生物样品的常用分析方法

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生物物质的检测方法

生物物质的检测方法

生物物质的检测方法
生物物质的检测方法主要包括以下几种:
1. 分光光度法:利用物质吸收、发射、散射等特性,通过测定样品对光的吸收、发射或散射的强度,来确定生物物质的含量。

2. 色谱法:将样品中的组分分离并定量分析。

常用的色谱方法包括气相色谱(GC)、液相色谱(HPLC)、超高效液相色谱(UHPLC)等。

3. 质谱法:将样品中的分子离子化,通过质谱仪进行质量分析和定性、定量分析。

常用的质谱方法包括质谱-质谱联用技术(GC-MS、LC-MS等)。

4. 核磁共振(NMR):利用核磁共振现象,通过测量样品中核自旋的磁共振信号,来获取样品的结构和含量信息。

5. 生物传感器:利用生物感知元件与生物物质之间的特异性相互作用,将生物信号转化为测量信号,实现对生物物质的定性、定量检测。

6. 高通量测序:通过测定DNA或RNA的序列,来获取关于生物物质的信息,如基因组、转录组、蛋白质组等。

7. 免疫分析法:利用抗体与抗原(或抗原类似物)之间的特异性结合,来检测
生物物质的含量或活性。

常用的免疫分析方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光法、免疫电化学法等。

总之,生物物质的检测方法多种多样,可根据不同的目的和要求选择不同的方法进行分析和测定。

生物化学实验中的化学分析方法

生物化学实验中的化学分析方法

生物化学实验中的化学分析方法在生物化学研究中,化学分析方法是不可或缺的工具。

化学分析方法能够帮助研究人员准确测定生物样本中的化学成分,从而揭示生物体内的生理过程和代谢途径。

本文将介绍几种常用的生物化学实验中的化学分析方法。

1. 光谱分析法光谱分析法利用波长、频率和能量之间的关系来研究物质的结构和性质。

常见的光谱分析方法包括紫外-可见吸收光谱、红外光谱和质谱等。

通过测定样本对特定波长或能量的吸收、发射或散射情况,可以确定样本中的化学组分和浓度。

2. 色谱分析法色谱分析法是一种基于固定相和流动相间分离物质的原理进行分析的方法。

常见的色谱分析方法包括气相色谱和液相色谱。

气相色谱常用于分离和鉴定挥发性有机物,液相色谱常用于分离和鉴定非挥发性有机物和生物大分子。

3. 电化学分析法电化学分析法利用电化学方法来测量反应产生的电流或电势变化,用以分析样本的成分和浓度。

常见的电化学分析方法包括电位滴定、极谱法和电化学传感器等。

电化学分析法具有检测灵敏度高、操作简便等特点,广泛应用于生物体内电活性物质的研究和生物传感器的制备。

4. 质谱分析法质谱分析法是一种通过测量样品中离子的质量和相对丰度来鉴定和定量化学成分的方法。

质谱分析法具有高分辨率、高灵敏度和高特异性的特点,广泛应用于分析和鉴定生物样品中的分子结构和组成。

以上所述的化学分析方法只是其中的几种常见的方法,随着科学技术的不断发展,化学分析方法也在不断创新和完善。

这些化学分析方法的应用为生物化学实验提供了强有力的工具,为科学家们深入探索生命的奥秘提供了可能。

正是通过这些分析方法的应用,科学家们才能够揭示生物体内的化学过程和代谢途径,为人类的健康和疾病的研究提供宝贵的参考和支持。

总结起来,生物化学实验中的化学分析方法是生命科学研究中不可或缺的工具。

通过光谱分析法、色谱分析法、电化学分析法和质谱分析法等方法,科学家们可以准确测定生物样本中的化学成分,揭示生物体内的生理过程和代谢途径。

常用的样品分析方法有哪些

常用的样品分析方法有哪些

常用的样品分析方法有哪些
常用的样品分析方法有:
1. 光谱分析方法:包括紫外可见光谱、红外光谱、核磁共振等,用于分析样品的结构、成分等。

2. 色谱分析方法:包括气相色谱、液相色谱等,用于分离和检测样品中的化合物。

3. 质谱分析方法:包括质谱仪、质谱成像等,用于分析样品中各种化合物的质量信息。

4. 离子分析方法:包括电化学分析、离子色谱等,用于分析样品中离子的浓度和类型。

