Megazyme 总淀粉测定试剂盒翻译
几种常见饲料原料中总淀粉含量的测定
含量则比较少。 表 １ 不同物质中总淀粉含量的测定结果 ％
样品
干物质
总淀粉
土豆粉
８８．２
６０．６１
燕麦
８９．８
５７．３
玉米
８９．７
６５．１７
小麦
８９．６
７１．５７
绿豆
８９．１
３７．３４
芋头
９０．１
５６．６４
小米
８９．４
７５．８６
荞麦
９０．７
６４．９
米
９２．４
８１．４４
蚕豆
９２．５
３４．８３
红薯
９２．４
［关键词］ 总淀粉；测定；酶水解
［中图分类号］ Ｓ８１６．４
［文献标识码］ Ａ
［文章编号］ １００４－ ３３１４（２００５）１５－ ００２８－ ０２
［Ａｂｓ ｔｒａｃｔ］ Ａ ｍｅｔｈｏｄ ｏｎ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｓｔａｒｃｈ ｕｓｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｗａｓ ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ，ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ
糖苷酶 ０．１ ｍＬ，旋涡混匀；接着将试管放入 ５０ ℃ 水浴恒温振荡器中（２００ 次／Ｌ），３０ ｍｉｎ 后取出。将
试管中所有溶液转入至 １００ ｍＬ 容量瓶中，用蒸 馏水冲洗离心管 ３ 次，洗液加入容量瓶中，蒸馏水
定容至 １００ ｍＬ，摇匀。３０００ ｒ／ｍｉｎ 离心 １０ ｍｉｎ，吸 取 １００ μＬ 上清液 至 Ｂｅｃｋｍａｎ Ｓｙｎｃｈｒｏｎ ＣＸ４／Ｐｒｏ 全自动生化分析仪样品杯中，测定葡萄糖（ＧＬＵ）， 计算出总淀粉含量：
MEGAZYME直链淀粉试剂盒说明书
前言:谷类淀粉的许多特性决定其最终用途，这些取决于直链淀粉/支链淀粉的比率。
这些特性包括糊化和凝胶化，溶解度，抗性淀粉的形成以及整颗大米的烹饪和构造特性。
因此，淀粉中直链淀粉含量的测定是淀粉加工的一个重要的质量参数。
最常用的测定谷物淀粉中直链淀粉含量的方法是利用电势，电流测定或直链淀粉的碘结合能力比色测定直链淀粉-碘色合配合物。
然而，这些方法具有不确定性。
支链淀粉-碘复合物也可以形成，这样降低了利用非比色法测定的游离碘离子的浓度，并且用比色法测量时，该复合物可能和直链淀粉-碘复合物吸收相同波长的光。
这种复合物致使直链淀粉的测定含量超过实际含量，需要进行校正。
Gibson等详细列举了使用这些方法所遇到的许多其他问题。
支链淀粉结合ConA的特殊复合物为淀粉中直链淀粉的测定提供了一种替代方法，而且不存在不确定性问题。
在指定pH值，温度和离子强度的条件下，ConA特异性结合分支多糖并形成沉淀，这种结合以多个非还原性末端基团上的α-D-吡喃葡萄糖基或α-D-吡喃甘露糖基单位为基础。
因此，ConA可以有效结合淀粉中的支链淀粉成分，但是不能结合线性为主的直链淀粉成分。
此方法是Yun和Matheson改进的ConA方法。
分析之前用乙醇预处理去除脂质。
原理：淀粉样品通过加热完全地溶解在二甲基亚砜（DMSO）里。
用乙醇沉淀淀粉去除其中的脂质，回收沉淀的淀粉。
用醋酸/盐溶液溶解沉淀的样品，加入ConA，特异性沉淀支链淀粉，离心去除沉淀。
单位体积上清液中的直链淀粉用酶水解为D-葡萄糖，然后用葡萄糖氧化酶/过氧化物酶试剂进行测定。
另外一份单位体积醋酸/盐溶液中的总淀粉同样用酶水解为D-葡萄糖，然后加入葡萄糖氧化酶/过氧化物酶，用比色法测定。
根据ConA沉淀样品的上清液和与总淀粉样品中的GOPOD在510 nm处的吸光光度值之比判断直链淀粉在总淀粉中的含量。
该方法适用于所有的纯淀粉和谷物粉。
精确性样品如为纯淀粉，相对标准偏差为<5%。
玉米籽粒发育突变体emp35_的表型分析与基因定位
