不同剂量博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的差异和动态变化
博来霉素对急性肺损伤小鼠肝毒性的影响
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２１ ０ ０年 ６月上 第 ２ 卷 第 ｌ 期 １
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究所。
纤维化药物 的评价和预后 。 研究发现 ， 博来霉素的剂量与实 验小 鼠的肺纤维化程度有 明显的依赖性 ， 药物剂量 越大 ， 纤
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度呈正相关。
博来霉素是从轮生链霉素菌中提取 的一种通过诱导肿 瘤细胞凋亡和抑制肿瘤新生血管生长发挥作用的抗肿瘤药 物 ，用其制作的肺纤维化模型因其生理和病理改变与人类 肺纤维化发生发展具 有较高的相似性而被广泛 的应用于抗
作者 简 介 ： 杨长福 ， ， 士， ， 男 硕 讲师 研究方向： 肺纤维化作用机制
肝脏是动物机体 内具有物质储存 、 代谢 、 解毒等综合功 能的器官 ， 是外源性药物生物转化 的主要场所， 肝脏 内丰富 的酶系统为药物 的吸收 、转运和降解提供 了最佳场所 。其
有 限公司 ，５ Ｓ ？ 一 ， １Ｕ Ｐ 支 １批号 ：８ ９ １加生理盐水适量 ， ０００ ） 使
不同造模方式对博莱霉素所致小鼠肺纤维化的影响
不同造模方式对博莱霉素所致小鼠肺纤维化的影响1.南京医科大学附属泰州人民医院江苏泰州 2253002. 2.上海交通大学医学院附属新华医院老年科上海200092【摘要】目的建立博莱霉素诱导肺纤维化小鼠模型，比较经鼻腔滴入和经气管内滴入的成模差异。
方法将36只C57BL/6J雄性小鼠采用随机数字表法分成阴性对照组（C组）、鼻腔给药组（N组）和气管给药组（I组），每组12只。
N组和I组分别经鼻腔滴入和气管内一次性滴入博莱霉素5 mg /kg诱导肺纤维化模型，C组经鼻腔滴入5 mg /kg生理盐水。
随机选取各组4只小鼠于造模14天后处死后取肺组织。
计算肺系数；统计小鼠体重变化和生存曲线；HE和Masson染色观察小鼠肺组织病理变化，并进行Szapiel评分。
结果给予博莱霉素造模后，N组和I组小鼠均出现体重增长程度的下降；肺系数较C组上升，其中I组相比N组肺系数上升更明显；HE和Masson染色后N组和I组肺组织炎症和纤维化程度明显加重，并通过评分比较发现I组相比N组肺组织炎症和纤维化程度明显加重。
结论经鼻腔滴入和气管内滴入博莱霉素分别制备肺纤维化小鼠模型，其纤维化程度存在一定程度差异，气管内滴入博莱霉素的纤维化程度更高。
【关键词】博莱霉素；肺纤维化；肺系数特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）是肺组织受损后异常修复所致的病理现象，早期以弥漫性肺泡炎、肺间质炎症为主，晚期发展为间质纤维化，表现为成纤维细胞异常增殖和细胞外基质过度沉积，导致肺组织结构破坏、功能受损[1]。
本病预后极差，多数患者确诊后中位生存时间仅2~3年[2]。
博来霉素（Bleomycin，BLM）制备肺纤维化模型是应用最广泛、研究最好的方法[3]，可以诱导出明显的纤维化反应，并且在IPF患者中显示出几种组织学特征[4, 5]。
既往研究表明，博莱霉素的肺纤维化模型中评估肺组织炎症和纤维化的最佳时间是博莱霉素滴入后第14天[6]。
不同剂量博莱霉素致小鼠肺纤维化模型的比较
万方数据 万方数据 万方数据陶章．等．不同劫量博蕞霉素致小鼠秭纾维化摸墅的磁较对照组：肺泡形态正常，壁纤细，间质中无炎症细胞浸润，见图１ａ。
２ｍｇ，ｋｇ博莱霉素组：肺纤维化程度＋，小片肺组织实变，其中有炎细胞浸润和少量胶原沉积，见图１ｂ。
３．５ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组：肺纤维化程度＋＋，肺组织中有较多的小片状实变区，实变区间见肺泡壁增厚，间隔增宽，有较多的炎细胞浸润和胶原沉积，见图１ｃ。
５ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组：肺纤维化程度＋＋＋，可见大片的肺实变，大量胶原沉积，见图１ｄ。
２．６各组小鼠肺组织中羟脯氨酸含量的测定见表３。
表３各组小鼠肺组织中羟脯氦酸含量的变化Ｔａｂｌｅ３Ｃｈａｎｇｅｓｉｎｐｕｌｍｏｎａｒｙｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｍｉｃｅｉｎｔｈｅｂｌｅｏｍｙｃｉｎａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｓ（ｘ－ｔ－Ｓ，ｍｇ／ｇ）Ｇｒｏｕｐ几ＨｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔＣｏｎｔｒ０４１５０。
４４ｆ；±０．００５Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ２ｍｇ／ｋｇ６０．５１２±－－０．０１７．３．５ｍｇ／ｋｇ４０．６２１±－０．００７ａ８Ｐ‘０．０５．临．ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ５ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组因小鼠存活数量太少不做统计分析，表３可见，各组小鼠肺组织中羟脯氨酸含量从高到低依次为５ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组（１只小鼠，肺组织羟脯氨酸含量为０．６６０ｒａｇ／ｇ）、３．５ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组、２ｍｇ／ｋｇ博莱霉素组和对照组。
３讨论博莱霉素是从轮生链霉菌中提取的一种抗肿瘤药物，国产平阳霉素是其单体，毒性小于博莱霉素。
它们的毒副作用之一是引起肺纤维化，用博莱霉素制作的肺纤维化模型，其病理组织学和生理学改变与人类肺纤维化近似，因此成为肺纤维化造模的常用药物。
１９７４年，Ａｄａｍｓｏｎ等删首次采用腹腔多次注射博莱霉素的方法，建立了鼠肺间质纤维化动物模型。
此后，一些学者采用不同动物及不同方式建立的模型逐渐增多（包括猴、犬、兔、豚鼠、大鼠、小鼠），采用多种途径（静脉、腹腔、皮下、气管）给药，均可成功建立模型。
维替泊芬减轻博来霉素诱导的肺纤维化的作用研究
维替泊芬减轻博来霉素诱导的肺纤维化的作用研究阎秋雨;陆晓萱;旷喜;杜俊蓉【期刊名称】《沈阳药科大学学报》【年(卷),期】2024(41)1【摘要】目的研究维替泊芬(verteporfin,VP)对肺纤维化小鼠的治疗作用及其机制。
方法给予C57BL/6小鼠气管内注射博来霉素(bleomycin,BLM)建立肺纤维化模型。
造模后第8天开始使用VP(100 mg·kg-1)治疗,每3天腹腔注射一次,连续给药两周。
于造模后第21天处死小鼠,计算体重变化率和肺系数;采用HE染色和Masson染色观察小鼠肺部的纤维化病变;羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)试剂盒测定肺组织的HYP水平;q-PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)和白细胞介素11(interleukin-11,IL-11)mRNA表达水平;Western blot法检测Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、α-SMA、YAP和核因子κB p65(nuclear factor kappa-B,NF-κBp65)的蛋白表达水平;ELISA试剂盒检测肺组织匀浆中IL-11水平。
结果经过VP治疗后,小鼠的体重变化率和肺系数降低;HE染色和Masson染色中的纤维化病变及胶原沉积有改善;肺组织的HYP、CollagenⅠ和α-SMA水平降低;VP也降低了肺组织中YAP、NF-κB p65和IL-11的表达。
结论VP可减轻BLM诱导的小鼠肺纤维化,其治疗作用与IL-11的下调相关。
