LBA4404电击 电转感受态细胞使用说明
EPI400电击感受态细胞使用手册

EPI400电击感受态细胞EPI400 Electroporation Competent CellEPI400电击感受态细胞基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA tonA pcnB4 dhfrEPI400电击感受态细胞说明:EPI400电击感受态细胞只能用于电击转化,不能用于热激转化。
该菌株来源于EC100菌株,将EC100核基因中控制质粒拷贝数的pcnB基因删除后引入一个诱导启动子驱动的pcnB基因,即是EPI400菌株。
EPI400菌株可以降低质粒的拷贝数,特别适合于各种不稳定DNA 或毒性基因的克隆,在加入诱导剂CopyCutter Induction Solution后又可以提高质粒产量到正常状态。
[mcrA, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]基因型使EPI400菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA。
recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
lacZΔM15标记的存在使DH10B可用于蓝白斑筛选,tonA赋予其抗噬菌体T1和T5的能力,rpsL赋予其链霉素抗性。
EPI400电击感受态细胞适用于不稳定DNA 或毒性基因的克隆,经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>1010 cfu/μg DNA。
EPI400电击感受态细胞操作方法:1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟,待其沥干水分,正置5分钟,使乙醇充分挥发,待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置5分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的EPI400电击感受态细胞插入冰中5 分钟,待其融化,加入目的DNA (质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。
LBA4404感受态细胞使用说明

LBA4404感受态细胞LBA4404Competent Cell规格:LBA4404 :10×100μlpCAMBIA2301(control vector):10ng/ul 10ul保存条件:-80℃说明:华越洋生产的LBA4404 农杆菌感受态细胞具有链霉素和利福平抗性,适用于玉米、烟草等植物的转基因操作,经pCAMBIA2301 质粒检测转化效率高达103cfu/μg。
操作方法:1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上或室温融化。
2. 每100μl 感受态加1ug 质粒DNA 混匀,依次于冰上静置10 分钟、液氮 5 分钟、37℃ 5 分钟、冰浴5 分钟。
3. 加入700μl 无抗生素的2YT 或LB 液体培养基,于28℃振荡培养2~3 小时。
4. 5000rpm 离心1 分钟收菌,留取100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的2YT或LB 平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3 天。
注意事项:1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
关联推荐大肠杆菌感受态细胞TOP10 感受态细胞XL1-Blue 感受态细胞XL10-Gold 感受态细胞Stbl3 感受态细胞DB3.1 感受态细胞DH10BAC 感受态细胞DH5α 感受态细胞JM109 感受态细胞BL21(DE3) 感受态细胞BL21(DE3)plysS 感受态细胞M15 感受态细胞Mach1-T1 Phage Resistant 感受态细胞 Rosetta(DE3) 感受态细胞DH10B 感受态细胞OrigamiB(DE3) 感受态细胞OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞 JM110 感受态细胞 农杆菌感受态细胞LBA4404 感受态细胞AGL1 感受态细胞EHA105 感受态细胞 GV3101 感受态细胞 酵母感受态细胞Y1HGold感受态细胞 AH109感受态细胞 Y187感受态细胞 EGY48感受态细胞 NMY51感受态细胞 KM71感受态细胞。
嗜水气单胞菌感受态细胞的制备

嗜水气单胞菌电转化感受态细胞的制备(1)将嗜水气单胞菌单菌落接种于 5 mL LB 培养基中,在30℃下振荡培养5h。
