麻疹、风疹IgM抗体检测原始记录
麻疹和风疹疑似病例血清标本实验室检测分析
麻疹和风疹疑似病例血清标本实验室检测分析了解巴南区网络直报疑似麻疹和风疹病例的实验室分类情况, 为消除麻疹制定相应的监测方案和控制策略提供科学依据。
方法对巴南区2008-2009年疾病监测信息报告管理系统中报告的疑似麻疹和风疹病例开展流行病学调查，实验室采用酶联免疫吸附试验方法，检测疑似麻疹和风疹病例急性期血清IgM抗体，并采用Excel2003软件对实验室诊断的麻疹和风疹病例流行病学资料进行分析。
结果共采集407份疑似风疹、麻疹病例血清标本中，麻疹IgM 阳性标本25份，阳性率6.14％，风疹IgM阳性标本150份，阳性率36.86％，麻疹IgM和风疹IgM双阳性标本1份，阳性率0.24%。
结论2008-2009年巴南区麻疹抗体阳性率较风疹阳性率低，应继续开展麻疹强化免疫等有效防控措施。
WHO将麻疹列为下一个拟被消除的传染病,《2006-2012年全国消除麻疹行动计划》提出在开展消除麻疹活动的同时，应有计划地开展风疹控制工作。
风疹作为与麻疹最易混淆的发热出疹性疾病，对其进行监测和控制，将对麻疹的控制工作起到积极的作用。
现通过对巴南区2008-2009年疾病监测信息报告管理系统中报告的疑似麻疹和风疹病例开展流行病学调查,并采集血清标本做实验室检测，分析巴南区疑似风疹和麻疹病例的流行病学特征、实验室分类情况，为消除麻疹阶段制定相应的监测方案和控制策略提供依据。
1 材料和方法1.1 标本来源血清标本来源于2008-2009年巴南区疾病预防控制中心和全区各医疗机构采集的麻疹、风疹疑似病例标本。
1.2 检测方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测麻疹IgM及风疹IgM，操作方法按照试剂说明书进行。
酶标仪设定波长450 nm，麻疹（风疹）病例血清标本的吸光度值和标准品的吸光度值的比值＜0.8判为阴性，≥1.1为阳性。
1.3 试剂及仪器麻疹、风疹IgM酶联免疫试剂盒为欧蒙（德国）医学实验诊断股份公司生产；酶标仪和洗板机由郑州博赛奥地利Autobio公司生产。
风疹病毒IgM抗体( 抗-RV·IgM )标准操作程序SOP文件
4，显色：每孔加底物和显色液各一滴，37 C5分钟。以阳性对照出现明显蓝色为准。
[结果判定]
1、目测法：在白色背景下观察各孔颜色，明显兰色为阳性，无色或极淡兰色为阴性。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-SOP-01-33
[原理]
本试剂盒采用捕获法检测人血清或血浆中的抗-RV·IgM。具有简便、快速等优点。
[试剂厂家]
深圳市绿瀚生物技术有限公司
[，终止液
3，洗涤液8、阴阳对照血清
4、酶结合物
5、底物
[试剂的稳定性与贮存]
试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。
风疹病毒是风疹德国麻疹的病原体是一种以皮疹及耳后枕下淋巴结肿大为特征发生在儿童和青少年的急性发热性疾病感染一次后能获地终身免疫
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-SOP-01-33
风疹病毒IgM抗体(抗-RV·IgM )
版序：ABCD
页码：第1页，共2页
[前言]
风疹病毒为ToRCH系列病毒之一，母体在妊娠早期感染可致胎儿畸形、早产、流产等。该试剂为优生优育试剂之一，主要用于免疫水平的调查。
风疹病毒IgM抗体(抗-RV·IgM )
版序：ABCD
页码：第2页，共2页
2、酶标仪检测（选择波长450nm）：每孔加终止液一滴，用空白孔校零，测定各孔OD值。
临界值（C.O.）=2.1×阴性对照OD值
（1）样本OD值S/C.O.≥1.0判为阳性；
