抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体制备及部分特性鉴定
7种常用猪流行性腹泻疫苗临床免疫效果观察和评估
从试验开始至结束，免疫组与对照组猪群食
欲、精神状况、体重均无明显变化。首免 3 d 后，个别 猪开始表现轻微拉稀症状，二免后 3 d 症状已趋于 好转，具体情况见表 1。
攻毒后 4 h，试验猪开始出现症状，主要表现为 拉稀，小猪屁股周围被粪便污染，猪舍地面散布稀
TB 腹泻二联灭活苗组 5 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0
对照组
5 0 0 0 1 10 11 0 0
总计
0 0 0 5 12 0 11 4 0 0
表 2 攻毒后试验猪腹泻情况
头
项目
样攻
攻毒后
本毒
数 前 8 h 1 d 2 d 3 d 4 d 5 d 6 d 7 d 14 d
HY腹泻二联灭活苗组 5 0 4 1 5 1 2 1 2 0 0
应激，病猪经治疗处理后第 3 天明显好转，第 5 天痊
（4）笔者采用猪用白细胞干扰素+黄芪多糖肌注，
愈，1 周后控制了疫情。
配合使用肺炎血链康或头孢旺或红奇华蟾素肌肉注
7 小结
射治疗，取得了较好的治疗效果。
（1）该场部分母猪已经注射 PCV2 灭 活 疫 苗
（编辑：姜雪）
2013 第 2 期
陈 静，等.7 种常用猪流行性腹泻疫苗临床免疫效果观察和评估
且攻毒后 3 d 阳性率最高，达 47.5%，攻毒后 14 d 易导致免疫失败从而无法预防发病。韩国政府建议
阳性率仍高达 40%（表 4）。应用 DNAStar 软件包将 对母猪实行 3 次接种（活苗-死苗-死苗）或 4 次接种
连续用药 3～4 d。疑似发病猪注射圆环抗毒杀（黄芪 邵武市部分猪场经常发生，应引起高度重视。由于
猪流行性腹泻的流行特点、诊断和防控技术
猪流行性腹泻的流行特点、诊断和防控技术李明波;宋忠旭;董斌科;孙华;雷斌;郭锐;梅书棋【摘要】猪流行性腹泻（PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的一种猪的高度接触性传染病，感染猪以急性肠炎、水样腹泻、呕吐为主要特征。
20世纪80年代我国首次报道并鉴定猪流行性腹泻病毒，随后该病毒成为引起猪病毒性腹泻的常见病毒。
2010年底，由PEDV变异毒株引起的PED大规模暴发，给养猪业带来重大经济损失。
文章主要针对当前PED在我国的流行情况、诊断技术、疫苗和防控策略等方面进行阐述，以期给该病的防控提供借鉴和参考。
【期刊名称】《养猪》【年(卷),期】2016(000)005【总页数】3页(P89-91)【关键词】猪流行性腹泻;流行情况;诊断技术;防控【作者】李明波;宋忠旭;董斌科;孙华;雷斌;郭锐;梅书棋【作者单位】湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北武汉 430209;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北武汉 430209;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北武汉 430209;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北武汉430209;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北武汉 430209;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北武汉 430209;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，湖北武汉 430209【正文语种】中文【中图分类】S858.285.3猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea,PED）是由猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的猪的肠道传染病，不同年龄阶段的猪都可感染，本病对初生仔猪的危害最大，5日龄以内的仔猪，由于腹泻和呕吐而造成的严重脱水，发病率和死亡率可达100%。
抗猪传染性胃肠炎M蛋白单克隆抗体的制备及部分特性鉴定
得 ３株 抗 Ｔ Ｖ Ｍ 蛋 白的 杂 交 瘤 细 胞 系 １ 、 ３ ２ Ａ ， 染 色体 平 均 记 数 为 ８ ＧＥ Ｂ３ Ｃ 、４ ５ ９对 、９ ２对 、９ 细胞 培 养 上 清 的效 价 分 别 为 １ ０ 、１１ ０ 、 １ ０ ，腹 水 效 价 分 别 为 ２×１４ ×１５ Ｂ 、３ ２ Ａ ／ ００ ／ ００ ／ ００ ４ ４ ０、２ ０、
