第七章 黄酮类化合物
黄酮类化合物flavonoids
分布
• 黄酮类化合物广泛分布于水果、蔬菜、 茶、谷物、植物根茎、花中。还是茶 及黄芩、银杏、沙棘等众多中草药的 活性成分。
结构及命名
8 7 6
5
1
O
2
3
4
O
色原酮
2-苯基色原酮
C6-C3-C6
分类
根据B环连接位置、C环氧化程度、C环是否成环等将黄酮类 化合物分为以下七大类。
1、黄酮和黄酮醇 2、二氢黄酮和二氢黄酮醇 3、异黄酮和二氢异黄酮 4、查耳酮和二氢查耳酮类 5 、橙酮类 6、花色素和黄烷醇类 7、其他黄酮类
HO
O
OH OH O
山柰酚
OH
HO
O
OH OH
OH OH OH O
杨梅素
OH
HO
O
OH
OR OH O
R=H
槲皮素
R=芸香糖 芦丁
• 罗勒
罗勒
槐花
2、二氢黄酮和二氢黄酮醇
• 二氢黄酮及苷类：陈皮素、陈皮苷、苷草素、苷草苷
OH
RO
O
HO
O
OCH3
OR
OH O
R=H
陈皮素
R=芸香糖 陈皮苷
O
R=H
苷草素
• 杜俊瑶,辛彦.芹菜素对人卵巢癌细胞系CAOV3 细胞增殖周期的影响[J]. 中国使用妇科与产科杂志, 2008,24(6) : 456－458.
抗氧化作用
螫合金属离子 体外直接清除自由基 抑制NO的生成 抑制DNA氧化损伤 抑制放射损伤 抑制LDL氧化损伤 抑制脂质过氧化作用
孙秀琴,李荣华,唐涛.芹菜素抗氧化作用研究进展 [J]. 2009,47(27): 34-35.
• 宋昊刚,崔浩,赵君,等. 黄芩苷对家兔视网膜炎性水肿厚度影响的研究[J]. 国际眼科杂志, 2010,10(7) : 1274
第七章 黄酮
四、用化学方法鉴别下列各组化合物
1.
OH
O
OH O
A
OH
OH
O
OH O
B
OH
OH
OH
O
OH OH O
C
2.
OH
O
OH OH O
后，或无羟基时，仅显暗淡的棕色。 4、旋光性
1）游离的二氢黄酮、二氢黄酮醇、二氢异黄酮和黄烷醇等具有旋 光性。其余的游离黄酮则无旋光性。
2）所有的黄酮苷均有旋光性，且多为左旋。旋光性的有无取决于 结构中是否含有不对称碳原子（＊C）
——溶解性
黄酮类化合物的溶解性因结构不同而有较大差异。
1.游离黄酮 一般难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚等 有机溶剂及稀碱液中。
二、A型题
1.聚酰胺对黄酮类化合物发生最强吸附作用时，应在__中。（A.甲酰胺 B.水 C.95％乙醇 D.酸水）
2.盐酸-镁粉反应为阳性的是__。（A.黄酮醇 B.异黄酮 C.查耳酮 D. 橙酮）
3.四氢硼钠反应为阳性的是__。（A.黄酮醇 B.异黄酮 C.二氢黄酮 D. 橙酮）