5. 热分析方法:包括热重分析、差热分析等,用于研究样品的热稳定性和热性质。

6. 微生物分析方法:包括培养基法、荧光法等,用于分析样品中的微生物存在和数量。

7. 晶体学方法:包括X射线衍射、单晶衍射等,用于确定样品的晶体结构。

8. 电化学分析方法:包括电解分析、电位法等,用于测定样品中各种物质的电化学性质。

9. 核素分析方法:包括放射测定法、放射免疫分析等,用于分析样品中放射性核素的浓度和种类。

10. 分子生物学方法:包括聚合酶链式反应、DNA测序等,用于分析样品中的基因和DNA序列。

掌握生物实验数据处理方法

掌握生物实验数据处理方法

掌握生物实验数据处理方法生物实验数据处理方法指的是科学家在生物实验中收集和分析数据的方法。

这些方法包括数据的收集、整理、统计和分析。

本文将介绍几种常见的生物实验数据处理方法。

首先,生物实验中最常见的数据收集方法是实验观察和测量。

科学家通过观察生物样本的形态、结构和功能等信息,或者通过测量生物样本的生理参数、分子量、浓度等指标来获取数据。

这些数据通常以数值的形式呈现,例如体重、体积、浓度等。

其次,在数据收集之后,科学家需要对数据进行整理和统计。

数据整理是将收集到的数据进行归纳、分类和整合,以便进一步分析和解释。

数据统计是对整理好的数据进行常见统计学方法的应用,例如计算平均值、标准差、相关系数等。

这些统计指标可以提供数据的集中趋势、变异程度和相关性等信息。

第三,在数据整理和统计之后,科学家需要对数据进行进一步的分析。

数据分析是通过运用统计学方法或其他相关的数学模型,对数据中的规律和关系进行深入探究和解释。

常见的数据分析方法包括方差分析、回归分析、聚类分析等。

这些分析方法可以揭示数据之间的因果关系、群体的差异和类别的划分等。

最后,科学家需要通过数据的可视化来呈现研究结果。

数据可视化是将研究结果以图表、图像或其他视觉方式进行展示,以便更好地理解和传达研究的结论。

常见的数据可视化方法包括柱状图、折线图、散点图等。

这些图表可以直观地展示数据之间的关系和变化趋势。

总之,生物实验数据处理方法包括数据的收集、整理、统计和分析等步骤。

科学家通过实验观察和测量来收集数据,然后对数据进行整理和统计,接着通过数据分析揭示数据中的规律和关系,最后通过数据可视化来呈现研究结果。

这些方法的应用可以帮助科学家更好地理解生物现象、推动科学研究的进展。

生物样本分析

生物样本分析

1、生物样本种类,特点,及前处理方法1)血液。

分为血浆/血清或全血。

测定血浆或血清中的药物浓度能较好的反映体内药物浓度变化。

若专门测定平均分布于血细胞内外的药物浓度,则用全血。

血浆采集应加入抗凝剂。

离心,取上清液,血清静置,移走血饼,离心,取上清液。

处理方法有沉淀蛋白法、液液萃取法、固相萃取法。

2)尿样,用于药物剂量回收研究、药物尿清除率、生物利用度研究。

易收集,但易受生理情况影响。

方法:酸解或酶解可使药物从缀合物中游离出来。

3)唾液:易收集,采集后应立即出去泡沫部分的体积,放置后易分层,离心,取上清液。

4)组织:为药物的吸收、分布、代谢、排泄等体内过程提供重要信息。

组织处理方法:匀浆化法,蛋白沉淀法,酸碱水解,酶水解5)头发:取样方便,无伤害,检样的掺伪可能性低,可测微量元素。

头发采集后需洗涤,处理方法有提取法,有机破坏法。

6)其他:乳汁,精液。

2、生物样品前处理方法及特点1)有机破坏法:包括湿法破坏、干法破坏和氧瓶燃烧法,适合人发样品的破坏破坏能力强,反应激烈。

2)直接沉淀法:将一定量生物样品加蛋白沉淀剂,涡旋,离心,取上清液进样。

当样品中待测物浓度较高,所用方法的特异性和灵敏度达到检测要求时可以考虑用直接沉淀法。

注意沉淀剂体积、沉淀剂的选择及对药物稳定性的影响(氧化、酸不稳定)。

可使接合型药物释放出来,缺点容易乳化。

3)液液萃取法:取一定量生物样品加有机提取溶剂,涡旋,离心,取有机层,氮气吹干,流动相溶样进样。

多数药物亲脂,在适当有机溶剂中溶解度大于水相,而血样或尿样中含有的大多数内源性杂质是强极性水溶性物质,液液萃取可除去大部分杂质,从大量样品中提取药物经浓集后用于分离。

