自然流产患者绒毛组织中肝素结合性表皮生长因子免疫组化分析
早期自然流产患者底蜕膜绒毛外滋养细胞中IGFBP7、VEGF 的表达变化及意义
［ ９ ］ 巩超 ， 张小霓． 围手术期磷酸 肌酸钠对心肌 的保护机制 与影响
［ Ｊ ］ ． 中国医药指南 ， ２ ０ １ １ ， ９ （ １ ４ ） ： ３ １ － ３ ３ ．
『 １ ０ ］Ｓ ａ ｋ Ｖ Ａ，Ｂ ｏ ｂ ｋ ｏ ｖ Ｙ Ｇ，Ｓ ｔ ｒ ｕ ｍｉ ａ Ｅ，ｅ ｔ １． Ｍ ａ ｅ ｃ ｈ ａ ｎ ｉ ｓ ｍ ｏ ｆ ｅ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｎ ｃ
摘要 ： 目的 观察 早 期 自然 流 产 患 者 底 蜕 膜 绒 毛 外 滋 养 细 胞 （ Ｅ Ｖ Ｔ ）中胰 岛 素 样 生 长 因子 结 合 蛋 白 ７ （ Ｉ Ｇ Ｆ Ｂ Ｐ ７ ） 、 血管内皮 生长因子 （ Ｖ Ｅ Ｇ Ｆ ） 的表达变化 ， 并探讨 其意义 。方 法 早期 自然流 产患者 ２ ０例 （ 观察组 ） ， 人 工流产患者 ２ ０例 （ 对照组） ， 采用免疫 组化法 检测两 组患 者 Ｅ Ｖ Ｔ中 Ｉ Ｇ Ｆ Ｂ Ｐ ７ 、 Ｖ Ｅ Ｇ Ｆ 。结 果 观 察组及 对照组 Ｉ Ｇ — Ｆ Ｂ Ｐ ７免疫染色评分 （ Ｉ Ｒ Ｓ ） 分别为（ １ ０ ． ７ ５－ ４ － １ ． ２ ８ ） 、 （ ８ ． ６ ３±１ ． ０ ６ ） 分， Ｖ Ｅ Ｇ Ｆ Ｉ Ｒ Ｓ分 别 为 （ ５ ． ２ ５ ４ － １ ． ９ ８ ） 、 （ ７ ． ７ ５± ２ ． ２ ５ ） 分， 两组 比较 ， Ｐ均 ＜０ ． ０ ５ 。Ｐ ｅ ａ ｒ ｓ ｏ ｎ相关 分析 显示 ， 观 察组 Ｉ Ｇ Ｆ Ｂ Ｐ ７ 、 Ｖ Ｅ Ｇ Ｆ表 达无 相关 性 （ ｒ＝一０ ． ３ ２ ， Ｐ＝ ０ ． ４ ４ ） 。结 论 早期 自然流产患者 Ｅ Ｖ Ｔ中 Ｉ Ｇ Ｆ Ｂ Ｐ ７表达升高 ， Ｖ Ｅ Ｇ Ｆ表达 降低 ， 两指标表 达异 常可能与早 期 自然 流
复发性自然流产患者绒毛和蜕膜组织中SOCS-3和LIF表达情况观察
复发性自然流产患者绒毛和蜕膜组织中SOCS-3和LIF表达情况观察刁英杰【摘要】目的:观察复发性自然流产(Recurrent spontaneous abortion,RSA)患者绒毛膜和蜕膜组织中细胞因子信号传导抑制因子-3(Suppressor of Cytokine Signaling3,SOCS-3)和白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的表达情况.方法:选取复发性自然流产患者29例为研究组,避孕失败需人工流产妇女30例为对照组,用Western-blot法分别检测各组患者蜕膜和绒毛组织中SOCS-3和LIF 的表达情况.结果:研究组患者的绒膜和蜕膜组织中,SOCS-3的相对表达量较对照组显著下降(P<0.05);LIF的相对表达量明显低于对照组(P<0.05).结论:复发性自然流产发病的原因可能由患者的绒毛和蜕膜组织中SOCS-3表达水平均显著下降,引起细胞因子Th1与Th2比例失衡,从而引起胚胎免疫损伤作用和LIF表达下降使免疫保护作用减弱所致.【期刊名称】《中国民康医学》【年(卷),期】2016(028)006【总页数】2页(P80-81)【关键词】绒毛膜;RSA;SOCS3;LIF;Western-blot【作者】刁英杰【作者单位】佳木斯市抚远县寒葱沟镇医院,黑龙江佳木斯 156500【正文语种】中文【中图分类】R714.21复发性自然流产（Recurrent spontaneous abortion，RSA）指连续发生自然流产两次或以上者。
目前认为RSA可由多种病因共同作用引发，包括遗传、解剖、免疫、内分泌、环境、感染等方面，仍然有近50%RSA患者病因不明，其中免疫因素异常被认为是RSA发病的重要因素之一［1］。
较多研究已证实，母体的Th1型细胞因子可通过毒害胚胎，阻碍胚胎组织的早期发育。
Th2型细胞因子则可维持妊娠正常进行。
早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织内TNF-α和TGF-β1的表达
早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织内TNF-α和TGF-β1的表达付伟勤;卢国元【期刊名称】《江苏医药》【年(卷),期】2007(33)7【摘要】目的探讨自然流产患者母胎界面肿瘤坏死因子α(TNF-α)及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,从免疫学角度分析自然流产的发生因素.方法采用免疫组织化学技术半定量测定28例早期自然流产患者和28例正常妊娠妇女绒毛和蜕膜组织内TNF-α及TGF-β1表达强度.结果早期自然流产组细胞滋养层细胞及合体滋养细胞表达TNF-α强度均显著高于正常人工流产妇女(P＜0.01),而早期自然流产患者绒毛合体滋养细胞层表达TGF-β1强度显著低于正常人工流产妇女(P＜0.01).