【总页数】6页(P96-101)【作者】阎秋雨;陆晓萱;旷喜;杜俊蓉【作者单位】四川大学华西药学院【正文语种】中文【中图分类】R96【相关文献】1.吡非尼酮下调NOX4减轻由博来霉素诱导的小鼠肺纤维化2.复明汤调控TGF-β1/Smad3通路抑制肺成纤维细胞活化及肺上皮损伤减轻博来霉素诱导的肺纤维化3.苦胆草减轻博来霉素致大鼠肺纤维化的作用研究4.山姜素对博来霉素诱导的肺纤维化小鼠的作用及机制研究5.山姜素减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基于自噬探究补肺活血胶囊对博来霉素诱发小鼠肺纤维化的抑制作用
基于自噬探究补肺活血胶囊对博来霉素诱发小鼠肺纤维化的抑制作用李鹏;牛璐;赵国静;孙英;陶红卫;周佩夏;陆学超;胡海波【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2024(46)4【摘要】目的基于自噬与上皮间质转化(EMT)角度探究补肺活血胶囊对肺纤维化(PF)小鼠的作用。
方法 105只C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,雷帕霉素组(2 mg/kg,腹腔注射),低、中、高剂量补肺活血组(0.32、0.63、1.62 g/kg补肺活血胶囊,灌胃)和补肺活血+3-MA组(1.62 g/kg补肺活血胶囊,灌胃;30 mg/kg 3-MA,腹腔注射)。
通过对小鼠气管内单次注射2.5 mg/kg博来霉素(BLM)来诱导PF,造模成功后1 d开始给药,持续21 d。
统计小鼠存活率与体质量,采集肺泡灌洗液(BALF)并测定总细胞与总蛋白,测定肺组织湿干重比与羟脯氨酸水平,苏木精和伊红(HE)染色和Masson三色染色观察肺组织病理学变化,RT-qPCR法检测肺组织EMT相关因子(E-cad、Vim、α-SMA、TGF-β1)mRNA表达,Western blot法检测肺组织EMT相关蛋白以及自噬相关蛋白(p-mTOR、mTOR、P62、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin1)表达。
结果与模型组比较,雷帕霉素与补肺活血胶囊干预后PF 小鼠生存率提高,体质量增加,肺组织湿干重比、BALF总细胞和总蛋白、羟脯氨酸水平均降低,肺组织病理形态改善,肺组织上皮细胞标志物E-cad mRNA及蛋白表达升高,间质细胞标志物Vim、α-SMA、TGF-β1 mRNA和蛋白表达降低,p-mTOR/mTOR、P62蛋白表达降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1蛋白表达升高;3-MA干预后PF小鼠各指标与模型组无明显差异。
结论补肺活血胶囊可通过促进上皮细胞自噬并抑制EMT来缓解BLM诱导的PF小鼠肺损伤。
【总页数】6页(P1337-1342)【作者】李鹏;牛璐;赵国静;孙英;陶红卫;周佩夏;陆学超;胡海波【作者单位】青岛大学附属青岛市海慈医院(青岛市中医医院)呼吸与危重症医学科(肺病)中心【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.叶黄素对博来霉素所致的小鼠肺纤维化治疗作用及其对小鼠氧化应激水平影响的研究2.褪黑素减轻博来霉素诱发小鼠肺纤维化早期的内质网应激反应3.维生素D3对博来霉素诱发小鼠肺纤维化的影响4.百部汤对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的抑制作用5.补肺活血胶囊对颗粒物致小鼠肺纤维化样变的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
肺纤维化动物模型的研究进展
3、影像学评估
影像学评估是利用X线、CT、MRI等影像学手段对肺纤维化动物模型进行评估。 X线平片可以观察到肺部纹理的改变和肺野的浸润影，CT和MRI可以更准确地判断 肺部病变的位置、范围和程度。此外，采用分子影像学技术，如光学成像、磁共 振成像等，可以进一步了解肺部病变的分子机制。
二、肺纤维化动物模型
