帕金森病大鼠模型的建立
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展帕金森病是一种慢性进行性神经系统变性疾病，主要特征是运动功能障碍、肌肉僵硬和震颤。
大多数病例原因未明，但有些病例是由基因突变或环境因素引起，科学家一直在努力寻找有效的治疗方法。
为了更好地了解帕金森病的发病机制和寻找有效的治疗方法，研究人员利用动物模型进行相关实验研究。
大鼠是大多数实验室研究中使用的一种常见动物模型。
通过使用帕金森病大鼠模型，研究人员可以更好地了解帕金森病的病理生理过程和其它一些重要的生物学问题。
行为学实验是研究模型动物行为特征的重要手段，也是判断药物治疗效果的重要指标。
本文将从行为学实验角度，总结帕金森病大鼠模型在研究中的应用和进展。
一、运动行为实验1. 步态分析步态分析是评估大鼠运动功能障碍的重要方法。
通过观察大鼠在运动轨迹仪或其他步态分析系统中的步态特征，可以了解大鼠的步态变化情况。
研究发现，帕金森病大鼠在步态上呈现出明显的异常，包括步态不稳、速度减慢、踏步困难等。
这些异常特征与人类帕金森病患者的步态异常相似，说明帕金森病大鼠模型对帕金森病的研究具有较高的可比性。
2. 旋转行为分析旋转行为是帕金森病大鼠的典型表现之一，通常表现为大鼠围绕垂直轴自发性旋转的行为。
研究人员通常使用旋转测试箱或旋转实验系统进行观测和记录。
实验结果表明，帕金森病大鼠的旋转行为较正常大鼠明显增加，而且旋转速度也明显加快。
这一结果为研究人员提供了一个直观的指标，用于判断大鼠运动功能障碍的严重程度。
1. 强制游泳实验强制游泳实验是评估大鼠抗抑郁能力的一种常用方法。
研究人员发现，帕金森病大鼠在强制游泳实验中的表现明显低于正常大鼠，表现出抑郁行为。
这一现象提示帕金森病大鼠可能存在抑郁症状，这也与临床帕金森病患者中常见的非运动症状一致。
2. 超声波实验超声波实验通常用于评估大鼠的社交行为能力。
研究发现，帕金森病大鼠的社交行为能力明显下降，社交时间减少、探索行为减少等。
这些结果表明，帕金森病大鼠模型在了解帕金森病非运动症状和社会行为障碍方面具有一定的应用价值。
帕金森病模型
帕金森病模型帕金森病模型对帕金森病发病机制及治疗方法的研究依赖于成功的帕金森病模型的建立。
采用的模型如下：利血平模型利血平能不可逆地封闭单胺类物质的运输，影响细胞内囊泡的单胺再循环，故而于世纪年代被用于制作大鼠模型。
当喷齿类动物注射利血平后，由于囊泡内摄取的多巴胺、轻色胺和去甲肾上腺被封闭，在胞质内被降解，快速降低单胺水平，导致肌肉僵硬等的症状。
甲基苯丙胺模型与利血平一样，甲基苯丙胺作用于多巴胺神经末梢，使多巴胺水平明显下降，而对黑质多巴胺能神经元胞体的影响很小。
有报道称对多巴胺能神经元的毒性作用由过氧化亚確酸盐的产生介导，这种毒性作用能够被抗氧化剂所阻断。
该模型的不足主要是没有出现组织病理学改变。
轻多巴胺模型轻多巴胺，不能透过血脑屏障，只有直接脑内给药才能造成中枢神经系统多巴胺能神经元损伤。
注入黑质区内的能选择性引起多巴胺能神经元的死亡。
注入纹状体内的先被神经末梢摄取，再通过逆轴突转运至黑质的细胞体，也引起多巴胺能神经元的死亡。
但此过程呈慢性渐进性改变，类似人体内的病程可用以建立早、中期模型。
鱼藤酮模型天然有机杀虫剂鱼藤酮容易透过血脑屏障，能抑制线粒体呼吸链复合物的活性，选择性引起黑质和纹状体多巴胺能神经元变性死亡。
根据等的方法制备鱼藤酮大鼠昆明理工大学博士学位论文模型，将渗透微菜埋于大鼠背部皮下，再从其下颂角静脉插管与微栗相连，每日灌注鱼藤酮，连用周，大歲表现为身体屈曲，运动减少，有时伴有强直，震颤和自发的旋转行为。
百草枯模型百草枯，是一种除草剂，其结构与的活性代谢物相似，被认为是可能的危险因素。
可以速度缓慢地穿过血脑屏障。
小鼠注射后引起黑质和纹状体多巴胺能神经元的减少，继而出现随意运动的减少。
