药品薄层色谱扫描法

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薄层扫描法知识分享

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薄层扫描法薄层扫描法一、定义薄层扫描法(TLCS)又称原位定量薄层色谱扫描法(QTLC)系指用一定的波长的光照射在薄层板上,对薄层色谱中有紫外或可见吸收的斑点或经照射能激发产生荧光斑点进行扫描,将扫描得到的图谱及积分值用于药品定性定量的分析方法。

回顾薄层色谱法(TLC)1、薄层板的制备(硅胶板,Al2O3板,聚酰胺薄膜等)2、点样(选择合适的展开剂,在薄板底1cm处画基线,点样)3、展开(浸入展开剂,展开到距薄板顶端1~2cm)4、检视(在紫外光灯下观察斑点)了解一下薄层扫描仪薄层扫描仪的组成及主要功能薄层色谱扫描仪有多个厂家生产,型号不同,仪器外形、光路系统及某些功能也有差异,但其基本结构及主要功能是基本相同的。

每台仪器都包括主机、数据处理及信号输出等部分。

(1)分光器及测量范围大多数薄层扫描仪的分光器为光栅,少数为棱镜,极个别的用滤光片,其测量范围光栅为200-800nm,棱镜为200-2500nm。

(2)光源及检测器光源室具有可见光源钨灯,波长范围为400-800,紫外光源氘灯波长范围为200-400nm,荧光光源为氙灯或汞灯。

操作时可通过光源选择杆来变换光源选择镜的位置;检测器一般为光电倍增管。

表7-5-2 国外几种主要专用薄层色谱扫描仪二、TLCS基本原理与方法薄层扫描法可分为薄层吸收扫描及薄层荧光扫描两类方法。

1. 薄层吸收扫描法的基本原理薄层吸收扫描法是用可见光或紫外线的单色光照射展开后的薄层色谱板,测定薄层色谱斑点(简称斑点)的吸光度(A)随展开压离(L)的变化,而获得A—L 成A—Rf曲线,即薄层色谱扫描图(简称扫描图)。

曲线上的色谱峰峰面积可用于定量分析。

由于薄层板存在着明显的散射现象,而使斑点中物质的浓度与吸光度的关系不服从Beer定律,所以需田Kubelka—Munk(古柏尔卡—曼克)理论来描述。

该方程式是薄层扫描法的定量分析基础。

定量校正方法可分为曲线校直法及非线性回归法等。

薄层扫描法

薄层扫描法

薄层扫描法一、定义ﻭ薄层扫描法(TLCS)又称原位定量薄层色谱扫描法(QTLC)系指用一定得波长得光照射在薄层板上,对薄层色谱中有紫外或可见吸收得斑点或经照射能激发产生荧光斑点进行扫描,将扫描得到得图谱及积分值用于药品定性定量得分析方法。

ﻭ回顾薄层色谱法(TLC)1、薄层板得制备(硅胶板,Al2O3板,聚酰胺薄膜等)ﻭ2、点样(选择合适得展开剂,在薄板底1cm处画基线,点样)3、展开(浸入展开剂,展开到距薄板顶端1~2cm)4、检视(在紫外光灯下观察斑点)了解一下薄层扫描仪薄层扫描仪得组成及主要功能薄层色谱扫描仪有多个厂家生产,型号不同,仪器外形、光路系统及某些功能也有差异,但其基本结构及主要功能就是基本相同得。

每台仪器都包括主机、数据处理及信号输出等部分。

ﻫ(1)分光器及测量范围大多数薄层扫描仪得分光器为光栅,少数为棱镜,极个别得用滤光片,其测量范围光栅为200-800nm,棱镜为200-2500nm。

ﻫ(2)光源及检测器ﻫ光源室具有可见光源钨灯,波长范围为400-800,紫外光源氘灯波长范围为200-400nm,荧光光源为氙灯或汞灯。

操作时可通过光源选择杆来变换光源选择镜得位置;检测器一般为光电倍增管。

表7-5-2 国外几种主要专用薄层色谱扫描仪二、TLCS基本原理与方法薄层扫描法可分为薄层吸收扫描及薄层荧光扫描两类方法。

ﻭ1、薄层吸收扫描法得基本原理ﻭ薄层吸收扫描法就是用可见光或紫外线得单色光照射展开后得薄层色谱板,测定薄层色谱斑点(简称斑点)得吸光度(A)随展开压离(L)得变化,而获得A—L成A—Rf曲线,即薄层色谱扫描图(简称扫描图)。

