食品中苏丹红的快速检测方法
高效液相色谱内标法测定辣椒制品中苏丹红
Ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ ｄｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｕｄａｎ ｒｅｄ ｉｎ ｃｈｉｌｌｉ ｐｒｏｄｕｃｔｓ
ＤＩ Ｗ ａｎ—ｓｈａｎ
（Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｐｅｔｒｏ－ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｊｉｎｚｈｏｕ １２１００１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｏｒａｎｇｅ ２ ｗａｓ ｃｈｏｓｅｎ ａｓ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｕｄａｎ ｒｅｄ ｉｎ ｃｈｉｌｉ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｂｖ ＨＰＬＣ．Ｓａｍｐｌｅ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｔｈｅｎ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ３０ ｍｉｎ ａｎｄ ｆ ｉｌｔｅｒ ｉｎｇ．Ｔｈｅ ｆ ｉｌｔ ｒａｔｅ ｗａｓ ｍｉｘｅｄ ｗｉｔｈ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ａｎｄ ｓｅｔ ｉｎ ｆｕｎｎｅ１ ａｎ ｄ ｓｔｏｏｄ ｆｏｒ ｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ａｆｔｅｒ ｓｏｌｖｅｎｔ ｅｖａｐｏｒａｔｅｄ， １０ ｍｌ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗａｓ ｔ ｈｅｎ ａｄｄｅｄ．Ｔｈｅｎ ６ ｍｌ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｗａｓｈ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ａｎｄ ｓｍａｌｌ ｃｏｌｕｍｎ ｐｕｒｉｆ ｉｅｄ ａｍｉｎｏ ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ． Ｔｈｅ Ｎｏｖａ．Ｐａｋ Ｃｌ８ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ （３．９ｍｍ １５ｍｍ ｛５ （ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｍ）ｗａｓ ｕｓｅｄ ｉｎ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（Ａ），ｕｌｔｒａｐｕｒｅ ｗａｔｅｒ（Ｂ）ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ：０ ～ ３ ｍｉｎ，Ｂ３０ Ａ７Ｏ％ ％ ｌ ３ — ４．５ｍｉｎ Ａ＿７Ｏ％ ～ ９５％ ａｎｄ Ｂ３０％ ～ ５％ ；４．５ ～ ７．５ｍｉｎ Ａ９５， Ｂ５％ ％ ； ７．５ ～ ８．５ｍｉｎ Ａ９５％ ～ ７０％ ａ ｎ ｄ Ｂ５％ ～ ３０％ ． Ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ ０．３ ｍＬ／ｍｉｎ，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ５１５ ｎｍ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｕｎｄｅｒ ｔ ｈｅ ａｂｏｖｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ， Ｏｒａｎｇｅ ２ ｗａｓ ｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｓｕｄａｎ ｒｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａ ｒｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｕｄａｎ ｒｅｄ．