模型能通过血脑屏障，在星形胶质细胞中单胺氧化酶的作用下转变为它的活性形式，被多巴胺转运体摄人多巴胺能神经元，从而特异性地对多巴胺能神经元产生毒性作用。
的毒性作用被认为是抑制线粒体复合物的活性产生氧化应激的作用机制说明线粒体功能障碍在典型发病中起重要作用。
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展帕金森病是一种慢性神经系统退行性疾病，主要表现为肌肉僵硬、震颤和运动协调障碍等症状。
目前，针对帕金森病的研究主要集中在动物模型上，其中大鼠模型是最为常用的模型之一。
大鼠模型在帕金森病研究中具有独特的优势，因此对其行为学实验研究的进展备受关注。
帕金森病大鼠模型的建立在帕金森病大鼠模型的建立中，最常用的方法是通过给予动物神经毒性物质或者基因突变来模拟帕金森病的特征。
目前被广泛应用的神经毒性物质包括6-羟多巴胺、四氯哌嗪和α-甲基对苯二酚等，这些物质能够诱导多巴胺能神经元的损伤和死亡，从而导致运动障碍的表现。
基因突变模型也是近年来备受关注的研究方向。
研究人员通过基因编辑技术或者基因转染技术，将与帕金森病相关的突变基因导入大鼠体内，使其表现出与帕金森病类似的症状。
这些方法的建立为帕金森病的研究提供了可靠的动物模型，为后续的行为学实验研究奠定了基础。
帕金森病大鼠模型的行为学实验主要通过观察动物在特定情境下的行为表现来评估其运动功能、认知功能和情绪状态等。
这些实验能够反映大鼠在帕金森病病理过程中不同方面的功能障碍，为深入理解疾病机制和评估治疗方法提供重要信息。
1. 运动功能评估实验在帕金森病大鼠模型中，运动功能的评估是最为重要的一项实验。
常用的评估方法包括旋转实验、步态分析和运动协调实验等。
旋转实验通过记录大鼠在特定刺激下的旋转行为来评估其运动功能的损伤程度，步态分析则通过观察大鼠行走时的步态特征来评估其步态的协调性，而运动协调实验则可以通过观察大鼠在倒立杆测试或者平衡实验中的表现来评估其运动协调功能。
这些实验可以客观地反映大鼠在帕金森病进展过程中运动功能的改变，为疾病的诊断和治疗提供重要参考。
除了运动功能，帕金森病还会伴随着认知功能的损害。
评估大鼠在认知功能方面的表现对于帕金森病的研究同样至关重要。
目前，常用的认知功能评估实验主要包括水迷宫实验、Barnes迷宫实验和双臂迷宫实验等。
建立类似于绝经期妇女帕金森病大鼠模型的实验研究
ｒｎ ｅｎ ｒ ｉ ｆ Ｎ ｗ ｒ ｓ ｎ ｉ ｎ ｙｄｃｅ ｅ ｏ ｐｒ ｅ 一Ｑ Ｄ ｒｕ （ ｏｓｎ ｈ ｊ ｅ ｓ ｅ ｅ ｉ ｉｃ ｔ ｅ ａ ｄｃｍ ａ ｄｔ ｔ ｉ ｔ ｉｕ ｄ ｄ ｏ Ｓ ｅ ｇ ｆａ ｌ ｒｓ ｅ ｏ ｈ ６ Ｈ Ａ ｇｏ ｐ Ｐ＜ ０ ．
维普资讯
齐 齐 哈 尔 医学 院 学 报 ２ ０ 年 第 ２ ０７ ８卷 第 ２ 期 １
帕金森病动物模型制备
帕金森病动物模型制备概述为模拟人类PD，理想的动物模型应具备以下一些特点：(1)多巴胺能神经元在出生时数量及形态正常，青年时期开始逐渐选择性地减少，减少量超过50％，且容易通过神经化学和神经生理学的方法检测到；(2)模型应能容易检测其运动功能的损伤，包括运动迟缓、肌僵直和静止性震颤等PD的主要症状；(3)模型应能显示出路易小体的形成；(4)如果模型是遗传性的，应基于单一突变而使突变模型有着强大的传播能力；(5)模型应有相对较短的疾病周期(如数月)，以使药物筛选得以经济、快速地进行。
国际通用国内应用较多是两种方法：①通过在大鼠的黑质或内侧前脑束注射6羟多巴胺（6-OHDA）②通过对模型动物(如:猴、小鼠、猪等)进行1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）的管饲法和立体定位注射等方法。