维普资讯
第２ ９卷 第 １ 期 １
２ ０ 年 １ 月 ０７ １
中 国 预 防 兽
医 学 报
Ｖｏ ．９． ． １ １ ２ Ｎｏ １
ＮＯＶ． ２ ００７
Ｃｈ ｎ ｓ ｏ ｒ ａ ｆＰ ｅ ｅ ｔ ｅ Ｖｅｅ ｎ ｒ ｅ ｉｉ ｅ ｉｅ ｅ Ｊ ｕ ｎ ｌ ｒ ｖ ｎ ｉ ｔｒ ａｙ Ｍ ｄ ｃ ｎ ｏ ｖ ｉ
ｍｅｈ ｄ Ｔｈ ｅ ｙ ｒｄ ｍａ ｓ ｒ ｓ ａ ａ ｎ ｔＴＧＥ Ｍ Ｐ ｄ ｓｇ ａｅ ｓ １ ，３ ， Ａ５ ｒ ｓ ｅ ｔ ｅ ｙ ｗｅｅ ｏ ｍｉ ｅ ． ｅ ｅ Ｍ ｃ ｒ ｔ ｏ ． ｒ ｅ ｈ ｂ ｉ ｏ ｅ ｅ ｇ ｉ ｓ ｉ Ｖ ｅ ｉｎ ｔｄ ａ Ｂ３ Ｃ２ ４ ｅ ｐ ｃ ｉ ｌ ， ｒ ｂ ｎ ｄ Ｔｈ ｓ Ａｂ ｗｅｅ ｖ ｈ ｇ ｌ ｐ ｃｆ ｏ ＴＧＥ ｂ ｎ ｉ ｃ Ｉ Ａ ｕ ｉｎｔｒ ａ ｔｗｉ ＥＤＶ．Ｐ Ｖ ｎ ｒ Ｔ ｅ Ｍ ｃ ｒ ｓ ｄ ｆ ｒＩ Ｎ ｏ ｄ ｔｃ ｉｈ ｙ ｓ ｅ ｉ ｃ ｔ ｉ Ｖ ｙ ｉ ｄｒ ｔＥＬ Ｓ ｂ ｔｄ ｄ ’ ｅ ｃ ｔ Ｐ ｅ ｈ Ｒ ａ ｄ Ｐ ｖ． ｈ Ａｂ ｗｅ ｅ ｕ ｅ ｏ Ｆ ｔ ｅｅ ｔ ＴＧＥ ． ＢＲＳ ｃ ｌ ｎ ｅ ｔ ｄ ｗｉ ＧＥ ｓ ｏ ｄ ｓｒ ｎ ｌ ｅ ｌ ｗ ｎ ｒ ｅ ｕ ｒｓ ｅ ｔｉ ｙ ｏ ｌｓ ａ ｄ ｃ ｌ ｍｅ ｒ ｎ ｓ Ｖ Ｉ ｅｌ ｉ ｆｃ ｅ ｔ Ｔ ｓ ｈ Ｖ ｈ ｗｅ ｔｏ ｇ ｙ ｙ ｌ ｏ ａ ｄ ｇ ｅ ｎ ｆ ｏ ｅ ｃ ｎ ｎ ｃ ｔ ｐ ａ ｍ ｎ ｅ ｌ ｌ ｍｂ ａ ｅ ．Ｍ ｃ Ａｂ ｒ ｐ ｒ ｄ ｉ ｈ ｓｗｏ ｋ ｍａ ｒ ｖ ｄ ａｕ ｂ ｅ ｔ ｏ ｓｆ ｒａ ｃ ｒ ｔ ｎ ａ ｉ ｉ ｇ ｏ ｉ ｆＴＧＥ ｅ ｏ ｔ ｔ ｉ ｒ ｙ ｐ ｏ ｉｅ ｖ ｌａ ｌ ｌ ｃ ｕ ａｅ ａ ｄ ｒ ｐ ｄ ｄ ａ ｅ ｎ ｏ ｏ ｎ ｓｓｏ Ｖ．
猪流行性腹泻病毒的研究进展
猪流行性腹泻病毒的研究进展作者：敖清莹来源：《国外畜牧学·猪与禽》2024年第03期摘要：猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）是一种由猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）引起的传染病，具有传染性强、致病性高、易传播的特点。
主要感染肠道上皮细胞，引起肠道上细胞损伤，从而影响肠道的吸收功能，感染后，病猪会出现呕吐、腹泻、食欲下降等症状，严重时可能导致脱水、死亡。
本文从猪流行性腹泻流行病学、病毒基因组及结构、临床症状及诊断进展进行综述，旨在为猪流行性腹泻的防控提供参考。
关键词：PEDV；流行病学；诊断中图分类号：S852.61 文献标志码：A 文章编号：1001-0769（2024）03-0089-04猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）是一种由猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）引起的接触性传染病，具有传染性强、致病性高的特点，主要感染猪肠道上皮细胞，引起肠道上皮细胞的损伤，从而影响肠道的吸收功能。
感染后，发病猪会出现食欲下降、呕吐、腹泻等症状，严重时可能导致脱水、死亡[1]。
研究表明，不同年龄段的猪均会感染PEDV，但临床症状有所不同，新生仔猪较易感，且发病率和死亡率较高[2]。
1971年，PEDV首次被发现；1978年，Pensaert等[3]首次分离出PEDV的经典毒株PEDVCV777株；1988年，Hofmann等[4]通过Vero细胞连续传代，分离到PEDV。
在过去的三十年中，PEDV的肆虐使欧洲和亚洲养猪业遭受了相当严重的经济损失。
2013—2014年，美国、加拿大和墨西哥也相继报道了PED[5]暴发，仅一年时间就损失了近七百万头仔猪，占美国养猪业的10％[6]。
我国早在1973年报道了PEDV[7]，1984年，Xuan等[8]通过血清中和实验，首次鉴定出PEDV。
猪流行性腹泻病毒的分子生物学特性以及胰酶对其作用机理
猪流行性腹泻病毒的分子生物学特性以及胰酶对其作用机理张永香;陈海南;陈樨;张如梅【摘要】猪流行性腹泻病毒（PEDV）在体外分离培养需依赖胰酶，目前胰酶对猪流行性腹泻病毒的作用机理尚未完全清晰，文中从分子生物学方面阐述胰酶对猪流行性腹泻病毒的作用。
%Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) isolated in vitro rely on trypsin, the current mechanism of action of trypsin on porcine epidemic diarrhea virus has not yet fully clear, this paper from the molecular biology of trypsin porcine epidemic diarrhea virus effect.【期刊名称】《福建畜牧兽医》【年(卷),期】2016(038)003【总页数】2页(P31-32)【关键词】猪流行性腹泻病毒;分子生物学;胰酶【作者】张永香;陈海南;陈樨;张如梅【作者单位】福州大北农生物技术有限公司 350014;湖北省襄阳市襄州区畜牧兽医局 441104;福州大北农生物技术有限公司 350014;福州大北农生物技术有限公司 350014【正文语种】中文猪流行性腹泻（PED）是由猪流行性腹泻病毒引起的猪的高度接触性肠道传染性疾病。
临床上以引起仔猪水样腹泻、呕吐、脱水等为主要特征。
该病一年四季均可发生，但以每年的冬、春季节为发病高峰期。
传播途径主要通过消化道传播，即粪-口传播，无需传播媒介。
猪群一旦感染病毒可持续存在，各个年龄段的猪均易感，但以哺乳仔猪的发病率和病死率最为严重，且耐过的仔猪也易成“僵猪”［1-2］。
由于当前缺乏有效的治疗和防控措施，使其成为业界持续关注的焦点。
PEDV属于冠状病毒科、冠状病毒属的成员，与其他冠状病毒成员一样，该病毒粒子的形态特征呈多形性，外有囊膜，囊膜上有花瓣状纤突。
猪流行性腹泻病毒HB／FN株S基因的克隆、原核表达及免疫原性分析
Ｉ ｇ Ｇ 羊 及抗 鼠 Ｉ ｇ Ｇ为 Ｃ ＷＢ Ｉ Ｏ 公 司 产 品； Ｅ． ｃ ｏ ｌ ｉ
ＤＨ５ ａ感受 态细 胞和 蛋 白 Ｍａ ｒ ｋ ｅ ｒ 为 Ｔｒ ａ ｎ ｓ Ｇｅ ｎ公 司 产品； 蛋 白纯 化试 剂 盒 Ｂ — Ｐ Ｅ Ｒ（ ｒ ） ６ ×Ｈｉ ｓ Ｓ ｐ ｉ ｎ Ｐ ｕ ｒ ｉ — ｆ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｋ ｉ ｔ为 Ｐ Ｉ Ｅ Ｒ Ｃ Ｅ公司产 品； ＴＭＢ 、 完全 弗 氏
１ ． １ ． ２ 主要试剂 Ｔ ｒ ｉ ｚ ｏ ｌ 为 ＧＩ Ｂ Ｃ Ｏ公司产品； Ｍ— ＭＬ Ｖ 反转 录 酶 、 Ｔ ａ ｑ ＤＮＡ 聚 合 酶 、 Ｔ ４ Ｄ ＮＡ 连 接 酶、 限制 性 内 切 酶 Ｂ ａ ｍＨ Ｉ、 Ｘｈ ｏ工、 ｐ ＭＤ１ ９ 一 Ｔ 载 体、 ２ ５ ０ ｂ ｐ ＤＮＡ Ｍａ ｒ ｋ ｅ ｒ 、 Ｄ ＮＡ Ｍａ ｒ ｋ ｅ ｒ Ｄ Ｌ ５ ０ ０ ０等 为 宝生 物工 程 （ 大连） 有 限 公 司产 品 ；ＤＮ Ａ 胶 回收 试 剂盒 、 小 量 质粒 纯化 试 剂 盒 、 ＨＲ Ｐ标 记 的 羊 抗 兔
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材料
Ｐ Ｅ Ｄ） 是 由冠 状 病 毒科 冠 状 病 毒 属 的 猪 流 行 性 腹 泻
病毒（ Ｐ ｏ ｒ ｃ ｉ ｎ ｅ ｅ ｐ ｉ ｄ ｅ ｍｉ ｃ ｄ ｉ ａ ｒ ｒ ｈ ｅ ａ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ，Ｐ Ｅ ＤＶ） ＿ １ 引
１ ． １ ． １ 毒 株 与 实验 动 物 猪 流行 性 腹 泻 病 毒 华 北 抚宁 株 （ ＨＢ ／ Ｆ Ｎ） 由河 北 农 业 大 学 兽 医微 生 物 实 验 室保存 ； ６周龄 ～８周 龄 Ｓ Ｐ Ｆ级 Ｂ ａ ｌ ｂ ／ ｃ小 鼠购于 北 京东 大实 验动 物 中心 。
猪流行性腹泻的实验室诊断方法研究进展
60猪业科学 SWINE INDUSTRY SCIENCE 2010年 第12期猪流行性腹泻的实验室诊断方法研究进展刘 涛，王 瑞（河南省信阳农业高等专科学校，河南 信阳 464000）猪流行性腹泻（PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的一种猪肠道传染病，以水泻、呕吐和脱水为特征。
PED 于1976—1977年首先发现于比利时和英国的一些种猪场，在各个年龄的猪群中暴发了急性腹泻。
此后中国、加拿大、匈牙利、德国、日本及韩国等多个国家相继报道了PED 的发生，现在PED 已成为世界流行性疾病。
PED 与猪传染性胃肠炎（TGE）同属冠状病毒属成员，二者在病毒粒子形态、临床症状及流行病学方面极为相似，难以区分。
对于该病的确诊，有赖于实验室检查。
1 免疫电镜法 由于PEDV 与TGEV 同属冠状病毒，形状非常相似，在普通电镜下无法区别，为此需用免疫电镜法（IEM）。
