生化分析常见交叉污染探讨与对策分解
生化试剂交叉污染对全自动生化分析仪检测结果的影响分析
生化试剂交叉污染对全自动生化分析仪检测结果的影响分析随着医疗水平的不断提高，生化分析仪已经成为临床检验中不可或缺的重要设备。
全自动生化分析仪通过对患者的生物样本进行精准分析，可以帮助医生快速获取患者的生化指标，对疾病的诊断和治疗提供重要参考。
在使用全自动生化分析仪的过程中，生化试剂交叉污染往往会对检测结果产生负面影响。
本文旨在对生化试剂交叉污染对全自动生化分析仪检测结果的影响进行分析，并探讨相应的解决措施。
一、生化试剂交叉污染的定义和原因生化试剂交叉污染是指在实验室中，由于操作不当或设备不清洁等原因导致不同生化试剂之间相互污染的现象。
生化试剂交叉污染可能会使得样本中的一些成分受到污染，从而影响全自动生化分析仪的检测结果。
生化试剂交叉污染的主要原因包括以下几点：1. 操作不当：在进行样本处理和试剂添加的过程中，操作人员如果没有严格按照操作规程进行操作，可能会导致不同试剂之间相互污染，从而影响检测结果。
2. 设备清洁不当：全自动生化分析仪作为高精密的设备，其清洁对于确保检测结果的准确性至关重要。
如果设备清洁不当，可能会导致试剂污染，从而影响检测结果。
3. 试剂质量问题：有些生化试剂的质量可能存在问题，如果在使用过程中没有及时发现并更换，则可能导致交叉污染，进而影响检测结果。
1. 检测结果偏高或偏低：生化试剂交叉污染会导致样本中的一些成分受到污染，从而可能使得最终的检测结果偏高或偏低。
3. 检测结果误差增大：生化试剂交叉污染会引起检测结果的误差增大，从而影响医生对于患者病情的判断和诊断。
以上种种影响都表明，生化试剂交叉污染可能会对全自动生化分析仪的检测结果产生严重的负面影响，从而影响到医生对患者病情的判断和诊断，甚至影响到患者的治疗效果。
为了避免生化试剂交叉污染对全自动生化分析仪检测结果产生负面影响，可以采取以下一些措施：3. 定期更换试剂：定期更换生化试剂，避免因为试剂质量问题导致生化试剂交叉污染，影响检测结果。
生化仪交叉污染对策
对比检测法
对比检测法是通过比较不同项目之间的检测结果来判断交叉污染的程度。具体操作是在生化仪上对多 个项目进行检测，比较各项目之间的检测结果，若某些项目的结果异常高或异常低，则说明存在交叉 污染。
对比检测法适用于具有多个检测项目的生化仪，具有操作简便、结果直观的优点。
仪器自检功能的使用
生化仪自检功能是指生化仪在每次开 机后自动进行一系列检测，以确保仪 器正常工作。通过使用生化仪自检功 能，可以及时发现仪器存在的异常情 况，如管路堵塞、气泡等，从而避免 交叉污染的发生。
高粘度或高盐度的试剂容易在 管道和组件上残留，导致交叉 污染。
选择低粘度、低盐度的试剂， 降低交叉污染的风险。
对于必须使用的特殊试剂，应 遵循仪器说明书，采取特殊措 施预防交叉污染。
04 生化仪交叉污染的检测方 法
试剂空白检测法
试剂空白检测法是通过检测试剂的空白值来判断交叉污染 的程度。具体操作是在生化仪上分别对试剂空白和样品进 行检测，比较两者的检测结果，若试剂空白值过高，则说 明存在交叉污染。
生化仪交叉污染对策
目录
• 生化仪交叉污染概述 • 生化仪交叉污染的常见原因 • 生化仪交叉污染的预防措施 • 生化仪交叉污染的检测方法 • 生化仪交叉污染的应对策略
01 生化仪交叉污染概述
交叉污染的定义
交叉污染是指在实验过程中，由于操作不规范、仪器故障或 环境因素等原因，导致一个样本中的物质污染到其他样本， 从而影响检测结果的准确性。
为预防生化仪交叉污染的发生，应建立应急预案。
预案应包括发现污染后的处理流程、责任分工、定期检查和维护的计划等内容。
通过培训和演练，确保相关人员熟悉应急预案的操作和流程，以便在交叉污染发生 时能够迅速应对。