4.在黄酮类化合物甲醇溶液中加入甲醇钠诊断试剂，所得紫外光谱与其甲 醇溶液紫外光谱比较，带Ⅰ红移了40～60nm，且强度不变，这说明结构中__ 。 （A.有4‘-OH,无3-OH B.有4‘-OH和3-OH C.有4‘-OH D.无4‘-OH）
2.碱性 因母核中γ-吡喃酮环上的1位氧原子有未共用电子对，故表现出 微弱的碱性。可溶于浓硫酸、浓盐酸等强无机酸生成 盐，该盐极不稳 定，加水后即分解。 溶于浓硫酸中生成的 盐，常常表现出特殊的颜色，可用于黄酮类 成分的鉴别。
天然药物化学-黄酮类化合物
O
Cl H2O
O
OH
在浓硫酸中生成的洋盐常表现特殊的颜色，可 用于鉴别。 黄酮、黄酮醇——黄~橙色，并有荧光
二氢黄酮——橙红〔冷〕、紫红〔热〕 查耳酮——橙红~洋红
第三十六页，共一百一十一页。
四、显色反响 (一)复原反响
1. 盐酸-镁粉〔盐酸-锌粉〕反响——鉴定 黄酮、黄酮醇及二氢黄酮、二氢黄酮醇——〔＋〕
OH
H OH
O 邻羟基查耳酮
第十六页，共一百一十一页。
O
O 二氢黄酮
HO
OH
HO glc O O
OH
红花苷
HO
OH
OH
glc O O
梨根苷
第十七页，共一百一十一页。
6.异黄酮类与二氢异黄酮类
结构特点
➢母核为3-苯基色原酮的结构，即B环连接在C环的3位上
➢异黄酮的2、3位被氢化 O 2
8
7
A
6
5
1
第五页，共一百一十一页。
〔二〕结构类型
根据B环连接位置〔2位或3位〕
C环氧化程度〔包括2，3位是否存在双键；4位
有无－C＝O〕
C环是否成环〔1，2位是否开环〕
将黄酮类化合物分为以下七大类。
1 黄酮和黄酮醇
2 二氢黄酮和二氢黄酮醇
3 异黄酮和二氢异黄酮醇
4 查耳酮和二氢查耳酮
5 橙酮类
8
6 花色素和黄烷醇类 7 其他
11．双苯吡酮类
根本母核由苯环与色原酮的２，3位骈合而成
O OH
8
HO 7
1 2
HO 6 5
O 4 3 OH glc
异 芒 果 素 (isomengiferin)
石韦中的异芒果素具有止咳祛痰的成效。
黄酮类化合物
从黄芩中提取黄芩甙工艺流程图：
黄芩粗粉 分别加10倍量、8倍量沸水提2次,每次1h,过滤
药渣
滤液 加HCl调pH～ 2,80℃ 保温30min，静置,离心过滤
沉淀
上清液
加适量水搅匀,加40%NaOH调pH7,搅拌下加入等量乙醇,过滤
滤渣
滤液 加HCl调pH～ 2,充分搅拌,加热至80℃ 保温30min,过滤
二.溶解性 黄酮类化合物的溶解度因解构及存在状态不同而有很大的差异.
一般游离甙元难溶或不溶于水,易溶于甲醇,乙醇,乙酸乙酯,乙醚等有机溶 剂及稀碱液中.1其中黄酮,黄酮醇,查尔酮等平面型分子,因堆砌紧密,分子间 引力较大,故更难溶于水;反之二氢黄酮及二氢黄酮醇等,因系非平面型分子, 有利于水分子进入,因而对水的溶解度稍大;异黄酮类化合物也不是平面型分 子,故亲水性也稍大;至于花色甙元也为平面信访4结构,但因以离子形式存在, 具有盐的通性,故亲水性较强,水溶度较大.