前者是较精典的模型制备的方法，也是在国内较早开展的，但是其存在①神经元的毁损出现的较早，这与临床PD病人的中脑黑质多巴胺能神经元的渐进性死亡不同②近距离的毁损很难把握毁损的程度，这使得采用这种方法获取部分损毁的模型的成功率很低；较之前者采用MPTP管饲法和立体定位注射方法，在国内最近几年才运用到帕金森动物模型的制备，国外已经利用MPTP在猴和小鼠身上建立了较为理想的PD模型，制备通常采用皮下、静脉、腹腔注射和肌肉给药，具有方法可靠且重复性较好。
但是其危险性较高，对于试验人员和试验条件有着严格的要求[1]。
模型制备应用6-经多巴胺制备PD模型1968年Ungenstdet首先报道采用6-经多巴胺(6-OHDA)在大白鼠造成帕金森病动物模型．该动物旋转模型的某些特点和人类贼金森病相似。
近来，人们根据6-OHDA的注射部位及注射剂量不同，来造成模拟不同阶段帕金森病的动物模型。
注射6-OHDA来制备帕金森病鼠的步骤[2]：1）实验选择体重250~300g健康雄性Wistar大鼠36只来制备帕金森氏病的大鼠模型2）大鼠用戊巴比妥（48mg/kg）腹腔注射注射麻醉3）解剖操作将麻醉后的大鼠固定于江湾I型C立体定向仪上，头部正中切口，剥离骨膜，止血。
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展帕金森病是一种常见的神经退行性疾病，主要特征是多巴胺神经元的损失和运动障碍。
为了研究帕金森病的发病机制以及寻找有效的治疗方法，科学家们经过不断努力，发展了许多帕金森病大鼠模型，并利用行为学实验对这些模型进行研究。
本文将介绍帕金森病大鼠模型常用的行为学实验及其研究进展。
一、旋转行为实验（Rotational behavior test）旋转行为实验是帕金森病大鼠模型中最常用的行为学实验之一。
该实验通过观察大鼠的旋转行为来评估其运动障碍程度。
实验方法一般是给予大鼠多巴胺受体激动剂（如阿片类药物apomorphine）或多巴胺受体拮抗剂（如多巴胺受体拮抗剂haloperidol）后观察其旋转行为。
正常情况下，大鼠在注射多巴胺受体激动剂后会出现顺时针或逆时针旋转行为，而注射多巴胺受体拮抗剂后会抑制旋转行为。
而帕金森病大鼠在多巴胺神经元损失后，注射多巴胺受体激动剂后旋转行为会减少或消失。
旋转行为实验可以用来评估药物对帕金森病大鼠的疗效，以及揭示帕金森病的病理机制。
最近的研究表明，旋转行为实验可以用来评估帕金森病大鼠对脑电刺激的反应，这为脑电刺激治疗帕金森病提供了基础。
步态分析是评估动物步态功能的重要方法，也是帕金森病大鼠模型中常用的行为学实验之一。
该实验通过评估大鼠行走时的步态参数，如步幅、步频、支撑时间等，来评估其运动障碍程度。
正常情况下，大鼠的步态参数是稳定的，而帕金森病大鼠步态参数会表现出异常。
近年来，步态分析在帕金森病研究中的应用越来越广泛。
科学家们发现帕金森病大鼠的步态分析可以用来评估不同治疗方法的效果，如药物治疗、基因治疗和深部脑刺激治疗等。
步态分析还可以用来研究帕金森病的病理机制，如多巴胺神经元损失对步态的影响等。
三、旋转杆测试（Pole test）旋转杆测试是一种评估大鼠运动协调和平衡能力的行为学实验。
该实验通过观察大鼠在竖直杆上爬升和下降的表现来评估其运动能力。
帕金森病动物模型的制作的详细步骤及方法
帕金森病动物模型的制作的详细步骤及方法一、通过耗竭单胺类神经递质制作PD模型(一)利血平模型利血平是一种生物碱。
通过不可逆地封闭囊内单胺运输消耗中枢和外周单胺，从而影响细胞内囊泡的单胺再循环，于20世纪50年代被用于制作大鼠PD模型。
当啮齿类动物注射利血平后，囊内摄取的DA、5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NA)被封闭，在胞质内被降解，快速降低单胺水平，导致肌肉僵硬等PD的症状。
制备方法：应用雄性Wistar大鼠，腹腔内注射一定剂量的利血平后即可使其出现骨骼肌僵硬、震颤、姿势异常。
该模型制作方法简单。