生化分析常见交叉污染探讨与对策
生化分析常见交叉污染探讨与对策生化分析是一种重要的实验方法，常常用于研究生物大分子的结构和功能。
然而，在进行生化分析实验的过程中，常常会出现交叉污染的问题。
交叉污染是指样品之间的杂交，可能导致实验结果的偏差和错误解读。
因此，探讨交叉污染的问题，并提出对策是非常必要的。
交叉污染的主要原因是实验过程中样品之间的接触、混合和传播。
以下是常见的交叉污染原因及其对应的对策：1.微量样品污染：在操作过程中，微量样品可能附着在不同实验设备的表面或液体中。
这种污染可能是由于操作不当、设备不干净或者液体受到其他样品的污染。
对策：首先，要对所有的实验设备进行彻底的清洗和消毒。
其次，在进行实验之前，应该在每个设备上都进行质量控制，确保没有残留的微量样品。
此外，在液体搬运和处理过程中，应该小心避免将样品交叉污染。
2.实验室环境污染：实验室环境中可能存在空气中的微生物或粉尘等污染物，这些污染物会对生化分析实验的结果产生影响。
对策：为了减少实验室环境污染的影响，需要对实验室进行定期的清洁和消毒。
同时，可以使用高效空气过滤系统来净化实验室空气，确保实验环境的干净和无菌。
3.实验人员操作污染：实验人员在进行生化分析实验时，可能不小心将样品交叉污染。
这种污染可能是由于操作不规范或者没有采取相应的防护措施导致的。
对策：实验人员应该接受专业培训，了解正确的实验操作方法，并且时刻保持实验操作的规范和准确性。
此外，实验人员还应该使用一次性手套、口罩和防护眼镜等个人防护装备，以防止污染物接触到样品。
4.样品预处理的交叉污染：在进行样品预处理时，不同样品之间可能会交叉污染，导致实验结果的误差。
对策：在进行样品预处理时，应该采取适当的措施来避免交叉污染。
比如，在每个样品处理之前，使用洗涤剂和漂白剂对实验器具进行彻底清洁，并使用新的实验器具来处理每个样品。
总之，交叉污染是生化分析实验中常见的问题，可能会对实验结果产生严重的影响。
为了避免交叉污染的发生，实验人员需要高度重视实验操作和实验环境的清洁和消毒。
OLYMPUS全自动生化分析仪交叉污染的探讨(一)
OLYMPUS全自动生化分析仪交叉污染的探讨(一)〔摘要〕目的：探讨OLYMPUS400和OLYMPUS2700全自动生化分析仪使用中交叉污染问题。
方法：设定生化仪的分析顺序，以无机磷、血清镁、乳酸脱氢酶为研究对象，将试剂内含磷酸盐、镁离子、乳酸脱氢酶组分的检测项目和这3个项目做几种组合，观察这些试剂用OLYMPUS400和OLYMPUS2700全自动生化分析仪对混合血清、临床样本和蒸馏水检测这3种组合项目的影响。
结果：对于OLYMPUS2700，实验中的任何项目之间无显著影响，对于OLYMPUS400当仪器状态比较好时，除AST对LDH、CHE对无机磷项目有影响外，其余项目均无显著影响，交叉污染较小，而当仪器状况不好时，交叉污染较严重。
结论：在日常工作中，既要注意项目间的设置，以减少交叉污染，更要重视仪器的使用、维护、保养，及时发现问题、及时解决，从而从根本上保证结果的准确。
〔关键词〕全自动生化分析仪；交叉污染；试剂近年来，随着医学技术的进步和迅速发展，各种全自动生化分析仪相继出现并广泛应用于临床实验室，生化分析仪项目间的交叉污染方面的研究也很多，我们用OLYMPUS400、OLYMPUS2700对目前使用的试剂可能存在交叉污染的项目进行了实验，现报告如下。
1材料与方法1.1仪器OLYMPUS400、OLYMPUS2700全自动生化分析仪。
