Biacore 生物大分子相互作用分析仪介绍
Biacore_检测蛋白与蛋白相互作用
Biacore_检测蛋白与蛋白相互作用蛋白是生物功能的主要体现者，蛋白的表达水平、活性强弱和相互作用等与生物学功能密切相关，如复制转录、信号转导、新陈代谢、抗体药物等，错误的蛋白相互作用会引起紊乱和疾病。
因此，蛋白的相互作用分析成为目前生物大分子研究中必不可少的重要手段。
蛋白-蛋白相互作用分析方法有很多，比如ELISA、CoIP、FRET、Y2H等，但这些方法往往受到需要标记、检测灵敏度低、假阳性高、无法定量等限制。
以Biacore为代表的表面等离子体共振（SPR）技术，无需对分子进行标记，能够实时观测微量、灵敏、快速、动态的定量表征结合过程，为正确全面地判定分子间相互作用提供可靠的数据支持！Biacore在蛋白-蛋白相互作用领域的研究涉及到科学研究的很多方面，比如：（1）结构生物学（2）病毒入侵机制（3）植物调控的分子机理，抗逆机制（4）转录因子（5）食品含量测量（6）疾病的分子机理研究等接下来以BiacoreT200仪器为例，解析蛋白与蛋白互作实验操作流程。
Biacore T200 检测蛋白与蛋白结合操作指南实验前准备· S 系列 CM5 芯片，货号：29-1049-88 ( 一片装 )、BR-1005-30 ( 三片装 )、29-1496-03 ( 十片装 )，( 注：每张芯片若一次性使用，可检测三对不同的互作，若再生后重复使用，只要蛋白一直有活性，就可一直使用 )。
·氨基偶联试剂盒( 货号：BR-1000-50),( 注：里面的EDC 和NHS，溶解后，200ul 每管分装，-20℃冻存，后续实验前，各取一管融化后使用即可 )。
·偶联 Buffer：10mM 醋酸钠 pH4.0 ( 货号：BR-1003-49 )，或10mM 醋酸钠 pH4.5 ( 货号：BR-1003-50 )。
·缓冲液：10 x HBS-EP+ ( 货号：BR-1006-69 )，用去离子水稀释10 倍，配置500 mL，置于T200 系统左侧托架上，将缓冲液进液管 A 插入瓶中。
biacore 8k参数
biacore 8k参数Biocore 8K参数Biocore 8K是一种生物传感器技术，用于分析和测量生物分子的相互作用。
它是一种表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance，SPR）仪器，可以实时检测生物分子的结合动力学和亲和性。
Biocore 8K具有许多独特的参数和功能，使其成为生物研究领域中的重要工具。
1. 流速控制：Biocore 8K可以通过调节流速来优化分析条件。
流速的选择可以影响到样品的传输，以及分子的结合和解离速率。
通过调节流速，研究人员可以根据实验需求来优化反应条件，从而获得准确的实验结果。
2. 注射模式：Biocore 8K提供了多种注射模式，包括单次注射、重复注射和连续流动注射。
这些不同的注射模式可用于模拟不同的生物过程和实验条件，帮助研究人员更好地理解生物分子的相互作用。
3. 温度控制：Biocore 8K具有温度控制功能，可以在实验过程中精确控制温度。
温度对生物分子的结合和解离动力学有重要影响，通过控制温度，研究人员可以模拟和优化生物反应条件，从而获得准确的实验结果。
4. 反应容器：Biocore 8K使用专门设计的芯片作为反应容器，该芯片具有高灵敏度的传感器阵列。
芯片上的传感器可以同时检测多个样品，提高实验效率。
此外，芯片还可以根据需要进行功能化修饰，以适应不同分子的检测需求。
5. 数据分析：Biocore 8K配备了专业的数据分析软件，可以对实验数据进行实时监测和分析。
该软件提供了丰富的数据处理工具和图表，可以帮助研究人员更好地理解实验结果。
通过对数据进行曲线拟合、亲和性分析和动力学建模，研究人员可以获得准确的结论和深入的研究洞察。
6. 多样性应用：Biocore 8K广泛应用于生物医药、生物化学、生物工程和生物物理等领域。
它可以用于研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸、蛋白质-小分子等生物分子的相互作用。
此外，Biocore 8K 还可以用于药物发现和开发，包括药物筛选、药物亲和性评估和药物动力学研究等。
biacore分子相互作用