IEM 法既可用已知的PEDV 高免血清检测未知抗原，又可用已知的PEDV 抗原检测未知抗体。
王继科[1]等把抗摘 要：猪流行性腹泻在流行病学和临床症状方面与猪传染性胃肠炎无显著差别，只是病死率比猪传染性胃肠炎稍低，在猪群中传播的速度也较缓慢些。
猪流行性腹泻多发生于寒冷季节，各种年龄猪都可感染，年龄越小，发病率和病死率越高，临床表现为呕吐，水样腹泻和严重脱水，进一步确诊需依靠实验室诊断。
笔者就各种实验室诊断方法近年来的研究进展进行了综述，并简明地指出了研究中存在的问题。
关键词：猪流行性腹泻；实验室诊断方法原和抗体分别经10 000 g 离心、免疫复合物又经12 000 g 离心、最后在电镜下直接观察到典型的病毒粒子形成的免疫复合物，建立了具有3次筛选作用的改良的IEM 法，具有简便、直观、快速和定性正确等优点。
但由于需用电镜设备，不适合于大规模诊断和临床诊断。
2 RT-PCR法Ishikawa [2]等根据S 基因序列设计了1对可扩增目的片段854 bp 的引物，成功的建立了诊断PEDV 的RT-PCR 法，可进行细胞毒和粪便毒的检测，灵敏度可达100 TCID50/mL，并可在8 h 内测出。
猪流行性腹泻病毒PEDV_SD_株的分离及体外3D_肠道类器官感染模型建立
·研究论文·摘 要：猪流行性腹泻病毒（PEDV ）是一种主要感染仔猪小肠的肠道冠状病毒。
本研究旨在建立一种用于PEDV 体外研究的仔猪小肠类器官模型。
首先从PEDV 发病猪场的临床仔猪腹泻样品中分离PEDV 并进行全基因组测序，结果显示成功分离1株PEDV ，命名为PEDV SD 株。
另外采用肠道类器官的培养技术，从10日龄健康仔猪小肠中分离小肠隐窝组织，经过体外培养7 d 左右分化成具有肠道隐窝结构的猪小肠类器官，并能进行连续传代。
然后将分离的PEDV SD 株感染传代培养的猪小肠道类器官，通过间接免疫荧光试验显示PEDV 可以很好地感染猪小肠道类器官，表明成功建立了PEDV 感染肠道类器官的模型。
猪小肠类器官感染模型可以在体外很好地重现PEDV 感染肠道细胞的复杂结构的过程，为深入研究PEDV 的致病机制提供一种新的可再生的体外研究模型。
关键词：猪流行性腹泻病毒；肠道类器官；感染模型中图分类号： S858.28 文献标志码：A 文章编号：1674-6422（2024）01-0001-08Isolation of Porcine Epidemic Diarrhea Virus SD Strain and Development ofin Vitro 3D Intestinal Organoids Infection ModelCAI Hongming 1,2, ZHANG Min 2, LYU Lilei 2, JIANG Yifeng 2, GAO Fei 2, YU Lingxue 2, TONG Wu 2,LI Liwei 2, LI Guoxin 2, ZHOU Yanjun 2, LIU Changlong 2, TONG Guangzhi 2(1. College of Animal Sciences (College of Apiology), University of Agriculture and Forestry in Fujian, Fuzhou 350002, China; 2. ShanghaiV eterinary Research Institute, CAAS, Shanghai 200241, China)收稿日期：2022-03-11基金项目：上海市浦江人才计划资助（21PJ1416300），上海市自然科学基金资助项目（21ZR1477200），中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（2019JB09）作者简介： 蔡鸿明，男，硕士研究生，预防兽医学专业通信作者：童光志，E-mail：***************.cn猪流行性腹泻病毒PEDV SD 株的分离及体外3D 肠道类器官感染模型建立蔡鸿明1,2，张 敏2，吕丽蕾2，姜一峰2，高 飞2，虞凌雪2，童 武2，李丽薇2，李国新2，周艳君2，刘长龙2，童光志2（1.福建农林大学动物科学学院（蜂学学院），福州350002；2.