Ｉｎ ｔｈ ｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０．５ ～ １．５ ｍｇ／ｋｇ． ｔ ｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｏｆ ４ ｋｉｎｄｓ ｏｆ Ｓｕｄａ ｎ ｒｅｄ ｐｉｇｍｅｎｔ ｗａｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ８８．７％ ～ ９９．７％，ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎ （ＲＳＤ） ＜ ０．２５％，ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ ｄｅｔｅｃｔ ｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｓｉｇｎａｌ—ｔｏ．ｎｏｉｓｅ ｒａｔｉｏｓ（Ｓ／Ｎ ＝ ３）ｗｅｒｅ ０．５６，０．５３，０ ４ ６，０．３３ｇ／ｋｇ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ ｔｏ ｏｐｅｒａｔｅ，ｇｏｏｄ ａｃｃｕｒａｃｙ， ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ．Ｉｔ Ｃａｌｌ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ Ｓｕｄａｎ ｒｅｄ ａｎａ ｌｙｓｉｓ ｉｎ ｈｏｔ ｐｅｐｐｅｒ ｐｒｏｄｕｃｔｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｉｎｔｅｒｎ ａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｍｅｔｈｏｄ ｌ ｏｒａｎｇｅ ２ ｌ Ｓｕｄａｎ ｒｅｄ ｌ ＨＰＬＣ ｌ ｐｅｐｐｅｒ ｐｒｏｄｕｃｔｓ
食品中苏丹红的快速检测方法课件
苏丹红检测的意义
提高公众健康水平
提升食品安全监管水平
通过苏丹红检测，能够减少含有苏丹 红的食品对公众健康的危害，提高整 体健康水平。
苏丹红检测技术的不断发展和完善， 有助于提高食品安全监管机构的监管 能力和水平。
规范食品行业秩序
加强苏丹红检测能够促使食品企业自 律，遵守食品安全法规，规范行业秩 序。
趋势分析
对多次实验结果进行趋势分析， 了解苏丹红含量的变化趋势。
因素分析
分析影响实验结果的各种因素， 为改进实验方法提供依据。
结果解读与报告撰写
结果解读
对实验结果进行深入解读，理解苏丹红在食品中 的存在状态和潜在风险。
报告撰写
根据实验结果和分析结论撰写实验报告，包括数 据记录、结果分析和建议措施等。
根据实验需要，准备适量的苏丹 红标准品、提取剂、缓冲液等试 剂，确保其质量和纯度。
实验操作步骤
提取
将处理好的样品加入适 量的提取剂中，进行充 分搅拌、纯 化，去除杂质，提高检
测准确性。
显色反应
加入适量的缓冲液和苏 丹红标准品，进行显色
反应。
检测
使用分光光度计在 550nm波长处测定吸光 度值，根据标准曲线计
算苏丹红含量。
05
实验结果分析
数据处理与结果判定
数据分析
对实验数据进行统计分析，包括 平均值、标准差等。
结果判定
根据实验数据判定食品中是否含有 苏丹红，以及苏丹红的含量是否超 标。
可信度评估
对实验结果的可信度进行评估，确 保结果的准确性和可靠性。
结果分析方法
对比分析
将实验结果与标准值进行对比， 分析差异原因。
气相色谱-质谱联用法
总结词
有毒有害物质的快速检测
第二十页，编辑于星期五：十点 十一分。
（3）消毒液有效氯的快速测定
消毒液在食品加工过程中使用广泛，控制消毒液的有效浓度是一个重要的环节。 目前使用较多的是含氯消毒液，测定有效氯的方法有两种试纸法。