（2）样本OD值S/C.O.＜0.9判为阴性。
（3）样本OD值S/C.O.介于0.9与1.0之间，判为可疑，需重复检测。
衢州市2007-2009年麻疹疑似病例IgM抗体检测结果分析
Analyzing results of Ig-M antibody in suspected measles in Quzhou during 2007～2009作者： 叶承华
作者机构： 浙江省衢州市疾病预防控制中心,浙江衢州324000
出版物刊名： 中国农村卫生事业管理
页码： 1049-1050页
年卷期： 2010年 第12期
主题词： 麻疹疑似病例 流行特征 IgM抗体
摘要：目的：对2007-2009年衢州市麻疹疑似病例进行IgM抗体检测,通过结果分析麻疹流行特征,为制定防治措施提供依据。
方法：采用酶联免疫吸附试验（EL ISA）对2007-2009年麻疹疑似病例血清标本进行IgM抗体检测。
结果：2007-2009年共检测疑似病例259份,确诊149份,阳性率57.53%,2009年麻疹阳性率低于其它年。
确诊病例的年龄主要集中在20~40岁,发病年龄有后移现象。
麻疹发病高峰仍在冬春季。
结论：保持疫苗高质量的常规免疫,重点加强大年龄组人群的强化免疫,并加大强化的力度,加强实验室的检测,有效控制麻疹的流行。
467份疑似血清标本麻疹＼风疹IgM抗体实验室监测结果分析
467份疑似血清标本麻疹＼风疹IgM抗体实验室监测结果分析目的了解芜湖市2009年麻疹、风疹病例的病原特点，探讨麻疹、风疹发病原因。
方法用ELISA法分别对467份疑似血清标本进行了麻疹、风疹IgM抗体检测。
结果467份标本分别检出麻疹IgM抗体阳性189份，风疹IgM抗体阳性115份。
结论芜湖市2009年麻疹、风疹病原特点基本相同，但存在着地区分布、发病时间、年龄分布之间的差异。
标签：麻疹；风疹；IgM麻疹是由麻疹病毒引起的急性呼吸道传染病，安徽省芜湖市自实施儿童计划免疫和免疫规划以来，麻疹发病率大幅下降。
但2009年麻疹疫情出现了反复波动，为了解芜湖市2009年麻疹发病原因，制定有效的防治措施提供科学依据，达到顺利实现消除麻疹的目标。
现将分析结果报告如下。
1 材料与方法1.1 材料来源芜湖市麻疹监测系统和麻疹实验室检测数据库1.2 诊断标准麻疹的诊断标准依据《全国麻疹监测方案》。
1.3 血清标本的采集标本来自2009年芜湖市各县(区)疾病控制中心和临床医疗机构送检的麻疹疑似病例血清标本，合格血清标本指病例出疹后4~28 d内采集，血清标本无明显溶血现象，无污染，分离的血清量大于50 uL，血标本冷藏运输(4°~8°)或冷冻保存。
1.4 检测方法用抗体捕捉酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定麻疹IgM抗体和风疹IgM抗体，检测试剂由安徽省疾病控制中心计划免疫科提供，检测试剂的产家为珠海海泰生物有限公司。
2 结果主要分布在镜湖区、弋江区、芜湖县、南陵县，共334例，占71.5%。
尤其是经济发达，交通便捷，流动人口密集的镜湖区、芜湖县、南陵县病例数占55.8%。
见表1。
2.2 时间分布芜湖市2009年全年12个月均有病例报告，发病数3~6月份为全年高峰期，特别是4月份为最高峰，这和不同城市报道的数据基本一致。
从统计中可发现4月份麻疹发病数和风疹发病数同样最多，4月份麻疹发病数占全年的30%，而风疹发病数占全年的40%。
上海市闵行区108例疑似麻疹病例IgM抗体测定结果分析
上海市闵行区108例疑似麻疹病例IgM抗体测定结果分析麻疹是一种传染性强的急性呼吸道传染病，自60年代使用麻疹疫苗以来，麻疹的流行规律发生了很大变化，如流行季节不明显、症状轻微、发病年龄后移、易与其他发热出疹性疾病相混淆。