第43卷 第2期2024年 3月Vol.43 No.2Mar. 2024，85~92华中农业大学学报Journal of Huazhong Agricultural University玉米籽粒发育突变体emp35的表型分析与基因定位刘津1，2，汤艳芳3，杜何为1，张祖新21.长江大学生命科学学院，荆州434023；2.华中农业大学作物遗传改良全国重点实验室，武汉430070；3.湖北中医药大学检验学院，武汉430065摘要 为解析玉米籽粒形成的遗传基础，探究Emp35基因在玉米籽粒发育中的作用，对籽粒缺陷突变体empty pericarp35（emp35）进行表型鉴定、胚乳细胞显微观察、胚乳贮藏物质含量测定及图位克隆。
结果显示：突变体籽粒发育缓慢，明显小于同期发育的正常籽粒，成熟籽粒干瘪呈空皮状；胚乳细胞显微观察发现emp35的胚和胚乳发育严重滞后，胚乳细胞中线粒体结构异常；淀粉和蛋白质积累减少；F 2代分离果穗上正常籽粒与发育缺陷籽粒呈3∶1分离，表明籽粒缺陷表型由单个隐性核基因突变所致。
采用集团分离分析法（bulked segregant analysis ， BSA ） 将Emp35定位于第8染色体 127.90~163.36 Mb 区间，在该区间内开发了4个InDel 标记，连锁作图将Emp35精细定位于139 571 117~146 176 858区间。
关键词 玉米（Zea mays L .）； 籽粒发育； 集团分离分析法； 基因定位； 表型鉴定中图分类号 S513.3 文献标识码 A 文章编号 1000-2421（2024）02-0085-08玉米籽粒产量由单位面积穗数、每穗粒数和籽粒质量3个因素构成。
籽粒质量由籽粒库容和胚乳充实程度所决定［1］，籽粒发育与充实程度影响籽粒产量。
玉米籽粒发育包括胚胎发育、胚乳细胞分化和贮藏物质积累3个关键过程，每个发育过程都受众多基因调控。
目前，研究者已经克隆了百余个控制籽粒发育进程的基因［2］。
3种杂豆淀粉回生过程的理化特性研究
3种杂豆淀粉回生过程的理化特性研究黄倩;高金梅;郭洪梅;张国权【摘要】采用酶解法、全质构、RVA、XRD和DSC方法分析蚕豆、豌豆和绿豆淀粉回生过程中消化特性、质构特性、糊化特性、结晶特性和热特性,以探讨主要豆类淀粉凝胶的回生特性,为豆类淀粉凝胶的生产及品质调控提供参考.结果表明:在4℃储藏7d内,淀粉凝胶抗性淀粉含量增加,硬度、黏性和咀嚼度增加.凝胶在储藏过程中,蚕豆和豌豆淀粉的峰值黏度、最终黏度低于绿豆淀粉,而糊化温度高于绿豆淀粉.淀粉在回生过程中衍射峰强度增加,但未出现吸热峰.%Digestibility, texture property, gelatinization property, crystalline property and thermal property of broad bean, pea and mung bean starches during retrogradation were analyzed by enzymatic hydrolysis, texture profile analysis(TPA), rapid visco analyzer(RVA), X-ray diffraction(XRD), differential scanning calorimeter (DSC), respectively, in order to explore the retrogradation characteristics of major legume starch gels and pro-vide references for the product and quality control of legume starch gel. The results showed that:during storage for 7 days at 4℃, the content of resistant starch (RS) was increased;the hardness, gumminess