中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241）Abstract: Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) is an intestinal coronavirus that infects the small intestines of piglets. The objective of the present study was to develop an in vitro 3D organoid model of porcine small intestines for studying the mechanism of PEDV infection. A PEDV SD strain was isolated from a farm and its whole genome sequence was analyzed in this study. The crypts of small intestines from a 10-day old pig were isolated and embedded in basement membrane extract and covered with the porcine intestinal organoids medium modifi ed from the human system. The organoids with a crypt-villus architecture formed in 7 days. Then the swine organoids wereChinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报2024,32(1):1-8· 2 ·中国动物传染病学报2024年2月infected with the PEDV SD strain virus. The PEDV infection was determined in indirect immunofl uorescence assay. The results showed that the PEDV infection model of swine intestinal organoids were developed in this study. The 3D intestinal organoid model off ered a long-term, renewable resource for investigating porcine intestinal infections with PEDV.Key words: Porcine epidemic diarrhea virus; swine intestinal organoids; infection model猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV）会可引起猪特别是新生仔猪的呕吐、腹泻和食欲下降，发病率和死亡率高[1]。
猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及N基因序列分析
猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及N基因序列分析刘希红;孟庆玉;王建舫;张永红;崔德凤;李佳;刘凤华【摘要】[Objective] In this study,it was aimed to dig out whether the porcine epidemic diarrhea virus is a variant strain,which caused the swine epidemic diarrhea.[Methods] The intestinal mucosa and contents from dead diarrheal piglets in pig herds,were collected from those being suspected to be infected by porcine epidemic diarrhea virus(PEDV).These samples were tansfected into VERO cells after being treated with general methods,VERO cells were cultured in DMEM supplemented with 10％trypsin.The isolated strains were identified by reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR),indirect immunofluorescence staining,animal regression and partial gene sequence analysis.