其对人类大的贡献在于揭示出左旋多巴(L-DOPA)可作为治疗PD的潜在药物。
缺点是只能短暂模拟PD的症状，不能完全复制自发性PD 的病理变化。
(二)甲丨基丨苯丨丙丨胺模型苯丨丙丨胺丨类药物是一类具有潜在成瘾性的神经兴丨奋丨剂，具有促DA释放作用，大剂量应用对啮齿类动物和非人类的灵长类动物具有神经毒性，像利血平一样，它能够导致DA能神经元末梢DA的耗竭，对黑质神经元损伤作用较小。
Boirean等研究表明，该药可通过DA转运体被摄入细胞内，兴奋性氨基酸受体拮抗剂MK.801可阻断其毒性作用，体外实验提示能量代谢障碍、氧化应激和兴奋性氨基酸均与其毒性作用有关。
制作方法：用成年大鼠，按体重10～25mg/kg 皮下注射甲丨基丨苯丨丙丨胺，每天一次，连续4天。
用药后可出现短暂活动过多，随之是活动减少。
4～5d后可有“幻觉样”行为，表现为颤抖、舔毛、咬皮毛。
1周后检测即可发现黑质和纹状体中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)活性降低，DA含量减少，但黑质 DA能神经元丢失不明显。
该模型制作方法简单，是一个急性损伤模型，症状的持续时间及稳定性方面尚不理想，也无PD的特征性组织病理学改变。
主要用于研究PD多巴胺耗竭后的纹状体生理、生化学改变，也可用于神经保护方面的研究。
二、神经毒素制作PD模型对PD患者大脑的研究显示，在氧化应激过程中存在线粒体复合物Ⅰ功能的抑制，因而这可能是黑质DA神经退行性变的重要组成部分。
帕金森动物模型课件
第病一理部分
Electrical and Mechanical
My class one, our home
调研方法 纹状体：壳核和尾状核通过大量条纹状细胞桥互相连接，所以得名纹状体。根据发生的早晚可分为新、旧纹状体，新纹状体
指豆状核的壳和尾状核，文旧档纹仅状供体参指考苍，不白能球作，为纹科状学体依属据锥，体请外勿系模的仿；结如构有，不与当骨之骼处肌，的请活联动系有本关人改。正。
第一部分
黑质 纹状体 Electrical and Mechanical
My class one, our home
• PD可见两种症状 2、运动症状 调研方法 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系本人改正。
• 1、非运动症状
• 震颤
情绪障碍
• 僵直
认识障碍
• 运动过慢/运动不能
③6-OHDA 机制：引起特异性几茶酚胺能神经元退行性变
方法：1、双侧注射：
第一部分
帕金森
优点：成功率高 缺点：往往因吞咽障碍、缺乏渴感、运动不能而死亡 2、单侧注射：
模型简介 Electrical and Mechanical
My class one, our home
成功率：16ug＞8ug&4ug组, 注射速度1ug/min,留置5min 诱导剂：阿扑吗啡 0.2~0.5mg/kg 判断依据：共记录30min，若转圈数＞7r/min或210r/30min则合格
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系本人改正。
第一部分
简介
第二部分
模型制备
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之S处D，大请鼠联系本人改正。
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展帕金森病是一种慢性神经系统退行性疾病，主要特征是运动障碍、异常肌肉僵硬和震颤。
目前，全球有数百万人患有帕金森病，尤其是老年人口中的比例逐年增加。
由于帕金森病的病因尚不明确，目前临床上仍缺乏有效的治疗手段。
科研工作者们一直在努力寻求更好的治疗方法和药物途径。
为了更好地了解帕金森病的发病机制和寻找有效的治疗手段，大鼠模型是帕金森病研究领域的重要工具之一。
