从新鲜牛奶中提取_乳球蛋白
一种从鲜奶中分离天然乳清蛋白的方法及应用[发明专利]
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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910015705.3(22)申请日 2019.01.08(71)申请人 东北农业大学地址 150030 黑龙江省哈尔滨市香坊区木材街59号(72)发明人 郭明若 程建军 蒋世龙 谢庆刚 田木 王皓 周欣慧 赵善舶 宋晓 (74)专利代理机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211代理人 邓宇(51)Int.Cl.A23C 9/16(2006.01)A23C 7/04(2006.01)A23J 1/20(2006.01)(54)发明名称一种从鲜奶中分离天然乳清蛋白的方法及应用(57)摘要一种从鲜奶中分离天然乳清蛋白的方法及应用，属于乳制品的生产技术领域。
针对现有分离方法破坏鲜奶中乳清功能性质的问题，本发明提供了一种从鲜奶中分离天然乳清蛋白的方法，包括以下步骤：1)脱脂：将鲜奶离心脱脂，获得脱脂鲜奶，所述鲜奶为牛奶或山羊奶；2)微滤：脱脂鲜奶利用微滤膜进行微滤，微滤后截留液为酪蛋白溶液，透过液为乳清；3)超滤：将乳清经超滤膜进行超滤，超滤后截留液为乳清蛋白浓缩液；4)脱盐：将浓缩乳清蛋白脱盐后得到天然乳清蛋白。
在分离过程中没有经过相变，保留乳清蛋白天然的功能性质，可以用于婴儿奶粉的生产。
权利要求书1页 说明书3页CN 110663773 A 2020.01.10C N 110663773A1.一种从鲜奶中分离天然乳清蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)脱脂：将鲜奶离心脱脂，获得脱脂鲜奶，所述鲜奶为牛奶或山羊奶；2)微滤：脱脂鲜奶利用微滤膜进行微滤，微滤后截留液为酪蛋白溶液，透过液为乳清；3)超滤：将乳清经超滤膜进行超滤，超滤后截留液为乳清蛋白浓缩液；4)脱盐：将乳清蛋白浓缩液脱盐后得到天然乳清蛋白。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述脱脂是指将鲜奶加热到45-55℃，离心脱脂，得到脱脂鲜奶和稀奶油。
β 乳球蛋白生产工艺
β 乳球蛋白生产工艺
β 乳球蛋白是一种重要的乳制品成分，其生产工艺一般包括以下几个步骤：
1. 乳清的提取，β 乳球蛋白主要存在于乳清中，因此首先需要从牛奶中提取乳清。
这通常通过离心、过滤和超滤等物理方法进行。
2. 蛋白分离，在乳清中，β 乳球蛋白通常与其他蛋白质混合在一起，需要进行分离和纯化。
这一步通常通过离子交换层析、凝胶过滤和超滤等技术来实现。
3. 浓缩和干燥，分离得到的β 乳球蛋白溶液需要进行浓缩和干燥，以便于后续的加工和运输。
这一步通常通过膜浓缩和喷雾干燥等技术来实现。
4. 加工和成型，浓缩干燥后的β 乳球蛋白可以根据需要进行加工和成型，例如制成粉末、颗粒或液体形式，以便于食品、保健品或医药品等行业的应用。
在整个生产工艺中，需要严格控制各个环节的操作参数，包括温度、pH 值、搅拌速度等，以确保β 乳球蛋白的质量和产量达到预期的要求。
同时，生产过程中需要符合相关的食品安全和质量管理标准，确保产品的安全性和可追溯性。
另外，一些先进的生产工艺技术，如超临界流体技术和膜分离技术等，也在β 乳球蛋白生产中得到了应用，以提高产率和产品质量。
总的来说，β 乳球蛋白的生产工艺是一个复杂的过程，需要综合运用物理、化学和工程学等多个领域的知识和技术。
牛奶蛋白实验报告
一、实验目的1. 学习从牛奶中提取蛋白质的方法；2. 掌握蛋白质的鉴定方法；3. 了解牛奶蛋白的成分和性质。