BIAcore系统是一种常用于分析生物分子间相互作用的方法，其基于光学表面等离子共振BIAcore系统是一种常用于分析生物分子间相互作用的方法，其基于光学表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance，简称SPR）原理。
具体来说，BIAcore可以提供实时观察生物分子间相互作用的技术，它实时记录分子结合和解离过程中传感芯片表面分子质量发生的变化，从而实时地监测分子间的相互作用。
BIAcore系统广泛应用于蛋白-蛋白、蛋白-小肽、蛋白-DNA，蛋白-药物、小肽-噬菌体、SPR-MS等各种生物分子之间相互作用的研究领域。
它的应用领域十分广泛，包含生命科学、食品安全、环境检测、生物医学、毒素和抗生素快速检测、蛋白质组学、药物筛选及相关药物动力学实时检测、生物分子特殊肽段及相关偶合分子的检测、病毒及致病分子/蛋白及受体研究、分子识别、免疫调节、免疫测定等。
SPR(Biacore)基本原理
Biacore Training
Biacore Training
传感芯片
葡聚糖 CM5
➾ 亲水性 ➾ 用于偶联
连接层 金膜 50 nm
➾ 用于SPR检测
玻璃支持层
• 除了HPA, Au和C1，所有芯片表面均覆盖葡聚糖层
Biacore Training
传感芯片
Biacore Training
1 RU 的响应值等价于芯片表面结合物质的 浓度改变了1 pg/mm2
Biacore Training
微射流卡盘（IFC） 液体传送装置 • 迷你化的组件 • 试剂消耗量低 • 完整的全自动液体处理装置
IFC
(展开图)
液体通道（flow cells）
微射流卡盘– 液体通道（Flow cells） • 不同的Biacore仪器，其IFC的液体通道的类型和
葡聚糖表面
• 亲水性 • 温和型: 和2%浓度的葡聚糖水溶液环境相似 • 非特异性结合量低 • 高结合容量 • 易于进行共价结合 • 出色的化学稳定性
Biacore Training
传感芯片 CM5
• 羧基化的葡聚糖表面 • 最常用的传感芯片 • 卓越的化学稳定性决定了 • 可靠的实验重复性
Biacore Training
• Biacore 的数据
» 传感图（The sensorgram）
SPR 生物传感技术的应用领域 • 生物大分子的相互作用
Biacore Training
SSppeecciiffiicciittyy
KKiinneettiiccss
AAffffiinniittyy
CCoonncceennttrraattiioonn
BIAcore生物分子相互作用分析仪原理和操作注意事项
BIAcore生物分子相互作用分析仪原理和操作注意事项BIA（Biomolecular Interaction Analysis）提供了实时观察生物分子间相互作用的技术。
通过它能观察两种分子结合的特异性，能知道两种分子的结合有多强，还能了解生物分子的结合过程共有多少个协同者和参与者。
BIA可以让得到用其他技术方法难以得到的结果，因为它可以实时反映分子结合过程中每一秒变化的情况。
无需借助标记物进行分析使BIA广泛应用于各类生物体系的测定，从各类小分子化合物、多肽、蛋白质、寡核苷酸和寡聚糖直至类脂、噬菌体、病毒和细胞。
BIA就是利用金属薄膜表面的折射率的改变，引起共振角的变化，来推断金属薄膜表面的变化。
实验时先将一种生物分子固定在传感器芯片表面，将与之相互作用的分子溶于溶液流过芯片表面。
检测器能跟踪检测溶液中的分子与芯片表面分子的结合、解离整个过程的变化。
BIA技术是基于一种表面等离子共振（SPR）的物理光学现象的生物传感分析技术。
不必使用荧光标记和同位素标记，从而保持了生物分子的天然活性。
当入射光以临界角入射到两种不同透明介质的界面时将产生全反射，且反射光强度在各个角度上都应相同，但若在介质表面镀上一层金属薄膜后，由于入射光可以引起金属中自由电子的共振，从而导致反射光在一定的角度内大大减弱，其中使反射光完全消失的角度称为共振角。
共振角会随金属薄膜表面通过的液相的折射率的改变而改变，折射率的变化（RU）又和结合在金属表面的大分子质量成正比。
因此，BIA技术可以通过对反应全过程中各种分子反射光的吸收获得初始的数据，并经相关处理获得结果－传感图。
一 各种传感片的理化特性及用途传感器芯片是实时信号传导的载体。
芯片结构是在玻璃片上覆盖了一层金膜，各种类型的芯片在金膜表面连有不同的多聚物以形成不同的表面环境，利于固定不同性质的生物分子。