取5mL培养液倒入100 mL LB培养基(用500 mL三角瓶)中,在30 ℃下振荡(300 r/min)培养至OD600为0.9-1.0(2) 将培养物在冰水中放置15-30分钟,然后倒入500ml的离心瓶中,在4℃下1000g离心15分钟,弃去上清液。
用100ml冰水悬浮细胞,1000g离心20分钟(3)弃上清,用10ml冰冷的10%甘油悬浮细胞,1000g离心20分钟。
(4)重复步骤3一次。
(5)用冰冷的GYT培养基悬浮沉淀,分装的40uL样品可直接用于电转化或保存于-80 ℃,备用嗜水气单胞菌的电转化(1)将电转仪参数调至2.5 kv,时间5ms,电容5μF,脉冲阻抗控制在400-1000Ω。
(2)从冰箱中取出感受态细胞,在冰上解冻。
在管中加入质粒1-2uL,轻旋以混匀内容物,在冰上放4-5 min。
同时把电击杯放置冰上预冷。
(3)将转化混合物转移到电击杯中,吸干杯的外表面,放入电转化仪的样品槽中。
(4)充电到1.25kV,放电,进行脉冲电转化。
(5)取出电击杯,加入1mL LB培养基后,用移液器反复吹打,然后将菌液转移到无菌的离心管中,30℃中振荡培养120min。
(6)取200-800 uL涂布于含有氯霉素的LB平板上。
(7)将平板置于室温直至液体被吸干。
30℃倒置培养,转化菌落在12-48h内出现GYT培养基:10%(v/v)甘油0.125%(m/v)酵母提取物0.25%(m/v)胰蛋白胨使用0.22um滤器过滤除菌,分装成2.5ml一份,保存于4℃。
北京细胞电转仪操作流程

北京细胞电转仪操作流程
一.准备工作
1. 将设备放置在室内稳定干燥处,以防灰尘污染仪器;
2. 将仪器与220V交流电源接通,打开设备拉开保护杆,仪器开机后可以正常使用;
3. 将需要的池放置好;
3. 确认仪器与计算机的接头连接稳定;
4. 打开计算机,打开文件里的细胞电转仪软件,准备开始实验;
二.操作步骤
1. 确认实验池的位置;
2. 打开细胞电转仪软件,点击“启动细胞”按钮,启动实验;
3. 旋转控制杆,调整池深浅,控制杆右侧点击“脉冲输出”按钮,产生细胞间脉冲;
4. 点击“总览”按钮,屏幕上出现实验池的图像,下方可显示实验池的相关信息;
5. 点击“参数设置”按钮,完成参数设置;
6. 点击“数据录入”按钮,完成数据录入;
7. 点击“数据记录”按钮,完成数据记录;
8. 点击“数据报表”按钮,完成数据报表;
9. 点击“总结”按钮,完成测试结果分析;
10. 完成实验后,录入实验结果,存档,备份;
三.实验结束
1. 将实验池清洗干净;
2. 关闭细胞电转仪软件,关闭计算机;
3. 关闭仪器的供电源;
4. 收好设备;。
感受态细胞操作步骤

感受态细胞(DH5α,,TOP10)操作步骤第一天1.配制试剂100mM CaCl2:7.35g CaCl2.2H2O /500 ml dd H2O100mM MgCl2:10.15g MgCl2.6H2O /500 ml dd H2O50%(V/V)甘油1L LB 培养基(1L dd H2O+25g LB粉末)75%(V/V)酒精配制试剂(100mM CaCl2100mM MgCl2):称取相应质量的固体粉末将其转移到事先清洗干净的烧杯里(若有容量瓶,使用容量瓶),用超纯水清洗量筒三次,加少量dd H2O到烧杯溶解固体粉末,将烧杯里溶液加到量筒里,用少量dd H2O清洗量筒三次,将量筒定容到500 ml,将溶液加到试剂瓶里,留待消毒。
配制50%(V/V)甘油:用量筒量取250ml甘油,甘油较粘稠,加时要小心慢加,将量好后的甘油加到试剂瓶里。
用另一个量筒量取250ml dd H2O,用少量水清洗量取甘油的量筒,最终将所有dd H2O加到试剂瓶里,留待消毒。
2. 准备实验用品:1个500mL摇瓶、2个2 L摇瓶(加有锡箔纸);3个无抗生素的LB平板(100ml dd H2O+3.7g LB粉末,可倒6-7个平板,下午1点左右做平板,所有感受态平板侧面需划两条线);2个Kana LB平板(100ml LB加入50ul kana);3ml巴氏吸管;1.5ml 小管(使用没有拆封过的小管,不需灭菌)1ml 枪头;200ul 枪头;4个400ml 离心管(每管实际装350ml液体)。
3. 灭菌锅消毒:100mM CaCl2;100mM MgCl2;50%(V/V)甘油;LB 培养基,dd H2O(若有灭菌水则不需灭);500 ml 摇瓶;2 L摇瓶;1ml 枪头;200ul 枪头;6个100ml 离心管。
灭完菌后拿到烘箱中60℃烘干,试剂则放到4℃冰箱中。
4. 涂布感受态细胞平板(以DH5α为例)pm 2:30-3:00⑴戴好手套,清理干净操作台,喷洒75%酒精;⑵将三个无抗性的LB平板放在工作台上,在底部标记上DH5α及日期;⑶倒5-8个Beads在第一个平板上,将beads倾到一边,在空白处加10ul灭菌的dd H2O;⑷第一个将LB平板,移液枪、枪头一起拿到-80℃冰箱那的操作台上,从冰箱迅速拿出装有感受态细胞的管子(三中感受态细胞的管子装在一个大袋子里,灰色为DH5α,紫色为TOP10,管子上有标记),用枪头在管子中搅出一小冰块,将冰块加到10ul 水上,盖好平板盖子,将感受态细胞管子迅速放到-80℃冰箱里,整个步骤要迅速小心。