大鼠模型是一种典型的帕金森病模型，主要通过对大鼠进行特定处理，如药物处理、手术切除等，使其出现类似帕金森病患者的行为和病理特征。
行为学实验是研究帕金森病大鼠模型常用的研究手段之一，通过观察大鼠的运动、认知、情绪等行为特征，可以更直观地了解帕金森病模型的变化和进展。
下面将就帕金森病大鼠模型常用的行为学实验研究进展进行详细介绍。
一、旋转行为实验旋转行为实验是一种常用的帕金森病大鼠模型行为学实验，该实验通过测量大鼠在圆柱体内旋转的次数和方向，来评估其运动功能的变化。
正常情况下，大鼠在旋转行为实验中不会表现出明显的旋转行为。
而帕金森病大鼠模型则会出现异常的旋转行为，表现为频繁、持续的旋转。
这种行为变化与帕金森病患者在运动障碍方面的症状是一致的，因此旋转行为实验被广泛应用于帕金森病模型的行为学研究中。
二、步态分析三、电动势行为实验帕金森病大鼠模型的行为学实验研究进展为研究帕金森病的发病机制、寻找有效的治疗手段提供了重要依据。
通过行为学实验的观察和评估，科研工作者们可以更直观、客观地了解帕金森病大鼠模型的行为特征和变化，从而为进一步的研究提供了有力的支持。
相信随着行为学实验技术的不断进步和完善，帕金森病大鼠模型的行为学实验研究将会取得更多的进展，为帕金森病的临床治疗和药物研发提供更多的参考和支持。
高效帕金森病大鼠模型建立方法的研究
高效帕金森病大鼠模型建立方法的研究谢金鹿;耿希文;何婷婷;李敏;张晓;类成东;侯亚兵;张圣强;王敏【摘要】为了探索高效的帕金森病大鼠模型的建立方法,通过黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNc)、中脑腹侧背盖区(ventral tegmental area,VTA)双位点注射和内侧前脑束(medial forebrain bundle,MFB)单位点注射6-羟基多巴胺2种方法建立帕金森病大鼠模型;术后连续4周运用阿朴吗啡旋转试验鉴定模型是否成功,并用免疫组化方法验证大鼠的SNc多巴胺能神经元的损毁程度.结果表明:SNc-VTA组造模后1周成功率为12％,4周后成功率为72％,MFB组造模后1周成功率即达到84％,2周后的成功率则达到92％;采用2种方法均可成功建立帕金森病大鼠模型,但MFB单位点注射法在短时间内具有更高的成功率.%To explore the best method of establishing a rat model of Parkinson's disease,the rat models of Parkinson's disease were established by the methods of injecting 6-hydroxydopamine into two regions of brain (substantia nigra pars compacta(SNc) and ventral tegmental area(VTA)) and into only one region (medial forebrain bundle,MFB).Apomorphine-induced rotation test was performed to verify whether the rat model was succeed in the next 4 weeks,and immunohistochemistry was used to detect the lesion to dopaminergic neurons in the substantia nigra.The results show that the success rate of SNc-VTA group is 12％ at the first week and 72％ at the 4th week.The success rate of MFB group is 84％ at the first week and 92％ at the 2nd week.The rat models of Parkinson's disease can be established successfully by both of the methods,but the method with MFB has a higher success rate.