1、博来霉素诱导的肺纤维化模型：博来霉素是一种由轮枝链霉菌产生的碱 性糖肽类物质的多组分复合抗生素，被广泛用于诱导肺纤维化。通过在动物身上 注射博来霉素，可以引发炎症和纤维化反应。这种模型已被广泛应用于研究肺纤 维化的病因和病理生理过程。
2、石棉诱导的肺纤维化模型：石棉是一种已知的致癌物，可导致肺癌和肺 纤维化。通过让动物吸入石棉，可以模拟石棉诱发的肺纤维化。这种模型有助于 研究石棉对肺部的影响以及开发新的预防和治疗策略。
3、遗传工程模型：某些基因的突变已被发现与特发性肺纤维化有关。利用 基因编辑技术，科学家们已经成功地创建了这些突变的动物模型。这些模型有助 于研究这些基因在肺纤维化中的作用，以及可能的治疗方法。
三、研究进展
1、炎症在肺纤维化中的作用：近年来，越来越多的研究表明，炎症在肺纤 维化的发病过程中起着关键作用。通过使用各种动物模型，科学家们已经发现了 一些炎症介质和细胞因子在肺纤维化中的重要性，这为开发新的治疗方法提供了 新的途径。
参考内容
一、引言
肺纤维化是一种慢性进行性疾病，其特征为肺组织逐渐被纤维组织替代，导 致肺部功能逐渐丧失。此疾病可由多种原因引发，包括石棉、某些药物或放射治 疗，以及一些遗传因素。在过去的几十年中，尽管科学家们已经尝试了各种方法 来研究肺纤维化的发病机制和寻找治疗方法，但该疾病仍然是一个重要的医疗难 题。在这篇文章中，我们将讨论肺纤维化动物模型的研究进展，以及这些模型如 何帮助我们理解疾病的发展过程和测试新的治疗策略。
抗肿瘤药物博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型
第5期邱雨雨，等:抗肿瘤药物博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型-55 -抗肿瘤药物博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型邱雨雨，张港，王鸣尚，杨小龙，董平轩*(德州学院医药与护理学院，山东德州253023)摘要:博来霉素(Bleomycin ,BLM ) 一 有抗肿瘤活性的天然产物，临床中具有导致肺纤维化损伤的副作用o 尝试 鼠肺间质纤维化简单易 实验方法’ C57BL/6小鼠，雌，随机分组° BLM 组一 注 酸博 素200 mg ( kg • bw )，对照组一次性注射相同剂量的生理性盐水’实验第21 d 实验组和对照组的小鼠留取肺组织，观察该实验中的小鼠肺 部 化,体重变化以及 ':与 雌 鼠对比,BLM 鼠肺部病理 主要为典型弥漫性炎、成纤维化部病理性基质 部质沉积 部病理变化特征,雌雄性别无明’ 有小鼠死亡 高，且病理变化不均一的特点’更加优化的肺纤维化 及其分子机制的深 有助于开发治疗肺纤维化 ’关键词:博 素;肺纤维化;尾静脉注射# C57BL/6 /J 、鼠中图分类号:R979C 文献标识码：A 文章编号：1008-021X (2021) 05-0055-03Pulmonary Fibrsis Model Inducee by Tail Vein Injection Bleomycin in MiccQiu Yuyu , Zhang Nang , Wang Mingshang , Yang Xiaolong , Dong Pingxuan *(Medicine and Nursing Department of Dezhou University , Dezhou 253023, China )Abstracc : Bleomycin was antitumor agent employed clinically for the treatment of several types of cancer. Objective of this study isioeipeooeiheopiomaemeihodsoobeeomycon ioonducepuemonaoyooboososon moce.40 C57BLL6 moceweoeoandomeydoeoded onioiwogooups : BLM maeegooup , BLM oemaeegooup , coniooemaeegooup and coniooeoemaeegooup.BLM eipeoomeniaegooup was oneecied woih beeomycon 200 mgL ( kg +bw ) once , whoeeiheconiooegooup wasoneecied woih ihesameamounioonoomaesaeone.Onihe21siday , a e ihemoceweoeko e e d , and iheeungio s uesooihemoceweoeiaken ioobseoeewheiheoihepaihoeogocaesiouciuoeooiheeungiossuewaschanged , and ihenoomaeweoghiand paoed woih iheconiooegooup moce , ihepuemonaoypaihoeogocaechangeson BLM gooup weoechaoacieoozed byiypocaedo o useioacheaepneumonoa ,eocaepaihoeogocaesioomaehypeopeasoaand ooboocyieooooboobeasi , deposoioon ooeiogenoussioomaon eocaepuemonaoyonieosioioumand eocaeaeeeoeaocaeoiy.Seeen BLM modeemocedoed and ihemooiaeoiyoaiewas35%.In ihosmeihod eipeoomeni , iheC57BLL6mousemodeeooeaoeypuemonaoyooboososwasesiabeoshed byoneeciongsongee-eaoge-dosebeeomycon ( 200 mgL ( kg +bw ) ) on iaoeeeon , aeihough iheeaoeydeaih oaieoomoceoseo i eehogh , and showed onhomogeneousooboososon iheeung.Then ihesompeeande o ecioeeiechnocaeioesiabeosh ooboososmodeeand oeseaochesoooismechanosm wo e makeoiheepoueiooeseaoch and deeeeopmenimedoconesooopuemonaoyooboosos.Key words : bleomycin ； pu —nona — fibrosis ； mil vein injection ； C57BL/6 mice博来霉素是从轮生链霉菌(Strep —myces ver/ci/is)培养液 中分离 一 基糖 产物，其结构如图1所示。
腹腔注射博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型的长期稳定性
腹腔注射博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型的长期稳定性苏敏红;江宁;李洪涛;王振国;谢玉芬;郑晓滨;涂常力;黄瑾【摘要】背景：至今特发性肺间质纤维化尚无特效治疗药物，这与该疾病动物模型尚不能完全模拟特发性肺间质纤维化病理表现有极大关系，因此建立更理想的动物肺间质纤维化模型对研究人类特发性肺间质纤维化的发病机制及研制有效治疗药物显得至关重要。
<br> 目的：建立一种更符合人类特发性肺间质纤维化病理组织特征的小鼠肺纤维化模型。
<br> 方法：雄性C57BL/6小鼠70只，随机均分为两组，博来霉素每周2次组(A组)，腹腔注射博来霉素35 mg/kg，2次/周，共注射8次；博来霉素每周1次组(B组)腹腔注射博来霉素35 mg/kg，1次/周，共注射8次。
分别于注射完第8次博来霉素后2，4，6，8，10周各处死5只小鼠，取肺组织进行羟脯氨酸测定、苏木精-伊红、Masson和免疫组织化学染色。
<br> 结果与结论：①两组在第8次腹腔注射后2，4，6，8，10周均出现不同程度的肺泡炎、肺纤维化。