二、实验原理牛奶是一种含有多种营养成分的乳制品，其中蛋白质是重要的营养成分之一。
牛奶蛋白主要包括酪蛋白、乳清蛋白和乳球蛋白等。
本实验采用酸沉淀法从牛奶中提取蛋白质，并通过颜色反应、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法对提取的蛋白质进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜牛奶、醋酸、氢氧化钠、硝酸、茚三酮、SDS、聚丙烯酰胺凝胶、凝胶成像系统等；2. 实验仪器：烧杯、玻璃棒、离心机、pH计、电子天平、电泳仪、凝胶成像系统等。
四、实验步骤1. 提取牛奶蛋白（1）称取10g新鲜牛奶，加入50mL烧杯中；（2）用玻璃棒搅拌，缓慢加入1mol/L的醋酸溶液，使pH值降至4.5；（3）继续搅拌，观察白色沉淀的形成；（4）将混合物转移至离心管中，于3000r/min离心10min；（5）弃去上清液，保留沉淀；（6）将沉淀用蒸馏水洗涤两次，去除杂质；（7）将沉淀转移至烧杯中，加入适量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌溶解。
2. 鉴定牛奶蛋白（1）颜色反应鉴定① 取1mL提取的牛奶蛋白溶液，加入1mL 0.1mol/L的氢氧化钠溶液，观察颜色变化；② 取1mL提取的牛奶蛋白溶液，加入1mL 0.1mol/L的硝酸溶液，观察颜色变化；③ 取1mL提取的牛奶蛋白溶液，加入1mL茚三酮溶液，加热至50℃，观察颜色变化。
（2）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定① 准备SDS-聚丙烯酰胺凝胶；② 将提取的牛奶蛋白溶液加入样品缓冲液，混匀；③ 加热样品至95℃，使蛋白质变性；④ 将样品加入凝胶孔中，进行电泳；⑤ 电泳结束后，用凝胶成像系统观察蛋白质条带。
五、实验结果与分析1. 颜色反应鉴定结果（1）加入氢氧化钠溶液后，牛奶蛋白溶液呈现红褐色；（2）加入硝酸溶液后，牛奶蛋白溶液呈现黄色；（3）加入茚三酮溶液后，加热至50℃，牛奶蛋白溶液呈现蓝紫色。
牛奶中过敏原的提取与纯化 修订
牛乳中过敏原的提取与纯化牛奶的主要过敏原包括：酪蛋白（最主要的过敏原）、β-乳球蛋白和α-乳白蛋白[1,2]；一、从牛乳中提取酪蛋白的方法1. 仪器设备：法国Tami无机陶瓷膜分离装置、离心泵、储罐、抽滤装置、自动控温加热装置、电子秤、大型离心机、喷雾干燥塔等。
2. 原料：市售新鲜牛奶3. 试剂：无水乙醇、无水乙醚、0.01mol/L PBS（pH=7.4）、乙醇与乙醚混合液：乙醇:乙醚=1:1（体积比）4. 预处理：在55℃离心分离得到的脱脂乳巴氏杀菌，脱脂乳在陶瓷膜分离之前预热至50 ℃恒温1h以平衡成分。
然后对脱脂乳进行陶瓷膜的分离，如图1所示。
采用0.14μm陶瓷膜微滤过程使得水分、乳糖、β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、可溶性矿物质及非蛋白氮等成分成为透过液。
这样，透过液用来提取β-乳球蛋白、α-乳白蛋白产品。
与此同时，截留液富集了酪蛋白粗品[3]。
5. 进一步提取：等电点沉淀法提取酪蛋白[1,4,5]原理：蛋白质在溶液中有两性电离现象。
假设某一溶液中含有一种蛋白质。
当p I=pH时该蛋白质极性基团解离的正负离子数相等，净电荷为0，此时的该溶液的pH值是该蛋白质的pI值。
某一蛋白质的p I大小是特定的，与该蛋白质结构有关，而与环境pH无关。
在此时，蛋白质之间的静电排斥力最小，溶解度最低。
利用蛋白质在pH值等于其等电点的溶液中溶解度下降的原理进行沉淀分级的方法称为等电点沉淀（isoelectric precipitation）。
操作：将预处理所得截留液加热到40℃，加入到同样40℃的PBS 中，用1mol/L HCl调节pH至4.7，此时有絮状的蛋白质沉淀析出。