and chewiness of starch gels were rised;the peak and final viscosities of broad bean and pea starch gels were lower than mung starch gel, while the pasting temperature of broad bean and pea starch gels was higher;the intensity of diffrac-tion peak was increased, but endothermic peak didn't appear.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)010【总页数】6页(P22-27)【关键词】豆类淀粉;回生;理化特性【作者】黄倩;高金梅;郭洪梅;张国权【作者单位】西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西杨凌712100【正文语种】中文豆类淀粉是淀粉四大来源之一，具有热糊稳定性好、凝胶弹性佳和透明度高等优良品质，为制作粉丝、凉粉等淀粉凝胶食品的优质材料。
一个新的玉米Bt2基因突变体的遗传分析和分子鉴定
作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2022, 48(3): 572−579/ ISSN 0496-3490; CN 11-1809/S; CODEN TSHPA9E-mail: zwxb301@本研究由国家自然科学基金项目(U1804235, 31771800)和河南农业大学科技创新基金项目(KJCX2020A04)资助。
This study was supported by the National Natural Science Foundation of China (U1804235, 31771800) and the Science and Technology Innovation Fund of Henan Agricultural University (KJCX2020A04).*通信作者(Corresponding author): 陈洪宇, E-mail: chenhongyu@第一作者联系方式: E-mail: 158********@Received (收稿日期): 2021-01-19; Accepted (接受日期): 2021-06-16; Published online (网络出版日期): 2021-07-19. URL: https:///kcms/detail/11.1809.S.20210716.1506.004.htmlDOI: 10.3724/SP.J.1006.2022.13005一个新的玉米Bt2基因突变体的遗传分析和分子鉴定徐宁坤 李 冰 陈晓艳 魏亚康 刘子龙 薛永康 陈洪宇* 王桂凤河南农业大学农学院 / 省部共建小麦玉米作物学国家重点实验室, 河南郑州 450002摘 要: 玉米籽粒发育调控机制的研究对于玉米产量与品质性状的遗传改良十分重要。
本研究鉴定了一个新的转座子插入的籽粒皱缩突变体5601Q , 遗传分析表明其籽粒缺陷稳定遗传且为单基因隐性突变。
α-淀粉酶(AMY)测定试剂盒(EPS底物法)产品技术要求sainuopu
α-淀粉酶（AMY）测定试剂盒（EPS底物法）适用范围：用于体外定量测定人体血清或尿液中α-淀粉酶的活性。
1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml。
1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1：无色澄清液体，试剂2：无色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度在37℃、405nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.35。