方法：于盛有2mL牛乳的试管中加入2mL玫瑰红试剂，乳中无碱性物质则呈黄色，有碱性物质时呈玫瑰红色，其碱性物质的存在量与反应颜色的深浅成正比。
0.00 0.03 0.06 0.09
相当于掺入碳酸钠的百分含量
第五页，编辑于星期五：十点 十一分。
5、牛乳中淀粉和麦芽糊精的快速检测
意义：牛乳掺水后乳密度会降低，很容易检出，加入淀粉和麦芽糊精后乳密度会升高，但营养成份并未增加。检测淀粉和麦芽糊精是否存在，主要是检测牛乳是否掺假。 方法：取5mL牛乳注入试管中（有条件时稍稍煮沸，待冷却后），加入数滴淀粉检测试液，如有淀粉和麦芽糊精存在时，则有蓝色或青蓝色沉淀物出现。
第十七页，编辑于星期五：十点 十一分。
三、 食品加工贮藏安全度的快速测定
食品中心温度、食品加工和贮藏温度 消毒间紫外线辅照强度 消毒液有效氯 游离性余氯
第十八页，编辑于星期五：十点 十一分。
（1）食品中心温度、加工和贮藏温度的快速测定
细菌生长最适宜的温度在10～60℃范围之内。因此,食品的储存温度应控制在10℃以下。食品加工应当烧熟煮透其中心温度应在70℃以上并保持一定的时间才可杀灭细菌。 在烹饪后至食用前超过2小时的食品，应当在高于60℃或低于10℃的条件下存放。需要冷藏的熟制品，应当放凉后在0～10℃之间冷藏。 煎炸食品时，油温最高不得大于250℃，一般不得超过190℃。 温度对于食品的质量起着重要作用。国家卫生部《餐饮业食品卫生管理办法》中对各环节的温度控制有明确的规定 。采用食品中心温度计和红外线瞬时测温仪可有效加以监控。
超高效液相-串联质谱法筛查食品中的苏丹红
超高效液相-串联质谱法筛查食品中的苏丹红陈 英（周至县食品药品检验检测中心，陕西西安 710400）摘 要：运用超高效液相-串联质谱法（UPLC-MS/MS）同时测定辣椒面、火锅料、辣条、鸭蛋、鸭血中的苏丹红Ⅰ～Ⅳ。
通过优化萃取试剂、样品基质效应的消除、色谱及质谱条件等参数，检测方法的灵敏度和适用性。
在电喷雾离子源正离子模式下，多反应监测（MRM）方式检测，外标法定量。
苏丹红Ⅰ～Ⅳ线性关系良好，相关系数（r2）均大于0.999，苏丹红Ⅰ～Ⅳ在3个添加水平下，回收率范围为85.1%～104.9%，标准偏差（RSD）均小于6.2%，检出限和定量限为1.0～6.0μg/kg。
本方法处理过程简单、分析时间短、准确度高，适用于辣椒面、火锅料、辣条、鸭蛋和鸭血中的苏丹红Ⅰ～Ⅳ检测，可用于食品中非法添加苏丹红Ⅰ～Ⅳ的筛查。
关键词：超高效液相-串联质谱法；苏丹红；非法添加苏丹红共有4个组分，为苏丹红Ⅰ～Ⅳ，是一种红色颗粒或粉末状的红色染料常用于工业上色如鞋、地板等的增光，因为有致癌作用危害人体健康，我国和欧盟都禁止其用于食品生产[1]。
市面上有一些不法分子为了产品成色漂亮好出售，依然违法添加工业染料。
目前，苏丹红Ⅰ～Ⅳ检测方法主要有薄层色谱法[2]、紫外可见分光光度法[3]、近红外显微成像光谱法[4]、液相色谱法[5-6]、液相色谱-质谱联用法[7-8]和化学发光分析法[9]，这些方法前处理复杂、试剂用量大、检测周期长、准确度不高，不适应实际工作中遇到的多种复杂基质中苏丹红的筛查测定。
本试验通过对色谱条件和质谱参数的研究、优化，建立了高效液相色谱-串联质谱同时分析苏丹红Ⅰ～Ⅳ的方法。
本方法前处理简单，7 min即可同时测出苏丹红Ⅰ～Ⅳ的含量，方法快速简单，结果准确，可以用于食品中非法添加苏丹红Ⅰ～Ⅳ的筛查。
1 材料与方法1.1 仪器与试药液相色谱-串联质谱联用仪：Qtrap 5500三重四极杆串联质谱仪（美国AB SCIEX公司）；配有电喷雾离子源（ESI）；LC20A超高效液相色谱仪（日本Shimadzu公司）；MS1003S电子天平（瑞士Mettler Toledo公司）；Milli-Q超纯水仪（美国Millipore公司）；MFV-24智能氮吹仪（广州德泰仪器科技有限公司）。
苏丹红最新检测方法
苏丹红最新检测方法下载苏丹红检测套装：固相萃取柱：HiCapt Sudan苏丹红专用柱(500mg/3mL，订货号：22-05003)液相色谱柱：HiSep C18-T 150 mm×4.6 mm i.d., 5 μm（订货号：0246150）苏丹红是偶氮苯类人工色素,由于苏丹红具有潜在的致癌性, 中国和欧盟等多数国家都禁止其作为色素添加剂在食品中使用。