注意水相pH值,提取溶剂以及有机相和水相的体积,优点在于选择性,这依赖于有机溶剂的选择。

药物能与多数内源性物质分离,缺点在于乳化现象的产生:有机溶剂易挥散、有毒性、对环保不利及不能自动化。

4)固相萃取法:将不同填料作为固定相装入微型小柱,当含有药物的生物样品溶液通过时,由于受到吸附或分配或离子交换或其它亲和力作用时,药物或杂质被保留在固定相上,用适当溶剂洗出杂质,再用适当溶剂洗脱药物。

elisa实验原理

elisa实验原理

elisa实验原理Elisa实验原理。

Elisa(酶联免疫吸附实验)是一种常用的生物化学分析方法,主要用于检测和定量分析样品中的蛋白质、抗体、荷尔蒙、细胞因子等生物分子。

Elisa实验原理基于抗体与抗原特异性结合的原理,通过酶标记的二抗或底物来检测抗原-抗体结合物质。

下面我们来详细了解一下Elisa实验的原理。

首先,Elisa实验的基本原理是利用抗体与抗原的特异性结合。

在实验中,首先需要将待检测的抗原或抗体样品吸附在微孔板上,然后加入特异性的一抗,使其与待检测物质结合。

接着,加入酶标记的二抗,使其与一抗结合,形成抗原-抗体-酶标记二抗的复合物。

随后,加入底物,酶与底物发生反应产生显色物质,其光密度与待检测物质的浓度成正比。

最后,用酶标仪测定显色物质的光密度,从而定量分析待检测物质的浓度。

其次,Elisa实验的原理还涉及到酶标记技术。

在实验中,常用的酶标记方法有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)等。

这些酶标记的二抗在与抗原-抗体复合物结合后,能够与底物发生化学反应,产生显色物质或荧光物质。

通过测定显色物质或荧光物质的光密度,可以间接反映待检测物质的浓度。

此外,Elisa实验的原理还涉及到微孔板的使用。

微孔板通常采用聚丙烯或聚碳酸酯材料制成,具有多孔结构,能够同时检测多个样品。

在实验中,将待检测的样品加入微孔板孔道中,利用微孔板的高通量特性,可以快速、准确地进行多个样品的检测和分析。

最后,Elisa实验的原理还包括数据分析和结果解读。

实验结果通常通过酶标仪或荧光分析仪测定显色或荧光物质的光密度值,然后通过标准曲线法或双对数法等方法,计算出待检测物质的浓度。

最终,根据实验结果,可以对待检测物质的浓度进行定量分析和结果解读。

总之,Elisa实验原理基于抗体与抗原的特异性结合,利用酶标记技术和微孔板的高通量特性,通过测定显色或荧光物质的光密度值,实现对待检测物质的定量分析。

这种实验方法在生物医学研究和临床诊断中具有广泛的应用前景,为科研人员和临床医生提供了一种高效、准确的生物分子分析方法。

常见的生物化学实验方法

常见的生物化学实验方法

常见的生物化学实验方法生物化学实验是研究生物分子结构、功能和相互作用的重要手段,广泛应用于生物医学研究、药物开发和环境保护等领域。

本文将介绍一些常见的生物化学实验方法。

一、色谱技术色谱技术是一种分离和分析物质的方法,根据分子的化学性质和大小差异,将混合物分离成各个组分。

常见的色谱技术包括气相色谱(GC)、液相色谱(LC)和薄层色谱(TLC)等。

在生物化学实验中,色谱技术常用于对生物样品中的分子进行纯化和分析。

例如,气相色谱可用于分析氨基酸和脂肪酸等小分子化合物,液相色谱则可以用于分离蛋白质、核酸和多糖等生物大分子。

二、电泳技术电泳技术是利用电场作用下物质的电荷和大小差异,将混合物分离成各个组分的方法。

常见的电泳技术包括聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和凝胶过滤电泳等。

在生物化学实验中,电泳技术常用于分离和检测蛋白质和核酸等生物大分子。

例如,聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于分离和测定蛋白质分子量,SDS-PAGE则可以用于检测蛋白质的纯度。