结论细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞TNF-α表达增加,提示在母胎界面局部发挥作用可能参与自然流产过程;早期自然流产患者绒毛合体滋养细胞层TGF-β1低表达可能与自然流产相关.【总页数】2页(P677-678)【作者】付伟勤;卢国元【作者单位】215002,苏州市计划生育指导中心;苏州大学附属第一医院【正文语种】中文【中图分类】R71【相关文献】1.CyclinB1在早期自然流产患者绒毛和胎盘蜕膜组织中的表达及与血清雌孕激素的相关性研究 [J], 唐莉;宿凌云;董云华;师义;雷毅;林娜2.细胞周期调节蛋白在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达及其与自然流产发生的相关性研究 [J], 钟菊晴;李海霞;3.细胞周期调节蛋白在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达及其与自然流产发生的相关性研究 [J], 钟菊晴;李海霞4.不明原因早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中Bcl-2和Fas蛋白的表达 [J], 刘敏;石运芝;王黎明5.反复早期自然流产患者绒毛、蜕膜组织中溶血磷脂酸受体3和环氧合酶2的表达[J], 韩省华;吴素清;李慧卿;李瑞珍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
复发性流产绒毛、蜕膜组织中tipe2、tnf-α、il-10的表达及意义
复 发 性 流 产 （ｒｅｃｕｒｒｅｎｔｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎ， ＲＳＡ）是指与同一性伴侣连续发生 ３次或 ３次以上 的自然流产，大多数为早期流产，少数为晚期流产， 发病率约 １％ ～５％［１］，严重者可导致不孕不育［２］。 复发性流产的原因包括胚胎染色体异常、免疫功能 异常、内 分 泌 功 能 异 常、子 宫 解 剖 异 常 等［３］。 越 来 越多的研究表明不明原因的自然流产与免疫因素相 关［４５］。胚胎作为同种异体移植物不被母体免疫排 斥是免疫学原理的例外；而妊娠的成功与否，取决于 母体与胚胎或胎儿之间的免疫调节［６］。Ｔｈｌ型细胞 分泌肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）等，可以促进机体的 细 胞 免 疫 应 答，也 参 与 了 自 身 免 疫 疾 病 发 病 过 程［７］。在妊娠过 程 中，Ｔｈ１细 胞 影 响 胚 胎 着 床 及 发 育，Ｔｈ１型细胞因子占优势会引起妊娠丢失［８］。Ｔｈ２ 型细胞则分泌白介素１０（ＩＬ１０）等，可以促进机体 的体液免疫应答，另一方面也参与自身免疫疾病的 发病过程，Ｔｈ２型细胞因子占优势有利于母胎免疫 耐受的产生和妊娠的维持。细胞因子维持胎儿和母 体免疫系统之间的平衡，一旦这种动态平衡被打破， 母体内的免疫系统对胚胎或胎儿的排斥反应由原来 的抑制转变为增强，就会引起病理性妊娠，严重者则 会发生 ＲＳＡ［９］。本课题通过测定 ＲＳＡ组和对照组 中绒毛及蜕膜组织中肿瘤坏死因子 α诱导蛋白２ （ＴＩＰＥ２）、ＴＮＦα、ＩＬ１０的 表 达 变 化，旨 在 研 究 复 发 性流产患者中 ＴＩＰＥ２通过对 Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞因子平衡 的影响，参与 ＲＳＡ的发生与发展。
中国生育健康杂志 ２０２０年第 ３１卷第 ３期 ｈｔｔｐ：／／ｃｊｒｈ．ｂｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
自然流产患者绒毛EVTs的基因芯片初步分析
文章编号：1003－6946（2012）06－431－04自然流产绒毛染色体核型分析的研究现状李阳洋1综述，章勤2审校（1．浙江中医药大学第一临床医学院，浙江杭州310053；2．浙江省杭州市中医院，浙江杭州310007）【摘要】自然流产的发病率日趋升高，其主要原因为染色体异常，分析胚胎染色体的核型对寻找自然流产的原因具有重要意义。
绒毛细胞染色体制片的培养法成功率高于直接法，但培养法的操作难度及成本亦高于直接法；自然流产的绒毛染色体异常核型中以非整倍体的发生最多见，其中16三体约占三体的1/3；自然流产、辅助妊娠后流产的绒毛染色体异常率分别都高于人工流产的绒毛染色体异常率；对于自然流产绒毛染色体异常与支原体、衣原体感染相关性及自然流产次数、年龄、孕周及胚胎性别与绒毛染色体核型的关系均尚无明确结论。
目前类似以上通过绒毛染色体分析寻找自然流产原因的研究很多，但可以治疗的原因并不多见，故还需结合临床的实验指标，寻找与绒毛染色体的相关性，进一步提高染色体分析的意义。
【关键词】自然流产；绒毛；染色体异常中图分类号：R715.5文献标识码：B自然流产是妇产科的一种常见病，近年来的调查估计其发生率约占临床妊娠的15% 20%，其中多数为早期流产（妊娠在12周前终止者）。
