凝血酶时间(TT)(冻干型)标准操作规程
凝血酶时间(TT)测定
出凝血凝血酶时间（TT）测定（第四版）出凝血原理：在37℃条件下，在血浆中加入“标准化”的凝血酶溶液后，血浆凝固所需要的时间。
出凝血标本处理：患者处于休息状态下，采空腹静脉血（急诊病人除外）。
采血者应技术熟练，“一针见血”，以防止组织损伤，使外源性凝血因子进入标本。
最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。
采完血后，将血液沿管壁缓缓注入试管，避免产生气泡；然后迅速将血液和抗凝剂轻轻颠倒混匀，避免用力震荡。
全血要在1小时内分离血浆。
分离乏血小板血浆时，要在室温下3000rpm离心10分钟，室温下可存放4小时。
全部试验不能在4小时内完成，应将乏血小板血浆分装在～的小试管中快速冷冻，储存于-20℃冰箱中。
冷冻过的标本不能再次冷冻，否则结果会不准确。
冷冻血浆融化时，应将盛冷冻血浆的容器置于37℃水浴中，并轻轻摇动，使其迅速融化。
出凝血试剂：TT试剂购于天津威士达公司：德灵Test Thrombin Reagent试剂（试剂盒代号OWHM13）。
内含凝血酶测定试剂冻干品：标准浓度的牛凝血酶，牛白蛋白；凝血酶测定试剂缓冲液（25mmol/l,）。
按要求的量用缓冲液溶解小瓶中的试剂，测试之前必须将试剂溶解液预温到37℃。
复溶的试剂从冰箱中取出后室温平衡15min后上机分析。
出凝血仪器：使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。
出凝血操作：按仪器操作步骤执行标准操作。
出凝血4.６.1开机：按下机器侧面的POWER 按钮。
开机后机器进行自检，当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。
出凝血4.６.2检查消耗品：1、准备反应杯：打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量，不足时，需及时添加。
（一次性最多可放1000 个杯子）2、准备试剂：按照仪器对试剂的要求，把试剂准备好，放到仪器内相应位置，注意查看试剂的量和有效期。
如还不熟悉试剂位置时，可在主屏幕上选Reagent Setting，按屏幕显示放置试剂。
凝血酶时间(TT)操作程序 TT-SOP
正常质控（混合）血浆时间：11～17秒；
重复性：重复试验的变异系数（CV）≤5％；
瓶间差：瓶间相对极差≤6％。
【检验方法】
凝固法
【检验原理】
待测血浆加入适量的凝血酶溶液，纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定凝固所需的时间，即为待测血浆凝血酶时间（TT）。
【检验试剂】
测定时的各组成成分
TT试剂：凝血酶、缓冲液、稳定剂、防腐剂
TT缓冲液：缓冲液、稳定剂、防腐剂
试剂稳定性与贮存
试剂2～8℃保存，可稳定至标签所示失效日期。
版序：2015-5
页码：第2页，共2页
【所需仪器及材料】
仪器：血凝仪、台式离心机；
材料：TT试剂、TT缓冲液；
质控血浆；
试剂准备：TT试剂用规定体积的TT缓冲液复溶。
【检验标本】
类型：血浆
稳定性：﹣80℃保存，不宜超过30天。﹣20℃保存，不宜超过14天。2～8℃保存，不宜超过6小时。22～24℃保存，不宜超过2小时。
检验室
文件编号：
TT-SOP-01-01
凝血酶时间（TT）操作程序
版序：2015-5
页码：第1页，共2页
【检验目的】
用于体外人血浆中凝血酶时间测定，该实验系检查受试者血浆纤维蛋白原转变为纤维蛋白能力的过筛试验。
【检验摘要】
TT延长：见于肝素增多或类肝素物质存在，SLE，肝病，ห้องสมุดไป่ตู้病，低（无）纤维蛋白原血症，异常纤维蛋白原血病（纤维蛋白原机能不良血症），FDP增多，异常球蛋白血症或免疫球蛋白增多等疾病。
注意：
采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，贮血必须使用塑料试管或硅化玻璃管。不宜使用普通玻璃器，避免凝血因子活化。
凝血TT