1.2试剂丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)、胆碱酯酶(CHE)由温州东瓯公司提供，方法均为连续监测法；淀粉酶脢(AMS)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶由科利亚公司提供，方法为连续监测法；血清镁(Mg2+)由科利亚公司提供，方法为二甲苯胺蓝法；无机磷(P2+)由中生公司提供，方法为钼酸铵法；总二氧化碳(TCO2)由RADON公司提供，方法为酶法。
1.3标本混合血清、门诊患者血清、蒸馏水。
检验科生化自动分析仪项目间试剂的交叉污染及避免方法
生化自动分析仪项目间试剂的交叉污染及避免方法试剂间干扰的原因很多类型的全自动生化分析仪因其清洗系统的工作模式所致，一个项目对紧随其后的一个项目甚至几个项目的测定会带来一定程度的试剂污染，并且随着仪器使用时间的累加，仪器状况的下降，试剂交叉污染的程度会有所加剧。
因此避免试剂间的干扰，变得非常重要。
试剂的干扰有两个原因：一是碱基中含有下一个测试所要测定的底物，或是含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用，因而直接干扰下一反应的测定结果：另一个则是该试剂所引导的反应对下一个项目的反应进程带来了间接的干扰，因为在有试剂污染的情况下，下一项目所测定的是前后两个项目反应的综合结果。
下面通过对试剂成分的分析和相应试剂来找出试剂交叉污染可能带来的情况，进而指导相应的项目调整和结果分析。
试剂间可能发生的干扰的情况1、ALT(IFCC)、AST(IFCC)试剂中含有高活力LD成分，有可能对LD的测定带来干扰。
2、ALP(IFCC)、CK、CK-MB、CO2、α-AMY等试剂中使用磷酸缓冲液，可能会对其后的MG2+测定带来干扰。
3、CHE、GLU、UA、α-HBDH等试剂使用磷酸缓冲液，可能会对无机磷的测定带来干扰。
4、CK、CK-MB试剂中含有GLU成分，其分析方法的原理中包含GLU的己糖酸梅反应过程，因此可能对GLU测定带来干扰，尤其对GLU的HK法测定可能带来干扰。
5、MG2+试剂中含有EGTA成分，为Ca2+络合剂，可能对Ca2+的测定带来干扰。
干扰的排查和发现事实上各个公司所提供的产品说明书常不能够全面反映试剂组成的情况，因此通过实验发现试剂交叉污染可能带来的干扰变得相当重要。
下面以两个试验来加以说明：1、将某一试剂作为样本进行全套项目测定，考察结果的情况，进而确定发生试剂交叉污染是造成直接干扰的项目。
2、1份样本分为两份，一份加生理盐水或其他适当的稀释液，另一份加等量的试剂，同时测定、考虑结果的变化，进而确定可能发生试剂交叉污染时造成干扰的项目。
浅析生化分析仪试剂间交叉污染及解决方法
浅析生化分析仪试剂间交叉污染及解决方法标签：生化分析仪；交叉污染；实验室目前，各种型号的生化分析仪已经广泛应用于临床实验室，生化分析仪具有快速、高效、准确、重复性好及多项目、多样本处理能力等优点。
近年来，随着各种检测方法学在不断改进，试剂、校准品质量也在不断提高，使得临床生化分析检测结果重复性和稳定性得到了进一步的提高。
但由于生化分析仪在分析过程中必须共用吸样针、试剂针、搅拌棒以及比色杯，使得交叉污染的问题也随之产生[1]。
交叉污染分为吸样针、搅拌棒、样品杯及试剂间的交叉污染，其中试剂间的交叉污染常不易发现，具有偶然性，对检测结果的影响最为严重[2]。
下面，本文就生化分析仪试剂间交叉污染和处理作一简要介绍。
1原因生化分析仪试剂间的交叉污染主要是因为仪器的清洗能力下降，特别是仪器老化、日常维护欠缺和仪器内积聚的污垢均使得仪器不能有效消除携带污染。
生化分析仪的试剂针在加样时要接触各种试剂成分，而搅拌棒需将血清和试剂在反应杯中混匀，如果试剂针、吸样针和搅拌棒清洗不干净，就容易在测试项目之间出现交叉污染，因为前一测试项目在试剂针、样品针或混匀器的残留部分会对下一测定项目造成影响。
