血液相容性实验方法
简述交叉配血试验的概念及方法。
简述交叉配血试验的概念及方法。
交叉配血试验是一种通过混合不同的血液来测试血液相容性的方法。
它的目的是确定某个个体的血型，并确定血型相容性，即血库中的哪些血液可用于该个体的输血或移植手术。
交叉配血试验通常涉及将患者的血液与供血者的血液混合并观察反应的情况。
如果患者的血液与供血者的血液不兼容，这可能会导致血小板凝集、红细胞溶解及其他严重的副作用，甚至引起死亡。
因此，交叉配血试验非常重要，可以在输血或移植手术前，防止不兼容的血液进入患者体内，保证患者安全。
交叉配血试验有两种主要的方法：直接法和间接法。
直接法是将供血者的红细胞与患者的血清混合。
如果血清中包含与供血者的红细胞不兼容的抗体，那么红细胞就会凝集。
间接法是在供血者的血液中加入患者的血清，并使用已知血原体抗体的试剂，检测是否有血清中抗体与加入的血液中的血型不兼容。
总的来说，交叉配血试验可以帮助医生确定哪些血液可以用于输血或移植手术，并且可以最大程度地保证患者的安全。
交叉配血试验的方法
交叉配血试验的方法交叉配血试验是一种以检测输血患者与供血者之间血液相容性的方法。
在进行输血前，交叉配血试验可以确保接受者不会发生血液不相容反应，如输血引起的溶血病变等。
交叉配血试验主要包括直接与间接抗人球蛋白试验（DAT和IAT）、抗人球蛋白海绵和有种结构等多种方法。
直接抗人球蛋白试验（DAT）是通过直接检测患者的红细胞上是否存在抗体和/或补体。
在这种试验中，将供血者的红细胞与接受者的血清混合，然后检测是否出现红细胞的凝集或补体沉淀。
如果发生了凝集或沉淀，则说明供血者的红细胞与接受者的血清存在不相容的反应。
间接抗人球蛋白试验（IAT）是通过检测患者的血清中是否存在抗人球蛋白抗体。
在这种试验中，将接受者的血清与已知抗原的红细胞混合，然后加入抗人球蛋白抗体。
如果发生红细胞凝集，则说明接受者的血清中存在该抗原所对应的抗体。
抗人球蛋白海绵试验是通过观察海绵浸泡在接受者的血清中是否发生溶血来判断血液相容性。
将供血者的红细胞与接受者的血清混合，然后将这种混合物浸泡在一块透明的海绵中。
如果发生了溶血意味着血液不相容，因为接受者的血清中存在与供血者红细胞抗原不相容的抗体。
有种结构试验是将供血者的红细胞与接受者的血清混合，然后使用适当的染料染色并观察红细胞形状的改变来判断血液相容性。
如果发生了有种结构改变，比如成片状堆积等，则说明血液不相容。
交叉配血试验的目的是为了提供给医务人员有关特定供血者与特定接受者之间血液相容性的信息。
通过这些试验可以确定哪些供血者与接受者是适合的，以避免发生输血不相容所引起的副反应。
交叉配血试验在临床中有广泛的应用，特别适用于有特殊输血需求的患者，如孕产妇、儿童等。
这些患者对输血的血液相容性要求更高，因此交叉配血试验可以帮助医务人员选择最适合的血液供应。
总结起来，交叉配血试验是一种通过不同的方法检测供血者与接受者之间血液相容性的方法。
它能够帮助医务人员确定最适合的输血方案，以减少输血不相容引起的风险和副作用。
交叉配血微柱凝集法
交叉配血微柱凝集法
交叉配血微柱凝集法是一种用于检测血液相容性的实验方法，常用于输血前的血型鉴定和配血试验。
该方法的原理是基于红细胞表面抗原和抗体的特异性反应。
将待检者的红细胞与供血者的血清或血浆分别加入到微柱凝集卡中，通过离心使红细胞与抗体结合，形成凝集反应。
根据凝集的程度和类型，可以判断待检者和供血者之间的血型相容性。
交叉配血微柱凝集法具有操作简便、结果准确、快速等优点，已经成为输血前常规的检测方法之一。
在进行交叉配血微柱凝集法时，需要严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。
交叉配血微柱凝集法只是一种初步的检测方法，不能完全代替其他血型鉴定和配血试验方法。
在进行输血前，还需要进行其他相关的检测和评估，以确保输血的安全性和有效性。
输血实验室血液相容性实验程序指南