实验时先将一种生物分子固定在传感器芯片表面，将与之相互作用的分子溶于溶液流过芯片表面。
biacore表征抗体和抗原的结合动力学
Biacore 是一种常用的生物传感技术，用于表征抗体和抗原之间的结合动力学。
它基于表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance，SPR）现象，通过监测光信号变化来实时测量生物分子的相互作用。
以下是使用Biacore 进行抗体和抗原结合动力学表征的基本步骤：
1. 表面制备：在Biacore 芯片上构建表面以捕获抗原或抗体。
通常，可以将抗原或抗体固定在芯片表面上，形成一个稳定的富有活性的层。
2. 实验设计：确定实验条件，包括流速、温度和缓冲液等。
这些条件应该与实际应用环境相匹配，以获得准确的结果。
3. 参考样品：准备参考样品，其中至少包括纯净溶液和缓冲液，以便对实验系统进行校准和基线确定。
4. 进行实验：将待测样品（通常为抗体）注入到芯片中，并观察光信号的变化。
当待测样品与芯片表面上的抗原结合时，会引起光信号的变化。
5. 数据分析：利用Biacore 提供的软件对实验数据进行分析。
通过分析曲线形状和信号变化，可以获得结合动力学参数，如关联常数（association constant）、解离常数（dissociation constant）和亲和力
等。
6. 结果解释：根据实验结果解释抗体和抗原之间的结合动力学特征。
这可以帮助我们了解抗体与抗原的结合亲和力、速率常数等参数，以及可能的结合机制。
Biacore 技术的优点是实时监测结合过程，定量描述抗体和抗原之间的相互作用。
它可以提供关于亲和力、速率常数和结合动力学等信息，为药物研发、生物分子相互作用研究和诊断测试等领域提供重要的实验数据。
生物大分子相互作用分析
四、BIAcore的一般分析流程
2. pH值选择（pH Scouting）
A 目的 使配体与芯片表面接近
B 如何选择合适的pH值？ 选择在pKa和蛋白质pI之间的某一pH值，用此pH值的NaAC稀释配体。
C 判断pH值合适的依据
四、BIAcore的一般分析流程
BIAcore C
BIAcore 3000
BIAcore Flexchip
BIAcore A100
BIAcore X100
BIAcore T100
二、BIAcore简介和工作原理
4. 其他品牌的分子互作分析仪
二、BIAcore简介和工作原理
5. BIAcore3000组件
光路和检测系统
IFC系统 芯片及卡盘
一、生物分子相互作用的研究
3. 大分子互作研究方法
A 酵母双杂交系统（THS） B 化学发光共振能量转移（BRET） C 双分子荧光互补（BIFC） D 生物分子相互作用分析（BIA） E 蛋白芯片（PC）
二、BIAcore简介和工作原理
1. BIA定义
BIA：Biomolecular Interaction Analysis 生物分子相互作用分析
三、BIAcore的应用领域
1. 免疫学检测、生化分析
2. 药物发现和筛选
3. 核酸/核酸、核酸/蛋白互作分析
4. 蛋白质分析和蛋白质组学
三、BIAcore的应用领域
1. 免疫学检测、生化分析
A 抗原识别、抗原决定簇 代替放射性免疫检测和ELISA
B 抗原抗体结合常数测定 T细胞识别抗原是免疫学研究的重点，分析抗原抗体结合常
4. 进样分析（Sample Injection）
biacore配体偶联水平计算
在生物医学领域中，生物分子相互作用的研究是非常重要的。
而对于生物分子相互作用的研究中，biacore配体偶联水平的计算是一个关键的步骤。
本文将从浅入深地探讨biacore配体偶联水平计算的主题，帮助您更深入地理解这一概念。
1. 什么是biacore配体偶联水平计算？在生物医学研究中，biacore是一种常用的生物分子相互作用分析仪器。
而配体偶联水平计算则是指在biacore上对配体与受体的结合强度进行定量分析和计算。
这一步骤可以帮助研究人员更好地理解生物分子间的相互作用，从而为药物研发和生物医学研究提供重要参考。
2. biacore配体偶联水平计算的重要性配体偶联水平计算是生物医学研究中的关键一环。
通过这一计算，研究人员可以了解配体与受体之间的相互作用强度，从而评估药物的疗效和安全性，优化药物研发过程。