聚酰胺柱色谱 (H2O:CH3OH)分离
流份1～ 4
硅胶柱色谱,洗脱剂: (CHCl3:CH3OH) 反复分离精制
汉黄芩素-5β-D-葡萄糖甙
5,8, 2'-三羟基-7-甲氧基黄酮 5,8, 4'-三羟基-6,7-二甲氧基黄酮 5,7, 4‘-三羟基-6-甲氧基二氢黄酮 3,5,7, 2‘,6’—五羟基二氢黄酮醇
典型化合物：
R'
HO
O
OH
HO
芹菜素 木犀草素 山萘酚 杨梅素
R'' O
R'=H .R''=H R'=OH. R''=H R'=H. R''=OH R'=OH. R''=OH
黄酮类化合物的分类名称和
黄酮类化合物的分类名称和黄酮是一类萜类化合物，它们通常是花青素和其他萜类的类似物质，具有独特的黄色色素。
它们存在于植物的多个细胞，植物的颜色和芳香等特征受它们的影响。
黄酮在植物状态下可以发生细微的变化，可以分成几种类别。
首先，有一类黄酮叫做黄酮苷，它是由一种植物黄酮和一种无机碱如硫酸钠结合而成。
它具有抗氧化作用，可以抵抗室内污染，也可以在饮料中用作色素和香料，以提高口感和色泽。
其次，黄色醇或黄酮醇是一种醇类化合物，它具有芳香和艳丽的色泽，可以保留植物食用价值，同时也是一种抗氧化剂，可以保护植物不受自由基的侵害。
它还可以用作颜料，使植物看起来更加漂亮。
另外，还有一类叫做酯类或醛类黄酮，它们是由羧酸和羧醇结合而成，它们也具有抗氧化作用，可以保护植物不受高温的损害。
最后，还有一类叫做黄酮酮或苯酮，它们是酯类化合物，具有抗氧化作用，可以保护植物不受污染物的侵害。
总的来说，黄酮是一类重要的萜类物质，它们在植物中的含量至关重要，可以保护植物不受它们自身的衰变和室内污染的损害。
从营养角度来讲，黄酮也具有抗氧化和营养补充作用，可以提高食物的色泽和口感，增强植物的药用价值。
因此，黄酮类化合物在植物中有着重要的作用，它们可以在营养，药用和颜色等方面都发挥着重要的作用。
由于它们的独特性，它们也被广泛应用在食品，药品和植物颜色等方面，为植物的正常生长提供营养和保护。
综上所述，黄酮类化合物可以分成苷类，醇类，酯类和苯酮类等几种，它们都具有抗氧化作用，可以保护植物不受室内污染和其他自身损害，也可以为人类带来营养，色泽和口感。
因此，要想了解黄酮类化合物的类别，也要了解它们的特性和作用，这样才能够更好地应用它们。
黄酮类化合物
HO
O
OH
O
大豆素
六）噢口弄类； 硫磺菊素。定位与其它黄酮类不同。
67 HO
5 4
O2 CH
3 O
2' 3' OH 4' OH
6' 5'
硫磺菊素
七)花色素类； 矢车菊素、飞燕草素。
O+ HO
OH OH
OH OH OH
飞燕草素
八)黄烷醇类； 黄烷-3-醇的衍生物称儿茶素类，
OH
H
O
HO
OH
H
OH OH
黄酮类化合物的主要结构类型
类型
基本结构 类型
基本结构
黄酮 黄酮醇 二氢黄酮
O
O O
OH O O
O
二氢黄酮 醇 异黄酮
二氢异黄 酮
O OH
O
O
O
O
O
查耳酮
二氢查耳 酮
花色素
黄烷-3-醇
OH
黄烷-3,4-醇
O
OH
双苯吡酮
O
O+
A OH
O
橙酮
OH
O
OH OH
O
O
O C H
O
一）黄酮和黄酮醇类
黄酮类；
例：从槐花米中提取芦丁
槐花米加约6倍量水,煮沸,在搅拌下缓 缓加入石灰乳至pH8-9,在此pH条件下 微沸20-30分钟,乘热抽滤,残渣同上再加 4倍量水煎1次,乘热抽滤。合并滤液在 60-700C下,用浓硫酸调至pH=5,搅匀,静 置 24 小 时 , 抽 滤 。 沉 淀 物 水 洗 至 中 性 ， 60oC干燥得芦丁粗品，于水中重结晶， 70-80oC干燥得芦丁纯品。
第7章黄酮类练习题