A组肺泡炎、肺纤维化评分于2周开始逐渐升高，于6-8周达高峰，持续至10周仍无明显降低；B组肺泡炎、肺纤维化评分于2周最高，随后逐渐波动式下降，至6周开始明显比A组评分低(P<0.05)；②兔疫组织化学显示Ⅰ型胶原蛋白主要沉积在胸膜下、血管周围和肺泡间隔，与 Masson染色所见的胶原纤维分布一致；转化生长因子β1和α平滑肌动蛋白在肺泡炎和肺纤维化部位表达增多。
A组小鼠肺Ⅰ型胶原蛋白、a-SMA、转化生长因子β1、羟脯氨酸含量于2周开始持续升高，于6-8周达峰值；B组于2周最高，随后逐渐降低，于4周时肺a-SMA和转化生长因子β1表达明显低于A组(P<0.05)，于6周时肺Ⅰ型胶原蛋白表达和羟脯氨酸含量明显低于A组(P<0.05)；③结果表明，1周2次腹腔注射博来霉素35 mg/kg诱导小鼠肺纤维化模型有极好的稳定性，且操作十分简单，可重复性好，其反复损伤修复过程、病理变化、细胞因子变化都与人类特发性肺间质纤维化类似，对研究人类肺纤维化，尤其是特发性肺间质纤维化有重要意义。
博来霉素气管多次给药诱导小鼠肺纤维化模型
博来霉素气管多次给药诱导小鼠肺纤维化模型陈孟毅;林帅;杜朋;李程程;孟爱民【摘要】目的建立小鼠博来霉素气管多次给药肺纤维化模型.方法 SPF级雄性C57BL/6J小鼠45只,按体重随机分为未处理组(5只)和处理组(40只),未处理组小鼠不经处理,处理组小鼠博来霉素气管给药(0.4 mg/mL),2周给药1次,共8次.处理组小鼠在初次给药后2周、1个月、2个月、4个月时分别取出肺组织称重计算肺系数、固定做HE染色和Masson染色,制备冰冻切片进行细胞衰老β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色.结果与未处理组小鼠比较,处理组小鼠在给药2周时肺系数显著升高(P＜0.05);同时,肺组织病理观察结果显示,给药2周时,小鼠肺泡腔内渗出和血管周围炎细胞浸润较为严重,病理评分与未处理组小鼠比较显著升高(P＜ 0.05).此外,处理组小鼠在给药2周、2个月与4个月时肺泡间隔增宽相对稳定,与未处理组小鼠比较,病理评分显著升高(P＜0.05),但胞浆渗出逐渐减少、炎细胞浸润减轻,评分接近未处理组小鼠水平;胶原染色结果显示处理组小鼠在给药2周时出现蓝绿色的胶原纤维,并在l、2、4个月时胶原纤维持续存在;SA-3-Gal染色结果表明,与未处理组小鼠比较,博来霉素气管给药4个月时小鼠的肺组织中衰老细胞明显增多.结论博来霉素气管多次给药可以建立小鼠肺纤维化模型,且模型小鼠具有肺纤维化进展不可逆、炎性反应明显减少两个重要特点,并提示肺纤维化与衰老细胞有一定关系.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2017(014)002【总页数】5页(P8-11,封4)【关键词】博来霉素;纤维化;肺;模型【作者】陈孟毅;林帅;杜朋;李程程;孟爱民【作者单位】中国医学科学院医学实验动物研究所,北京 100021;中国医学科学院医学实验动物研究所,北京 100021;中国医学科学院医学实验动物研究所,北京100021;中国医学科学院医学实验动物研究所,北京 100021;中国医学科学院医学实验动物研究所,北京 100021【正文语种】中文【中图分类】R563.02;R363特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，IPF）是一种原因不明、以弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱最终导致肺间质纤维化为特征的慢性疾病[1-2]。
博来霉素诱导的肺纤维化动物模型
博来霉素诱导的肺纤维化动物模型
（一）实验动物
8周龄，体重为23g左右的C57BL/6小鼠
（二）实验材料
博来霉素、麻醉剂、手术剪、眼科镊、缝合线、1 ml注射器或微量注射器
（三）实验步骤
博来霉素（盐酸博来霉素或硫酸博来霉素均可，给药时需换算为博来霉素）使用生理盐水溶解，剂量为2-5 U/kg（PS：需根据实验动物的质量摸索造模剂量，不同来源的鼠有一定的差异）。