将上述悬浮液冷却至室温，离心分离10min（15000r/min），除去上清液（乳清），得到酪蛋白粗制品。
二、酪蛋白的纯化[4,5]1. 用蒸馏水洗涤沉淀3次，离心10min（3000r/min），弃去上清液。
2. 在沉淀中加入3ml 95%的乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。
牛初乳中免疫球蛋白的提取与活性保持技术研究
美国人一直将牛初乳作为一种抗病食品食用。１９９５年，Ｌｅｈｔｏ Ｅ．等人在Ｉｍｅｍａｔｉｏｎａｌ Ｆ００ｄ
Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ杂志上撰文，首先提出动物初乳可作为一种功能性食品基料，立即引发了一个研究牛
初乳功能性食品的热潮。目前展现于世人面前的牛初乳已经是一种相当有前景的生长促进剂和提
高机体免疫能力的功能性食品或保健品，在大洋洲、亚洲及美国、英国、德国以及其他欧洲国家
２０００）：
１．２．２．１蛋白质及氨基酸
天然牛初乳富含蛋白质，特别是第一次挤出的初乳，其蛋白质含量可达常乳的４－８倍。根据 一级结构，牛初乳中的蛋白质可大致分为两大类：酪蛋白和乳清蛋白。酪蛋白沉淀之后牛初乳乳 清中主要蛋白组分包括血清蛋白、Ｂ．乳球蛋白、口乳白蛋白、免疫球蛋白以及一些胨化合物。乳 清蛋白中含有的大量免疫因子和生跃因子，如免疫球蛋白（ＩｇＧ）、乳铁蛋白（ＬＯ及胰岛素样生长因 子０ＧＦ）。另外，牛初乳蛋白质富含苏氨酸（ＴｈＯ、缬氨酸（ｖａｌ）、异亮氨酸Ｏｉｅ）、色氨酸（Ｔｒｙ）、赖氨
从新鲜牛奶中提取β-乳球蛋白
从新鲜牛奶中提取β-乳球蛋白
张睿;袁敏伟;史炳照
【期刊名称】《中国医药工业杂志》
【年(卷),期】1999(30)2
【摘要】用调ｐＨ至等电点的方法将脱脂牛乳中的酪蛋白除去，乳清用ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００凝胶过滤，得到较纯的β－乳球蛋白。
ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳显示一条带，并与β－乳球蛋白标准品的位置一致。
【总页数】3页(P51-53)
【关键词】β乳球蛋白;提纯;凝胶过滤;牛奶
【作者】张睿;袁敏伟;史炳照
【作者单位】上海医药工业研究院
【正文语种】中文
【中图分类】Q512.203
【相关文献】
1.凝胶电泳法(SDS-PAGE)测定乳与乳制品中β-乳球蛋白的含量 [J], 韩奕奕;黄菲菲;王建军;吕春
2.脱脂乳发酵过程中β-乳球蛋白和α-乳白蛋白抗原性变化规律 [J], 张颖;布冠好;郑喆;罗永康
3.壳聚糖法提取乳清粉中的β-乳球蛋白 [J], 牟德华;庞鹏;叶润
4.从新生小牛血清分离提取胎球蛋白 [J], 王贤辅;左渝萍;何赐科
5.虎杖提取物中白藜芦醇的定性定量分析及其与β-乳球蛋白相互作用的质谱研究[J], 李玲鹤;徐康宁;张文祥;王献
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牛乳酪蛋白提取
牛乳酪蛋白提取综合实验：从牛奶中分离乳脂、酪蛋白和乳糖一、引言牛奶约含有3.4％乳脂，经离心就可上浮，撇出乳脂层可加工奶油，剩余的即脱脂乳，可用于分离酪蛋白和乳糖。
牛奶中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。
酪蛋白在乳中是以酪蛋白酸钙-磷酸钙复合体胶粒存在，胶粒直径约为20～800 纳米，平均为100 纳米。
在酸或凝乳酶的作用下酪蛋白会沉淀，加工后可制得干酪或干酪素。
本实验利用加酸，当达到酪蛋白等电点pH=4.6 时，酪蛋白沉淀。
脱脂乳中除去酪蛋白后剩下的液体为乳清，在乳清中含有乳白蛋白和乳球蛋白，还有溶解状态的乳糖，乳中糖类的99.8%以上是乳糖，可通过浓缩、结晶制取乳糖。