ﻭ曲线上得色谱峰峰面积可用于定量分析。

由于薄层板存在着明显得散射现象,而使斑点中物质得浓度与吸光度得关系不服从Beer定律,所以需田Kubelka—Munk(古柏尔卡—曼克)理论来描述。

该方程式就是薄层扫描法得定量分析基础。

定量校正方法可分为曲线校直法及非线性回归法等。

薄层色谱法在药物分析中的应用

薄层色谱法在药物分析中的应用

薄层色谱在药物分析中的应用摘要:随着高效液相色谱法的兴起与发展,薄层色谱法曾一度被忽略,直至高效薄层材料和预制板的出现,特别是20世纪80年代后期薄层色谱扫描仪的出现,形成现代仪器化薄层色谱法,才得到了更多的关注。

TLC法被许多国家药典用于药物中杂质的检查、药物分析等方面,且是目前药典中收载最多的鉴别与有关物质检查方法之一,具有设备简单、操作简便、分离速度快,灵敏度和分辨率较高等优点。

关键词:薄层色谱,药物分析薄层色谱法(The layer chromatography,TLC)是将固定相均匀的涂布在具有光洁表面的玻璃、塑料或金属板上形成薄层,在此薄层上进行色谱分离的方法,它属于平板色谱,是一种常用的色谱分离方法。

但随着高效液相色谱法的兴起与发展,薄层色谱法曾一度被忽略,直至高效薄层材料和预制板的出现,特别是20世纪80年代后期薄层色谱扫描仪的出现,形成现代仪器化薄层色谱法,才得到了更多的关注。

TLC法被许多国家药典用于药物中杂质的检查、药物分析等方面,且是目前药典中收载最多的鉴别与有关物质检查方法之一,具有设备简单、操作简便、分离速度快,灵敏度和分辨率较高等优点。

其中,薄层色谱法用于药物中杂质检查常用的方法有:杂质对照品法(适用于已知杂质并能制备得到杂质对照品的方法)、供试品溶液自身稀释对照法(适用于杂质的结构不能不能确定,或无杂质对照品的情况)、杂质对照品法和供试品溶液自身稀释对照法并用、对照药物法(前两种方法不适用时可用此方法)。

而薄层色谱在药物分析中我们则常用薄层色谱扫描法,其主要用于以下几个方面:1.中药材与中成药的鉴别与成分分析薄层色谱扫描法在中药材与中成药上的应用,主要是药材品种的鉴别、含量的测定、成分研究、采收期与炮制方法等对成分与含量的影响,以及成药中药味的鉴别与含量的测定等。

此方法可以直接在薄层板上进行中药成分的定量分析,其扫描图谱也可作为中药材的质量评价、鉴别依据。

例如:用薄层扫描法可以鉴别黄连品种并对对其所含生物碱进行定量的测定;用薄层扫描法测定土荆皮中乙酸的含量,以帮助鉴别其真伪等。

薄层色谱扫描法测定宫康中水苏碱含量

薄层色谱扫描法测定宫康中水苏碱含量
为 5 0n 1 m。
23 样 品 测 定 .
2 1 年 第 5 期 00
分 别 精 密 吸取 批 号 为 200 、0 82、08 3 0 8 120 0 200 的 宫 康样 品 , 供 试 品 溶 液 制 备方 法 制 备 溶 液 , 按 依 法测 定 , 量 分 别 为 13 、 .8和 11 / 。 含 .0 1 0 .5mg mL
R D 为 1 .%。 S 01
291 层 析 温 度 、 度 对 测 定 结 果 的 影 响 取 同 .. 湿 批 样 品 ( 号 200 )按 供 试 品溶 液 制 备 方 法 依 批 0 83 , 法提 取 , 密 吸 取 对 照 品溶 液 4 、0 L 供 试 品 溶 精 1 , 液 1 L, 叉 点 样 于 同~ 硅 胶 G 薄层 板 上 , 别 0 交 分