【期刊名称】《济南大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(031)002【总页数】5页(P159-163)【关键词】6-羟基多巴胺;帕金森病;大鼠模型;内侧前脑束;黑质【作者】谢金鹿;耿希文;何婷婷;李敏;张晓;类成东;侯亚兵;张圣强;王敏【作者单位】山东师范大学生命科学学院,山东济南250014;秦皇岛市卫生学校,河北秦皇岛066000;山东师范大学生命科学学院,山东济南250014;山东师范大学生命科学学院,山东济南250014;山东师范大学生命科学学院,山东济南250014;山东师范大学生命科学学院,山东济南250014;山东电子职业技术学院计算机科学与技术系,山东济南250200;山东师范大学生命科学学院,山东济南250014;山东师范大学生命科学学院,山东济南250014;山东师范大学生命科学学院,山东济南250014;山东师范大学生命科学学院,山东济南250014【正文语种】中文【中图分类】R322.81帕金森病(Parkinson’s disease，PD)是最常见的以运动紊乱为主的神经系统退行性疾病，其主要病理变化是中脑黑质多巴胺能神经元变性坏死导致的黑质纹状体系统内多巴胺(dopamine，DA)含量减少。
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６一 Ｈ Ａ是一种神经毒素 ， ＯＤ 其能选 择性引起 中枢
．
３４． １
奎堕 ２ １ ０ 旦 ． ！ ！ ：
神经 系统 儿茶 酚胺神经 元尤其多 巴胺 （ ｏａ ｉｅ Ｄ ｄｐｍ ｎ ， Ａ）
神 经元 的化学性损 毁 ， 而对 中枢神经 系统其他 神经元 （ 如胆碱能 、 ５一羟色 胺 能神经 元 ） 不造 成 损 害。由于 ６一Ｏ Ｄ Ｈ Ａ的分子结构 与儿茶酚胺类 神经递 质相似 ， 易 被某 些 胺 类 摄 取 系 统 误 将 其 作 为 内 源性 儿 茶 酚 胺
度相对稳定 ， 其中 ３ ９只大 鼠恒 定 向健侧 （ 左侧 ） 旋转 ， 视为成功的 Ｐ Ｄ模 型大 鼠见表 ２ 。
表 １ 术 后 Ａ Ｏ诱 导 实验 组 大 鼠旋 转 行 为 Ｐ ４ｓ －
分为实验 组 （ ０只 ） ７ 和对 照 组 （ ０只 ） １ 实 验组 ： １ 。（ ）
２ ％戊 巴比妥钠 （０ｍ ／ ｇ 腹腔注射麻醉 ， ４ ｇｋ ） 固定于立体 定 向仪 。以前 囟为标准 参考点 ， 参照 大 鼠脑 立体 定位 图谱 ， 右 侧 前 脑 内 侧 束 （ ｅｉ ｏｅｒｉ ｂ ｎｌ， 于 ｍ ｄ ｌｆｒ ａ ｕｄｅ ａ ｂ ｎ
Ｐ Ｄ是常见 于中老年 的神经 系统 退行性变性疾病 ，
加、 敏感性增高 ， 而健 侧纹状 体 内神 经递质 Ｄ Ａ含量 、 受体 的状态和运 动调节 能力均 正常 。此 时若给予 Ｄ Ａ 受体 激动剂 ， 动物 由于神经损毁 侧的反应 强于健侧 而
无法保持平衡并 向健侧旋转 。Ａ Ｏ是 突触 后膜 Ｄ ： Ｐ Ａ Ｄ
一
诸多相似之处 （ 如黑质 Ｄ Ａ神经元 变性 、 死亡 、 失 ， 缺 黑 质、 纹状体神经递 质 Ｄ Ａ含量 降低 等 ） 然 而 其黑 质 内 ， 并无 Ｌｗ 小体形成 ， 外 ６一Ｏ Ｄ ｅｙ 此 Ｈ Ａ还可导 致大 鼠中 枢神经系统其他儿茶酚胺神经元 的非特异性 损伤 。尽 管 如此 ， 由于可通过 旋转运 动定量评估 运动损 伤的优 势使其成 为筛 选 Ｐ Ｄ治 疗药 物 的可 靠工 具 。因此 ，