EHA105电击电转感受态细胞使用说明

EHA105电击电转感受态细胞使用说明EHA105电击/电转感受态细胞EHA105 Electroporation Competent CellEHA105电击/电转感受态细胞基因型:C58 (rif r) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) SuccinamopineEHA105电击/电转感受态细胞说明:EHA105菌株由EHA101菌株改造而来,为C58型背景,核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105 (pTiBo542DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。
EHA105菌株适用于水稻、烟草等植物的转基因操作。
唯地生物开发的EHA105电转感受态特别适用于大质粒的转化:经pCAMBIA2301质粒(size:11633 bp)检测转化效率>105 cfu/μg DNA;经pCAMBIA2301-ZH质粒(size:40 kd)检测转化效率可达5×103 cfu/μg DNA。
EHA105电击/电转感受态细胞操作方法:1.0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟,待其沥干水分,正置5分钟,使乙醇充分挥发,待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖,冰中静置5分钟充分降温。
2.取-80℃保存的农杆菌感受态插入冰中5分钟,待其融化,加入1-5 μg质粒DNA(质粒体积不大于6ul,最好用试剂盒抽提,双蒸水溶解),用手拨打管底混匀,立即插入冰中,用200 μl枪头将感受态-质粒混合物快速移到电击杯中,盖上杯盖,空管保留待用。
3.启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V (此参数为Biorad 推荐,使用者也可按所用电转仪推荐的protocol操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中,加入700 μl无抗生素的LB并转移到感受态空管中,28℃振荡培养2~3小时。
C43(DE3)感受态细胞使用说明书
C43(DE3)感受态细胞使用说明书OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell 产品说明书产品规格OverExpress C43(DE3) :10×100μlpUC19(control vector):10pg/μl10μl保存条件:-80℃基因型F–ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)产品说明OverExpress C43(DE3) 、OverExpress C41(DE3) 两个菌株均起源于 BL21(DE3) ,其优点是可以高效表达毒性蛋白或疏水性蛋白。
OverExpress C41(DE3) 跟BL21(DE3) 的区别在于其基因组含有至少一个未知突变,这个未知突变使其获得了高效表达毒性蛋白(1-5)的能力,此突变位点参与大肠杆菌表达毒性蛋白时的细胞死亡途径;OverExpressC43(DE3) 来源于OverExpress C41(DE3) ,是通过筛选OverExpress C41(DE3)对另一个不同毒性蛋白的抗性菌株获得。
OverExpress C43(DE3) 菌株具有比OverExpress C41(DE3)更强的表达毒性蛋白和疏水性蛋白的能力,所以说OverExpress C43(DE3)菌株与BL21(DE3)相比拥有至少两个未知突变,正是这两个未知突变使其获得了更广泛的表达毒性蛋白或疏水性蛋白的能力。
此菌株含有DE3区,可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。
High5TM系列OverExpressC43(DE3) 感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率可达5×108 cfu/μg DNA。
操作方法1. 取100 μl冰上融化的OverExpress C43(DE3)感受态细胞,加入目的DNA并用指尖轻轻拨打管底混匀(避免用枪吸打),冰上静置25分钟。
电感受态细胞制备
根据诸多文献,提出如下红球菌电转化感受态细胞制备方案:1.接种一环红平红球菌/紫红红球菌到LB培养基里,30°C,170转/min 过夜培养。
2.取1.0-1.5ml过夜培养菌液,4000转/min离心3min,无菌水洗涤,重新离心一次,重悬浮于1.0ml无菌水中。