输血实验室血液相容性实验程序指南英国血液标准委员会输血工作专题组1 引言1．1 目的本指南的目的是建立开展输血前实验必须采用的实验室规程。
本指南的形成是根据专家们的意见、英国临床病理鉴定学会(cpa)的推荐、英国输血服务机构的指南、英国实验室间质量评价方案(bti p)的数据和输血严重危害(sh()t)的监测方案。
支持新的观点以及潜在争议的依据将在文内提及。
1．2 输血前实验项目1．2．1 受血者abo、d血型鉴定1．2．2 受血者抗体筛选，若新生儿输血则进行患儿母亲抗体筛选。
筛选阳性者，继续进行抗体鉴定。
1．2．3 计算机或手工比对当前的结果与既往的记录。
上述3项组成定型和筛选。
1．2．4 供血者红细胞选择及交叉配合试验，包括病人血清／血浆和供者红细胞的血清学试验，或者电子化的选择及发放。
1．2．5 应有紧急情况下的书面处理程序。
临床紧急用血时，患者需要即刻的红细胞支持，输血前实验必需简化，或者直接发放o型红细胞。
1．3 红细胞抗体的临床意义1．3．1 临床意义的红细胞抗体是指能通过加速破坏一定比例的输注红细胞，而导致患者输血反应的抗体。
1．3．2 抗一a、抗一b和抗一a，b通常认为具有临床意义。
1．3．3 除少数例外，一般具有潜在临床意义的红细胞抗体仅指在严格的37 c时，间接抗球蛋白试验(iat)阳性的抗体。
1．3．4 在某些临床情况下，如大量失血，患者需要输血可能会输注不配合的血液。
1_3．5 患者有同种抗体时，红细胞的选择原则见表1。
表1 含同种抗体的患者选择输注血液的原则血型系统抗体推荐原则abo抗-ai37c iat法交叉试验相合rh抗-d、-c、-c、-e、-e抗原阴性且交叉试验相合rh抗-cw iat法交叉试验相合*kell抗-k、-k抗原阴性且交叉试验相合kell抗-kpa iat法交叉试验相合*kidd抗-jka、jkb抗原阴性且交叉试验相合mns抗-m(37c反应)抗原阴性且交叉试验相合mns抗-m(37c不反应)37c iat法交叉试验相合mns抗-n37c iat法交叉试验相合mns抗-s、-s、-u抗原阴性且交叉试验相合duffy抗-fya、fyb抗原阴性且交叉试验相合p抗-p137c iat法交叉试验相合lewis抗-lea、-leb、lea-b37c iat法交叉试验相合lutheran抗-luaa37c iat法交叉试验相合diego抗-wra(抗-di3)iat法交叉试验相合*h抗-hi(ait和aib患者)37c iat法交叉试验相合全部其它在37c iat反应性抗体咨询血液中心1．3．6 可以考虑应用抗体卡，该卡由实验室或血站填写而由患者携带。
输血实验室血液相容性实验程序指南
输血实验室血液相容性实验程序指南介绍输血是现代医学中常见的一项治疗手段。
在进行输血时，需要进行血液相容性实验，以确保病人接收的血液与其自身血液相容性良好，以避免不必要的风险和并发症。
本文档将介绍输血实验室血液相容性实验的程序指南。
实验步骤1. 准备工作将待测血液样本和供血者血液样本准备好，同时将其标记清楚，确保其完整性以及标签的准确性。
确保所有实验所需的试剂和药品在实验室中均已备齐。
2. 预备实验首先进行凝集素检查，确认使用的凝集素是否存在异常。
此外，还需检查用于实验的培养基、血清等试剂是否过期，以确保实验的准确性。
3. 操作流程1.取2ml待测血液样本于无菌离心管中；2.加入等体积的0.9％氯化钠溶液混匀，制成2％全血；3.用离心机离心10分钟，在4℃下保存；4.取2支离心管，分别标记为“试验管”和“对照管”；5.分别加入100μL试验组全血和100μL对照组全血；6.加入10μL适当稀释的抗人球蛋白凝集素，混匀；7.在室温下孵育30分钟；8.观察试管内血液凝聚程度，根据排序判定。
–如果试验管和对照管出现不同程度的凝聚，说明出现凝集反应，意味着输血存在不相容现象。
–如果试验管和对照管凝聚程度相同，说明样本血液与对照血液相容性良好，可进行输血。