修改纪录：1目的本操作书的制定的目的是，为操作者进行血浆凝血酶时间测定提供正确的操作方法。
2适用范围适用于血浆凝血酶时间测定3定义凝血酶时间（TT）是一个快速而简易地评价纤维蛋白形成的试验，因子X III 缺乏时，TT保持正常。
当PT，APTT延长，不能解释结果时，在进行其他试验之前，应先测定TT，再做其他确诊测试。
4测定原理和临床意义4.1测定原理在过量的凝血酶存在下，被稀释血浆的凝固时间可直接反映血浆中纤维蛋白原水平。
4.2临床意义反映血浆中纤维蛋白的减少和FDP的增多，可作为异常纤维蛋白原的筛选试验。
延长：血循环中纤维蛋白（原）降解产物（FDP）（如DIC继发纤溶亢进、溶拴治疗后））；肝素或类肝素物质增多；AT-Ⅲ活性增高；纤维蛋白原严重减少（如先天性无纤维蛋白血症、严重肝脏疾病）等。
异常FDP（骨髓瘤，风湿性关节炎）缩短：见于高凝状态。
5实验室条件5.1实验场所中心实验室临检室5.2温湿度要求室温：15-30℃湿度：20-80%6标本要求6.1标本种类6.1.1标本种类血浆6.1.2标本量最适量：3ml最小量：2ml分析量：200ul不适标本的处理：采集量过少、抗凝剂错误、血液凝固等情况下，拒收标本，及时与临床联系，并做好登记。
6.1.3容器枸橼酸钠抗凝管---9体积血采集到1体积0.109 M枸椽酸钠抗凝剂中（NCCLSH3-A3，H21-A21标准）6.1.4采集条件采集时间：检查对象生活饮食处于日常状态，安静。
拒收标准：采血量不足、严重乳糜血、抗凝不充分、严重乳糜血、抗凝剂有误等采集部位：静脉采血。
6.2使用条件6.2.1保存条件---标本血浆在20℃保存8小时，如果采用肝素治疗，标本保存2小时。
* 不要将血浆置于2 - 8℃保存。
6.2.2保存事项必须及时检验，放置过久可影响检验结果。
6.2.3保存天数：1天6.2.4保存场所：临检室6.2.5特殊容器：无6.2.6预防措施标本为可感染性标本，应注意人员及环境的防护，防护措施请使用眼镜，口罩，手套等。
PT_APTT_TT
2．凝血酶时间延长也可见于肝素增多 或类肝素抗凝物质增多。 3．凝血酶时间缩短极为罕见，主要见 于某些异常蛋白血症或巨球蛋白血症 时，此外，较多的是技术原因，如标 本在4℃环境中放置过久，组织液混入 血浆等。
【评价】 1．用凝血酶时间检测了解纤维蛋白 原含量和凝血作用有时也会出现误差。 如低Fg可造成凝血酶时间延长，过高 Fg因抑制纤维蛋白单体交联也会造成 类似结果；异常纤维蛋白原血症时， 既可能延长，也可能缩短。
系统有无异常的最常用的筛检试验。 血凝仪测定APTT，其测定速度和结果 的准确性、灵敏度均高于试管法，并 易于标准化。
血浆凝血酶时间 (TT)
【原理】 受检血浆中加入“标准化”的凝 血酶溶液后，血浆凝固所需要的时间 为凝血酶时间(thrombintime，TT)。 TT主要用于检测血浆纤维蛋白原的减 少或抗凝物质的增多。
【操作】 试管法 1．硅化试管或塑料管中加入 109mmol／L枸橼酸钠溶液0.2ml，静 脉采血1.8ml加入上管中，充分混匀， 3000rpm离心10min，分离血浆。 2．将氯化钙凝血活酶溶液、健康人 混合冻干血浆和待测血浆，置37℃水 浴中预温5min。
3．取试管1支，加入健康人混合冻干血 浆0.1ml，37℃水浴预温30s，再加入 预温的25mmol／L氯化钙凝血活酶溶 液0.2ml，混匀，开动秒表计时。
【评价】 试管法为测定血浆凝血酶原时间 的手工方法之一，其准确度比仪器法 差，但多次重复测定也可得到较准确 的结果。仪器法测定由半自动或全自 动血凝仪完成，全自动血凝仪的准确 性和精密度高。不同仪器及试剂测定 同一血浆，其PT也有一定差异，但 INR应一致。
活化部分凝血活酶时间测定(APTT )
2．过多的FDP造成的凝固时间延长， 可用鱼精蛋白来纠正；类肝素增多， 则可用爬虫酶时间测定在正常范围 来证实。
凝血酶时间
02 相关拓展
简称：TT (thrombin time)，是指在血浆中加入标准化的凝血酶后血液凝固的时间。在共同凝血途径中， 所生成的凝血酶使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，可用凝血酶时时间（TT）来反映。由于纤维蛋白（原）降解产物 （FDP）能使TT延长，故也有人将TT作为纤溶系统的筛选试验。