第七章黄酮类化合物（一）选择题A型题（单选题）1．黄酮类化合物的准确定义为（）A．两个苯环通过三碳链相连的一类化合物 B．γ-吡喃酮C．2-苯基色原酮 D．2-苯基苯并α-吡喃酮 E．2-苯基苯并γ-吡喃酮2．色原酮环C2、C3间为单键，B环连接在C2位的黄酮类化合物是（）A．黄酮醇 B．异黄酮 C．查耳酮 D．二氢黄酮 E．黄烷醇3．聚酰胺TLC，以甲醇-水（1︰1 ）为展开剂，下列化合物Rf值最大的是（）A．山奈素 B．山奈素-3-O-鼠李糖苷 C．山奈素-3-O-葡萄糖苷D．山奈素-3-O-芸香糖苷 E．槲皮素4．银杏叶中含有的特征成分类型为（）A．黄酮醇 B．二氢黄酮 C．异黄酮 D．查耳酮 E．双黄酮5．黄酮类化合物大多呈色的最主要原因是（）A．具酚羟基 B．具交叉共轭体系 C．具羰基D．具苯环 E．为离子型6．二氢黄酮醇类化合物的颜色多是（）A．黄色 B．淡黄色 C．红色 D．紫色 E．无色7．二氢黄酮、二氢黄酮醇类苷元在水中溶解度稍大是因为（）A．羟基多 B．有羧基 C．离子型D．C环为平面型 E．C环为非平面型8．硅胶吸附TLC，以苯-甲酸甲酯-甲酸（5︰4︰1）为展开剂，下列化合物Rf值最大的是（）A．山奈素 B．槲皮素 C．山奈素-3-O-葡萄糖苷D．山奈素-3-O-芸香糖苷 E．山奈素-3-O-鼠李糖苷9．不能溶于氯仿的是（）A．槲皮素 B．杨梅素 C．芦丁 D．木犀草素 E．芹菜素10．黄酮苷和黄酮苷元一般均能溶解的溶剂为（）A．乙醚 B．氯仿 C．乙醇 D．水 E．酸水11．下列黄酮类酸性最强的是（）A．7-OH黄酮 B．4′-OH黄酮 C．3′，4′-二OH黄酮D．7，4′-二OH黄酮 E．6，8-二OH黄酮12．柱色谱分离具3-OH或5-OH或邻二酚羟基的黄酮类化合物，不宜用的填充剂是（）A．活性炭 B．硅胶 C．聚酰胺 D．氧化铝 E．纤维素13．鉴别黄酮类化合物最常用的显色反应是（）A．四氢硼钠反应 B．三氯化铝反应 C．三氯化铁反应D．盐酸-镁粉反应 E．二氯氧锆反应14．聚酰胺色谱分离下列黄酮类化合物，以醇（由低到高浓度）洗脱，最后流出色谱柱的是（）A．山奈素 B．槲皮素 C．芦丁 D．杨梅素 E．芹菜素15．聚酰胺色谱分离下列黄酮类化合物，以醇（由低到高浓度）洗脱，最先流出色谱柱的是（）A．山奈素 B．槲皮素 C．芦丁 D．杨梅素 E．芹菜素16．二氯氧锆-枸橼酸反应中，先显黄色，加入枸橼酸后颜色显著减退的是（）A．5-OH 黄酮 B．黄酮醇 C．7-OH黄酮D．4′-OH黄酮醇 E．7，4′-二OH黄酮17．四氢硼钠反应用于鉴别（）A．黄酮、黄酮醇 B．异黄酮 C．查耳酮D．二氢黄酮、二氢黄酮醇 E．花色素18．黄酮苷类化合物不能采用的提取方法是（）A．酸提碱沉 B．碱提酸沉 C．沸水提取D．乙醇提取 E．甲醇提取B型题（配伍选择，每个选项可能不止用一次）[19-23]A．芦丁 B．红花苷 C．儿茶素 D．银杏素 E．橙皮苷19．属于黄酮醇类化合物的是（）20．属于二氢黄酮类化合物的是（）21．属于查耳酮类化合物的是（）22．属于双黄酮类化合物的是（）23．属于黄烷-3-醇类化合物的是（）[24-28]A．黄酮类化合物 B．异黄酮类化合物 C．查耳酮类化合物D．花色素类化合物 E．橙酮类化合物24．葛根素是（）25．硫磺菊素是（）26．矢车菊素是（）27．大豆素是（）28．芹菜素是（）[29-33]A．无色 B．灰黄色 C．橙黄色 D．红色 E．蓝色29．黄酮苷的颜色通常为（）30．二氢黄酮的颜色通常为（）31．异黄酮的颜色通常为（）32．查耳酮的颜色通常为（）33．pH＞8.5 花色素颜色通常为（）[34-38]A．5%NaHCO3 B．5%Na2CO3 C．0.2%NaOH D．4%NaOH E．5%HCl 34．pH梯度萃取 5-OH黄酮应选用（）35．pH梯度萃取 6-OH黄酮应选用（）36．pH梯度萃取 7-OH黄酮应选用（）37．pH梯度萃取 4′-OH黄酮应选用（）38．pH梯度萃取 7，4′-二OH黄酮应选用（）[39-43]葡聚糖凝胶分离下列黄酮类化合物，以甲醇-水混合溶剂梯度洗脱：A．