4. 结果分析根据凝聚程度的排序结果，可对血液相容性进行分类。
1.1+：试验管明显凝聚，对照管无凝聚；2.2+：试验管明显凝聚，对照管有轻度凝聚；3.3+：试验管明显凝聚，对照管中度凝聚；4.4+：试验管明显凝聚，对照管重度凝聚；5.反应消失：试验管和对照管均无凝聚反应。
注意事项•操作实验时需严格按照实验步骤进行，确保实验的准确性；•严格遵守无菌操作和个人防护措施，保证操作安全；•实验室应当向周围环境保持良好的通风和卫生状况。
了解血液相容性实验的操作步骤和注意事项，对于准确评估输血患者的风险和并发症，具有重要的临床意义。
在实验操作过程中，需留意操作细节，加强实验室质控管理，以确保实验的可靠性和准确性。
纳米材料的生物相容性测试方法
纳米材料的生物相容性测试方法纳米材料是一种尺寸在纳米尺度范围内的材料，具有较大比表面积、尺寸依赖性和量子效应等特点，被广泛应用于医疗治疗、药物传输、基因治疗等领域。
然而，由于其特殊的物理和化学特性，纳米材料对生物体的相容性成为研究的关键问题之一、因此，对纳米材料的生物相容性进行测试是非常重要的。
下面将介绍几种常见的纳米材料的生物相容性测试方法。
1.细胞毒性测试细胞毒性测试是评估纳米材料对细胞的毒性作用的一种常用方法。
该方法利用体外培养的生物模型，如细胞系或原代细胞，将纳米材料与细胞接触，观察细胞形态、细胞增殖、细胞膜完整性以及细胞死亡等指标的改变。
常用的细胞毒性测试方法包括MTT法、LDH释放试验、细胞形态观察等。
2.血液相容性测试血液相容性测试用于评估纳米材料对血液成分的相容性。
通过与血浆、血小板和红细胞等关键成分的相互作用来评估纳米材料的血液相容性。
血液相容性测试方法包括凝血时间测定、血小板聚集实验、红细胞凝聚实验等。
3.组织相容性测试组织相容性测试用于评估纳米材料对生物组织的相容性。
常见的方法包括组织切片法、炎症反应观察法以及纤维蛋白沉着和血管生成的评估方法。
这些方法可以通过观察组织形态学改变、炎症反应以及纤维蛋白沉积和新生血管数量等指标来评估纳米材料对组织的相容性。
4.免疫相容性测试免疫相容性测试用于评估纳米材料对免疫系统的相容性。
常见的方法包括淋巴细胞增殖试验、细胞因子释放测定以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）测定等。
这些方法可以评估纳米材料对免疫细胞功能的影响，从而评估其免疫相容性。
5.仿生相容性测试仿生相容性测试用于评估纳米材料在生物体内的行为和相容性。
常见的方法包括体内内皮功能测定、天然免疫应答评估、组织灌流和荧光显微镜观察等。
这些方法可以评估纳米材料在体内的生物分布、代谢和对器官的影响等。
综上所述，纳米材料的生物相容性测试方法包括细胞毒性测试、血液相容性测试、组织相容性测试、免疫相容性测试和仿生相容性测试等。
《临床输血检验技术》课件——输血相容性检测技术
（抗A、抗B以外的血型抗体。
不规则抗体可引起急性、迟发 性溶血性输血反应可以使患者 体内或输入的红细胞寿命缩短 和引起新生儿溶血病。
不规则抗体筛查试验方法包括 盐水介质法、经典抗人球蛋白 试验、微柱凝胶技术等
想一想
一．不规则抗体是什么？ 二．为什么要进行抗体筛查试验？
输血相容性检测技术
学习目标
了解输血相容性检测项目 掌握输血相容性检测技术
（一）输血前相容性检测
• 目的是使输入的供血者红细胞成分在受血者体内不被破坏，输入的 血浆成分不破坏受血者的红细胞，达到供血者和受血者血液相容。
· • 供血者和受血者的ABO血型和RhD血型鉴定 · • 不规则抗体筛查 · • 交叉配血试验
（二）交叉配血试验
• 目的是检测受血者、供血者血液之间是否存在不配合的抗原、抗
体成分
红细胞
红细胞
供
(主侧)
血
者
(次侧)
受
血
者
血清
血清
应尽可能多地检测出具有临床意义的抗体，包括不配合的IgM抗体和 IgG抗体，最大限度地减少抗体的漏检，防止溶血性输血反应的发生。
微柱凝胶抗人球蛋白法和低离子凝聚胺介质法