三、质谱技术质谱技术是利用质量分析仪器对物质的质量和结构进行分析的方法。

常见的质谱技术包括质谱仪、飞行时间质谱(TOF-MS)和液相色谱质谱联用(LC-MS)等。

在生物化学实验中,质谱技术常用于鉴定和定量生物分子。

例如,利用质谱仪可以对蛋白质进行鉴定,通过测定样品中蛋白质的质量和碎片离子的质量谱图,确定蛋白质的氨基酸序列。

四、核酸杂交技术核酸杂交技术是利用互补的DNA或RNA序列进行结合,从而检测目标序列的方法。

常见的核酸杂交技术包括Southern blot、Northernblot和in situ hybridization等。

在生物化学实验中,核酸杂交技术常用于检测和定量特定DNA或RNA序列的存在。

例如,Southern blot可用于检测DNA片段在基因组中的分布和拷贝数,Northern blot则可用于检测特定mRNA的表达水平。

生物样品分析方法

生物样品分析方法

生物样品分析方法生物样品分析是一项重要的实验技术,用于研究生物体内的成分、结构和功能。

为了获得准确的结果,需要采取适当的样品处理方法和分析技术。

以下将介绍几种常见的生物样品分析方法。

首先是DNA/RNA提取与分析。

DNA/RNA是生物体内遗传信息的载体,其提取与分析可用于研究基因的表达、变异和调控等。

DNA/RNA提取方法一般包括细胞溶解、裂解、蛋白酶处理、有机溶剂萃取和纯化等步骤。

分析方法主要包括凝胶电泳、PCR、RT-PCR和测序等。

其次是蛋白质提取与分析。

蛋白质是生物体内执行生物学功能的重要分子,其提取与分析可用于研究蛋白质的结构、功能和相互作用。

常用的蛋白质提取方法包括细胞裂解、亲和层析、电泳分离和质谱分析等。

分析方法包括SDS-PAGE、Western blot、质谱分析和免疫共沉淀等。

另外是细胞及其器官提取与分析。

细胞是生物体的基本功能单位,其提取与分析可用于研究细胞结构、代谢和信号转导等。

细胞提取方法包括胰酶消化、细胞裂解和亚细胞分离等。

常用的细胞分析方法有细胞计数、流式细胞术、显微镜观察和细胞共培养等。

器官提取方法则与具体器官的特性相关,例如心脏、肝脏和肾脏等。

此外,还有组织提取与分析。

组织是生物体内多个细胞的集合体,其提取与分析可用于研究组织的结构、功能和病理过程等。

组织提取方法包括机械破碎、体外培养和酶消化等。

常用的组织分析方法有组织切片、组织染色、免疫组织化学和组织内分子分析等。

最后是体液样品提取与分析。

体液样品如血液、尿液和脑脊液等含有丰富的生物分子,其提取与分析可用于研究疾病的发病机制和诊断标志物等。

体液样品提取方法一般包括离心、沉淀和过滤等步骤。

常用的体液分析方法有生化分析、免疫分析、代谢分析和分子诊断等。

总之,生物样品分析方法在生命科学研究和临床诊断中起着重要作用。

通过采用适当的提取与分析技术,可以获得关于DNA、RNA、蛋白质、细胞、组织和体液样品的详细信息,从而推动生物医学研究和疾病治疗的进展。

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紫外分光光度法(UV)
原理同比色法。适用于测定具有紫外 吸收的药物。 体内药分中母体药物与代谢物的紫外 吸收光谱非常相似,易产生干扰。受灵敏 度和选择性的限制,其在体内药分中的应 用也呈下降趋势。
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荧光分析法 (Fluorescence method) 利用物质经光照射后能发射荧光的特性 进行分析的光学分析法。
参考文献:涡流色谱技术在生物样品分析中的应用 刘朋,周建良,安婧婧,李萍,Chinese Journal of Chromatography
1
光谱法(Spectroscopy)
光谱法是基于检测能量(电磁辐射) 作用于待测物质后产生的辐射信号或所 引起的变化的分析方法。
特点
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薄层扫描法 (TLCS)
实例:薄层扫描色谱法检测血清中对乙酰氨基酚 采用TLCS法检测患者血清中对乙酰氨 基酚的浓度,为临床急诊中毒分析和血药浓 度监测提供了快速简便的方法。 该法板间测定误差小、回收率高、线 性范围宽,能准确测定患者血药浓度。与文 献报道的HPLC和GC法相比,具有简便快 速、样品用量少、费用低和不需要进行衍生 化等优点 。
体内药分专题之五—— 生物样品常见分析方法
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思考
1.在体内药物分析中所采用的生物 样品有哪些? 2.最常用的生物样品是什么? 3.药物分析中常见分析方法包括哪 些?哪些适用于体内药物分析?
生物样品的常用分析方法
体内药物分析是借助于现代化的仪器 与技术来分析药物在体内数量与质量的变 化,以获得药物在体内的各种药代动力学 参数、代谢方式、代谢途径等信息。目前, 用于生物样品分析的方法有很多,归纳起 来主要有以下几类:
