草酸、富马酸、丁二酸、 品中乳酸、草酸、富马酸、丁二酸、戊二 软脂酸、油酸、 酸、软脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸等物 质的含量。 质的含量。
5 气相色谱法分析脂肪酸组成
脂类用醚法或氯仿-甲醇混合液提取后， 脂类用醚法或氯仿-甲醇混合液提取后， 用碱处理，使游离脂肪酸， 用碱处理，使游离脂肪酸，甘油酯以及磷 脂等构成脂肪酸的物质变成水溶性的碱盐， 脂等构成脂肪酸的物质变成水溶性的碱盐， 然后用有机溶剂去除不皂化物（固醇、 然后用有机溶剂去除不皂化物（固醇、萜 蜡等），再用酸水解， ），再用酸水解 烯、蜡等），再用酸水解，使其转变成游 离脂肪酸。经硫酸甲酯化处理后， 离脂肪酸。经硫酸甲酯化处理后，用气相 色谱法分离各种脂肪酸。 色谱法分离各种脂肪酸。
六 脂肪酸的应用
1 医药 脂肪酸及其衍生物在医药领域有着广泛 的应用，如作为各种制剂的助剂， 的应用，如作为各种制剂的助剂，作为杀 菌消毒剂的表面活性剂， 菌消毒剂的表面活性剂，作为抗菌剂的脂 肪酸及单酰基甘油酯， 肪酸及单酰基甘油酯，作为医药基材和特 殊营养食品的有中碳链脂肪酸三甘油酯。 殊营养食品的有中碳链脂肪酸三甘油酯。 在生理学及营养学方面， 在生理学及营养学方面，脂肪酸是重要的 必不可少的化学物质。 必不可少的化学物质。
5 涂料、油墨、颜料 涂料、油墨、
涂料、油墨制造业的历史非常悠久， 涂料、油墨制造业的历史非常悠久，初 期以油性涂料、油性油墨为主。近年来， 期以油性涂料、油性油墨为主。近年来， 随着各种涂料的发展， 随着各种涂料的发展，油性涂料的比例逐 年下降， 年下降，而只有以天然油脂或脂肪酸作为 基本原料的油性涂料还保留较大市场。 基本原料的油性涂料还保留较大市场。各 种醇酸树脂或其他合成树脂的变性产品， 种醇酸树脂或其他合成树脂的变性产品， 其增长活力比最近发展显著的石油化学系 产品还要旺盛。 产品还要旺盛。
五 结构鉴定
1 硝酸银络合法分离不饱和脂肪酸 用硝酸银浸渍过的硅胶薄层， 用硝酸银浸渍过的硅胶薄层，可用 来分离饱和脂肪酸甲酯、 来分离饱和脂肪酸甲酯、不饱和脂肪 酸甲酯及分离不饱和程度不同的不饱 和脂肪酸及顺反异构体等。 和脂肪酸及顺反异构体等。
2 游离脂肪酸的测定
样品以乙醚混合液溶解， 样品以乙醚混合液溶解，以氢氧 化钾溶液滴定，根据滴定的结果， 化钾溶液滴定，根据滴定的结果，以 油酸计算出游离脂肪酸的含量。 油酸计算出游离脂肪酸的含量。