（一）ABO血型和RhD血型鉴定
在各类血型中，A、B抗原性最强，D抗原性次 之，受血者和供血者的ABO和RhD血型必须在 输血前给予确认。
交叉配血时要进行受血者和供血者的ABO血型 和RhD血型复查，除非紧急特殊用血，患者必 须选择ABO、Rh血型同型血液输注，任何定型 试验结果发生疑问，都应当在输血前给予解决
材料的血液相容性表征
材料在医疗领域中的应用越来越广泛，因此了解和评估材料的血液相容性非 常重要。在本次演示中，我们将深入探讨材料血液相容性的定义、评价方法 以及未来发展方向。
什么是血液相容性？
红细胞膜的相容性
血液相容性是指材料接触到红细胞膜时，是否会 激活免疫系统释放细胞毒素导致红细胞的损伤和 死亡。
如何表征血液相容性
凝集作用
血液透明度的变化、血栓形成情况等。
血浆蛋白变化
血浆蛋白，如C3、C4等的变化。
血细胞形态变化
大小、形态等变化。
溶血试验和补体激活
溶血度、补体激活情况等。
材料相容性测试实验设计
实验设备
选择合适的器材和设备进行实验。
取样方法
使用准确的取样方式保证实验的准确性。
操作技能
熟练地掌握实验操作技能。
实验流程评估
对于实验过程中产生的问题进行评估并改善。
相容性测试结果分析与解读
1
结果分析
综合分析实验结果，确定材料的血液相容性评价标准。
2
结果解读
将实验结果与已有标准进行比较分析，对于实验结果进行科学的解读。
3
风险评估
基于分析结果对于材料的应用风险进行评估和控制。
未来发展方向
多重评估指标的应
性评价
用
将高通量筛选技术应用 于材料的血液相容性评 价，大幅提高实验效率。
对于3D打印材料的血液 相容性评价技术进行研 究，以适应3D打印在医 疗领域中的不断发展。
结合多种技术和评估指 标，提高材料血液相容 性评价的客观性和科学 性。
血液输注的相容性
血液相容性还可以用来描述给予血液或血液制品 时，受者的血液是否反应异常，导致炎症反应、 溶血等不良后果。
输血相容性检测标准流程
输血相容性检测标准流程采集一）标本采集1.受血者标本采集：采集受血者静脉全血标本，避免过度采血。
2.献血者标本采集：采集献血者静脉全血标本，避免过度采血。
二）标本处理1.受血者标本处理：将受血者标本离心分离血清，存放于2-8℃，不得冷冻。
2.献血者标本处理：将献血者标本进行红细胞分离，存放于2-8℃，不得冷冻。
三、实验室检测一）实验室检测流程1.受血者ABO和RhD血型测定：采用标准血清试剂和技术进行测定，确认受血者的ABO和RhD血型。
2.受血者抗体筛选：采用标准试剂和技术进行筛选，检测受血者血清中是否存在不规则抗体。
3.血液交叉匹配试验：采用标准试剂和技术进行交叉匹配试验，检测受血者血清与献血者红细胞是否有相对应的抗原抗体。
二）实验室检测结果1.受血者ABO和RhD血型测定结果：确定受血者的ABO和RhD血型。
2.受血者抗体筛选结果：确定受血者血清中是否存在不规则抗体。
3.血液交叉匹配试验结果：确定受血者血清与献血者红细胞是否相容，从而确定最终输血血液的相容性。
四、结果判定与报告一）结果判定1.受血者ABO和RhD血型测定结果判定：根据实验室检测结果确定受血者的ABO和RhD血型。
2.受血者抗体筛选结果判定：根据实验室检测结果确定受血者血清中是否存在不规则抗体。
3.血液交叉匹配试验结果判定：根据实验室检测结果确定受血者血清与献血者红细胞是否相容，从而确定最终输血血液的相容性。
二）结果报告1.结果报告内容：报告受血者的ABO和RhD血型、抗体筛选结果、血液交叉匹配试验结果以及最终输血血液的相容性。
2.报告方式：书面报告或电子报告，确保报告的准确性和及时性。
五、结果保存与归档一）结果保存1.实验室检测结果保存：将实验室检测结果记录在实验室记录簿中，并保存原始记录和计算机数据。
2.结果报告保存：将结果报告记录在相应的记录簿中，并保存原始记录和计算机数据。
二）结果归档1.实验室检测结果归档：将实验室检测结果归档，保存至少5年。
输血实验室血液相容性实验程序指南