[Results] After the first generation,VERO cells became tumescence andround,gathered together the package body and then gradually fall off.It is doubtful for CPE of PEDV.With the great increase of virus passages,CPE became more and more regular after being detected by RT-PCR,indirect immunofluorescence staining and animal regression to identify the virus.Ultimately,the isolate was characterized as PEDV and named asBJ2015,and the TCID50 was 10-6.4/0.1mL.Gene sequencing results showed that the length of the N gene is 1 329 bp,encoding 442 aminopared with the reference strains,the N gene nucleotide sequence and phylogenetic analysis showed that the genetic distance betweenBJ2015 strain and the traditional strain CV777 was very far.N genes ofBJ2015 and popular variant BJ-2011-1 were in a same branch of the evolutionary tree,each of them had 99.6％,and 99.5 ％ of nucleotide and amino acid homology,respectively.it also showed that the genetic distance between BJ2015 strain and the BJ-2011-1 strain was not faraway.[Conclusion]BJ2015 strain was a popular PEDV variant.%[目的]了解引起仔猪腹泻的猪流行性腹泻病毒是否为变异株.[方法]从疑似猪流行性腹泻病毒感染的猪场采集死亡仔猪的肠黏膜及其内容物,将病料常规处理后接种VERO细胞,采用维持培养液加10 μg/mL的胰酶的方法分离培养.用RT-PCR、间接免疫荧光、动物回归实验以及部分序列分析等方法对分离株进行鉴定.[结果]病料在接入细胞第一代即出现病变,细胞肿胀变圆,形成合胞体,逐渐脱落,细胞病变明显.随着病毒传代次数的增加,细胞病变逐渐稳定,进行RT-PCR检测、间接免疫荧光检测以及动物回归实验,最终确定分离株符合PEDV特征,并命名为BJ2015,测定毒株的TCID50为10-6.4/0.1 mL.基因测序结果显示,N基因长1 329 bp,编码442个氨基酸.与参考株N基因核苷酸序列比对及遗传进化分析表明,BJ2015与传统株CV777亲缘关系较远;与流行变异株BJ-2011-1N基因在进化树的同一个分支上,二者的核苷酸和氨基酸同源性分别为99.6％、99.5％,表明BJ2015与BJ-2011-1亲缘关系较近.[结论]结果表明BJ2015为PEDV流行性变异毒株.【期刊名称】《北京农学院学报》【年(卷),期】2016(031)004【总页数】6页(P46-51)【关键词】猪流行性腹泻病毒;分离鉴定;N基因;序列分析【作者】刘希红;孟庆玉;王建舫;张永红;崔德凤;李佳;刘凤华【作者单位】兽医学(中医药)北京市重点实验室/北京农学院动物科学技术学院,北京102206;兽医学(中医药)北京市重点实验室/北京农学院动物科学技术学院,北京102206;兽医学(中医药)北京市重点实验室/北京农学院动物科学技术学院,北京102206;兽医学(中医药)北京市重点实验室/北京农学院动物科学技术学院,北京102206;兽医学(中医药)北京市重点实验室/北京农学院动物科学技术学院,北京102206;兽医学(中医药)北京市重点实验室/北京农学院动物科学技术学院,北京102206;兽医学(中医药)北京市重点实验室/北京农学院动物科学技术学院,北京102206【正文语种】中文【中图分类】S852.659.2猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea，PED )是由冠状病毒属猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea Virus，PEDV)引起的一种猪的肠道传染病，主要表现为猪的腹泻、呕吐、脱水及高发病率和高致死率，不同年龄段、不同性别以及不同品系的猪均能感染PEDV，尤其以哺乳仔猪的发病率和死亡率最为严重[1]。