配体偶联水平计算也能够帮助科研人员深入理解生物分子的结构与功能，为疾病治疗和病理机制研究提供重要数据支持。
3. biacore配体偶联水平计算的原理在biacore配体偶联水平计算中，主要依靠表面等离子体共振技术(SPR)。
通过SPR技术，可以实时监测配体与受体在生物芯片表面的结合情况，并通过计算得出它们之间的结合亲和力、速率常数等参数。
这些参数的计算可以帮助研究人员全面评估生物分子的相互作用情况，为进一步研究和应用提供有效数据支持。
4. biacore配体偶联水平计算的进展和挑战随着生物技术和分析仪器的不断发展，biacore配体偶联水平计算在生物医学领域的应用也得到了广泛的推广。
然而，由于生物分子结合过程的复杂性和多样性，配体偶联水平计算中还存在一些挑战，如对大分子复合物的计算、数据的准确性和标准化等方面的问题。
未来还需要进一步完善技术和方法，以提高配体偶联水平计算的准确性和应用价值。
5. 个人观点与总结biacore配体偶联水平计算在生物医学研究中具有重要意义。
通过全面评估配体与受体的结合情况，可以为药物研发和生物医学研究提供重要参考。
运用BIAcore技术研究G蛋白和腺苷酸环化酶的结合反应
面向２ｌ世纪的植物保护发展战略运用ＢＩＡｃｏｒｅ技术研究Ｇ蛋白与腺苷酸环化酶的结合反应陈巨莲‘倪汉祥１孙京瑞１ＧｅｚｈｉＷｅｎ９２Ｒａｖｉｌｙｅｎｇａｒ２（１．中国农科院植保所北京１０００９４；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒｏｆＭｏｕｎｔＳｉｎａｉ，ＮｅｗＹｏｒｋＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＮＹ１００２９）摘要应用表面质膜共振（ＳＰＲ）技术，采用传感芯片？ｅＴＡ（ｓｅｎｓｏＦｃｈｉｐ．Ⅵ’Ａ】首次证明Ｇ蛋白Ｄ－ｐ亚基直接作用于腺苷酸环化酶２（Ａｃ，）的胞质尾巴ｃ：区域，而且活性位点和结台位点同位于该区域。
研究结果为今后开展Ｇ蛋白在昆虫信号传导中的作用和小麦抗蚜分ｒ机理奠定ｒ基础。
ＢＩＡｃｏｒｅ技术是一种队渐消失波方法为基础的表面质膜共振（ＳｕｒｆａｃｅＰＩａｓｍｏｎＲｅｓｏｎａｎｃｅ，ＳＰＲ）技术，其优点队测定折射指数这一物理量的变化监测细胞内或离体的蛋白与蛋白互作的即时反应，不需要对所研究蛋白质进行任何修饰，而且适用大分子之间互作的亲和力范围很广，因而被普遍用于生物大分子互作关系定量研究｛Ｓｃｈｕｃｋ，１９９７），关键词表面质膜共振（ＳＰＲ）技术ＢＩＡｃｏｒｅ技术Ｇ蛋白腺苷酸环化酶（ＡＣ）ＢＩＡｃｏｒｅ技术利用在金属／液体界面发射一个表面质膜波研究分子之间的结台。
一个相互作用的组分固化在装备好的传感芯片（ｓｅｎｓｏｒｃｈｉｐ）上，另一个组分从缓冲液中流过，分子之间结合反应引起芯片上折射指数的改变，即为监测的ＳＰＲ信号的改变，用分子动力学方程及有关参数来确定其结合情况。
腺苷酸环化酶（ＡＣ）是研究Ｇ蛋白效应物的最早例子。
它是质膜上一种酶，受Ｇ蛋白直接凋控，能催化腺苷三磷酸（ＡＴＰ）产生环腺苷酸ｃＡＭＰ。
目前，哺乳动物的ＡＣ的９个同工酶（ｉｓｏｆｏｒｍ）都被克隆，据推断这些ＡＣ具有相似的二级结构：一个短的氨基末端，６个跨膜螺旋和一个Ｃ一末端胞质尾巴（Ｗｅｎｇｅｔａ１．，１９９８）。
biacore 案例
biacore 案例全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：生物传感技术在生物医药领域中扮演着越来越重要的角色，其中一种重要的技术是生物感应技术(Biacore)。
Biacore是一种生物传感技术，通过检测生物分子相互作用的强度和动力学来实现分子水平的定量分析。
它将生物分子固定在传感芯片表面上，通过监测在其表面流过的分析物质分子与固定生物分子间相互作用的变化来获得信息。
Biacore技术最初由瑞典公司Pharmacia Biacore开发，后来被GE Healthcare收购。
Biacore技术被广泛应用于生物医药领域，包括药物筛选、蛋白质相互作用研究、生物样品分析、免疫学研究等。
下面我们将介绍一些关于Biacore技术在药物开发方面的案例。
1. 蛋白质药物研究在研发新型蛋白质药物时，需要对药物与其靶点蛋白质的相互作用进行研究。
Biacore技术可以实现对蛋白质与蛋白质之间的相互作用进行定量分析，进而优化药物分子的结构，提高药效。