（1）取小试管1支或表玻璃皿1个，置37℃水浴中，加受检血浆0.1ml。 （2）加凝血酶溶液0.1ml，同时开动秒表，记录凝固时间，重复2次，取平均值。
正常值16～18s。超过正常对照3s以上为异常。
（1）TT延长（超过正常对照3s以上）肝素和类肝素物质增多，如红斑狼疮、肝脏疾病、肾脏疾病等。低 （无）纤维蛋白原血症、异常纤维蛋白原血症。
（1）血浆于室温下不宜超过3h。 （2）不宜用乙二胺四乙酸二钠和肝素作抗凝剂。 （3）实验终点，试管法以出现混浊的初期凝固为准；玻璃皿法以能挑起纤维蛋白细丝为准 。 10相关疾病 红斑狼疮
相关拓展
甲苯胺蓝纠正试验或血浆游离肝素时间，甲苯胺蓝呈碱性，有中和肝素的作用。在凝血酶时间（TT）延长的 受检血浆中加入少量甲苯胺蓝，再测定TT。若延长的TT恢复至正常或明显缩短，则表示受检血浆中有类肝素物质 存在或肝素增多；若不缩短，则表示受检血浆中存在其他抗凝血酶类物质或缺乏纤维蛋白原。
医学检查
0 1
1检查名称
0 2
2分类
0 3
3取材
0 4
4测定原理
0 5
5试剂
0 6
6操作方法
8化验结果临床意 义
7正常范围
9附注
凝血酶时间
临床血液检查 >出血和凝血检查
血液
在血浆中加入“标准化”的凝血酶溶液后，血浆凝固所需时间为凝血酶时间（TT）。
血凝分析仪项目标准操作程序
SOP_09-17 血凝分析仪项目标准操作程序一、目的：统一项目操作规程，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。
二、适用范围：血栓/止血检验项目三、操作人员：检验科授权工作人员四、操作步骤：凝血酶原时间PT测定1、检测原理:待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶，使凝血酶原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，测定凝固所需的时间，即为待测血浆凝血酶原时间PT。
是外源性凝血系统较理想和常用的筛选试验。
2、试剂盒组成PT凝血活酶：10支本批试剂国际敏感指数ISI值：1.20标本来源与保存静脉采血，置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸钠抗凝液（1份抗凝液+9份全血）的塑料试管或硅化玻璃管中，3000rpm离心10分钟，收集上层液（血浆，黄色）。
2-8℃保存，不宜超过12小时。
3、方法3.1取PT凝血活酶冻干品一支，加入2.2ml蒸馏水轻摇溶解。
3.2取待测血浆（参比血浆）0.1ml，37℃孵育2分钟，加入37℃预温凝血酶溶液0.2ml（上机加0.1ml），混匀，立即启动秒表，记录凝固时间，即为PT值。
4、数据处理凝血酶原时间比值（PTR）=待测血浆PT/参比血浆PT国际标准化比值（INR）=PTR ISI正常值1.以时间表示：11-15秒2.以PTR表示：0.95-1.243.以INR表示：0.94-1.295、注意事项1）采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，贮血升微使用塑料试管或硅化玻璃管。
不宜使用普通玻璃管，避免凝血因子活化。
2）血时止血带不可束缚过紧，并不应超过5分钟，否则导致凝血及纤溶因子活化。
3）浆制备必须及时，血浆分离应尽量去除血小板。
血浆分离后应尽快测定。
4）血浆预温不宜超过10分钟。
5）凝血活酶预温不可超过30分钟。
6）用浊度法测定终点的自动化凝血仪，溶血和较明显的黄疸及脂血会影响测定结果，此时宜用手工法或电子机械式凝血仪测定。
7）红细胞比容超过55%时，应调整抗凝剂用量。
凝血酶时间测定(TT)
凝血酶时间测定（TT）一、测定原理：1、在凝血酶作用下，待检血浆中纤蛋白原变位纤维蛋白。
当待检血浆中抗凝物质增多是，凝血酶时间延长。
二、标本要求：1、凝血专用管（CTAD管，枸椽酸钠0.109M，蓝帽）抽取静脉血至刻度线，充分混匀。
1000转离心10分钟后2小时内测定完毕。