诱发自然流产的原因很多，涉及遗传、解剖、免疫、内分泌、感染甚至环境及其他未知因素等，其中遗传因素在自然流产的发生中起了相当大的作用。
本文综述分析了近几年关于自然流产绒毛染色体核型分析的研究现状。
1绒毛细胞培养及染色体分析技术在流产中的应用自然流产其病因可能有以下几种：遗传因素（染色体异常、遗传印记异常、单亲二倍体、偏斜X-染色体失活、单基因突变等）、子宫解剖异常（双角子宫或中隔子宫等）、免疫因素（如封闭抗体缺乏）、内分泌因素（孕激素分泌不足、前列腺素增多、甲状腺功能低下等）、感染因素（如TORCH感染）、血栓形成倾向、环境因素（情绪受强烈刺激）等，在这些因素当中，染色体异常占50% 60%［1］，为主要因素。
自然流产患者滋养细胞肝素表皮生长因子的表达及意义
自然流产患者滋养细胞肝素表皮生长因子的表达及意义胡昌东;归绥琪【期刊名称】《上海医学》【年(卷),期】2004(27)7【摘要】目的探讨自然流产患者滋养细胞肝素表皮生长因子 (HB EGF)的表达及其与滋养细胞增殖细胞核抗原 (PCNA)的关系。
方法选择自然流产患者和正常妊娠者各 2 0例 ,采用免疫组织化学法分析滋养细胞HB EGF和PCNA的表达。
结果HB EGF主要存在于细胞质 ,合体滋养层和细胞滋养层均有表达 ,部分流产滋养细胞不表达。
自然流产患者滋养细胞HB EGF和PCNA的表达显著低于正常妊娠者 (P <0 .0 1) ,成正相关 (r =0 .4 5 4 ,P <0 .0 1)。
结论HB EGF的表达和滋养细胞增殖相关 ,HB【总页数】4页(P491-493)【关键词】自然流产;滋养细胞肝素表皮生长因子;表达;免疫组织化学法;增殖细胞核抗原【作者】胡昌东;归绥琪【作者单位】复旦大学附属妇产科医院【正文语种】中文【中图分类】R714.21【相关文献】1.早期自然流产绒毛外滋养细胞VEGF的表达及意义 [J], 杨倩;卢丽莉;梁珊;毕秀霞;韩彦洁;宋春红;刘洋2.马鞭草醇提液中有效部位的提取及筛选/马鞭草醇C部位抗人绒毛膜癌JAR细胞作用机制的研究/重度妊娠高血压综合征患者胎盘表皮生长因子受体的表达/不同孕期人滋养层细胞表皮生长因子受体及其mRNA表达的研究 [J],3.早期自然流产患者底蜕膜绒毛外滋养细胞中IGFBP7、VEGF 的表达变化及意义[J], 杨倩;卢丽莉;孟丽婵;宋春红4.肝素结合表皮生长因子通过诱导人子宫内膜细胞骨桥蛋白的表达促进人滋养层细胞的体外侵袭 [J], 顾方乐;王品;黄夏曼;吕芳;董乃俊;潘宇;刘凯峰;张晓梅5.早期自然流产患者绒毛滋养细胞中CXCL14的表达及其临床意义 [J], 陈秋月;邹阮敏;薛向阳;杨蒙蒙;肖碧如;孙蓉蓉;张文淼因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
原因不明复发性自然流产患者绒毛组织中STAT4和STAT6的表达
0000原因不明复发性自然流产患者绒毛组织中STAT 4和STAT 6的表达*张冬丽1),杨雪峰2)#1)河南大学淮河医院妇产科开封475000 2)郑州大学第三附属医院妇产科郑州450052#通讯作者,女,1956年生,本科,主任医师,研究方向:生殖内分泌,E m a i:l yangx @f zzu .edu .cn关键词 STA T4;STAT 6;复发性自然流产;绒毛 中图分类号 R714.21摘要 目的:探讨原因不明复发性自然流产(UR S A )患者绒毛组织中S TAT 4和STAT6蛋白的表达。
方法:采用免疫组化技术检测正常早期妊娠妇女(20例)和UR S A 患者(20例)绒毛组织中S TAT 4、STAT6蛋白的表达,并分析两者的相关性。
结果:正常妊娠组和UR S A 组绒毛组织中STAT 4和STAT6均呈阳性表达,主要表达于绒毛滋养细胞的胞质,胞核多数无明显着色。
URSA 组绒毛组织中S TAT 4阳性信号平均灰度值(148.00 24.38)高于正常妊娠组的(116.75 9.26)(t =5.730,P <0.001)。
U RSA 组绒毛组织中STAT6阳性信号平均灰度值(121.50 7.98)低于正常妊娠组的(161.60 17.78)(t =10.392,P <0.001)。
UR S A 组和正常妊娠组绒毛组织中S TAT 4与STAT 6的表达水平均呈负相关(r =-0.589,-0.647,P 均<0.001)。
结论:UR S A 患者绒毛组织中STAT4的高表达和STAT6的低表达可能诱导T 辅助淋巴细胞1/2失衡,进而导致UR S A 的发病。