药 , 有 效 成 分 为 水 苏 碱 。 有 效 控 制 该 制 剂 的 质 其 为
干 , 渣 加 乙醇 5m 残 L溶 解 , 为 供 试 品溶 液 。 作 212 洗 脱 剂 用 量 考 察 .. 精 密 吸 取 本 品 l L, 0m
水 浴 浓缩 至 2mL 加 中性 氧 化 铝 ( 0 — 0 , 10 2 0目) , 2g


量 ,笔者等采用薄层色谱扫描法对宫康 中水 苏碱
的含 量 测 定 方 法 进 行 了研 究 ,为 该 制 剂 的质 量 控 制提 供 了定 量 检 测 方 法 。 1 仪 器 与 试 药
搅 拌 均 匀 , 干 , 磨 , 其具 有 良好 流动 性 。 其 蒸 研 使 将 加入 氧化铝 柱 ( 中性 氧 化 铝 10 2 0目 , , 0—0 2g 内径 1 0mm) ,按上 述 方 法 共 制 备 5 ,分 别 用 6 、0 份 07 、 8 、0 10mL乙醇 洗 脱 , 集 洗 脱 液 , 干 , 渣 0 9 、0 收 蒸 残 加 乙醇 5mL溶 解 , 到 5份 供试 品溶 液 。 照含 量 得 按 测 定 方 法 测 定 其 含 量 ,结 果 乙 醇 的 洗 脱 量 为 8 、 0

药学专业-药物分析-第六章-药物的含量测定

药学专业-药物分析-第六章-药物的含量测定
2.测定方法:取本品约0.2g,精密称定,加新沸过的冷水100ml与 稀醋酸10ml使溶解,加淀粉指示液1ml,立即用碘滴定液(0.1mol/L)滴 定,至溶液显蓝色在30s内不褪,即得。每1ml碘滴定液(0.1 mol/L)相 当于8.806mg的C6H8O6。
3.数据处理: 维生素C的百分含量为
因的芳伯氨基定量发生重氮化反应,反应式为:
用永停滴定法指示终点,由消耗亚硝酸钠滴定液的用 量计算盐酸普鲁卡因的含量。
2.测定方法。取本品约0.6g,精密称定,照永停滴定法 (2005年版附录ⅦA),在15~25℃,用亚硝酸钠滴定液 (0.1 mol/L)滴定。每1ml的亚硝酸钠滴定液(0.1 mol/L)相当 于27.28mg的C13H20N2O2·HCl。
测定。 1.测定原理。将本品溶于中性乙醇后,以酚酞为指示剂,用0.1mol/L氢氧
化钠液直接滴定。滴定反应式如下:
2.测定方法。取本品约0.4g,精密称定,加中性乙醇(对酚酞指示液显中 性)20ml溶解后,加酚酞指示液3滴,用氢氧化钠液(0.1mol/L)滴定。每 1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4。
cx为待测成分的浓度; Ax为待测成分的峰面积(或峰高); cR为对照品的浓度; AR为对照品的峰面积(或峰高)。
2.内标法加校正因子 精密称取对照品和内标物质,分别配成溶液,精密量
取各溶液,配成测定校正因子所用的对照溶液,取一定量 注入仪器,记录色谱图,测量对照品和内标物质的峰面积 (或峰高),按下式计算校正因子f:
量计算。
取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相 当于盐酸氯苯胍25 mg),置50 ml棕色量瓶中,加甲醛 30 ml,振荡使溶解,用甲醛稀释至刻度,摇匀,照分光 光度法,在352 nm波长处测定吸收度。另取盐酸氯苯胍 对照品约25 mg,同法测定,计算即得。

药物分析:中药制剂的薄层扫描法

药物分析:中药制剂的薄层扫描法

薄层扫描法是用一定波长的光照射在薄层板上,对薄层色谱有紫外光和可见光吸收的斑点,或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描,将扫描得到的图谱及积分数据用于药品的鉴别、检查和含量测定的方法。