二、实验材料和试剂1．新鲜牛奶。
2．试剂：10%醋酸，95%乙醇，乙醚，碳酸钙，5%醋酸铅溶液，10%氯化钠，0.5%碳酸钠，0.1mol/L，氢氧化钠，0.2%盐酸，饱和氢氧化钙溶液，米伦试剂。
米伦试剂的配制：将汞100g 溶于140ml(密度1.42)的浓硝酸中(在通风橱内进行)。
然后加两倍量的蒸馏水稀释。
三、实验步骤1. 从牛奶中分离乳脂及转变为奶油取20 mL新鲜牛奶，于普通生化离心机上3500rpm 离心5分钟，取出离心管后，小心将乳脂层与脱脂乳分离，将乳脂层冻结，然后回放到室温下，将要重新融化前，快速搅动使脂肪球膜破裂以及脂肪球膜蛋白变性，倾出释放出的少量水后，继续搅动形成油包水式的奶油。
称量后计算得率。
2. 从牛奶中分离酪蛋白将脱脂乳在恒温水浴中加热至40℃,边轻轻搅拌边慢慢加入10%醋酸溶液,使牛奶pH = 4. 7,放置冷却、澄清后,用尼龙布过滤或直接用玻璃棒挑出酪蛋白粗品。
滤液（乳清）留作乳糖的分离。
将酪蛋白粗品转入另一烧杯，加20ml蒸馏水，用玻棒充分搅拌，洗涤除去其中的水溶性杂质（如乳清蛋白，乳糖以及残留的缓冲溶液），离心后弃去上层液，加15ml乙醇，洗涤除去其中的磷脂，离心后弃去上层液，加15ml乙醚洗涤除去其中的脂肪, 离心后弃去上层液，待酪蛋白充分干燥后称量其重量,并计算酪蛋白的得率。
β-乳球蛋白 生产工艺
β-乳球蛋白生产工艺
β-乳球蛋白（β-lactoglobulin）是一种存在于乳制品中的蛋白质，主要存在于牛奶中。
其生产工艺包括以下步骤：
1. 牛奶收集：从奶牛、山羊或其他乳制品动物中收集新鲜的乳汁。
2. 分离乳清：通过离心等方法将乳汁中的乳清与乳脂分离开。
3. 蛋白质沉淀：将乳清中的蛋白质沉淀下来，可以通过酸、碱或酶的作用使蛋白质沉淀。
4. 分离β-乳球蛋白：通过过滤、离心、柱层析等方法将β-乳球蛋白从其他蛋白质中分离出来。
5. 纯化β-乳球蛋白：进一步纯化分离得到纯度更高的β-乳球蛋白。
可以使用各种技术，如离子交换层析、凝胶过滤层析、逆流层析等。
6. 浓缩和干燥：将纯化的β-乳球蛋白浓缩并干燥，以获得更稳定和长期保存的产品。
7. 包装和贮存：将干燥的β-乳球蛋白产品进行包装和贮存，以确保产品的质量和安全性。
需要注意的是，具体的β-乳球蛋白生产工艺可能因不同的生产厂家和产品而有所差异，上述步骤仅为一般性概述。
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氢化可的松 (1) 工业上多采用半生物合 1 实验部分
成法生产, 即由薯蓣皂素等天然原料先合成 化合物 S 的醋酸酯, 再利用梨头霉菌氧化; 氧 化产物经乙酸丁酯 5 次错流萃取得到 1 粗 品。由于氧化反应的选择性较差, 粗品中尚含 有其旋光异构体——表氢化可的松 (2) , 需再 用结晶分离提纯[1]。 国内生产厂家现多采用
色 谱分离柱 (上海锦华实验器械厂) , 高速离心机
(Beckm an 公 司) , 蛋 白 核 酸 检 测 仪 ( 华 阳 生 物 仪 器 厂) , V 162夹心式垂直电泳槽 (上海精益有机玻璃制品仪器厂)。
Sep hacryl S2200 (Pharm acia 公司) ,M ark 和 1 标准品 (Sigm a 公司) , 其他试剂均为分析纯。
A band of the p u rified p roduct on SD S2PA GE co rresponded w ith the loca t ion of standa rd Β2
lactog lobu lin. Key W ords Β2lactog lobu lin , p u rify, gel filt ra t ion
图 3 具 280 nm 吸收的 3 个洗脱峰的
SD S-聚丙烯酰胺凝胶电泳