然而, 仍有不少食品生产企业为了改善食品色泽、降低成本将其作为食用色素。
我国质量监督部门检出了包括几家知名企业生产的众多含有苏丹红的食品, 引起了整个社会的关注。
因此，建立快速可靠的检测方法至关重要。
目前报道的苏丹红的检测方法主要是采用液相色谱法。
由于辣椒油、辣椒粉等食品成分复杂,液相色谱分离困难,易导致假阳性结果。
国家标准的方法是采用正已烷作为萃取溶剂，用氧化铝固相萃取柱净化样品。
但该方法样品处理过程复杂，而且氧化铝的活性不易控制，方法回收率难以得到保证。
因此我们开发了HiCapt Sudan苏丹红专用固相萃取柱，建立了同时检测食品中四种苏丹红的高效液相色谱分析方法，较好地解决了这一问题。
方法的优势：∙专利创新的苏丹红专用萃取填料，有效去除食品中的天然色素和植物油等杂质干扰∙回收率稳定、重现，克服了传统方法中氧化铝活性不稳定的缺陷∙方法简单、快速、节省溶剂∙优化的色谱分离条件，有效去除杂质干扰1. 样品处理：1.1 样品提取：（参考国标GB/T 19681—2005）1.1.1辣椒粉等粉状样品称取0.5 g（准确至0.001g）样品于三角瓶中，加入5mL正己烷，超声10min，5000 r/min离心5 min 后取上清液3 mL，待净化。
1.1.2辣椒油等油状样品称取0.5 g（准确至0.001g）样品于小烧杯中，加入3mL正己烷溶解，涡旋1分钟混匀，待净化。
1.1.3腊肠样品将腊肠切成小丁，称取3.0 g, 放入10 mL离心管中，加入5 mL正己烷，超声10分钟，然后步骤同辣椒粉样品。
食品中苏丹红的检测
高效液相色谱法（HPLC）
我国国家质量监督检验检疫总局、国家标准化管 理委员会发布的高效液相色谱法在欧洲委员会公 布的检测方法基础上做了改进。 国标法的提取液由乙腈改为正己烷，将液体、浆 状样品混合均匀，固体样品磨细后用正己烷提取、 过滤，必要时加入无水硫酸钠脱水后稍加温溶解， 用旋转蒸发仪蒸发浓缩，然后慢慢加入氧化铝层 析柱中萃取净化后用丙酮转移定容待测。
苏丹红的分析技术
高效液相色谱法（HPLC）
迄今为止，国际上食品中苏丹染料的常用检测方 法是高效液相色谱法，而高效液相-质谱联用法和 前面所述的电喷雾解析电离质谱法等用于检测结 果的确证。 欧洲委员会推荐的液相色谱法是由样品经匀桨化 或粉碎后，加入乙腈（Sudan Ⅲ、Sudan Ⅳ加入 氯仿）提取，过滤，滤液用反相高效液相色谱仪 进行色谱分析。以波长可变的紫外-可见检测器定 性和定量。
苏丹红的结构，合成与危害
合成方法 苏丹红属偶氮染料，可用芳胺做为前体通过重氮 化反应生成重氮离子再通过亲电取代反应和萘酚 偶联体还原酶的作用下在体内生成相应的 胺类物质。在多项化学与生物实验中发现，苏丹 红的致毒性与代谢生成的胺类及萘酚类物质有关。 Sudan I在体内的代谢如下图所示。
苏丹红的结构，合成与危害
分类及结构 苏丹红为亲脂性偶氮化合物，外观呈暗红 色或深黄色片状晶体，难溶于水，主要包 括Ⅰ、Ⅱ、III 和Ⅳ4 种类型。其中II、III 和IV 均为I 的化学衍生物。结构和IUPAC命 名如下所示
苏丹红的结构，合成与危害
Sudan Sudan Sudan Sudan
苏丹红的分析技术
高效液相色谱法（HPLC）
检测波长：Sudan Ⅰ、Sudan Ⅱ在478nm 波长有 最大吸收，Sudan Ⅲ、Sudan Ⅳ在520nm波长有 最大吸收。 Sudan Ⅰ的检测限是13微克/升，定量的最低浓 度为106微克/升，在辣椒粉样品中的添加回收率 高于90％。
三食品中苏丹红染料的测定
实验十、食品中苏丹红染料的测定标准依据：GB/T19681-2005食品中苏丹红染料的测定（高效液相色谱法）一、目的要求学习食品中苏丹红染料测定的原理和方法。
二、实验原理苏丹红色素是应用于油彩蜡、地板蜡和香皂等化工产品中的一种非生物合成的着色剂，非食用色素，长期食用具有致癌致畸作用。
苏丹红色素一般不溶于水易溶于有机溶剂，待测样品经有机溶剂提取，经浓缩及氧化铝柱层析萃取净化，用反相高效液相色谱—紫外可见光检测器进行色谱分析，采用外标法定量。
三、仪器与试剂（一）试剂1、乙腈色谱纯2、丙酮色谱纯、分析纯3、甲酸分析纯4、乙醚分析纯5、正己烷分析纯6、无水硫酸钠分析纯7、层析柱管：1cm (内径) 5cm (高)的注射器管。