3，5，7-三羟基黄酮B．3，5，7，4′-四羟基黄酮C．3，5，7，3′，5′-五羟基黄酮D．3，5-二羟基-7-O-芸香糖基黄酮苷E．3，5-二羟基-7-O-葡萄糖基黄酮苷39．首先被洗出的是（）40．第二被洗出的是（）41．第三被洗出的是（）42．第四被洗出的是（）43．最后被洗出的是（）[44-48]A．芦丁 B．槲皮素 C．二者均是 D．二者均不是44．可溶于石油醚（）45．可用沸水提取（）46．与二氯氧锆反应显黄色，加枸橼酸后颜色不褪（）47．可用碱溶酸沉法提取（）48．Molisch反应生成棕色环（）[49-53]A．3-OH及5-OH B．邻二酚羟基 C．二者均是 D．二者均不是49．可与AlCl3试剂反应的黄酮类化合物（）50．可在HCl酸性条件下与AlCl3试剂反应的黄酮类化合物（）51．AlCl3+HCl紫外光谱与甲醇谱相同，示黄酮（醇）类化合物无（）52．AlCl3+HCl紫外光谱与AlCl3谱相同，示黄酮（醇）类化合物无（）53．AlCl3+HCl紫外光谱与AlCl3谱不同，示黄酮（醇）类化合物有（）（二）简答题1．写出黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）、异黄酮、查耳酮、花色素的基本母核。
黄酮类化合物
黄酮类化合物黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。
此外，它还常与糖结合成苷。
多数科学家认为黄酮的基本骨架是由三个丙二酰辅酶A和一个桂皮酰辅酶A生物合成而产生的。
经同位素标记实验证明了A环来自于三个丙二酰辅酶A，而B环则来自于桂皮酰辅酶A[1]。
1、分类：根据中央三碳链的氧化程度、B-环连接位置（2-或3-位）以及三碳链是否构成环状等特点，可将主要的天然黄酮类化合物分类：黄酮类(flavones)、黄酮醇(flavonol)、二氢黄酮类(flavonones)、二氢黄酮醇类(flavanonol)、花色素类(anthocyanidins)、黄烷-3，4二醇类(flavan-3,4-diols)、双苯吡酮类(xanthones)、查尔酮(chalcones)和双黄酮类(biflavonoids)等十五种。
另外，还有一些黄酮类化合物的结构很复杂，其中包括榕碱及异榕碱等生物碱型黄酮。
2、理化性质：天然黄酮类化合物多以苷类形式存在，并且由于糖的种类、数量、联接位置及联接方式不同可以组成各种各样黄酮苷类。
组成黄酮苷的糖类包括单糖、双糖、三糖和酰化糖。
黄酮苷固体为无定形粉末，其余黄酮类化合物多为结晶性固体。
黄酮类化合物不同的颜色为天然色素家族添加了更多色彩。
这是由于其母核内形成交叉共轭体系，并通过电子转移、重排，使共轭链延长，因而显现出颜色。
黄酮苷一般易溶于水、乙醇、甲醇等级性强的溶剂中；但难溶于或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。
糖链越长则水溶度越大。
黄酮类化合物因分子中多具有酚羟基，故显酸性。
酸性强弱因酚羟基数目、位置而异。
3、显色：1.盐酸-镁粉（或锌粉）反应为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应，反应机理现在认为是因为生成了阳碳离子缘故[1]。
2.四氢硼钠（NaBH4）是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂，产生红～紫色。
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----黄酮类的提取和分离
Flavonoid s
第七章 黄酮类化合物
1 概述 2 黄酮类化合物的结构和分类 3 黄酮类化合物的理化性质 4 黄酮类化合物的提取和分离 5 黄酮类化合物的检识和结构鉴定
2
.