1- M ark 2- 乳清冻干粉 3- 峰 1 4、7- 峰 2
图 1 乳清冻干粉 SD S-聚丙烯酰胺凝胶电泳 1、2- M ark 3、4- 1 标准品 5、6- 乳清冻干粉
7- 酪蛋白等电点沉淀物
3. 2 脱脂乳酪蛋白等电点沉淀物的主要蛋 白成分
上述工艺, 共萃取过程中使用萃取罐, 间歇操 1. 2 实验及分析方法
作, 萃取效率低; 结晶分离过程周期长, 能耗
过量 1 加去离子水, 微热, 电磁搅拌 0. 5
大, 操作繁复, 收率低。 本文提出一种低能耗 ～ 1 h 使尽量溶解。 冷却后过滤可得到室温
和操作简便的溶剂萃取分离法, 可克服上述 下 1 的饱和水溶液。 将有机溶剂与 1 的饱和
轻工业出版社, 1991∶6722673
PU R IF ICA T ION O F Β2LA CTO GLOBU L IN FROM FR ESH M IL K
ZHAN G R u i, YU AN M in2W ei, SH I B ing2Zhao
(S hang ha i Institu te of P ha rm aceu tica l Ind ustry , S hang ha i 200040)
2. 2 凝胶过滤提纯 1
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
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中国医药工业杂志 Ch inese Jou rnal of Pharm aceu ticals 1999, 30 (2)
从 脱 脂 乳 酪 蛋 白 等 电 点 沉 淀 物 SD S2 PA GE (图 1- 7) 可以看出蛋白条带 6 条, 其 中主要有两条, 分子量大约为 2. 5～ 3 万, 与 文献中报道的酪蛋白分子量相符[5], 表明该
5、8- 峰 3 6- 1 标准品
第 2 个洗脱峰 (图 3- 4、7) 主要只有 1 条 带, 与 1 标 准 品 的 位 置 一 致, 分 子 量 在 18000左右, 第 3 个洗脱峰 (图 3- 5、8) 主要 也只有 1 条带分子量在 14000 左右, 与文献 报道 Α2乳清蛋白的分子量一致。结果再一次 提示该介质对分离小分子蛋白质效果较好。
(S hang ha i Institu te of P ha rm aceu tica l Ind ustry , S hang ha i 200040)
ABSTRACT H um an p la sm inogen w a s p u rified from Cohn fract ion by affin ity ch rom a tog rap hy on L 2lysine2sub st itu ted Sep ha ro se 4B w ith 98% recovery and a sp ecific act ivity of 20 u m gp ro co rresponded to 3502fo ld p u rifica t ion. A p ho sp ha te buffer con ta in ing ep silon2am inocap ro ic acid w a s u sed a s the eluan t. SD S po lyacrylam ide gel elect rop ho resis show ed the m o lecu la r w eigh t of p la sm inogen w a s abou t 85000. A fter p la sm inogen w a s act iva ted w ith excessive st rep tok ina se, it s band d isapp ea red in the SD S2PA GE.