8、层析用氧化铝（中性100目~200目）：105℃干燥2h，于干燥器中冷至室温，每100g中加入2mL 水降活，均匀后密封，放置12h 后使用。
9、氧化铝层析柱：在层析柱管底部塞入一薄层脱脂棉，干法装入处理过的氧化铝至3cm高，经敲实后加一薄层脱脂棉，用10mL 正己烷预淋洗，洗净柱杂质后，备用。
10、5%丙酮的正己烷溶液：吸取50mL 丙酮用正己烷定容至1L。
11、标准物质：苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ；纯度≥95%。
12、标准贮备液：分别称取苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ及苏丹红Ⅳ各10.0mg （按实际含量折算），用乙醚溶解后用正己烷定容至250m L。
（二）仪器1、高效液相色谱仪（配有紫外可见光检测器）2、分析天平：感量0.1mg3、旋转蒸发仪4、均质机或匀浆机5、粉碎机6、离心机7、0.45μm有机滤膜四、实验步骤（一）样品制备：将液体、浆状样品混合均匀，固体样品需粉碎磨细。
（二）样品处理：1、红辣椒粉等粉状样品称取1g ~ 2 g（准确至0.001 g）样品于三角瓶中，加入10mL ~20mL 正己烷，超声处理5min，过滤，用10 mL 正己烷洗涤残渣数次，至洗出液无色，合并正己烷液，用旋转蒸发仪浓缩至5 mL 以下，慢慢加入氧化铝层析柱中，为保证层析效果，在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样，在全程的层析过程中不应使柱干涸，用正己烷少量多次淋洗浓缩瓶，一并注入层析柱。
食品中苏丹红检测方法探讨
，
、
a n人 氯仿)提
l l ¨g ／ g k
，
1 0 u g ／k g
8 u g ／ g k 2 6％
．
、
，
滤 液 用 反 相 高效 液 相 色 谱 仪
。
8 bt g ／ g k
相对 标 准 偏 差 <
10 6 ％
。
，
回收
影响
，
整 个分 析 时 间 只 需 3 2
．
m
in
。
进 行 色谱 分 析
，
蓝
、
丽 春 红 4 R 四 种 偶氮 染 料 对 苏 丹 红 I
，
薄 层 层 析法 等
．
…
采 用梯 度洗 脱
，
色谱 分 离 的 干 扰
线形 梯度洗脱 果
一
发现 以p H 值 为2
．
高效液 相 色 谱 法对 食 品 中苏 丹
一
相 色 谱 进 行 色谱 分 析
：
外标 法 定 量
m
；
的冰 乙 酸 水 溶 液 和 乙 腈 为 流 动相 进 行
，
原则
避 免高效液相 色谱 淋 洗 液 乙 睛 液 对 人 体 的 损害
仪 器 稳 定性
…
。 ，
丙酮溶
采 用 乙 腈 乙 酸 溶 液 为流 动 相 体 系 时
，
只 要 能溶 解在 流 动相 中 的 物 质 都
。
降 低 了成 本
．
，
提高了
待测 物 谱 峰 纯 度 高
16
．
。
欧盟法
，
流 动相 为
，
可 以 用 高效液 相 色谱 法 分 析 知 的有机化合物 中
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【检测步骤】 1.样品处理：取约2g样品（辣椒取1g）于研钵中, 加入一瓶提取剂研 磨约3至5分钟，用滤纸过滤后挤干残渣, 收集滤液5mL于100mL量筒 中，用蒸馏水定容至15mL。 2.过层析柱：将50mL注射器与层析柱（层析柱使用前依次用5ml洗 脱液、5ml水激活）连接，将步骤1中收集到的样液倒入注射筒里， 用注射塞加压，加快流速，建议15mL样本通过柱子的时间为3～ 5min。待样液完全流干后加2mL洗涤剂、2ml水洗涤层析柱。 3.观察结果：观察层析柱中吸附剂颜色变化，若吸附剂逐渐形成红色 环带，可初步判断样本中含有苏丹红；向层析柱中加1mL洗脱液； 将其洗脱下来的液体用5mL离心管收集,看液体颜色来判断。 萃取：取步骤3中的5mL离心管，加入1mL萃取剂，加入0.2ml水， 振荡，离心管上层若有明显的红色则可判断样品中含有苏丹红。 4.检测：用1ml注射器取步骤4中离心管中的上层液(注意不要吸到下 层的液体), 加到白色点滴板的一个孔上，样液渐渐挥干，若在孔上形 成红色斑环则说明样品中含有待检物质。加0.2ml提取剂溶解，滴加 2~3滴定性试剂,试剂红色加深为苏丹红1、2，试剂变蓝色为苏丹红3、 4。（注意及时观察）