输血实验室血液相容性实验程序指南英国血液标准委员会输血工作专题组1 引言1．1 目的本指南的目的是建立开展输血前实验必须采用的实验室规程。
本指南的形成是根据专家们的意见、英国临床病理鉴定学会（cpa）的推荐、英国输血服务机构的指南、英国实验室间质量评价方案（bti p)的数据和输血严重危害（sh（)t）的监测方案。
支持新的观点以及潜在争议的依据将在文内提及。
1．2 输血前实验项目1．2．1 受血者abo、d血型鉴定1．2．2 受血者抗体筛选,若新生儿输血则进行患儿母亲抗体筛选。
筛选阳性者,继续进行抗体鉴定。
1．2．3 计算机或手工比对当前的结果与既往的记录。
上述3项组成定型和筛选。
1．2．4 供血者红细胞选择及交叉配合试验，包括病人血清／血浆和供者红细胞的血清学试验，或者电子化的选择及发放。
1．2．5 应有紧急情况下的书面处理程序。
临床紧急用血时，患者需要即刻的红细胞支持，输血前实验必需简化，或者直接发放o型红细胞.1．3 红细胞抗体的临床意义1．3．1 临床意义的红细胞抗体是指能通过加速破坏一定比例的输注红细胞，而导致患者输血反应的抗体。
1．3．2 抗一a、抗一b和抗一a，b通常认为具有临床意义。
1．3．3 除少数例外，一般具有潜在临床意义的红细胞抗体仅指在严格的37 c时，间接抗球蛋白试验（iat）阳性的抗体.1．3．4 在某些临床情况下，如大量失血，患者需要输血可能会输注不配合的血液.1_3．5 患者有同种抗体时，红细胞的选择原则见表1。
表1 含同种抗体的患者选择输注血液的原则血型系统抗体推荐原则abo 抗-ai 37c iat法交叉试验相合rh 抗—d、-c、-c、—e、—e 抗原阴性且交叉试验相合rh 抗—cw iat法交叉试验相合*kell 抗—k、-k 抗原阴性且交叉试验相合kell 抗-kpa iat法交叉试验相合*kidd 抗-jka、jkb 抗原阴性且交叉试验相合mns 抗-m（37c反应）抗原阴性且交叉试验相合mns 抗—m（37c不反应) 37c iat法交叉试验相合mns 抗—n 37c iat法交叉试验相合mns 抗-s、—s、-u 抗原阴性且交叉试验相合duffy 抗-fya、fyb 抗原阴性且交叉试验相合p 抗—p1 37c iat法交叉试验相合lewis 抗-lea、—leb、lea-b 37c iat法交叉试验相合lutheran 抗—luaa 37c iat法交叉试验相合diego 抗—wra(抗—di3) iat法交叉试验相合＊h 抗—hi(ait和aib患者) 37c iat法交叉试验相合全部其它在37c iat反应性抗体咨询血液中心1．3．6 可以考虑应用抗体卡，该卡由实验室或血站填写而由患者携带.它们可以提醒临床医生或实验室患者体内存在临床意义的抗体。
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用PBS缓冲溶液浸泡XX膜2h，将浸泡过的膜在37℃的富血小板血浆（PRP）中浸泡2h后，用PBS缓冲溶液漂洗多次，除去没有黏附的血小板，再浸泡入戊二醛溶液(2.5%) 中，固定30min后，用PBS缓冲溶液漂洗多次，然后依次在不同浓度(50、60、70、80、90、95、100 %)的乙醇溶液中各浸泡30min，逐级脱水。
凉干后喷金，用扫描电镜观察材料表面粘附血小板的情况。
:victory:
溶血实验：首先的话要根据你膜的厚度来确定浸提液体积：膜厚度<0.5mm 6cm2/ml 膜厚度>0.5mm 3cm2/ml
注意（膜是双面算面积）
然后在37度用生理盐水或PBS浸泡24h，制为浸提液，以浸提液和阳性、阴性对照（阳性对照为超纯水，阴性对照为生理盐水）各5m+0.1ml的稀释红细胞，在37度孵育1h，l然后3500rpm，5min离心，取上清用分光光度计测试吸光度，波长545nm，空白为超纯水。
计算公式HR=(A-B)/(C-B)*100%
A=样品，B=阴性对照，C=阳性对照。