2006年卫生部发布了《2006～2012年全国消除麻疹行动计划》，承诺于2012年消除麻疹[1]。
为了实现这一目标及对麻疹疑似病例做出科学诊断，探讨麻疹免疫策略及控制麻疹疫情提供依据，我们对送至闵行区疾病预防控制中心的157名的疑似麻疹病例的血清进行了麻疹IgM抗体检测。
现将结果报告如下：1 材料与方法1.1 资料来源闵行区疾病预防控制中心免疫预防科的个案调查表和微生物检验科的血清学检验报告。
1.2 调查对象2011年到闵行区各级医院就诊的并临床诊断为疑似麻疹患者，共计108例。
1.3 病例定义根据卫生部《全国麻疹监测方案(试行)》规定的标准，实验室检出麻疹IgM抗体阳性的为确诊麻疹病例，麻疹IgM抗体阴性的为非麻疹病例(临床诊断为疑似麻疹病例)。
1.4 检测方法抽取患者静脉血5 ml，分离血清后于-20℃保存。
利用包被在固相载体上的抗人IgM μ链抗体，捕捉待测血清中的IgM，再用麻疹/风疹病毒抗体和已知的酶标麻疹/风疹病毒抗体检测血清中的IgM(试剂盒采用珠海经济特区海泰生物制药有限公司生产的麻疹IgM抗体酶免检测试剂盒及风疹IgM抗体酶免检测试剂盒)。
1.5 诊断标准1.5.1 麻疹诊断标准样品所测OD值/阴性对照OD值≥2.1，判断为阳性；否则为阴性。
1.5.2 风疹诊断标准样品所测OD值≥临界对照平均值，判断为阳性；否则为阴性。
1.6 统计学方法以SPSS 11.5统计软件进行统计分析。
2 结果此次调查的108例疑似麻疹患者，男91例，女66例，其中年龄1 d~57岁。
这些疑似患者中，无免疫史46例(42.6%)，有免疫史17例(15.7%)，免疫史不详的45例(41.7%)。
麻疹、风疹病毒IgM检测详细操作步骤
麻疹、病毒IgM检测详细操作步骤:将试剂盒取出，放室温平衡30分钟以上。
1.收到样本后,大致用天平配平,离心，用一次性吸管吸出血清，放入罗口离心管中。
.2.将血清样本从1开始编号。
3.将写好编号的血清样品，依次排列于麻疹血清盒中。
4.将相同数量的白色塑料管，排列于麻疹血清盒中的血清样本后。
5.用1000毫升的加样枪调至990微升，10微升的加样枪调至10微升。
200微升的加样枪调至100微升。
6.用990微升的加样枪，加样品稀释液990微升（绿色液体）于白色塑料管中，一份样品一管。
7.需要5+样本数量的包被孔。
将这些预包被孔板放于96孔板架上。
8.加样：加10微升第一份血清样本于白色塑料管中，混均，用100微升的加样枪加100微升混匀液于包被孔第6孔中；加10微升第二份血清样本于白色塑料管中，混均，用100微升的加样枪加100微升混匀液于包被孔第7孔中；依次类推。
9.第1孔留做空白对照，加100微升阳性对照于包被孔第2孔，加100微升阴性对照于包被孔3、4、5孔。
10.在微型振荡器以最低震速，震荡几秒钟。
11.放于水浴箱中37度60 分钟。
(温浴时间,打开洗板机)12.取出96孔板架，放于洗板机上，按2键，找到Run Procedure, 按4键，找到MVIGM.按5键，出现8列，按4键，到96孔板架上的列数。
按5键，洗板开始。
13.洗板结束后，拍干。
除空白孔外加酶标记物各1滴。
放于水浴箱中37度60 分钟。
14.洗板同12步骤。
15.洗板结束后，拍干。
各孔（包括空白对照孔）加显色液A 、B各1滴。
置37度水浴箱30分钟。
16.取出后，立刻每孔（包括空白对照孔）加终止液1滴。
17.在微型振荡器以最低震速，震荡几秒钟。
18.擦干包被孔底的水珠，放于CODA中,进行读板。
19.选择桌面上酶标仪，双击，出现酶标仪界面。
选择reading, 点击OK, 出现对话框，选择Single, 450 nm 点击start. 开始读数.20.读数结束后,填出结果, 将结果选中复制.粘贴于公式中,打印.。
麻疹风疹诊断标准