3.转移100uL上述菌悬液到一个装有100mlMB培养基的培养瓶中(MB medium (5 g/l酵母膏, 15 g/l胰蛋白胨,5 g/l大豆蛋白胨, 5 g/l NaCl, 2.0%甘氨酸, 1.8%蔗糖,pH7.2。
灭菌后加入0.25ug/m L青霉素G)试验最佳生长培养基:LB含0.5M蔗糖;LB含0.5M山梨醇;LB含0.5M甘露醇;LB+0.5M 蔗糖+0.5M山梨醇;LB+0.5M蔗糖+0.5M甘露醇;LB+0.5M山梨醇 +0.5M甘露醇;MB培养基4. 30°C,170转/min 振荡培养过夜或者O.D.600值达到0.8-1.0之间。
5.用灭菌的离心管(10ml)或者50 ml锥形管和适当的适配器在GSA转子里以 4 000 rpm 的速度离心10分钟(如果细胞没有沉淀下来,改变离心时间和转速为4000g/min,10min)6. 倒掉上清,加入6mL预冷的蒸馏灭菌水,轻轻洗涤,4 000 rpm的速度离心10分钟。
7. 倒掉上清,再次将细胞沉淀加入到6mL预冷的5%甘油蒸馏灭菌,水轻轻洗涤,4 000 rpm 的速度离心10分钟。
8. 用6ml的10%灭菌的冰冻甘油洗涤细胞沉淀一次,4000 rpm的速度离心10分钟。
(重复一次)9. 用6ml的10%灭菌的冰冻甘油洗涤细胞沉淀一次,4000 rpm的速度离心10分钟。
10. 用5ml(20倍浓缩)或更少(40倍浓缩)的灭菌冰冻甘油对细胞沉淀进行重悬浮11. 按120μl等份装入灭菌的微型离心管中于-80°C储藏电转化:1.取400uL冷冻红球菌感受态细胞2.加入1uL质粒DNA(0.5ug),轻轻混匀,冰上放置30min(500ng/400ul=125ng/ul)3.将上述感受态细胞—质粒DNA混合物转移到预冷的0.2cm的电击杯内4.设置电击参数为:电压2.5kV,电抗400Ω,电容25.0uF,脉冲7.0ms5.电转后立即加入1mLLB培养基,30℃培养3h6.适当稀释后涂布LB培养基。
LBA4404根癌农杆菌使用说明
面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数
的增加,细菌的活力会逐渐下降。
2,为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板,然后再挑单克隆
菌落进行后续操作。
冷 冻 管 开 封 :
用浸过 75%精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
转入的双元载体 T-‐DNA 顺利转移)。 pAL4404 型 Ti 质粒含有筛选标签:
strep,赋予 LBA4404 菌株链霉素抗性,适用于菸草、番茄、烟草等植物
的 转 基 因 操 作 。
操作说明:
1,本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表
(必要时,可适当延长培养时间)。
菌 株 传 代 :
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中(尽量
增大接种量:如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基,边移动边缓 慢释放),适宜温度下培养,用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。 注 意 事 项 : 1、菌种活化前,将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中,长时间室温下放 置会导致菌种衰退; 2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行; 3、一些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,部分需连续两次继代培养才能 正常生长; 4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基,敬请正确选择,不清楚时来 电询问; 5、某些厌氧菌的培养,自开封到接种完成,均需以无氧气体充填,以保持厌氧 状态;培养过程中亦要保持厌氧状态; 6、某些菌种,如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要 5-‐10%CO2 促 进生长; 7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况,应停止使用对应产品。 8、部分菌种有致病性、扩散性,请专业人员在专业环境下有保护性操作。 保 藏 条 件 : -‐20℃保存(复溶液于 2-‐8℃保存) 保 藏 时 间 : 2-‐10 年,应根据菌种状况及时转接
农杆菌电击感受态的制备,转化及验证