１２ 方 法 ．
Ａ Ｏ诱导可 出现 向健侧 （ Ｐ 左侧 ） 转行 为 。一 般于腹 旋 腔注射 Ａ Ｏ后 １ ３ｍ ｎ内开始 出现旋转 ， Ｐ ～ ｉ 平均（ ． ２ ２±
１２ １ 大鼠脑立体 定 向手术 ．．
将 ８ ０只 Ｓ Ｄ大 鼠随机
０５ ｍｎ 旋 转时多数 以左后 肢为支 点 ， ． ） ｉ， 身体 向左侧 弯 曲， 首尾相接 ， 原地转动 ， 的甚至 出现 翻转 ， 数则做 有 少 小环形运 动。随着 时间推 移 ， Ａ Ｏ诱 导 出现旋 转的 经 Ｐ 大鼠数量 明显增 加 ， 旋转 速度 较 前增 快见 表 １ 且 。至 术后 ６周 ， Ａ Ｏ诱导 出现旋转 的大 鼠数量及 旋转速 经 Ｐ
。 昆明医学 院 第 一 附 属 医院 神 经 外科 （昆 明 ６ ０ ３ ） 华 中科 技 大 学 同济 医 学 院 附属 协 和 医院 神 经 外 科 ５０２ ； （ 武汉 ４ ０ ２ ） 中 目友好 医院神经外科 （ ３０ ２ ； 北京 １０ ２ ） ０ ０ ９
【 摘要 】 目的
应用 ６一羟 多巴胺 建立帕金 森病大鼠模 型 并对其进行行 为学评估 。方 法
探索新的治疗手段 ， 迫切需要 与 Ｐ Ｄ密切相似 的动物模 型。２ １ ００年 ９月至 ２ １ ０ １年 ９月 本研究将建 立 Ｐ Ｄ模 型 大 鼠， 为进一步开展细胞移治疗 Ｐ Ｄ的研究奠定基础。
１ 材 料 与 方 法
１３ 统计 学方法 ．
２ 结 果
用 Ｓ Ｓ ２ ０统计 软件 ， Ｐ Ｓ１． 采用单 因
应用 ６一 Ｈ Ａ立体定 向注射损 毁黑质 一纹 状体 ＯＤ Ｄ Ａ通路 后 ， 成中脑黑 质 Ｄ 造 Ａ神经元 丢失 、 神经 纤维
退变 ， 而导 致黑 质 、 从 纹状 体 内神 经递 质 Ｄ Ａ含量 减 少， 引起大 鼠两侧 大脑 半球功 能不对称 。机 体通 过 自 我调节机制使损毁侧纹状体 内 Ｄ Ａ受体数量代 偿性增
Ｉ Ｏ Ｄ ３ ｘ ６一 Ｈ Ａ（ ｇ ） 注 射速 度为 １￣ ／ ｉ， 射 ， Ｌ ｍｎ 注 完毕 后 原 位 留针 ５ ｍｎ 之 后 缓 慢退 针 （ ２ ｍ ｎ 。 ｉ， 约 ｉ ） （） ２ 对照组 ： 用上述 同样方法 向右侧 Ｍ Ｂ及 Ｖ Ａ两点 Ｆ Ｔ 注射 ４ 含 ０ ０ ％抗 坏血酸 的 Ｐ Ｓ ．２ Ｂ。 １２ ２ 行为 学评估 术 后 １周 开始 ， ．． 腹腔 注射 Ａ Ｏ Ｐ （． ５ｍ ｇ 诱发大 鼠旋转行为 ， ０ ２ ｋ ） 每周 １ ， 次 连续 测试 ６周 。注射 １ ｉ ０ｍｎ后手动计数器计数其在 ３ ｉ ０ｍｎ内的 旋转 次 数 。选 取 平 均 向 健 侧 （ 侧 ） 转 速 度 ＞７ 左 旋
１１ 材料 ．
Ｓ Ｄ大 鼠由北 京维通利华 实验动物技 术有
２２ 行为 学评估 ．
术后 ２周开始 ， 实验组部分 大鼠经
限公 司提 供 ； ６一羟 多 巴胺 （ ６一ｈｄｏｙ ｏａ ｉｅ ６一 ｙ ｒ ｄｐｍ ｎ ， ｘ Ｏ Ｄ ， Ｈ Ａ） 阿朴吗啡 （ｐ ｍ ｒｈ ｅ Ａ Ｏ （ ｉ ａ 。 ａｏ ｏ ｉ ， Ｐ ） Ｓｇ ） ｐｎ ｍ
广东 医学
２１ ０２年 ２月 第 ３ ３卷第 ３期
Ｇｕ ｎ ｄ ｎ ｄｃ ｌ ｏ ｒａ Ｆｂ ０ ２， ｏ．３ ，Ｎ ．３ ａ ｇ ｏ ｇＭｅ ｉａ ｕ ｎ ｌ ｅ ．２ １ Ｖ １ ３ ｏ Ｊ
・
３１ ・ ３
帕金 森 病 大 鼠模 型 的建 立 术
邓兴 力 ，雷德 强 ，刘如 恩 杨 智 勇 ， ，冯 忠堂
ｒｍｎ ／ ｉ的大 鼠为建立成功的 Ｐ Ｄ模型大 鼠。
表 ２ 术 后 ６周 Ａ Ｏ诱 导 大 鼠旋 转 行 为 Ｐ 只
３ 讨 论
云南省教育厅科学研究基金 资助项 目（ 编号 ：９ ０ ５ ， 明医 ０ Ｙ １３） 昆 学 院第一附属 医院博 士启动基金资助项 目（ 编号 ：０ ０ Ｓ ８ ２ １Ｂ ０ ）