Expressi on of STAT4and STAT6i n v illi of wo men w ith unexplai ned recurrent spontaneous abortionZ HANG Dong li 1),Y ANG X uefeng2)1)D epart m ent of Obstetrics and Gynecology ,Huai h eH os p ital ,H enan Un i v ersity ,K ai f eng 475000 2)Depart m ent o f Obstetrics and Gynecology ,t h e Thir d Aff iliate d H os pital ,Zhengzhou Universit y ,Zhengzhou 450052K ey word s STAT4;STAT6;recurrent spontaneous abortion ;v illiAbstract A m i :T o i nvesti g ate the STAT 4and STAT 6prote i n expression i n v ill us of pati ents w it h unexp l a i ned recur rent spon taneous aborti on (UR S A ).Me thods :T he express i on o f STAT 4and S TAT 6i n v illi o f 20cases o f nor m a l ea rl y pregnan tw o m en and 20cases o f pati ents w ith URSA w as detec ted usi ng i m munohistoche m istry ,and co rre l a ti on t he ir w as analyzed .Re su lts :The expressi on of S TAT 4and STAT 6in t he 2g roups w as positi v e ,wh i ch m ai n l y located i n the cytoplas m o f trophob last ce lls .T he expression l eve l o f S TAT 4i n UR S A group w as (148.00 24.38),h i gher t han that (116.75 9.26)o f norma l pregnancy group(t =5.730,P <0.001).The expression leve l of S TAT 6i n URSA group w as (121.50 7.98),l ow er than that (161.60 17.78)of nor m a l pregnancy g roup (t =10.392,P <0.001).T he expressi on of S TAT 4and S TAT 6w ere neg ati ve l y corre l a ted i n villi o f the URSA group and no r m al pregnancy g roup (r =-0.589,-0.647;P <0.001).Conc l u s i o n :The high express i on of S TAT 4and lo w expression of STAT6i n v illi o f patientsw it h UR S A m ay i nduce T h1/Th2i m balance ,w hich may resu lt i n URSA.*河南省自然科学基金资助项目 051104130042 郑州大学学报(医学版) 2010年1月 第45卷 第1期复发性自然流产(recurren t spontaneous abor ti o n ,RSA )是指与同一性伴侣连续发生3次或3次以上自然流产[1],发生率为1%。
反复自然流产患者妊娠组织中Survivin、 VEGF及Stat3的表达及相关性
反复自然流产患者妊娠组织中Survivin、 VEGF及Stat3的表达及相关性张素芝;杜丽荣;韩宏伟;李国正;韩省华;刘效群;赵邦荣;张亦心【摘要】目的通过对RSA患者和正常早孕女性绒毛、蜕膜中Survivin、VEGF及Stat3的测定,探讨不明原因反复流产患者的病因和母-胎界面滋养细胞增殖的调控机制.方法采用免疫组化法检测40例反复自然流产(RSA)患者及20例对照组的绒毛和蜕膜组织中Survivin、VEGF及Stat3含量.结果 RSA患者绒毛组织中Survivin、VEGF的表达水平高于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05),二者在绒毛中的表达呈正相关(r=0.268,P<0.05);RSA组与正常对照组的绒毛中Stat3的表达差异无统计学意义(P>0.05),Survivin与Stat3的表达不存在相关关系(r=-0.006,P>0.05);RSA组与正常对照组蜕膜中Survivin、VEGF和STAT3的表达差异无统计学意义(P>0.05).结论本研究发现在胚胎发育和胎盘形成过程中VEGF通过上调Survivin,促进细胞增殖、血管形成和抗细胞凋亡的作用,参与胚胎着床、胎盘生长和浸润;而Stat3与其无关,RSA胚胎凋亡时Survivin的上调可能不通过JAK-STAT途径.