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2 黄来发. 蛋白饮料加工工艺与配方, 北京: 中国轻工业出 版社, 1996∶17218
3 《乳品工业手册》编写组. 乳品工业手册. 北京: 轻工业出 版社, 1987∶2852287
4 B randfo rd MM. A nal B iochem , 1976; 72∶248 5 菲尼马 O R. 食品化学. 王 璋等译. 第 2 版, 北京: 中国
摘要 用调 pH 至等电点的方法将脱脂牛乳中的酪蛋白除去, 乳清用 Sep hacryl S2200 凝胶过滤, 得到较纯的 Β2乳球蛋白。 SD S2聚丙烯酰胺凝胶电泳显示一条带, 并与 Β2乳球蛋白标准品的位置一 致。 关键词 Β2乳球蛋白 提纯 凝胶过滤
牛奶在婴儿食谱中是最普遍、最富营养 的饮品, 但据报道近 0. 5%～ 7. 5% 的婴儿会 发生对牛乳的过敏反应, 如湿疹、腹泻等。 不 但直接饮用牛奶的婴儿有可能产生此类过敏 反应, 即使是母乳喂养的婴儿, 如果母亲饮用 牛奶, 也有一定的发生比率。这种存在于牛乳 中的主要过敏原是 Β2乳球蛋白 (1)。为诊断对 1 过敏的病例, 必须先将 1 提纯。已有从乳清 中分离 1 的方法[1], 但本文仅用一步凝胶过 滤进行分离纯化, 有其独特的优点。 1 材料与试剂
ABSTRACT Β2L actog lobu lin w a s p u rified from lyop h ilized w hey w ith Sep hacryl S2200
gel filt ra t ion after ca sein rem oved from sk imm ed m ilk by ad ju st ing pH to it s isoelect ric po in t.
Key W ords hum an p la sm inogen, p u rifica t ion, affin ity ch rom a tog rap hy
[ 1997 年 12 月 19 日收稿 ]
从新鲜牛奶中提取 Β-乳球蛋白
张 睿 袁敏伟 史炳照
(上海医药工业研究院, 上海 200040)
全分开成具有 280 nm 吸收的 3 个峰 (图 2) , 这 3 个峰分离的效果满意。
图 2 Sephacryl S-200 280 nm 处洗脱图谱
以这 3 个洗脱峰分别进行 SD S2PA GE (图 3) , 第 1 个洗脱峰 (图 3- 3) 有 5 条主带, 分子量分布在 7、6、5、4 和 2. 5 万, 相当于乳 清冻干粉电泳 (图 3- 2) 的第 1、3、4、5、6 条 带。 它们分子量相差比较大, 但在 Sep hacryl S2200 色谱分离柱上不能分开, 是否可以认 为该色谱分离介质对分离 2. 5 万以上分子量 的蛋白质的效果较差。
Sep hacryl S2200 400 g, 溶涨后装柱 (2. 6 ×100 cm )。 蒸馏水过洗, 再用缓冲液 (0. 02 m o l L PB S+ 0. 08 m o l L N aC l) 平衡。 乳清 冻干粉 0. 5 g 溶于上述缓冲液 1 m l, 上样, 缓 冲液洗脱。用蛋白核酸仪在 280 nm 检测, 按 所得图谱分步收集洗脱液。 2. 3 SD S2聚丙烯酰胺凝胶电泳
2 方法与步骤 2. 1 乳清的获得[2, 3 ]
采购当天新鲜的全脂牛奶, 经适当加热 (30～ 45℃) , 高速离心除去上层奶油。脱脂乳 在温热条件下, 用 8 倍稀释浓盐酸调 pH 至 酪蛋白的等电点 (pH 4. 6) , 静置, 高速离心分 离酪蛋白沉淀, 得上清液, 即为乳清。 乳清经 硫酸铵沉淀、脱盐、冻干得乳清冻干粉。
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
中国医药工业杂志 Ch inese Jou rnal of Pharm aceu ticals 1999, 30 (2)
1. 1 材料与仪器
药用 1 (含量> 98% )、药用 2 (含量> 97% ) 及 1 粗品均 由国内某厂家提供。 1 粗品中 1 与 2 含量之比为 3. 5～ 4∶ 1, 此外尚含有少量其它甾体杂质[2 ]。
本工作中所用液相色谱为 Gilson2715H PL C 系统, 色 谱柱为 Zo rbax C8 反相色谱柱 (4 mm ×15 cm ) , 流动相为 70% 甲醇水溶液, 流速为 1. 0 m l m in, 检测波长为 241 nm。
参考文献[ 4 ]方法, 根据分离图谱的 3 个 蛋白峰, 分别合并, 进行 SD S2聚丙烯酰胺凝 胶电泳, 然后用考马斯亮蓝法染色。 3 结果与讨论 3. 1 乳清冻干粉的主要蛋白成分