致猪腹泻的冠状病毒病的研究进展
致猪腹泻的冠状病毒病的研究进展2021年第2期致猪腹泻的冠状病毒病的研究进展李仕林，王雅雯，姜水兵，郭良帅，努尔麦麦提·麦麦提敏，王新新，焦海宏*（塔里木大学动物科学学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室，新疆阿拉尔843300）摘要：冠状病毒在自然界广泛存在，其宿主多样，可引起鸡、火鸡、猪、牛、犬等动物传染病。
冠状病毒传染性较强、高发病率，严重制约畜牧业的发展，威胁人类健康。
文章对猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎、猪急性下痢症候群冠状病毒病的病原、流行病学特征、临床病理变化、诊断及预防进行综述，进一步认识致猪腹泻的冠状病毒病的危害，为猪冠状病毒病的预防提供参考。
关键词：猪；冠状病毒；疾病中图分类号：S855.3文献标识码：A文章编号：1672-9692（2021）02-0089-04Advances in the study of porcine diarrheal coronavirus diseaseLi Shilin,Wang Yawen,Jiang Shuibing,Guo Liangshuai,Nuermaimaiti·maimaitimin,Wang Xinxin,Jiao Haihong*(College of Animal Science,Tarim University,Tarim Key Laboratory ofAnimal Husbandry Technology of Xinjiang Production and Construction Corps,Xinjiang Alar843300) Abstract:Coronaviruses is widespread in nature,and it's hosts are diverse and can cause infectious diseases in chickens, turkeys,pigs,cattle,dogs and other animals.Coronavirus is highly infectious and has a high incidence,which severely restricts the development of animal husbandry and threatens human health.The article reviews the pathogens, epidemiological features,clinicopathological changes,diagnosis and prevention of swine epidemic diarrhea,transmissible gastroenteritis,and swine acute diarrhea syndrome Coronavirus disease,and further understands the causes of swine Coronavirus disease Harm,provide reference for the prevention of swine Coronavirus disease.Key words:Pig;Coronavirus;Disease冠状病毒属套式病毒目（Nidovirales）冠状病毒科（Coronaviridae）冠状病毒属（Coronavirus），该属包括多种动物冠状病毒和人冠状病毒。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
为免疫原制备单克隆抗体 ，建立 了抗 Ｐ Ｄ Ｅ ＶＮ蛋 白
的 杂 交 瘤 细 胞 系 。 将 制 备 的单 抗 应 用 于 Ｗｅｔｒ ｓ ｎ ｅ Ｂｏ试 验 和酶联 免疫 吸 附试 验 ，结 果证 明该 单 抗 与 ｌ ｔ ＰＤ Ｅ ＶＮ蛋 白具 有 高度 的 特异 性 ，为 Ｐ Ｄ Ｅ Ｖ的 早期
维普资讯
第３ 卷 第 ７ ９ 期
２０ ０ ８年 ７月
东
北
农
业
大
学
学
报
３ （） ８ － ９ ９７： ４ ８ Ｊ ｌ ２ ０ ｕｙ ０ ８
Ｊ ｕｎ ｌ ｆ ｏｔ ｅ ｓ Ａ ｃ ｌ ｒｌ ｎ ｖｒｉ ｏ ｒ ａ ｒ ａ ｔ ｕｔ ａ Ｕ ｉｅｓｔ ｏＮ ｈ ｕ ｙ