黄酮类化合物的提取和分离
提取
原理：黄酮类化合物的溶解性和酸性 相似相溶与酸碱理论
.
黄酮类化合物的提取和分离 活性炭吸附法
原理：活性炭吸附黄酮苷类化合物 用途：主要用于含量较高的黄酮苷类的精制 操作：植物的甲醇提取物中，分次加入活性炭，
搅拌，静置，定性检查上清液无黄酮反应时为止。 过滤，收集活性炭，依次用沸水、沸甲醇、7%酚/水、 15%酚/醇溶剂进行梯度洗脱，对各部分洗脱液进行定 性检查。
酸性：7,4′-OH＞ 7-或4′-OH ＞一般酚OH＞5-OH
溶于5%NaHCO3 溶于5%NaCO3 溶于不同浓度NaOH
16
.
黄酮类化合物的提取和分离 梯度pH萃取法
乙醚液
5% NaHCO3
乙醚液 碱液(7,4’-二OH黄酮)
5% Na2CO3
乙醚液 碱液(7或4’-OH黄酮)
0.2% NaOH
➢ 原理：酚羟基与碱成盐，溶于水；加酸后析出 ➢ 碱： 常用Ca(OH)2，即石灰乳(石灰水) ➢ 优点 A：使含酚羟基化合物成盐溶解
B：使含羧基杂质（果胶、粘液质、蛋白质等） 形成沉淀
➢ 注意 a：提取时，碱液浓度不宜过高。
b：加酸酸化时，酸性也不宜过强。
➢ 应用：芦丁和槲皮素的提取、分离和鉴定
6
芹菜素
5,7,4’－三OH
5.3
木犀草素
5,7,3’,4’－四OH 6.3
槲皮素
3, 5,7,3’,4’－五 OH
8.3
杨梅素
3, 5,7,3’,4’,5’－ 六OH
9.2
山奈酚-3-半乳糖鼠李糖-7-鼠 李糖苷
三糖苷
3.3
槲皮素-3-芸香糖苷
双糖苷
4.0
槲皮素-3-鼠李糖苷 14
单糖苷
4.9
.
黄酮类化合物的提取和分离 葡聚糖凝胶柱色谱
乙醚液 碱液(一般酚OH黄酮)
4% NaOH
乙醚液 碱液(3或5-OH黄酮)和分离 金属盐络合法
原理：利用分子中某些特定官能团性质进行分离 具有邻二酚羟基的成分，用醋酸铅沉淀 不具有邻二酚羟基的成分，用碱式醋酸铅沉淀
具有邻二酚羟基的黄酮类化合物还可以与硼酸反应形成 溶于水的硼酸络合物，可以与不具有邻二酚羟基的其它 黄酮类化合物分离
➢ 常用洗脱剂：
碱性水溶液（0.1mol/L NH4OH），盐水溶液(0.05mol/L NaCl) 醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水，乙醇等。 其它溶剂：含水丙酮、甲醇-氯仿(凝胶会膨胀， 体积变大)。
13
.
黄酮类化合物在Sephadex-LH20(甲醇)上的Ve/Vo
黄酮类化合物
取代情况
Ve/Vo
大部分黄酮苷类可以用7%酚/水洗下。
7
.
黄酮类化合物的提取和分离 分离方法
极性 氢键 分子大小（量） 酸性 特殊结构
硅胶 聚酰胺 柱色谱法 凝胶 梯度pH萃取法 金属盐络合法
8
.