%Objective To investigate the pathogenesis of recurrent spontaneous abortion ( RSA ) and the regulation mechanism of trophoblast cell proliferation on matenal-fetal interface through measuring the levels of Survivin,VEGF and Stat3 in villus and decidua in women with RSA. Methods The levels of Survivin, VEGF and Stat3 in villus and decidua in 40 women with RSA ( observation group ) and 20 healthy subjects( control group ) were detected. Results The expression levels of Survivin and VEGF in villus in women with RSA were significantly higher than those in normal pregnant women during the first trimester ( P < 0. 05 ), and theexpression levels of Survivin in observation group were positively correlated with those in control group ( r = 0. 268, P < 0.05 ). However there was no significant difference in the expression levels of Stat3 in villus between the two groups during the first trimester ( P > 0. 05 ). There was no correlation in the expression levels in villus between VEGF and Survivin ( r = -0. 006, P >0. 05 ), furthermore, there were no significant differences in the expression levels of Survivin, VEGF and Stat3 in decidua between the two groups ( P >0. 05 ). Conclusion The results in the investigation suggest that VEGF can promote cell proliferation, angiopoiesis and antiapoptotic effect during embryo development and placentation by up-regulating the expression of Survivin, which is involved in embryo nidation, placenta development and infiltration, however, Stat3 is not related with VEGF, furthermore, the up-regulation of Survivin expression during embryo apoptosis may not carry out via signal transducer and activator of transcription-3 pathway.【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2012(034)011【总页数】3页(P1610-1612)【关键词】存活素;滋养层细胞;信号传导子和转录活化子3;血管内皮生长因子;反复自然流产【作者】张素芝;杜丽荣;韩宏伟;李国正;韩省华;刘效群;赵邦荣;张亦心【作者单位】050071,石家庄市,河北省计划生育科学技术研究院;050071,石家庄市,河北省计划生育科学技术研究院;河北省黄骅市计划生育服务站;050071,石家庄市,河北省计划生育科学技术研究院;河北省石家庄市妇幼保健院妇产科;050071,石家庄市,河北省计划生育科学技术研究院;050071,石家庄市,河北省计划生育科学技术研究院;050071,石家庄市,河北省计划生育科学技术研究院【正文语种】中文【中图分类】R714.21反复自然流产(recurrent spontaneous abortion，RSA)是指连续发生2次或2次以上的自然流产。
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文章编号:1007-4287(2008)10-1244-03自然流产患者绒毛组织中肝素结合性表皮生长因子免疫组化分析李 巍1,岳 瑛2*,李 杰1,鲍俊兰1,丁丽秀1(1.吉林大学第四医院妇产科,吉林长春130011; 2.吉林大学第一医院妇产科)摘要:目的 研究肝素结合性表皮生长因子(HB E GF)在早孕人工流产(正常早孕)及早孕自然流产(早期流产)绒毛组织中的表达是否存在差异,并进一步探讨HB EGF在早期流产病因学中的作用。