麻疹风疹诊断标准集团公司文件内部编码：（TTT-UUTT-MMYB-URTTY-ITTLTY-麻疹（Measles）【WS296--2008】(2008-12-11发布，2009-06-15实施)3诊断依据3.1流行病学史在出疹前6d~21d与麻疹患者有接触史。
3.2临床症状（见附录C）3.2.1发热体温≥38℃。
3.2.2全身皮肤出现红色斑丘疹。
3.2.3咳嗽，流涕、喷嚏等上呼吸道卡他症状，并有畏光、流泪、结膜炎症状。
3.2.4皮疹自耳后、面部开始，自上而下向全身扩展，3d~5d内波及全身。
3.2.5起病早期（一般于病程第2d~3d）在口腔颊黏膜见到麻疹黏膜斑(Koplik斑)。
3.3实验室诊断3.3.18d~6周内未接种过麻疹减毒活疫苗而在血清中查到麻疹IgM抗体（见附录A）。
3.3.2恢复期患者血清中麻疹IgG抗体滴度比急性期有4倍或4倍以上升高，或急性期抗体阴性而恢复期抗体阳转（见附录A）。
3.3.3从鼻咽标本或尿液中分离到麻疹病毒，或检测到麻疹病毒核酸（参见附录B）。
4诊断原则典型麻疹病例可根据临床表现结合流行病学作出诊断，轻型麻疹病例需根据血清麻疹抗体的检测结果或麻疹病毒分离阳性或麻疹特异性基因检测结果作出诊断。
5诊断5.1疑似病例具备3.2.15.2临床诊断病例符合以下任何一项者:5.2.1疑似病例与实验室确诊病例没有流行病联系者。
5.2.2疑似病例未进行流行病学调查者。
5.2.3疑似病例在完成调查前失访/死亡者。
5.2.4疑似病例无实验室诊断结果且不能明确诊断为其他疾病者。
5.3流行病学诊断病例疑似病例无标本或标本检测结果为阴性，并同时具备3.1者。
5.4实验室确诊病例疑似病例同时具备3.3.15.5排除病例符合以下任何一项者：5.5.1麻疹疑似病例采集了合格血标本，经合格实验室检测麻疹IgM阴性，并与实验室确诊病例无流行病学联系。
5.5.2经实验室检测证实为其他疾病（如风疹等）。
麻疹风疹监测方案
监测指标
（一）监测系统敏感性指标。 以县为单位，排除麻疹风疹病例报告发病率达到2/10万以上。 （二）监测系统及时性指标。 监测病例报告后48小时内完整调查率达到80％以上，血标本 采集后3日内送达网络实验室的比例达到80％以上，实验室 收到标本后麻疹风疹IgM检测结果4日内报告率达到80％以 上。 （三）监测系统特异性指标。 监测病例血标本采集率达到80％以上；麻疹暴发疫情实验室 确诊率达到90％以上；麻疹暴发疫情病原学标本采集率达到 80％以上。
监测病例定义： 为发热、出疹，伴咳嗽、卡他性鼻炎、结膜 炎、淋巴结肿大、关节炎、关节痛症状之一 者，或传染病责任疫情报告人怀疑为麻疹或 风疹的病例。
监测病例分类
实验室确诊麻疹病例 符合下面条件之一的监测 病例，为实验室确诊麻疹病例。 ①血标本检测麻疹IgM抗体阳性者； ②病原学标本检测麻疹病毒核酸阳性或分离到麻疹 病毒者； ③恢复期血清麻疹IgG抗体滴度比急性期有≥4倍升 高，或急性期抗体阴性而恢复期抗体阳转者。
（一）病例报告。 传染病法定责任报告单位和责任疫情报告人发现监 测病例，应按照规定进行报告 （二）病例监测。 1.流行病学监测 （1）病例调查，每例监测病例都应进行流行病学 个案调查。负责调查的专业人员应在接到报告后48 小时内开展流行病学个案调查，填写“麻疹监测病 例流行病学个案调查”。
监测内容
资料管理与信息交流
（一）信息的录入和个案管理 流行病学个案调查信息由县级疾病预防控制中心于调查完成 后48小时内录入麻疹监测信息报告管理系统。流行病学调查 原始资料由县级疾病预防控制中心保存，实验室检测原始记 录由检测单位保存。 （二）信息分析与利用。 各级疾病预防控制中心应适时对监测资料进行汇总，综合分 析麻疹和风疹流行病学特征，评价当地人群免疫状况，发现 免疫接种薄弱地区和人群，提出相关工作建议，并及时将信 息反馈至下级单位，报告同级卫生行政部门和上级疾控机构。