薄层扫描法具有分离效能高、快速、简便等特点,因而适用于中药的分析。

薄层扫描法虽然精密度不如HPLC法高,但可作为补充,,用于无紫外吸收,或不能用HPLC法分析的组分如人参皂甙、贝母生物碱等。

试验条件的选择薄层色谱条件:原则组分应完全分离,斑点对称,均匀,不拖尾。

(2)检测方法:吸收测定法和荧光测定法两种。

在可见、紫外区有吸收的组分,可在200~800nm范围内采用吸收测定法测定。

有荧光的组分,可选择好激发光波长(λex)和发射波长(λem),用荧光法具有专属性强、灵敏度高和线性范围宽度等特点。

(3)测量方法:有反射法和透射法两种。

反射法是将光束照射到薄层斑点上,测量反射光的强度;反射光灵敏度较低,受薄层厚度影响较小,基线较稳,信噪比较大,因而使用较多。

透射法受薄层厚度影响较大,且玻璃对紫外光有吸收,所以实际应用较少。

(4)扫描方式:有单波长和双波长两种。

双波长是两束不同波长的光,一束测量样品称测定波长(λS);另一束作为对照,称参比波长(λR)。

两束光通过斩光器交替照射到斑点上,以吸收度之差ΔA定量。

双波长可以消除薄层不均匀的影响,使基线变得平稳。

测定波长一般选测定组分的最大吸收波长,参比波长可选在组分无吸收的位置,若背景光谱中与λS的等吸收处,可达到排除背景干扰的目的。

单波长法通常用斑点吸收光谱的测定。

扫描方式还有线性扫描和锯齿扫描:线性扫描是用一束比斑点略长的光作单向扫描,扫描速度快,但斑点形状不规则或浓度不均匀时误差大,主要用于荧光测定;锯齿扫描是用一微小的光束同时互相垂直的两个方向进行锯齿状扫描,由于光束小(1.25mm*1.25mm),光束内部浓度差异可以忽略不计,因而受斑点形状和浓度分布的影响小。

(5)散射参数SX:由于薄层对光散射,其吸收度A和浓度KX之间不服从比尔定律,而符合K-M方程,其吸收度由于散射而减小,A-KX曲线偏向横轴,不成直线,其形状与SX有关。

薄层色谱扫描法测定板蓝根颗粒中亮氨酸的含量

薄层色谱扫描法测定板蓝根颗粒中亮氨酸的含量
1 仪器与试药
瑞士卡玛公 司扫描仪 : C A MA G T L C S C A N N E R 3 ; 半 自动
点样器 : C A M A G L I N O MA T 5 ; H H - 4型数显恒温水浴锅 , 国华 电 器有限公司 ; N e w C l a s s i c M S电子天平 ( 0 . 0 l m g ) , 梅特勒公司。 板蓝根颗粒 ( 含糖 型 , 每袋装 1 0 g , 相 当于饮 片 1 4 g , 马鞍
摘要 : 目的 建立板蓝根颗粒 中亮氨酸含量 的测定方法 。方法 采用单 波长薄层 扫描 法 , 硅胶 G高效预制 板 , 正丁醇一 冰 醋酸一 水( 1 9 : 5 : 5 ) 为展开剂 , 测 定波长 5 0 9 n m。结果 亮氨酸点样量在 0 . 1~ 0 . 9 g 之间与吸收度积分值呈 良好 的线性关 系, 平均 回
2 方 法 与 结 果
2 . 1 薄层色谱条件及 扫描 方法 取对 照品溶 液 5 L点 于硅
胶 G高效预制板 上 , 展开剂 为正 丁醇一 冰醋酸一水 ( 1 9 : 5 : 5 ) ; 上行展开 , 展距 9 . 5 c m; 显 色剂 为茚 三酮 试液 。显色条 件 为
ห้องสมุดไป่ตู้
和精氨酸单组份 的含量 J ,没有测定其 有效 成分亮氨 酸的方
n e r o f s i n g l e w a v e l e n g t h w a s s e l e c t e d t o d e t e c t l e u c i n e wi t h s i l i c a g e l a t h i n l a y e r . T h e s a mp l e w a s s e p a r a t e d b y u s i n g b u t a n o l — g l a c i a l a c e t i —

药品薄层色谱扫描法

药品薄层色谱扫描法

药品薄层色谱扫描法一目的:制定薄层扫描检查法,规范薄层扫描测定的操作。

二适用范围:适用于薄层扫描法的测定。

三责任者:品控部。

四正文:1.简述薄层扫描法指用一定波长的光照射在薄层板上,对薄层色谱有吸收紫外光或可见光的斑点或对经照射能激发产生荧光的斑点进行扫描,将扫描得到的图谱及积分数据用于药品的鉴别、杂质检查或含量测定。