方法 采用免疫组化链霉菌抗生物素 过氧化物酶(SP)连接法检测正常早孕妇女及早期流产患者绒毛组织中HB EGF的表达。
结果 正常早孕组与自然流产组绒毛组织内均有HB EGF表达,各组HB EGF均表达于绒毛组织滋养细胞细胞膜和细胞浆内。
灰度测定与对照组比较,自然流产组绒毛组织内HB EGF表达明显减弱(t=2.48,P=0.02)。
结论 绒毛组织产生的HB E GF 在正常早孕及自然流产患者绒毛的表达有明显差异,自然流产绒毛组织内HB EGF表达水平显著低于正常早孕,HB EGF在自然流产的发病及病理生理过程中有重要的作用,绒毛组织滋养细胞内HB E GF的减少有可能是发生自然流产的原因之一。
关键词:自然流产;肝素结合性表皮生长因子;免疫组化中图分类号:R714 21文献标识码:AAn imm uno histochemical analysis o f heparin binding growth factor in vilii of patients w ith spontaneous abortion LI Wei,YUE Yin g,LI Jie,et a l.(Depa rtment o f G ynecology an d Obstetrics,The Fourth Hospital o f Jilin Un iversit y,Chan gchun130011,China) Abstract:Objective To analyze the different expression of heparin binding epidermal growth factor(HB E GF)in chorionic villi of the i nduced abortion(normal pregnancy)and spontaneous abortion early pregnancy(early abortion),and to further discuss the role of HB E GF in the early abortion.Methods Immunohistochemistry streptavidin biotin peroxidase(SP)to detect HB EGF ex pression of villus tissue between normal pregnancy and early abortion with women.Results Both of normal pregnancy group and spontaneous aborti on group have HB EGF expression in chronic villi,HB EGF exp ress in villous trophoblastic cell membrane and the cytoplasm.Gray determination compared wi th the control group,HB EGF expression of villus tissue i n spontaneous abortion group was si gni ficantly decreased(t=2.48,P=0.02).Conclusion There is a significant di fference in HB EGF expression in chronic villi between the normal pregnancy group and spontaneous abortion group.The expression level of HB EGF in sp ontaneous abortion villus tissue was significantly lower than early pregnancy.The expressions of HB EGF play an important role in spontaneous abortion.The re duction of HB EGF in villous trophoblast cells organizations may be the one of the reasons of spontaneous abortion.Key words:spontaneous abortion;HB EGF;immunohistology(Chin J Lab Diagn,2008,12:1244)自然流产(spontaneous abortion)为妊娠于孕28周前自然终止者。
如在孕12周前自然终止者称早期流产,在孕13-27周自然终止者为晚期流产。
自然流产病因复杂,尚有些不确定因素。