方法：以苏丹红Ⅰ作模板分子, 用悬浮聚 合法制备出微米级苏丹红Ⅰ分子印迹聚 合物并将其做成微固相萃取柱, 直接安装 在流动注射系统的八通阀上, 对样品溶液 中的苏丹红进行在线分离和富集, 然后通 过高锰酸钾氧化苏丹红Ⅰ化学发光反应 测定样品中苏丹红Ⅰ的含量。此法具有 很高的灵敏度和选择性, 检出限可达3 ×10- 7 g/L, 是目前测定苏丹红Ⅰ最简 单、最廉价和最灵敏的方法之一。用于 食品安全的现场检测每次测定只需10 min, 并可进行连续在线测定。
目前，苏丹红的快速检测的 发展主要有以下三个方面：
薄层色谱法 免疫学检测方法 在线分子印迹-化剂盒本试剂盒采用免疫竞争法检测苏丹红。 微孔板上包被有抗苏丹红抗体。加入苏丹红酶结合物和苏 丹红标准品或样品，游离苏丹红与苏丹红结合物竞争微量 反应板上的抗苏丹红抗体，没有结合的酶结合物被洗去。 再向反应孔中加入相应反应底物TMB，作用一定时间后， 结合的酶结合物将TMB转化为蓝色，转化成最终的黄色。 颜色的深浅和样品中的苏丹红呈负相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度。 最低检测限：0.39 ng/ml 特异性：本试剂盒可用于快速检测苏丹红。与对位红有一 定交叉反应。 有效期：6个月
食品中苏丹红的快速检测方法
姓名：*** 班级：质量091 学号：***
苏丹红为亲脂性偶氮化合物，主 要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四种常见类型， 其结构式中含有萘环。苏丹红并不是 一种食品添加剂，而是一种工业染料， 一些不法食品企业把苏丹红Ⅰ作为一 种食品添加剂来使用，常见的食品有 辣椒粉、辣椒油、红豆腐、红心鸡蛋。 与食品安全相关的“涉红”事件的主 要代表即为苏丹红Ⅰ。
苏丹红快速检测试剂盒（柱净化） 【简介】 本方法检测速度快，检测一个样品10分钟左右；不需要做对照 实验，特异性高, 可准确定性；操作简便，不需专业技术人员； 【检测原理】 样品经苏丹红快速检测试剂盒中的提取剂提取、层析柱净化后， 经液液萃取后与定性试剂反应，根据显色反应可定性检测样品 中的苏丹红。 【检测范围】 蛋类、辣椒、酒类等 【技术指标】 检测下限：50 μg/kg
实验原理：
分子印迹聚合物是一类新的分子识别物质, 它将待 测物质作为模板分子, 首先, 使功能单体与模板分 子间相互作用形成单体- 模板分子复合物; 然后, 功 能单体与交联剂交联聚合形成聚合物, 将模板分子 固定; 最后再通过一定的物理或化学方法把模板分 子提取出来。从而在聚合物中留下一个与模板分子 特异性结合的功能基的三维空穴, 对模板分子具有 专一性识别作用。这种分子印迹聚合物具有构效预 定性、特异识别性和广泛实用性。其识别能力可以 和生物分子抗原- 抗体、酶- 底物、受体-激素间的 特异性识别相媲美, 同时还具备对恶劣环境(高温、 高压、强酸、强碱)的耐受性。
LJSP-2多功能食品安全检测仪 检测范围： 食品中磺胺总量 食品中苏丹红 水产品中组胺 乳制品蛋白质 重金属镉 水产品中孔雀石绿 蜂蜜中羟甲基糠醛 食醋总酸 蜂蜜酸度 蜂蜜淀粉酶 食用油过氧化值 双氧水
仪器原理: 多功能食品安全测定仪的原理是基于被测样品中 有害物质与显色剂反应生成有色化合物对可见光 有选择性吸收而建立的比色分析法。 仪器组成: 仪器由笔记本电脑、LED光源、比色池、集成光 电传感器、微处理器构成，可直接在电脑及仪器 液晶屏幕上显示出被测样品中有害物质的含量， 并打印出分析结果。
国际上通用的苏丹红检测方法是欧洲健 康与消费者保护综合委员会第四份委员会提 供的检测标准——反相高效液相色谱-紫外检 测器定性与定量检测法。2005年3月20日,我 国国家质量监督检验检疫总局及国家标准委 发布GB/T19681-2005《食品中苏丹红染料 的检测方法——高相液相色谱法》。该标准 采用的HPLC法，与欧洲相比，在萃取剂、 纯化及定量方法方面有所改进，检出限为10 微克每千克。