2.仪器2.1 仪器构成薄层扫描法所用的仪器薄层扫描仪。

该仪器主要同光源、单色器、样品室、薄层板台架、检测器、记录仪及数据处理系统等部分组成。

光源:色括氘灯(200~370nm)、钨灯(370~700nm)或氙灯,有的还加有汞灯,光源的转换通过转动反射镜而完成。

单色器:包括光栅与夹缝。

入口夹缝固定,出口夹缝可根据需要调整其高度与宽度。

由光源发出的复合光,经光源反射镜反射后进入入口夹缝,经光栅色散后由准直镜反射到出口夹缝得到单色光,再经平面镜向下反射到薄层板上。

薄层板台架及驱动装置:仪器中的薄层板台架可完成薄层板的X轴和Y轴方向的移动。

检测器:包括监测用光电倍增管及反射测定用与透射测定用的光电倍增管。

反射测定时,光束照射到薄层板上斑点以前的光,一部分被石英窗板反射由监测光电倍增管接受,另一部分照射到斑点,除部分光被样品吸收后作为吸收度信号。

透射测定时,由透射光电倍增管代替反射光电倍增管,它的输出信号与监测光电倍增管的输出信号之比,经对数转换后得到透射测定的吸收度信号。

数据处理:设定适当参数,采集检测器的吸收度信号进行积分计算,通常仪器上还具有对信号作不同处理的功能。

如背景校正、提高信噪比、工作曲线直线化、平滑基线等,按要求进行数据的再处理,然后送至打印机,打印谱图及报告。

2.2 仪器性能检定2.2.1 仪器波长准确度的检查用低压汞灯在200~700nm波长范围内以荧光方式对空白的硅胶薄层板扫描零吸收图谱,图谱中峰位波长与相应已知波长的差值即为波长准确度,汞灯谱线的已知波长为253.6、313.0、334.2、365.0、404.7、435.8、546.1、578.0nm,有的仪器规定波长准确度应不大于±8nm。

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药品薄层色谱扫描法
一 目 的:制定薄层扫描检查法,规范薄层扫描测定的操作。

二 适用范围:适用于薄层扫描法的测定。

三 责 任 者:品控部。

四 正 文:
1.简述
薄层扫描法指用一定波长的光照射在薄层板上,对薄层色谱有吸收紫外光或可见光的斑点或对经照射能激发产生荧光的斑点进行扫描,将扫描得到的图谱及积分数据用于药品的鉴别、杂质检查或含量测定。

2.仪器
2.1 仪器构成 薄层扫描法所用的仪器薄层扫描仪。

该仪器主要同光源、单色器、样品室、薄层板台架、检测器、记录仪及数据处理系统等部分组成。

光源:色括氘灯(200~370nm )、钨灯(370~700nm )或氙灯,有的还加有汞灯,光源的转换通过转动反射镜而完成。

单色器:包括光栅与夹缝。

入口夹缝固定,出口夹缝可根据需要调整其高度与宽度。

由光源发出的复合光,经光源反射镜反射后进入入口夹缝,经光栅色散后由准直镜反射到出口夹缝得到单色光,再经平面镜向下反射到薄层板上。

薄层板台架及驱动装置:仪器中的薄层板台架可完成薄层板的X 轴和Y 轴方向的移动。

检测器:包括监测用光电倍增管及反射测定用与透射测定用的光电倍增管。

反射测定时,光束照射到薄层板上斑点以前的光,一部分被石英窗板反射由监测光电倍增管接受,另一部分照射到斑点,除部分光被样品吸收后作为吸收度信号。

透射测定时,由透射光电倍增管代替反射光电倍增管,它的输出信号与监测光电倍增管的输出信号之比,经对数转换后得到透射测定的吸收度信号。

数据处理:设定适当参数,采集检测器的吸收度信号进行积分计算,通常仪器上还具有对信号作不同处理的功能。

如背景校正、提高信噪比、工作曲线直线化、平滑基线等,按要求进行数据的再处理,然后送至打印机,打印谱图及报告。

2.2 仪器性能检定
2.2.1 仪器波长准确度的检查 用低压汞灯在200~700nm 波长范围内以荧光方式对。

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