鼠中有 ３ ９只 （８ ） ７ ％ 经阿朴吗啡诱 导后 恒定向健侧旋转 （ 转速度 ＞ ｍｉ） 帕金 森大鼠模 型复制成功。结论 旋 ７ｒ ｎ ， ／
【 关键词 】 帕金 森病 ；大鼠；动物模型 ； ６一羟 多巴胺
帕金森病 （ ａｋ ｏ ｄ ｅｓ ，Ｄ） Ｐｒｉ ｎＳ ｉ ａｅ Ｐ 是常见 于 中老年 ｓ ｓ 的神经系统退行性变性疾病 ， 其病机制 尚不清楚且 目前 无根治疗 法 。为 阐明 Ｐ Ｄ的病理 生理机 制 ， 一步 进
现和频 率的大小可作 为鉴定模型成功和衡 量治疗效果
的 一个 重要 指 标 。
６一Ｏ Ｄ Ｈ Ａ对 Ｄ Ａ神 经元 具有选择性 损毁作 用 ， 故可 应 用其建 立 Ｐ Ｄ动 物 模 型。１７ ９ ６年 Ｕ Ｇ Ｒ Ｔ Ｄ Ｎ Ｅ Ｓ Ｅ Ｔ等 首先应用 ６一 Ｈ Ａ成功建立 了 Ｐ Ｏ Ｄ Ｄ模型大 鼠。虽然 ６ Ｏ Ｄ Ｄ模 型大 鼠的病理 、 Ｈ ＡＰ 生化 改变 与人类 Ｐ Ｄ有
ｅｔ ２ ０ ３５ ９ ５ ）： ９ ５ ７ ｅ， ０ ５， ６ （４ ９ ５５— ９ ．
［ Ｅ Ｉ Ｓ ＮＪＬ， Ｚ Ｌ Ｋ Ｚ， Ｅ Ｒ Ｅ Ｌ ．Ｍｏ ｃｌｒ ａ ｏ ２］ Ｒ Ｋ Ｅ ＷＳ Ｏ Ｅ Ｐ Ｔ ＵＣ Ｌ Ｉ Ｌ ｌ ｕａ ｔ — ｅ ｐｈ ｇｎｓ ｆ ａｋｎｏ ｉ ａｅ Ｊ ．Ａｃ ｅｒｌ ０ ５，６ ３ ｅ ｅｉ ｏ ｒｉｓｎｄｓ ｓ ［ ］ ｒｈ Ｎ ｕｏ，２０ ｓ Ｐ ｅ ２（ ）：
ＭＦ （ ／ 一３ ６ ｍ Ｌ： ． Ｂ） Ａ Ｐ： ． ｍ； ＋２ ０ ｍｍ； Ｖ：一９ ０ ｍｍ） ． 及
腹侧被盖 区 （ ｅｔ ｌ ｅ ｅ ｔ ｒ ， Ｔ （ ／ ： ． ｖｎｒ ｇ ｎ ｌａ ａ Ｖ Ａ） Ａ Ｐ 一６０ ａｔ ｍ ａ ｅ ｍ Ｌ ＋ ． ｍ； 一 ． ｍ） ｍ； ： ０ ５ｍ Ｖ： ８ ０ｍ 分别 立体定 向注入 １ ２
３ ３—３ ７． ５ ５
６一 Ｈ Ａ不能通过血脑屏 障， 须经立体 定 向注 Ｏ Ｄ 必 射将其直 接导人脑 内。 由于 动物 品系 、 龄 、 重 ， 年 体 靶 点选择 ， 药物剂 量 ， 定位 不准 和操作 不稳定 等原 因， 目 前 国内外 报道应 用 ６一Ｏ Ｄ Ｈ Ａ建 立 Ｐ Ｄ模 型 大 鼠成功 率 较低 ， 般 为 ４ ％ ～ ０ 。本 研究 参 考 Ｐ Ｘ ． 一 ０ ５％ Ａ Ｉ Ｎ Ｓ等 主 编 的 《 ｈ ａ Ｂａ ｎ Ｓ ｒ ｔ ｉ Ｃ ｏｄ Ｏ Ｔ ｅＲ ｔ ｒ ｎ ｉ ｔ ｅ ａ ｃ ｏｒｉ ｉ ｅ ｏｘ ． ｎｔ ） ａ ｓ 确定靶 点坐标 ， ｅ） 选取 与 图谱 选用 的品 系 、 大小基 本 一致 的 Ｓ Ｄ大 鼠建立 Ｐ Ｄ模 型 ， 而避免 了因动物 品 从 系和大小而带来 的不稳 定因素 。 传统主要通 过黑质单 靶 点立体 定 向注射 ６一Ｏ － Ｈ
神经元 内单胺氧化 酶 的作 用下生成 多种活性 产物 ， 产 生大量 自由基 ， 对神经元进行 攻击 ， 引发膜 结构 中的脂 质过氧化 。此外 ， ６一Ｏ Ｄ Ｈ Ａ还 可 抑制 线 粒 体 呼 吸链 ＮＤ Ａ Ｈ脱氢酶 和细胞 色 素氧化 酶 的活性 ， 直接 引起线 粒体功能障碍 ， 进而引起神经元死亡 。
（ Ａ、 甲肾上腺素 ） Ｄ 去 来利 用 ， 故可 经儿茶 酚胺高 亲和 力 转运系统转运到相应 的神经元 内。６一Ｏ Ｄ Ｈ Ａ在 Ｄ Ａ
Ｍ Ｂ 可使黑 质 Ｄ Ｆ， Ａ神经元缺失达 ９ ％ ， ７ 而且还 能使终 纹间核 、 腹侧核 、 伏核 和嗅结 节 的 Ｄ Ａ神 经末稍完 全消 失 。因此 ， 本研究采用 Ｖ Ａ和 Ｍ Ｂ双点 注射 法 ， Ｔ Ｆ 克 服 了单点注射法 的不稳定性 ， 获得 了较高 的成模率 。
本研究采用 ６一 Ｈ Ａ建 立 Ｐ Ｏ Ｄ Ｄ模型 大 鼠， 而研究细 进 胞移植对 Ｐ Ｄ的治疗作用 。