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荧光分析法 (三)荧光探针分析法
(Fluorescence method) 局限 衍生化增加分析 步骤,易引入分析 使用荧光探针从无荧光的药物制备有荧光 误差。 的衍生物。
优点
1
2
3
增强待分析 物质的荧光 响应,提高 检测灵敏度 和选择性。
稳定分析物, 有助于化合 物基团的确 尤其针对活 证。 泼的和有挥 发性的化合 物。
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薄层色谱法 (thin layer chromatography )
分离速度快
优点
检出灵敏度高 选择性好 显色方便等
缺点:对生物高分子分离效果不甚理想。
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薄层扫描法 (TLCS)
系指用一定波长的光照射在薄层板上,对薄 层色谱中有紫外或可见吸收的斑点或经照射 能激发产生荧光的斑点进行扫描,将扫描得 到的图谱及积分值用于药品的质量检查的方 法。 与高效液相色谱法相比,具有多通道效应, 可同时平行分离分析多个样品;流动相用量 少且选择范围宽、更换方便;固定相为一次 性使用,对样品的预处理要求不高等优点。 已成为薄层色谱常用的定量方法,在体内药 物分析中广泛应用。
实例:气相色谱法测定中毒病人血液中的溴氰菊酯
方法: 样品加入乙腈、涡旋混合、超声提取 、Florisil固相萃取柱净化、氮吹,DB-17石 英弹性毛细管柱30m(0.32mm,0.25μm)分离 ,气相色谱电子捕获检测器(GC-ECD)检测, 保留时间定性,外标法定量。 结果: 方法最低检出限为0.01 ng/ml,样品加 标回收率为80.1%~94.5%, 相对标准偏差 (RSD)为2.3%~4.8%。
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胶束电动毛细管色谱(MECC)
在MECC体系中存在着以胶束形式存在的 准固定相和作为载体的液体流动相,胶束带电 荷在电场的作用下产生泳动,溶质中各组分依 据其在水相和胶束相之间的分配差异及在电泳 和电渗流驱动下出现淌度差异而分离。 优点:手性拆分常用的分离模式之一,只需在 背景电解质中添加手性选择剂,构建手性环境, 即可进行手性拆分,本法适用于拆分人体内的 氨基酸。
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荧光分析法
(Fluorescence method)
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薄层色谱法 (thin layer chromatography )
是以涂布于支持板上的支持物作为固定相, 以合适的溶剂为流动相,对混合样品进行 分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。 根据不同的分离机制,薄层色谱法可分为 吸附薄层色谱、分配薄层色谱、离子交换 薄层色谱和凝胶薄层色谱法等。
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气相色谱法 (gas chromatography ,GC)
结论: 该方法简便、快速、准确,检出限
低,适合中毒病人血液中溴氰菊酯含量的测 定。
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高效液相色谱法
定义 以经典液相色谱为基础,以微粒型填 料作固定相,采用高压送液泵和各种高灵敏度 检测器。 分离效能高
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生物样品的常用分析方法
1. 色谱分析法 2. 光谱分析法
3. 免疫分析法
4. 微生物分析法 5. 电化学分析法
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色谱法(chromatography)
一种物理或化学的分离分析方法,其分 离原理主要是利用物质在流动相和固定相 中的分配系数,或吸附能力的差异而达到 分离。 包括薄层色谱(TLC),纸色谱(PC),凝 胶色谱,气相色谱(GC)和液相色谱(LC)。
优点:
1.灵敏度高。检出限可达10-10 g/ml~1012g/ml。 2.选择性好。
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荧光分析法 (Fluorescence method) (一)常规荧光分析法
1.直接测定法 适于自身能产 生荧光的物质,因 荧光性质与溶液的 pH有关,故荧光强 度的测定须在适宜 的pH介质中进行。