本研究探讨HB E GF在自然流产中的表达,有助于进一步认识HB EGF在自然流产发病及病理生理学中的作用,从而为自然流产的预测与治疗提供理论依据。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 试剂 山羊抗人重组HB EGF多克隆抗体为美国R&D公司产品,购自上海吉泰科技有限公司;SP超敏试剂盒、0.01M PB S(pH=7.4)及DAB 显色试剂盒购自福州迈新生物科技开发有限公司。
1.1.2 仪器 湖北省医用电子仪器厂生产的包埋机;德国LeicaR M2135轮转切片机:德国Leica HI 1210捞片机;南京实验仪器厂DG 5恒温箱;日本OLYMP US CK2光学显微镜。
1.1.3 研究对象 选择2007年1月至2007年12月在吉林大学第一医院妇产科正常早孕及早期流产的绒毛共28例,平均年龄(28 3 4.87)岁,平均孕周(9 32.8)周。
早期流产组:19例,平均年龄(28 3 5.37)岁,平均孕周(10 8 2.5)周。
正常早孕组:9例,为正常早孕妇女因社会因素行人工流产1244Chi n J Lab Diagn,October,2008,Vol12,No.10术者,平均年龄(28 1 3.91)岁,平均孕周(8 2 1 7)周。
两组孕妇均排除心脏病、糖尿病、肾病、肝炎、严重贫血等内科合并症,无吸烟和长期服药史,近期无急慢性感染的。
1.2 方法1.2.1 免疫组织化学SP 法 严格按试验步骤操作。
1.2.2 结果判定标准 阳性染色显示细胞浆内及细胞膜有浅黄至棕黄色着色颗粒,且其着色强度高于背景非特异性染色。
并进行灰度测定,应用Image Pro plus 软件定量分析。
1.2.3 统计学分析 所得实验数据采用平均值 标准差( x s )表示,经Excel 软件分析工具包进行方差分析和t 检验。
2 结果2.1 正常早孕组与早期流产组绒毛组织滋养细胞中均可见HB EGF 表达。
早期流产组与正常早孕组表达强度差异显著(P <0.05),详见表1。
表1 正常早孕组与自然流产组绒毛组织滋养细胞中HB EGF 表达情况比较分组例数灰度测定值正常早孕组94823263.9 1503326.7早期流产组192338285.9 1165362.9两组比较,t =2.48,P =0.022.2 正常早孕组与早期流产组绒毛组织中HB EGF 的表达均位于绒毛滋养细胞中,其它种类细胞中未见HB E GF 表达。
HB EGF 表达阳性的细胞中,阳性颗粒均位于细胞浆及细胞膜中,细胞核未见HB EGF 表达。
图1-6。
图1 正常早孕,HB EGF 阳性图2 正常早孕,HB EGF 强阳性图3 自然流产,HB EGF 弱阳性(++),DAB,10!10(+++),DAB,10!40(+),DAB,10!10图4 自然流产,HB EGF 阳性 图5 正常早孕,灰度测定 图6 自然流产,灰度测定(++),DAB,10!403 讨论3.1 HB EGF 的结构特点及生理特性表皮生长因子家族(epidermal gro wth fac tor family)是一组与表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)结构及生物学功能相近的糖蛋白,它由表皮生长因子(EGF)、转化生长因子 (transforming growth factor ,TGF )、肝素结合性表皮生长因子(heparin binding EGF like growth factor,HB EGF)、两性调节蛋白(am phiregulin,AR)、 细胞调节素(betacellulin,B TC)等生基,通过与EGF 受体家族结合,并激活EGFR 后发挥生物学作用。
HB E GF 基因定位于第5号染色体,长度为14kb,含有6个外显子和5个内含子[1]。
等电点在7.2-7.8[2]。
其分子量为19-23kDa 。
HB EGF的前体蛋白(pro HB EGF)含208个氨基酸,为跨膜蛋白结构,包括6个结构域。
成熟的可溶型HB EGF(s HB EGF)为含86个氨基酸的糖基化蛋白质,由pro HB EGF 裂解而来,包括一个位于氨基端的肝素结合区和一个位于梭基端的EGF 样区。
前者富含精氨1245 中国实验诊断学 2008年10月 第12卷 第10期基酸具高度保守性;后者约35%的氨基酸与EGF同源,有一个含6个半肤氨酸的保守序列,相互间形成3个双硫键。
Pro HB EGF还包括信号肽、前肽、近膜区、跨膜区和胞浆区[3]。
3.2 绒毛组织HB EGF的表达在与生殖方面有关的研究证实HB EGF在人和动物子宫内膜细胞和胎盘组织上均有表达,调节甾体激素对子宫内膜上皮细胞和间质细胞的有丝分裂增殖作用,促进子宫内膜从增殖期向分泌期转化,并介导胚胎着床,促进胎盘形成和生长。
目前认为白血病抑制因子(LIF),HB EGF、白介素1 (IL 1 )和集落刺激因子 1(CSF 1)为着床期间必不可少的四种细胞因子,对胚泡着床有直接调节作用。
在子宫内膜、绒毛、蜕膜、胎盘和胚泡中已证实存在HB EGF及其受体,并以旁分泌、自分泌方式与受体结合后发挥其生物学作用。