８ｌ ～ ２周龄 Ｂ Ｌ ／小 鼠 ，购 自哈 尔滨 兽 医研 究 Ａ Ｂｃ
所。
１ ． 抗 体 制 剂 ．４ １
诊断及蛋 白质理学研究提供参考 。
收稿 日期：２ ０ 一 ｌｏ ０ ７ ｌ— ９ 作者简介：裴敦 国（ ９ ８ ） １７ 一 ，男 ，黑龙江人 ，硕士研 究生 ，研究 方向为动物微生物与免疫学。 通讯作者 Ｅ ｍａｌｙ ｉｇｉ ａｏ．ｏ － ｉ ｉｎ ｌ ｈｏ ｔｍ ：ｊ 研
文章编 号
１０ — ３ ９ ２０ ）７ ０ ８ — ６ ０ ５ ９ ６ （０ ８０ — ０ ４ ０
抗猪流行性腹 泻病毒 Ｎ蛋 白单克 隆抗体
制备及部分特性鉴 定
裴敦 国，葛俊伟 ，马广鹏 ，姜艳 萍 ，李一经
（ 东北农业大学动物医学院，哈尔滨 １０ ３ ５ ０ ０）
摘
要 ：以原核表达 系统 ｐ Ｅ 一 ｐ １ ＮＢ ２ 经 Ｉ １ Ｇ Ｘ ６ 一 一 ／ Ｌ １ ｆ’ ｙＧ诱导表达 的重组 Ｐ Ｄ — Ｓ Ｅ Ｖ Ｎ Ｇ Ｔ融合 蛋白作为免疫抗原 ，
ｌ 材 料 与方 法
１ 材 料 ． １ １１１ 菌株 ． ． ｐ Ｅ ６ — — ／Ｉ １菌 株 、Ｔ ２ ｐ Ｒ Ｈ ａＢ Ｇ Ｘ一 ｐ ｌ Ｎ Ｂ ２ １一 Ｐ Ｏ Ｔ ／— Ｉ ｌ菌 株 ：ｐ Ｅ ６ — — ／ Ｌ １菌 株 １，经 ＩＴ ２ Ｇ Ｘ一 ｐ ｌ Ｎ Ｂ ２ ２ １ ＰＧ
２ ３ Ｃ 。亚类鉴定为 ＩＧ１ ＩＧ ａ型 ，均 为 链抗体 ，染色体数 平均为（ １ ７ 对 。用制备 的单抗与 ｐ Ｅ 一 ｐ Ｅ 、４ ６ ｇ 和 ｇ２ ９＋ ） Ｇ Ｘ ６一 １ Ｎ／ Ｌ １ １一 Ｐ Ｏ ａ Ｌ １ 一 Ｂ ２ 、Ｔ ２ ｐ Ｒ ＨＴ ／ ２ 诱导表达后 的茵体裂解物做 Ｗｅｔ ｎＢｏ 试验 ，在 不同栽体 表达的 Ｎ蛋 白处 出现 Ｂ ｓ ｒ ｌｔ ｅ
中图分类号 ：￥ ５ ．５ ７ ５ ８ ２ ；Ｑ ８ ６ 文献标识码 ：Ａ
猪 流行性 腹泻 （ｏｃｎ ｐｄｍｉ Ｄａｒｅ， Ｅ Ｐ ｒｉｅＥ ｉｅ ｃ ｉ ｈａＰ Ｄ） ｒ
是 由猪流行性腹泻病毒 （ｏｃ ｅ ｐ ｅ ｉ Ｄａ ｈａ Ｐｒｉ ｉ ｍｃ ｉ ｅ ｎＥ ｄ ｒ
ＶｒｓＰ Ｄ 引 起 的 以 腹 泻 、呕 吐 、脱 水 和 对 哺 ｉ ， Ｅ Ｖ） ｕ
原 ） １ 一 Ｐ Ｏ Ｔ ／ Ｌ １菌 株 ，含 有 Ｐ Ｄ ，Ｔ ２ ｐ Ｒ Ｈ ａＢ ２ Ｅ Ｖ Ｎ基
国 家 相 继 报 道 了 Ｐ Ｄ 的发 生 ，造 成 严 重 的经 济 Ｅ
损失 。
对 病 原 的准确 检 测 是 防 治 的先 决 条件 ，Ｐ Ｄ ＥＶ 因其 体 外 培 养 难 ，细 胞 病 变 不 明显 ，给抗 原 生产 带来 困难 。基 于 Ｐ Ｄ 的培 养特 点 ，利用 体外 表 达 ＥＶ 病 毒 结 构 蛋 白作 为 抗 原 ，并 以此 制 备 诊 断 抗 体 对 Ｐ Ｄ的诊 断提供 更 好 的途径 。 Ｅ 本试 验 以原核 表达 获得 的重 组 Ｐ Ｄ Ｅ Ｖ Ｎ蛋 白做
乳仔猪高致死率 为主要特征 的一种高度接 触性肠 道传染病… Ｅ 。Ｐ Ｄ是 世 界 范 围 内发 生 的猪 病 之
一
，
１７ ９ ８年 在 英 国 和 比 利 时 首 次 报 道 ，此 后 中
国 、加 拿 大 、匈 牙 利 、德 国 、 日本 、韩 国 等 多 个
诱 导 ，其 表 达 基转移 酶（Ｓ Ｇ Ｔ，２ ｕ 的 融 合 蛋 白 （ 疫 用 抗 ６ｋ ） 免
因 的重 组 质 粒 ，经 ＩＴ 诱 导 ，可 表 达 Ｐ Ｄ ＰＧ Ｅ ＶＮ
蛋 白（ 筛选用 抗原 ） 。以 上菌 种均由本实验室构建
保存 。
１１ 病 毒 ．２ ．
猪流行性腹泻病毒 、 猪轮状病毒 、 猪传染性 胃 肠炎病毒 、猪伪狂犬病病毒的细胞培养物均为本实 验室保存 。
明显 的特 异性 条 带 ；通过 间接 Ｅ ＩＡ做 病 原检 测 ，这 两株单 抗 不与 Ｔ Ｅ ＬＳ Ｇ Ｖ、Ｐ Ｖ和 ＰＶ 发生 交叉 反应 ，而 与 Ｒ ｒ
ＰＤ Ｅ Ｖ显 示 良好 的 特 异 性 反应 。
关键 词：猪流行性腹泻病毒 ；单克隆抗体 ；Ｗｅｔ ｎＢｏ；间接 Ｅ ＩＡ ｓ ｒ ｌ ｅ ｔ ＬＳ
辣根过氧化物酶（ Ｒ ） Ｈ Ｐ 标记羊抗 鼠 Ｉ ，购 自 ｇ Ｇ
北 京 中杉 金桥 生 物技 术有 限公 司 ，ＩＧ 抗体 亚 类试 ｇ 剂盒 购 自 Ｓｕｈｒ ｉｅｈ公 司。 ｏｔｅｎＢｏ ｃ ｔ
维普资讯
免疫 Ｂ Ｌ ／ 小 鼠，运 用淋 巴细胞 杂交瘤技 术 ，制备单克 隆抗体 ，用原核表 达 系统 Ｔ ２ ｐ Ｒ Ｈ ａ Ｌ １经 ＩＴ Ａ Ｂｃ １ 一 Ｐ Ｏ Ｔ／ ２ Ｂ Ｐ Ｇ诱
导表 达 的 Ｐ Ｄ Ｅ Ｖ Ｎ蛋 白做 筛选抗原 ，通过 间接 Ｅ ｌＡ进行 筛选 ，获得 两株抗 Ｐ Ｄ ＬＳ Ｅ Ｖ Ｎ蛋 白杂 交瘤细胞 ，命 名 为