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为10.03 ng/ml,线性范围为10.03~40110 ng/mL,日内RSD为1.9% ~5.9% ,日间RSD 为3.4% ~7.3%。受试制剂中对乙酰氨基酚的 相对生物利用度为(96.1 ±15.0) % ,曲马多的 相对生物利用度为(93.9 ±15.3) %。 结论:本方法操作简便、灵敏度高,可用于临床 血药浓度测定。受试制剂与参比制剂生物等效 。
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高效液相色谱法
高效液相色谱法串联紫外- 荧光检测器同时测定 人血浆中对乙酰氨基酚与盐酸曲马多的浓度
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流动相,紫外- 荧光检测器串联法同时在线检 测对乙酰氨基酚与曲马多,紫外检测波长: 245 nm;荧光激发波长: 275 nm,发射波长: 304 nm。20名健康志愿者服药后,依据血浆中 对乙酰氨基酚与曲马多经时血药浓度,对2种 制剂进行了生物等效性研究。 结果:本法中对乙酰氨基酚最低定量限为 0.110μg/mL,线性范围为0.11000~ 10.100μg/mL ,日内RSD为3.9% ~8.0% , 日间RSD为5.5% ~6.7%;曲马多最低定量限
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高效液相色谱法
分 离 方 法
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高效液相色谱法 色谱分离方法的选择 主要根据是样品的相对分子质量 的大小,在水中和有机溶剂中的溶解 度,极性和稳定程度以及化学结构等 物理、化学性质。
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高效液相色谱法 一、相对分子质量
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气相色谱法 (gas chromatography,GC) 缺点:
要求被测药物及其代谢物必须具有一定的 挥发性和热稳定性。
解决方法:固定相发展和衍生化试 Nhomakorabea的广泛使用,使 生物样品不再受限制。
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气相色谱法 (gas chromatography,GC)
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荧光分析法
(Fluorescence method) 示例 Tb-吡哌酸的荧光体系及尿和血清中 吡哌酸含量的测定 应用镧系离子发光探针生成Tb-吡哌酸配 合物,在紫外光照射下发生分子内能量传 递使Tb产生特征荧光,其荧光强度与吡哌 酸浓度呈线性关系,从而建立一种灵敏、 快速的分析吡哌酸的方法。
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胶束电动毛细管色谱(MECC)
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涡流色谱技术(TFC)
涡流色谱技术是利用大粒径填料使流动 相在高流速下产生涡流状态,从而对生物样 品进行净化与富集。 优点: 可以在线处理生物样品,速度快、选择 性好、灵敏度高,易于实现自动化,近年来 在生物领域尤其是体内药物分析中得到了广 泛的应用。
2.间接测定法
将无荧光或弱 荧光物质衍生化, 测定衍生物荧光 强度的方法。
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荧光分析法 (Fluorescence method) (二)胶束增溶增敏荧光分析法
利用胶束溶液对荧 光物质的增溶、增 敏和增稳作用,大 大提高荧光分析法 的灵敏度和稳定性。
用β-CD单分子胶束荧光技术 检测秦艽中龙胆苦苷血药浓 度。 龙胆苦苷嵌入β-CD的疏 水空洞中,使其在胶束中溶 解度增加和相互碰撞几率减 少,荧光量子效率提高,从 而提高检测灵敏度。
优点
检测灵敏度高 分析速度快 选择性好
适用范围广
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高效液相色谱法
缺点 有“柱外效应”。在从进样到检测器 之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、 柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动 相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和 滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率 降低。 高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
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