农杆菌电击感受态的制备,转化及验证1.制备农杆菌电转感受态(1)挑取根癌农杆菌EHA 105单菌落,接种于5mlLB〔含利福平(Rif) 50mg/L,;链霉素100mg/L)液体培养基中,28'C, 220rpm震荡培养过夜。
(2)将2m1过夜培养的菌液加到50ml含同样抗生素的LB培养基中,28'C, 220rpm震荡3-4小时,至OD560=0.5左右。
(3) 5000rpm离心5分钟,去上清。
(4) 加入40m1 10%甘油悬浮菌体,冰浴30min.(5) 4'C, 5000rpm离心5分钟,去上清。
(6 加入30mL10%甘油重悬浮菌体,4'C, 5000rpm离心5分钟,(7)重复步骤6一次,去上清,加入2ml10%甘油悬浮,分装于1.5ml的离心管中(200 p 1/管)备用。
2 农杆菌感受态的电转化〔I)取2 ul质粒加到200 u I EHA 105感受态细胞中,轻轻混匀,冰浴30分钟。
(2)把质粒和感受态混合液吸入电极杯,电击转化。
(3)马上加入lml新鲜的LB液体培养基,28'C, 150rpm轻摇4-6小时。
(4)收集菌体涂布于含有链霉素100mg/L),利福平(50mg/L)及质粒所含的抗性的LB固体培养基平板上,28℃培养2-3天。
其实和大肠杆菌电转化差不多,只不过培养温度是28度,摇的时间长一些,还有就是链霉素和利福平两种抗生素要加上,目的是防止根癌脓杆菌自带质粒的丢失,不过具体要加哪些抗生素还得看你是那种根癌脓杆菌非常感谢我用的不是电转化是把茎和叶浸在农杆菌液里30秒..想知道为什么不是把菌液直接滴在土里?可以采用注射法导入农杆菌还有就是把植株取出放入侵染液中用真空渗透法导入感受态制备及转化方案二1、农杆菌选择:LBA4404、EHA105、GV31012、农杆菌活化:将保存的农杆菌在固体LB培养基上画线(或加或不加抗生素,LBA4404:Rif 或Str;EHA105:Rif或Str;GV3103:庆大霉素。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
LBA4404电击/电转感受态细胞
LBA4404 Electroporation Competent Cell
LBA4404电击/电转感受态细胞基因型:
Ach5 (rif r) Ti pAL4404 (strep r) Octopine
LBA4404电击/电转感受态细胞说明:
LBA4404菌株为Ach5型背景,核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的章鱼碱型Ti质粒pAL4404,此质粒含有vir基因(vir 基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。
pAL4404型Ti质粒含有筛选标签:strep,赋予LBA4404菌株链霉素抗性,适用于菸草、番茄、烟草等植物的转基因操作。
唯地生物开发的LBA4404电转感受态特别适用于大质粒的转化:经pCAMBIA2301质粒(size:11633 bp)检测转化效率>105 cfu/μg DNA;经pCAMBIA2301-ZH质粒(size:40 kd)检测转化效率可达103 cfu/μg DNA。
LBA4404电击/电转感受态细胞操作方法:
1.0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟,待其沥干水分,正
置5分钟,使乙醇充分挥发,待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面
0.5 cm以方便盖上杯盖,冰中静置5分钟充分降温。
2.取-80℃保存的农杆菌感受态插入冰中5分钟,待其融化,加入1-5 μg质粒DNA(质
粒体积不大于6ul,最好用试剂盒抽提,双蒸水溶解),用手拨打管底混匀,立即插入冰中,用200μl枪头将感受态-质粒混合物快速移到电击杯中,盖上杯盖,空管保留待用。
3.启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此参数为Biorad 推
荐,使用者也可按所用电转仪推荐的protocol操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中,加入700 μl无抗生素的LB并转移到感受态空管中,28℃振荡培养2~3小时。
4.6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生
素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天(当平板只含有50 μg/ml kan 时,28℃培养48 h即可;平板中同时加入50 μg/ml kan,20 μg/ml rif 时,需
28℃培养60h;如果使用的平板含有50μg/ml rif 则需要28℃培养72-90h)。
注意事项:
1.加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化