特别是如果前一测试项目的某一试剂含有下一测定项目的测试所要测定的底物或含有的某种成分与下一测定项目的反应所要测定的底物有作用，就会直接干扰下一测定项目的反应的测定结果；如果试剂污染了，下一测定项目的反应就是前后两种试剂综合作用的结果，会干扰下一测定项目的反应的测定结果[3]。
朱武军等[4]研究了26个常用生化项目试剂对TBA测定的干扰现象，发现HDL-C、TC、Cr和TG试剂对TBA测定产生正干扰的原因是由于试剂交叉污染，可能是HDL-C、TC和TG试剂所含的胆酸钠具有胆汁酸的反应特性，从而对TBA测定造成干扰；而Cr对TBA的干扰可能与前者试剂所含抗坏血酸氧化酶有关，其影响了后者氧化还原的进程。
2表现在临床检验工作中生化分析仪试剂间出现交叉污染主要表现为某一项目的测定结果一直符合临床要求，一段时间后其测定结果趋高或减低，日益明显；但单独测定该项目时其测定结果又合理起来，钟原胜等[5]检测了DBIL后再检测的ALT发现DBIL试剂对ALT的检测有负干扰，而单独检测的ALT与增加2项对研究对象无干扰项目测定后再测定，则发现检测结果合理，无干扰。
【2019年整理】生化仪交叉污染对策
同样本针携带污染
3.搅拌棒携带污染
鉴别
对同一份血清标本重复测定GGT 或ALT或 AST20次以上，结果重复性较差且有走高趋势。
原因
搅拌棒特富龙涂层剥落，搅拌棒表面有顽固性 污渍，冲洗水冲洗不充分,
4.清洗系统携带污染 鉴别：
在样本测定过程中加做室内质控，部分项目 测定异常或者失控
在样本测定过程中以蒸馏水为样本，多次测 定LDH、P、Mｇ、TBA，结果重复性不好。
六 不同类型生化仪抗污染能力的比较
全自动优于半自动 多针的优于单针的 美国的优于日本的 中国的优于外国的
原因：
干燥棒携带污染为多
5.比色杯污染 鉴别： 在每日早晨刚开机时对所有项目做试剂空白测定，
试剂空白吸光度高（终点法）或者试剂空白吸光度变化率高（速 率法）
TBA（循环酶速率法）经常出现负值 蛋白项目、血脂项目结果偏高 胆红素（钒酸盐法）易出现异常值 原因：
比色杯划痕较深较多，清洗系统清洗不彻底
6.不同类型的交叉污染的发生几率由高到低排列： 试剂针携带污染 搅拌棒携带污染 比色杯污染 样本针携带污染
ALT 、AST、 TBIL、 DBIL 、TBA、ALP、GGT 、CHE 、TP、 Alb 、 Urea 、 UA 、 Cr 、 CK 、 CK-MB 、 α –HBDH 、 LD 、 Glu 、TG 、TC、 HDL-C、 LDL-C、APOAI、APOB、 Amy 、 CO2 、P 、 Fe、Ca、 Mg。 (仅供参考)
3． 当交叉污染程序较重时，应对仪器做大保养和维修，更 换相应部件。
4. 每个实验项目所需的样本量、试剂量不要随意同比例降 低，以保证反应液保持较大的时，往往是几类污染同时存在。 2． 项目编排顺序要与试剂瓶安放顺序保持一致。试剂 应尽量选用大容量瓶盛装。 3． 试剂针携带污染与搅拌棒携带污染的现象有很多共 同点，鉴别较复杂。
全自动生化分析仪项目间交叉污染的观察及对策
全自动生化分析仪项目间交叉污染的观察及对策随着全自动自动生化分析仪在临床上的广泛应用，给检验人员带来了很多新的研究课题，对自动化的分析仪器除了学习操作、维护保养以外，还要注意仪器设置流程本身对实验结果的影响。
很多类型的全自动生化分析仪由于其清洗系统的工作模式所决定，各项目试剂间会带来一定程度的交叉污染的可能，并随仪器使用时间的延长，仪器状况的下降，试剂交叉污染的程度会有所加深，避免试剂间的干扰，提高测定结果的准确性变得非常重要。
为了了解试剂间的污染问题，我们进行了实验观察，并将如何避免交叉污染进行探讨。