博来霉素给药采用器官内给药，成模率、成模速度较其他给药方式快。
具体操作如下：
小鼠按照麻醉剂剂量麻醉后，沿颈部中线开口（开口大小，小鼠0.5-1 cm左右）。
使用眼科镊分离出气管，此时需要轻柔操作，减少因手术操作造成的气管损伤，使用注射器（1ml或者微量注射器，胰岛素针不失为好的选择）将少量的博来霉素溶液（不超过0.2 ml/只，肺内大量积液会导致动物的死亡，溶液量极可能少）经气管注射进入器官内，缝合伤口后将动物直立1-3 min可稍微摇晃一下，保证博来霉素在肺内均匀分布。
（3天左右即会出现损伤，体重降低等症状，纤维化则与博来霉素的剂量和溶液体积有很大关系，一般在7-21天出现，时间越久模型组死亡率可能会比较高。
）
PS：博来霉素剂量当天配置当天使用，另外博来霉素诱导的肺纤维化模型在不同品系的动物上有很大的差异，C57Bl/6小鼠的敏感程度显著高于BALB/c小鼠。
动物死亡率可作为此模型药效指标。
博来霉素除经气管给药造成肺纤维化模型之外，还可以通过口服、腹腔等方式给药来造模[1]。
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余各组差异均有显著性（Ｐ＜Ｏ．０５）；各个剂量组Ⅲ型胶原的表达面积 与正常组相比，除１００ｍ∥（ｋｇ．ｂｗ）ＢＬＭ组在第７天的模型差异无显著
性外（Ｐ＞Ｏ．０５），其余各组均较正常组高（Ｐ＜Ｏ．０５），各个剂量组分别
在第２１天达到高峰，以２００ｍ∥（埏．ｂｗ）ＢＬＭ组第２１天组Ⅲ型胶原
的表达面积最高；该模型小鼠各剂量组死亡率为Ｏ。②在多次小剂量
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ｉｎｄｕｃｅ ｔ１１ｅ ｐｕｌｍｏｎａ巧ｆｉｂｒｏｓｉｓ．
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Ｍｅｔｈｏｄ：Ｏｎｅ ｈｕｎｄｒｅｄ ａｎｄ
ｗｅｒｅ
ｔｗｅｎｔｙ ｓｉｘ ８一ｗｅｅｋ ０１ｄ ｍａｌｅ ＩＣＲ ｍｉｃｅ
续注射１４ ｄ，两组分别于第１４、２１、２８天各处死６只。留取肺组织， 观察肺组织病理改变，检测Ⅲ型胶原的含量，观察小鼠体重及生存
率。
结果：①在一次性大剂量模型中，ＢＬＭ各剂量组肺泡炎症评分 及肺纤维化评分与正常组相比，除１００ｍｇ／（蚝．ｂｗ）ＢＬＭ组和
１
５０ｍｇ／（蚝．ｂｗ）ＢＬＭ组在第７天的模型差异无显著性外（Ｐ＞Ｏ．０５），其
并通过网络向社会公众提供信息服务。
硕士学位论文
中文摘要
不同剂量博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的差异及动态变化
摘要
目的：探讨博来霉素诱导小鼠肺纤维化最佳剂量和方法。方法：
１２６只８周龄雄性ＩＣＲ小鼠，随机分成一次性大剂量模型和多次小剂
量模型。一次性大剂量模型分为２００ｍ耿ｋｇ．ｂｗ）ＢＬＭ组、１ ５０ｍ∥（埏．ｂｗ） ＢＬＭ组、１００ｍ叭埏．ｂｗ）ＢＬＭ组及阴性对照组（ＤＮ组），每组１８只，
ｏｎｃｅ
Ｏｍ叭蚝．ｂｗ）／ｄ
ｇｒｏｕｐ
ＢＬＭⅫｅｃｔｉｏｎ
ｐｅｒ ｄａｙ ｆｏｒ ｃｏｎｓｅｃｕｔｉＶｅ ｌ ４
ａｔ １ ４，２ １觚ｄ ２８
（１ａｙｓ，ａｎｄ ｎｅｇａｔｉＶｅ ｃｏｎｔｒｏｌ铲ｏｕｐ．Ｓｉｘ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｌ（ｉ１１ｅｄ ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ
ＢＬＭ ａｎｄ ｓａｌｉＩｌｅ ｉ巧ｅｃｔｉｏｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉＶｅｌｙ．Ｔｈｅ ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔ，
Ⅳ
ｄａｙｓ．Ｔｈｅ ｅＸｐｒｅｓｓｉｏｎｓ
硕士学位论文
英文摘要