效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2.混入质粒时应轻柔操作。
转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3.平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大
的菌落,应减少质粒用量。
4.利福平浓度不应高于25 μg/ml,过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速
度和转化效率。
本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒
筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
LBA4404电击/电转感受态细胞保存条件:-80℃
华越洋LBA4404电击/电转感受态细胞相关:
Rosetta-gami B(DE3)pLacI感受态细胞DMT感受态细胞
Rosetta-gami 2(DE3)pLacI感受态细胞TKB1感受态细胞
Rosetta-gami感受态细胞Origami感受态细胞
Rosetta感受态细胞HMS174, HMS174(DE3), HMS174(DE3)pLysS Rosetta-gami 2(DE3)pLysS感受态细胞平板涂布专用玻璃珠
Stbl3超级感受态细胞Stbl3感受态细胞
RosettaBlue感受态细胞NMY51酵母感受态细胞
RosettaBlue(DE3)感受态细胞TG1感受态细胞,TG1感受态细胞
TOP10F′超级感受态细胞EHA105感受态细胞
RosettaBlue(DE3)pLysS感受态细胞Stbl2感受态细胞
RosettaBlue(DE3)pLacI感受态细胞DH10B感受态细胞
Tuner(DE3)pLacI感受态细胞T1感受态细胞
Rosetta2(DE3)感受态细胞M15感受态细胞
Rosetta2(DE3)pLacI感受态细胞HB101感受态细胞
Tuner(DE3)pLysS感受态细胞JM109感受态细胞
Rosetta(DE3)感受态细胞Y1HGold酵母感受态细胞
Rosetta(DE3)pLySs感受态细胞Rosseta(DE3)感受态细胞
Rosetta(DE3)pLacI感受态细胞AH109酵母感受态细胞
Rosetta 2感受态细胞TB1感受态细胞,TB1
Rosetta 2(DE3)pLySs感受态细胞EGY48酵母菌感受态细胞
Origami B感受态细胞XL1-Blue感受态细胞
Origami 2(DE3)pLysS感受态细胞DH10Bac感受态细胞
Tuner(DE3)感受态细胞BJ5183感受态细胞,BJ5183 Origami 2(DE3)pLacI感受态细胞DB3.1感受态细胞
Tuner感受态细胞JM110感受态细胞
OmniMAX2-T1感受态细胞GV3101感受态细胞
NovaF-感受态细胞SURE感受态细胞,SURE感受态细胞NovaBlue感受态细胞BL21(DE3)感受态细胞
XL1-Blue化学感受态细胞stbl3感受态细胞,stbl3感受态细胞DH5α超级感受态细胞BL21 Star(DE3)感受态细胞
DH5α- T1感受态细胞BL21 Star(DE3)pLySs感受态细胞BLR(DE3)感受态细胞AD494(DE3)感受态细胞
BLR(DE3)pLysS感受态细胞KM71H,KM71H酵母感受态细胞
BLR(DE3)pLysS感受态细胞EHA101,EHA101农杆菌感受态细胞
BL21-SI感受态细胞ER2566感受态细胞
BL21-Gold(DE3)感受态细胞Tuner(DE3),Tuner(DE3)感受态细胞BL21-AI感受态细胞TOP10F` 感受态细胞
BL21(DE3)pLacI感受态细胞EHA101农杆菌感受态细胞
BL21 trxB(DE3)感受态细胞TG1感受态细胞
BL21 trxB(DE3)pLysS感受态细胞XL10-Gold 感受态细胞
Mach1-T1 Phage Resistant 感受态细胞农杆菌感受态细胞
DH10bac(BmNPV) 感受态细胞Stable感受态细胞
BJ5183-AD-1感受态细胞F-DH5α感受态细胞
F-TOP10感受态细胞stable电击感受态细胞
DH10B电击感受态细胞EPI400电击感受态细胞
TG1电击感受态细胞
BL21(DE3)pLysS感受态细胞CodonPlus感受态细胞BL21感受态细胞
GV3101电击感受态细胞EHA105电击感受态细胞AGL1电击感受态细胞
LBA4404电击/电转感受态细胞
C41(DE3), C41(DE3)PlysS感受态细胞C43, C43(DE3)感受态细胞OrigamiB,OrigamiB(DE3),OrigamiB(DE3)pLysS,OrigamiB(DE3)pLacI
DH10bac (BmNPV)克隆感受态细胞。