1 材料与方法1.1 检测标本（1）待检血清：标本为混合血清(以15名健康检查者血清混合而成)；（2）质控血清：Randox人基质多项质控品；（3）标准液：Randox多项定标物。
1.2 检测试剂科华、Randox、九强公司产品。
1.3 检测仪器 Olympus AU640全自动生化分析仪。
1.4 试验方法选择某些项目为实验对象，以含磷酸盐缓冲液试剂的项目，如：血糖、胆固醇、尿酸等作为无机磷检测疑似产生交叉污染项目；以肌酸激酶项目作为血糖、镁检测疑似产生交叉污染项目。
实验前常规保养仪器，每个观察项目及疑似污染项目均单独使用Randox校准品定标，定标后每个涉及项目单独测试质控品，结果均在控。
实验时，3个项目分开观察，用3种方式实验。
第1种方式是单独测定混合血清观察的项目；第2种方式是先测定疑似产生交叉污染项目，接着测定观察项目；第3种方式是在第2种方式测定观察项目测定前加测1次对观察项目无影响的其他项目测定；每种方式测定5次计算平均值。
2 结果由表1可见交叉污染对磷、镁、血糖检测结果有一定影响。
表l 各种项目组合方式对检测结果的影响(平均值mmol/L)测定方式血糖磷镁方式15.26 1.15 0.83方式25.86 1.460.99方式35.40 1.29 0.883 分析及对策生化试剂检测原理及成分复杂，一些检测项目如血糖、钙、胆固醇、乳酸脱氢酶等试剂中含磷酸盐缓冲液；CO2、肌酸激酶、碱性磷酸酶试剂中含有镁离子；淀粉酶试剂中含有醋酸钙、CK、CK-MB试剂含有葡萄糖等。
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携带污染实验方案
目前大部分实验室开展的生化检测项目至少都有 20项以上，评价全项 目之间的携带污染会非常耗时，试剂成本消耗量大。且不同仪器的动 作原理不完全相同，设计一个较为简单，合理的实验方法是需要重点 考虑的 内容。 试剂针携带污染实验方案原理：通过设置特定的标本检测顺序，每个 样本只做一个项目的检测，可以控制不同项目的先后吸取顺序，实现 任何一个 项目都能与其他项目相遇。为了有效评价项目之间携带污染 影响程度，污染实验所用病人样本的混合血清应尽量包含医学决定水 平浓度
①清洗力的低下(日常维护 欠缺,仪器老化)
②生化仪内污垢的积聚 ③测试顺序安排不当 ④常规清洗不能有效消除 污染
设计共用机械部分
①样本针,试剂针 ②比色杯 ③搅拌棒
二
交叉污染的分类
样本针携带污染
试剂针携带污染 搅拌棒携带污染 清洗系统携带污染 比色杯污染
试剂交叉污染
三 不同类型交叉污染的鉴别 方法及原因
样本针携带污染率试验（二）
测试顺序：3L 2H 1L 2H 4L 2H 1L 2H 1L 2H 1L （注上述顺序前的数字代表测试数 量，如 3L 代表连续测试 3 个低值样 本） 定义：L – L 值为紧跟在低值标本 后低值标本的结果。 H – L 值为紧跟在高值标本后低值 样本的结果 携带污染指标= H – L结果的平均值 – L – L结果的平均值 判断标准： 当携带污染指标小于 3SD SD是 ( L – L ) 结果的SD值。
பைடு நூலகம்
先单独做A项目，紧接着连续测试3次B项目，第一个B项目的结果受A项目影响最大，第三 个B项目的结果因为有2次自身冲洗，结果应比较准确。比较第一个B项目检测结果同第三个 B项目检测结果，如果影响百分比同初试结果影响趋势和程度相近，可以判断 A项目对B项 目有携带污染。 确认实验检测顺序以(A→B ）, (D→E)为例
表3中显示了试剂之间携带污染初实验 后的结果: a 将表格内测试顺序号代表的位置处输 入该项目对应的测试结果， b 对每个测试顺序号下面对应的测试结 果和该项目单独5次重复结果的均值相 比 比值以百分比形式表示，通过考察百 分比的大小来初步判断携带污染的可 能性。 目前的判断标准以正负百分之五作为 判断标准，超过范围时怀疑有携带污 染。