2.3.2试剂空白吸光度变化率在37℃、405nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于0.002。
2.4 分析灵敏度测定活性为100U/L样本时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.006。
2.5 线性范围在（5，1000）U/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.996。
在[50，1000）U/L，范围内的线性相对偏差不大于±10%；测定结果（5，50）U/L时，线性绝对偏差不大于±5U/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于6%。
2.8 准确度相对偏差：相对偏差应不大于±10%。
2.9 稳定性效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃下有效期为12个月，取失效期的试剂盒进行检测，试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。
淀粉含量测定方法大致可分为酸水解或酶程序
淀粉测定说明书淀粉含量测定方法大致可分为酸水解或酶程序，酸水解方法只能适用于纯淀粉样品，从而应用受到限制。
酶的程序不同的前处理工序,淀粉糊化，液化及糊精,糊精水解为葡萄糖和血糖测量。
AACC方法76-11指定在含水条件下的淀粉糊化高压釜中.其次是淀粉转化为葡萄糖淀粉葡萄糖苷酶和葡萄糖的测量. AACC方法76—11低估了淀粉含量在一定范围内的样品和材料，包括高直链淀粉玉米淀粉和许多谷物加工的产品。
当今使用的大多数方法A-淀粉酶结合处理热稳定期间或紧随淀粉糊化工序。
难以糊化（如高直链淀粉玉米淀粉)的样品,如氢氧化钠或氘代二甲亚砜(DMSO）溶剂.在一个过程中，以确保完全溶解，淀粉，膳食纤维的测定，Englyst 和Cunmmings的包括处理淀粉脱支酶，支链淀粉酶.为了满足非常样品的需要，尚未定量和可靠的，程序为总淀粉Megazyme的测量产生，并备有一个总淀粉耐高温A-淀粉酶和淀粉葡萄糖苷酶（麦克利等)的基础上使用的检测试剂盒。
该方法已通过AOAC(官方方法996.11)和AACC(方法76.13)。
最近，耐高温α—淀粉酶是积极和稳定在较低的pH值变得可行.因此，我们用酶更新了我们的总淀粉的方法。
这种改进的主要优点是让耐高温A—淀粉酶和淀粉葡萄糖苷酶活化在同一PH值（5。
0），这反过来，简化了要执行的步骤法和生产的异构麦芽糖(4-A—吡喃葡糖基—D-果糖）的可能性减至最小，这是抗淀粉葡萄糖苷酶和A—淀粉酶水解。
Megazyme总淀粉分析程序可以测量总淀粉广泛的食品，饲料，植物和谷物产品（自然或加工).大多数样品（如面粉），淀粉完全溶解大约培养样本在100℃并有耐高温A-淀粉酶的存在。
样品中含有高含量的抗性淀粉（例如高直链淀粉玉米淀粉)，要求预先溶解在寒冷的2 M KOH或相关DMSO。
含有可溶性淀粉或麦芽糖糊精，烹饪用的热稳定的样品A—淀粉酶是不需要的。
原理：耐高温α—淀粉酶水解淀粉转化为可溶的支链和直链麦芽糊精(1）。
直链 支链 总淀粉含量（酶法）试剂盒说明书
直链/支链/总淀粉含量（酶法）试剂盒说明书（货号：G0548F分光法48样）一、产品简介：常用直链淀粉测定方法有电位测定法、旋光分析法或碘与直链淀粉结合力的比色法，然而这些方法存在不确定性。
因为支链淀粉-碘复合物在此过程中同样会形成，导致直链淀粉含量的高估，因此需要修正。
本试剂盒利用伴刀豆球蛋白A只与支链淀粉结合而不与直链淀粉结合的特性，使其分离，再用仅水解淀粉的酶复合物使淀粉水解为葡萄糖，通过检测葡萄糖含量得到直链、支链和总淀粉的含量。