2. 生物样品分析Biacore技术也可以应用于生物样品的分析，比如血清样本中的蛋白质浓度检测、血液中各种荷尔蒙的检测等。
通过Biacore技术可以实现对生物样品的快速、准确的分析。
3. 药物筛选Biacore技术在药物筛选领域也有重要应用。
研究人员可以利用Biacore技术对候选药物与靶点蛋白质的相互作用进行快速筛选，从而筛选出最具活性的药物。
Biacore技术在生物医药领域中有着广泛的应用前景。
它可以帮助研究人员更加深入地理解生物相互作用的机制，加快新药研发过程，提高药物研发的效率和成功率。
相信随着生物技术的不断发展，Biacore技术将在未来有更加广泛的应用，为生物医药领域的发展做出更大的贡献。
第二篇示例：生物医学领域的科研工作往往离不开各种先进的仪器设备，在这BIACORE是一个被广泛应用的生物传感技术分析仪器，它可以用于生物分子间的相互作用分析、蛋白质互作研究、新药筛选等多个方面。
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Biacore 生物大分子相互作用分析仪
BIA是英语"Biomolecular Interaction Analysis"的缩写，Biacore提供了实时观察生物分子间相互作用的技术。
通过它您能观察两种分子结合的特异性，能知道两种分子的结合有多强，还能了解生物分子的结合过程共有多少个协同者和参与者。
Biacore可以让您得到用其他技术方法难以得到的结果，因为它可以实时反映分子结合过程中每一秒变化的情况。
无需借助标记物进行分析使Biacore 广泛应用于各类生物体系的测定，从各类小分子化合物、多肽、蛋白质、寡核苷酸和寡聚糖直至类脂、噬菌体、病毒和细胞。
Biacore 是一个通用的仪器，因为您可以任意偶连如上所述任一种生物分子到传感片表面。
因此要将Biacore
应用在哪个领域，由您决定!
Biacore 拥有20余年表面等离子共振（SPR）生物传感器的研发经验，是生物分子相互作用领域的技术引
领者和标准制定者。
Biacore系统提供独到的洞察力来揭示蛋白质以及其他生物分子之间的相互作用，能够帮
助科学家们更深入的理解生物分子的功能、更好的作出决策和提高生产力。
Biacore是基于表面等离子共振(SPR)技术来实时跟踪生物分子间的相互作用，而不用任何标记物。
实验时先将一种生物分子固定在传感器芯片表面，将与之相互作用的分子溶于溶液流过芯片表面。
检测器能跟踪检测溶液中的分子与芯片表面的分子结合、解离整个过程的变化。
Biacore系统可以为很多领域提供有价值的信息包括：动力学、亲和力、特异性、热力学和浓度等，同时它所
能够研究的分子范围也十分广泛-大至细胞与病毒，小至100道尔顿以下的有机化合物。
Biacore系统性能强大
的硬件、种类丰富的耗材和操控智能的软件适合各个领域对于各种高质量数据的需求：无论是基础研究，还
是药物开发，甚至是生产过程中的质量控制。
您可以从Biacore官方网站（）上查询到更多的
信息。
GE Biacore现有5个型号：Biacore 4000， Biacore 3000，Biacore T200， Biacore X100 及主要面对食品或维生素客户的Biacore Q
今天对生命科学奥秘的探索，已经不仅仅停留在是什么，而是要探询为什么。
旨在揭示生命现象背后的机理研究，必然要理清生物分子间复杂的关系。
只有Biacore能实时反映生物分子相互作用的整个过程，而不同于其他只能提供生物分子作用后的结果的方法，为您开辟一个崭新的研究角度。
- 蛋白质组学研究(Proteomics)
- 癌症研究(Cancer Research)
- 新药研发(Drug Discovery)
- 信号传递(Cell Signalling)
- 多分子复合物的结构和组装( Multi-molecular Complexes) - 分子识别(Molecular Recognition)
- 免疫调节(Immune Regulation)
- 免疫测定法(Immunoassay)
- 疫苗开发(Vaccine Development)
- 瞬时结合(Transient Binding)
- 配体垂钓(Ligand Fishing)
- 结合特异性(Binding Specificity)
- 结构与功能的关系(Structure-function Relationship)
- 酶反应(Enzyme Reaction)。