确认实验步骤（表4） A B1 B2 B3 D E1 E2 E3
搅拌棒携带污染
搅拌棒污染：试剂与样本、第一试剂与第二试剂的混 匀需要搅拌棒，而搅拌棒如果清洗不完全，或黏附力增 加时，残留试剂可能会对下一检测结果造成影响。 鉴别 对同一份血清标本重复测定 GGT 或 ALT 或 AST20次以上，结果重复性较差且有走高趋势。 原因 搅拌棒特富龙涂层剥落，搅拌棒表面有顽固性 污渍，冲洗水冲洗不充分,
1. 样本针携带污染： 目前大多数全自动生化分析仪采用循环冲洗 式样本针吸取样本，当样本针在清洗不完全，或黏附力增加时，样本 残留可能会对下一相邻样本的检测结果造成影响。
原因：样品针尖弯曲，特富龙涂层剥落，针堵塞，冲洗水冲洗不充分
携带污染率主要是体现样品之间的污染程度
样本针携带污染率试验（一）
同一检测项目浓度相差较大的a标本（高浓度），b标本（低浓度）。 检测顺序：a 1 , a 2 , b 1 ,b 2 , b3 计算： 评价： 以q小于10%为判断标准。局限性：结果与选择的标本浓度有关系 例1：选择高浓度的ALT样本浓度值为2020 U/L，低浓度ALT 样本第一次检测 结果40 U/L，第三次检测结果20 U/L。 通过计算携带污染率q = （40 – 20）/ 2000 * 100% = 1%。 例2：选择高浓度的Cl 样本浓度值为140 mmol/L，低浓度Cl 样本第一次检测 结果为86 mmol/L，第三次检测结果为80 mmol/L。 通过计算携带污染率q = （86 – 80）/ 60 * 100% = 10%。 上例中，例1的携带污染率尽管只有 1%，由于结果正好在医学决定水平附近 因此对临床判断有较大影响。例2的携带污 染率尽管达到了10%，但是对于临 床判断不会产生大的影响。因此，使用该方法评价样本针携带污染需考虑样 本的实际浓度。
试剂针携带污染实验方法
携带污染初实验
假设本次实验以A, B, C, D, E五个项目来考察各个项目之间的试剂针携 带污染,
先在生化仪中输入样本测试号码和选择项目，每个样本号码只选择一 个项目，目的是使试剂针吸取项目的顺序 完全按照样本测试号码的先 后顺序进行，五个项目的测试 顺序见表1。测试完成后，将数据输入到 处理表格2和表格3中，按照一定的判断标准，寻找可能存在的污染项 目组合。
试剂针携带污染
全自动生化分析仪一般采用双试剂针，即所有项目的一 试剂都共用试剂针 R1 ，所有项目的二试剂都共用试剂 针R2。试剂针R1或R2在每吸取一次试剂后都会进行一 次清洗，之后会 立即吸取下一个项目的试剂。 当自身清洗能力下降，试剂针在吸取试剂时会将部分残 留的前项目试剂成分带入到后项 目反应杯中，对后项 目的检测结果造成影响。 从各个项目设置的参数可知，试剂体积量远大于样本体 积量。因此试剂针携带污染影响程度会高于样本针携带 污染。
生化分析常见交叉污染探讨与对策
徐国超
一
如何理解交叉污染
测试项目A
在 A 项目测定中所使用的试 剂、样本、反应产物、清洗
试剂、样本等残留
剂等对 B 项目的测定产生了 不良影响的现象。
测试项目B
A 项目与 B 项目不一定是相
邻项目。
引发交叉污染的原因
生化仪的发展变化
生化仪状态不良,使用不当
①多项目,多样本处理 ②处理能力的提高(高速化)
试剂针携带污染确认实验
由携带污染初实验筛选出怀疑有污染的项目组合， 假设 (A→B) 同(D→E) 即A项目对B项目（A项目做好后紧接着做B项目），D项目对E项目（D项目做好后紧接着做 E项目）怀疑有污染。 由于初实验的项目交叉结果只是一次测试的结果， 可能有偶然因素，还必须进行确认实验。 以(A→B)为例，(D→E)的情况相同