二、试剂盒的组成和配制：试剂名称规格保存要求备注试剂一粉体g×1瓶4℃保存用前加100mL蒸馏水溶解，并用50%的乙酸（1mL 蒸馏水+1mL冰乙酸）逐滴加入约40μL，务必核定PH为6.4,（不能低于6.4，否则重新配置）试剂一稀释液：30mL试剂一+70mL蒸馏水混匀试剂二粉剂mg×1瓶-20℃保存用前甩几下使试剂落入底部，再加5.5mL的试剂一稀释液溶解备用。
试剂三液体50mL×1瓶4℃保存试剂四粉剂mg×1瓶-20℃保存用前甩几下使试剂落入底部，再加5.5mL的试剂三溶解备用。
试剂五粉剂mg×瓶-20℃保存用前甩几下使试剂落入底部，再加8.2mL的蒸馏水溶解备用。
试剂六液体56mL×1瓶4℃保存标准品粉剂mg×1支4℃保存用前甩几下使试剂落入底部，再加2mL的试剂三溶解，即为1mg/mL葡萄糖。
三、所需的仪器和用品：可见分光光度计、1mL玻璃比色皿（光径1cm）、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰、二甲基亚砜（DMSO）、乙醇、乙酸和蒸馏水。
四、淀粉含量测定：建议正式实验前选取2个样本做预测定，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、样本制备：①取1-5g样本烘干（50℃）至恒重，磨碎并过筛（如0.5mm筛）得到待检均匀粉末样本；取10mg粉末样本至2mL的EP管中，加入0.5mL的DMSO并涡旋振荡使样本分散悬浮于液体中（勿沉积于管底或块状悬浮）。
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Megazyme总淀粉测定试剂盒（K-TSTA 04/2009）简介:酸水解法和酶法被广泛的应用于淀粉含量测定,酸水解法仅仅适用于纯净的淀粉样品,应用范围有限。
酶法的前处理步骤上有各种变化，经过凝胶、液化和糊精化作用,糊精水解生成葡萄糖,最终以测量的葡萄糖计算淀粉含量。
AACC方法76-11特殊之处在于：在高压蒸汽和碱性环境下淀粉糊化成为凝胶，然后再用淀粉葡糖苷酶将淀粉转化为葡萄糖进行测量。
AACC方法76-11会低估某些样品的淀粉含量，包括高多糖玉米淀粉和众多的经过加工的谷物产品。
今天应用的众多的测定方法都使用了联合处理方法,如在样品处理过程中或直接在淀粉凝胶化后使用耐热α-淀粉酶。
对于难凝胶的样品(如高多糖玉米淀粉)使用了氢氧化钠或二甲基亚砜作为溶剂。
为确保膳食纤维中的淀粉能够全部溶解，Englyst和Cummings(1988)总结的处理方法中使用了去分支酶,支链淀粉酶。
为了测量极端样品得到满意结果，兼顾数量和可靠性，Megazyme提供了一个总淀粉分析试剂盒，基于使用耐热性淀粉酶和淀粉葡糖苷酶。
这一方法已被AOAC和AACC采用(Method 76.13)。
最近，耐热淀粉酶可在低pH环境下使用。
因此，我们更新了我们的总淀粉测量方法加入了这种酶。
这一改进的最大益处在于可以在同一pH（pH5.0）条件下进行耐热性淀粉酶和淀粉葡糖苷酶孵育，简化步骤以及减少麦芽酮糖（抗耐热性淀粉酶和淀粉葡糖苷酶水解）的产生。
另一改进是使用己糖激酶/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶/ NADP+在D-葡萄糖处理步骤(K-TSHK5)。
Megazyme总淀粉分析方法可以测量广泛范围内食品，饲料，植物和谷类产品（自然的或加工的）。
对于大多数样品（例如小麦面粉），淀粉可以在100°C抗耐热性淀粉酶处理步骤中完全可溶。
包含高水平抗性淀粉（例如高多糖含量玉米淀粉）样品，需要先用冷2 M KOH 或热DMSO进行预溶解。
含可溶性淀粉和糊精的样品，无需进行抗耐热性淀粉酶处理。
原理:抗耐热性淀粉酶水解淀粉为可溶性分支麦芽糊精和去分支麦芽糊精。
样品中的抗性淀粉可用2M KOH进行预溶解，再用醋酸钠缓冲液进行中和再进行淀粉酶水解。
或者用DMSO在100°C进行溶解。