黄酮类化合物的提取和分离 硅胶柱色谱
硅胶是一种高活性吸附材料，其化学分子式为mSiO2·nH2O 应用范围：
主要分离小极性和中等极性的化合物，应用最为广泛。
原理： 利用黄酮类与其它杂质极性 不同，选不同溶剂进行萃取
药材
水或醇-水，加热提取
提取液
浓缩，加3-4倍醇
醇水液
沉淀（水杂）
浓缩，回收醇，加水
水液
依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取
石油醚层
叶绿素等脂 溶性成分
氯仿层
黄酮苷元
乙酸乙酯层
大极性苷元 小极性的苷
5
正丁醇层
黄酮苷
水层
多糖 蛋白质
.
黄酮类化合物的提取和分离 碱提酸沉法
规律：
➢苷元的羟基数越多，Ve/Vo越大，越
难以洗脱。
吸附作用
➢苷的分子量越大, 其上联结糖的数目
越多,Ve/Vo 越小, 容易洗脱。
分子筛原理
➢苷比苷元先洗脱。
15
.
黄酮类化合物的提取和分离 梯度pH萃取法
原理： 黄酮类化合物具有酸性、且不同数目和不同位置的
酚羟基的酸性强弱不同 适用范围：适用于分离酸性强弱不同的黄酮苷元
洗脱剂：有机溶剂（氯仿-甲醇，极性小） 含水溶剂（甲醇-水，极性大）
先洗脱：游离黄酮（苷元，极性小）
苷（极性大）（柱色谱分离）
Rf值： 苷元 > 苷
苷元 < 苷（TLC色谱鉴别）
11
.
正相与反相层析
硅胶 固定相（硅醇）极性 > 流动相（醇）极性时为正相 聚酰胺 固定相（聚酰胺脂肪链）极性 < 流动相（醇水）极性时为反相
提取：
苷元：极性小的溶剂，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等
回流提取
苷及极性大的苷元：
用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、醇-水加热提取 极性稍大的甙元一般指：羟基黄酮、双黄酮、 橙酮、查尔
酮
多糖苷类：一般用沸水提取
3
.
黄酮类化合物的提取和分离
粗分
➢溶剂萃取法（系统分离法） ➢碱提酸沉法 ➢炭粉吸附法
4
.
黄酮类化合物的提取和分离 溶剂萃取法
异黄酮＞二氢黄酮醇＞黄酮＞黄酮醇。
➢ 分子中芳香程度高、共轭双键多，则聚酰胺对其的吸附力
强，故难于洗脱。 应用范围：适合各种类型的黄酮类化合物，包括苷、苷元、
查耳酮及二氢黄酮
10
.
聚酰胺“双重色谱”原理
正相色谱
反相色谱
苷与苷元聚 酰胺色谱
聚酰胺：极性固定相（极性酰胺基团） 非极性固定相（非极性脂肪链）
异黄酮、二氢黄酮（醇）、高度甲基化（乙酰化）的黄酮 及黄酮醇
多羟基黄酮、黄酮醇及其苷类：硅胶加水去活化
吸附规律：
极性大吸附能力强
e g ： A 苷元 B 二糖苷 C 单糖苷
Rf：A > C > B
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黄酮类化合物的提取和分离 聚酰胺柱色谱
原理：氢键吸附（作用） 洗脱规律：（先—后）
➢ 母核上羟基增加，洗脱顺序递减 ➢ 羟基数目相同时，有缔合羟基 > 无缔合羟基 ➢ 苷元相同：三糖苷 > 双糖苷 > 单糖苷 > 苷元 ➢ 不同类型黄酮类化合物的洗脱先后顺序为：
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从柠檬果皮中分离降血压有效成分 提取分离实例1
聚
酰
硅
胺
胶
TLC TLC
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黄酮类化合物的提取和分离 葡聚糖凝胶柱色谱
➢ 常用型号：Sephadex-G和Sephadex-LH20 ➢ 原理：吸附作用和分子筛
对游离黄酮，主要是吸附作用, 吸附程度取决于游离酚羟基的 数目，苷元的羟基数目越多，越难洗脱。 对黄酮苷，主要是分子筛原理, 洗脱时按分子量由大到小先后 洗脱下来。