ｏｆ帅ｅⅢｃｏｌｌａｇｅｎ ｉ１１ ａＨ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｓｉ盟ｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉ曲ｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ
率低，操作简单，有效安全方便的特点使之有希望成为一种复制肺纤 维化的理想模型。
关键词 分类号 肺间质纤维化；博来霉素；ＩＣＲ小鼠 Ｑ９５．３３ｙｎａｍｉｃ ｅＶｏｌｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆ！｜ｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ
ＩＩ
硕士学位论文
中文摘要
模型中，各组的肺泡炎症与肺纤维化程度与正常组相比差异均有显著
性（Ｐ＜Ｏ．０５）；各组Ⅲ型胶原的表达也均高于正常组（Ｐ＜Ｏ．０５），且
随着时间的延长呈进行性增加，在第２８天达到高峰；该模型小鼠共 死亡１１只，死亡率为３０．５６％。 结论：在本实验中，以尾静脉一次性注射ＢＬＭ ２００ｍ∥（ｋｇ．ｂｗ） 后第２１天诱导建立的ＩＣＲ小鼠肺纤维化模型成模最好，其小鼠死亡
原创性声明
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Ｙ２４２３５５９
本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢
的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不
包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我 共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。
ｓｕｒｖｉＶａｌｒａｔｅ，ｐａｍｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｌｗ培ｔｉｓｓｕｅ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒＶｅｄ．
ａｎｄ锄ｏｕｎｔ ｏｆ ｔ），ｐｅ ＩＩＩ
ｃｏｌｌａｇｅｎ ｉｎ ｔｈｅ
ＲｅｓｕＩｔｓ：①Ｉｎ
ｔｈｅ ＯＬＤ ｍｏｄｅｌｓ，ｔ１１ｅ
ｓｃｏｒｅｓ
ｏｆ ｐｕｌｍｏｎａ巧ａｌｖｅｏｌｉｔｉｓ
＋ｒａｎｄｏｍｌｙ
ｄｉＶｉｄｅｄ
ｉｎｔｏ
ｓｉｎｇｕｌ妒１ａ玛９一ｄｏｓｅ
（０ＬＤ）
ａｎｄ
ｍｕｌｔｉｐｌｅ－ｌｏｗ－ｄｏｓｅ（１Ｖ几Ｄ）ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅ ＯＬＤ ｍｏｄｅｌ
ｉｎｔｏ ｆｏｕｒ ｓｕｂ铲ｏｕｐｓ ｗｉｔｌｌ
１ ５０ｍ∥（蚝．ｂｗ）， １
ｗａｓ ｃｌａｓｓｉｆｉｅｄ
ＢＬＭⅫｅｃｔｉｏｎ
ａｎｄ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｏｆ ｍｅ ｍｉｃｅ ｉｎ ｏｆ ｍｅ
ａＵ铲ｏｕｐｓ
ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ
ｎｏｍａｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜Ｏ．０５），ｅｘｃ印ｔ
ｍｅ １ ｏｏｍ∥（蚝．ｂｗ）ＢＬＭ ａｎｄ １ ５０
ａｔ ７
ｍ∥（蚝．ｂｗ）ＢＬＭ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞Ｏ．０５）ｓａｃｒｉｆｉｃｅｄ
作者签名：摧：趋．
日期：＿２盟Ｌ年由翌日
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分别经尾静脉一次性注射ＢＬＭ ２００、１５０、１００ｍｇ／（埏．ｂｗ）及生理盐水
１０ｍＬ／（ｋｇ．ｂｗ），各组分别于第７、１４、２１天各处死６只。多次小剂量
模型分为每日１０ｍ∥（埏．ｂｗ）ＢＬＭ组及阴性对照组（Ｎ组），分别经尾
静脉注射ＢＬＭ １ Ｏｍｇ／Ｏ唱．ｂｗ）及生理盐水１ Ｏｎ儿／（埏．ｂｗ），每天１次，连