淀粉葡萄糖苷酶水解麦芽糊精至D-葡萄糖。
D-葡萄糖氧化为D-葡萄糖酸脂，释放出(H2O2)，再用过氧化氢酶催化进行显色反应，产生醌亚胺染料。
样品包含高水平的D-葡萄糖和麦芽糊精可以在分析前用80%乙醇进行洗涤。
单个样品可在70分钟内完成测定。
20个样品可在2小时内完成。
特异性，灵敏度，线性范围和精确性此试剂盒专用于分析 -葡聚糖（包括淀粉，糖原，植物糖原和非抗性麦芽糊精）。
最小可区分的吸收值是0.01吸收值范围。
这对应于1.0mg的D-葡萄糖（或0.9mg淀粉）/L在最大样品体积1ml。
检测极限：2.0mgD-葡萄糖（或1.8mg淀粉）/L，这对应于0.02吸光度区别在最大体积1ml中。
此试剂盒在5-100ugD-葡萄糖范围内呈线性。
一个样品溶液的重复测定中，吸收值会有0.005至0.010的波动。
当样品体积为1ml时，这相当于0.05-1ml/L浓度的D-葡萄糖。
如果样品在准备过程中被稀释，结果需要乘以稀释倍数。
例如在样品准备时，样品称重，如10g/L，变异范围将在0.02至0.05g/100g。
干扰:如果D-葡萄糖的转化在5分钟内完成，不会产生干扰。
可以通过加入D-葡萄糖至反应完成后试管内（例如50ug在0.1ml）以检测干扰。
可以看到吸光度显著上升。
样品内的干扰物质可以通过加入内标进行分析。
可以对这标准进行定量校正。
样品操作中的损失可以通过在起始步骤中加入D-葡萄糖进行校正。
试剂盒成分Megazyme总淀粉含量测定试剂盒提供有足够运行100次试验的试剂,并提供有全部的试验方法:瓶1: 耐热α-淀粉酶(10mL, 3,000U/mL在CERALPHA试剂中pH6.5; 40°C或1600U/mL在CERALPHA试剂中pH5.0; 40°C)。
稳定性>4年, 4°C保存。
瓶2: 淀粉葡糖苷酶(10mL, 3300U/mL在可溶性淀粉)（或200U/mL在p-nitrophenylβ-maltoside*，pH4.5，40°C）稳定性>4年, 4°C保存。
完整的分析程序可在获得。
瓶3: GOPOD试剂缓冲液。
磷酸钾缓冲液（0.26M，pH7.4），对羟基苯甲酸（0.22M），叠氮化钠（0.4%W/V）稳定性>4年, 4°C保存。
注意：1. 如果GOPOD缓冲液存储在-20°C，会形成盐结晶，用双蒸水稀释至1L前必须完成溶解。
2.此溶液含叠氮化钠（0.4%W/V），有毒。
瓶4: GOPOD试剂酶。
葡萄糖氧化酶(> 12,000 U) 和过氧化物酶(> 650 U)和4-氨基安替比林（80mg）。
冻干粉，稳定性>4年, -20°C保存。
瓶5: 葡萄糖标准溶液（5ml，1mg/mL）在0.2% W/V苯甲酸溶液中。
稳定性>4年，室温保存。
瓶6: 标准的玉米淀粉。
淀粉含量见标签。
稳定性>4年, -20°C保存。
准备试剂溶液溶液1 用试剂1（100mM醋酸钠缓冲液, pH5.0，自备）稀释1.0mL瓶1成分至30mL 。
分成小份后冻存。
稳定性>3年, -20°C保存。
注意：如果按照AOAC方法996.11（example b），用试剂4（50mM MOPS缓冲液,pH7.0）稀释酶。
溶液2 此酶不用稀释可以直接使用,由于酶溶液具有一定粘稠度,所以必须使用正确的移液器。
4°C下保存,稳定性>3年。
溶液3 用蒸馏水稀释瓶3成分（GOPOD试剂缓冲液）到1L, 立即使用。
溶液 4 用20ml溶液3溶解瓶4成分再倒回溶液3瓶子。
铝箔纸包裹避光。
这就是葡萄糖测定试剂(GOPOD试剂) 稳定性: 4°C下保存，3个月；-20°C下保存，12个月；分装成小份再进行冻存，只能冻融一次。
新鲜配制的试剂呈浅黄色或浅紫色。
4°C下保存2-3个月过程中，逐渐变成深紫色。
用水为空白对照时，此溶液的吸光度<0.05。
溶液5&6 同瓶5&6自备试剂1.醋酸钠缓冲液(100mM, pH5.0) +氯化钙(5mM)5.8ml冰醋酸(1.05g/mL)加入900mL蒸馏水,用1M(4g/100mL)NaOH调节pH到5.0,大约需要30mL。
4°C下保存2个月.添加0.74g二水氯化钙完全溶解, 定容到1L, 4°C下保存>6个月。
注意：可通过添加叠氮化钠（0.2g/L）增加此缓冲液的稳定性。
室温2年。
必须在pH调完后再加入叠氮化钠。
酸化的叠氮化钠会释放出有毒气体。
2.醋酸钠缓冲液(1.2M, pH3.8)69.6ml冰醋酸(1.05g/mL)加入800mL蒸馏水, 用4M NaOH调节pH到3.8, 定容到1L。
室温下保存12个月。
3.氢氧化钾溶液（2M）加入112.2 g KOH 至900 mL 去离子水，搅拌溶解，定容一升。
储存于密闭容器。
室温下>2年。
4. MOPS缓冲液(50mM,pH7.0)+氯化钙(5mM) +叠氮化钠(0.02%)（仅用于example b分析样品）11.55g MOPS(钠盐, Sigma cat. M-9381)加入900mL蒸馏水, 用1M(10%V/V)HCl调节pH 到7.0,大约需要17mL。
添加二水氯化钙(0.74g)和叠氮化钠(0.2g), 完全溶解, 然后调整到1L, 4°C下保存6个月。
5. 醋酸钠缓冲液(200mM,pH4.5)+叠氮化钠(0.02%)（仅用于example b分析样品）冰醋酸(11.8mL,1.05g/mL)加入900mL蒸馏水, 用1M(4g/100mL)NaOH调节pH到4.5,大约需要60mL。
加入叠氮化钠(0.2g),完全溶解,然后调整到1L, 4°C下保存6个月。
注意：可通过添加叠氮化钠（0.2g/L）增加此缓冲液的稳定性。
室温2年。
必须在pH调完后再加入叠氮化钠。
酸化的叠氮化钠会释放出有毒气体。
设备:1.玻璃试管(圆底;16x120mm或18x150mm)2.离心机(3,000rpm)3.微量移液器(100uL).4.连续分配器5.分析天平.6.分光光度计510nm.7.漩涡混合器8.定时钟9.沸水浴锅和试管夹注意事项:1.GOPOD试剂的孵育时间没有严格规定,但是至少要20分钟,并在60分钟内测定吸光度.2.每次试验必须设定试剂空白对照和葡萄糖对照(100μg, 四倍)。
a)试剂空白对照: 0.1mL蒸馏水+3.0mLGOPOD溶液b)葡萄糖对照包括:0.1mL葡萄糖标准溶液(100μg/0.1mL)+3.0mLGOPOD溶液。
因子F （页码13和14）通过D-葡萄糖在标准分析中读得的吸光度进行计算（例如100/1.038=96.386）。
3.每次试验必须设定标准面粉或淀粉样品4.每一新批此的GOPOD溶液,必须验证其与100μg葡萄糖标准反应产生颜色所需要的最长时间, 通常为15分钟左右。
样品空白:样品空白按照标准试验程序（example A）进行,将第4步修正为添加3mL蒸馏水,第5步中也用蒸馏水替代其中的淀粉葡糖苷酶.也可以用样品前处理中所用的酒精作为样品空白( example E)。
样品准备示例A.不含抗性淀粉，D-葡萄糖和麦芽糊精的谷物和食物（建议的程序，pH5.0孵育）。
1.研磨谷物, 过0.5mm筛（35目）。
2.将研磨后样品(准确称量~100mg)加入到试管中(16x120mm),确保全部样品位于试管底部。
3.加入0.2mL乙醇溶液(80%v/v)湿润样品帮助分散, 用漩涡混合器混合。
4.立即加入3mL耐热α-淀粉酶(100mM醋酸钠稀释), 在沸水浴中孵育6分钟(在孵育2分钟,4分钟，6分钟的时强烈振荡试管).注意:在这一步中强力震荡是关键，目的是确保浆状样品能完全的混匀（去除块状）。
同样,每间隔2分钟振荡也是为了防止由于酒精蒸发导致某些样品被喷出试管。
如果使用聚丙烯管，增加孵育时间至12分钟，在4, 8和12强烈震荡。
5.将试管放置于50°C的水浴锅中, 加入0.1mL瓶2成分（淀粉葡糖苷酶,330U在淀粉上）。
充分混合,在50°C下孵育30分钟。
6.将全部的溶液转移到100mL的容量瓶中,用洗瓶冲洗试管,并也倒入容量瓶中,然后用蒸馏水调整溶液体积, 充分混匀。