2、测定量 100ul血浆三、试剂：1、STAGO公司原装试剂STA®-THROMBIN®2、保存条件：2-8℃3、使用条件：使用前干粉与稀释液混匀，放入搅拌珠，以保持试剂为混悬液，条码扫描后放入仪器试剂柜特定位置。
四、仪器和材料：1、STA全自动血凝仪2、含有磁珠的反应杯五、标准和质控：1、预定标，标准曲线由厂家在试剂中提供。
2、质控品为原装STA-COAG CONTROL N+P两批号定值血浆干粉，保存条件2-8℃。
使用前加蒸馏水1ml，混匀即可使用，试剂开启后在试剂柜内稳定8小时。
编写：伍海波制定日期：2011.12.1六、操作程序：1、装卸试剂：F2键打开试剂柜，条码扫描后确认试剂量，放入特定孔（带搅拌珠混匀功能）即可。
2、定标与室内质控：更换试剂批号时仪器根据每批试剂的标准曲线自动定标，24小时室内质控自动测定一次，未通过则仪器会提示报警。
3、标本测定：F1键打开标本柜，输入号码后随机插入标本孔，选择测定项目后关闭标本柜。
吸样针加100ul血浆入反应杯，预温240秒后加入50ul TT试剂并开始计时。
秒数计算均由仪器根据曲线自动完成换算。
4、传送并核收结果。
5、注意事项：a、血量与抗凝剂比例适宜，离心时间充分以确保血浆中无血小板干扰测定结果。
b、标本无凝固。
七、计算和参考值由仪器自动完成，正常参考值：14-21秒编写：伍海波制定日期：2011.12.1。
凝血酶时间检测标准操作规程
凝血酶时间检测标准操作规程1.【目的】为保障血浆凝血酶时间（TT）测定结果的准确性，特制作本规程。
2.【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
3.【标本类型及实验前准备】1.标本类型1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月）,只能冻融1次，在37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。
抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
2.患者准备早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
3.容器、添加剂类型3.8％枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。
4.仪器设备1. 仪器名称: Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪2. 仪器厂家:日本Sysmex公司3. 仪器型号:Sysmex CA-15004. 仪器技术参数:4.1 速度: 最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时4.2 试剂位:36个,具冷藏功能。
4.3 样本位:50个,可自动连续添加。
5. 仪器校准程序:5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂批号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。
5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)5.实验试剂德国Dade Behring Marburg 公司Test Thrombin Reagent测定试剂,每瓶加5ml 缓冲液溶解(50人份),未开封试剂2～8℃贮存到说明书上有效期，复溶试剂2～8℃保存不超过5天。
4.【测定原理】凝血酶可使血浆标本中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白，形成凝块。
形成凝块的时间即检测时间。
5. 【程序性操作步骤】1. 检查前准备:1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。
血浆凝血酶时间测定( TT )标准操作程序SOP文件
[标本采集与处理]
用血凝试验专用1：9枸橼酸钠抗凝真空采血管抽取静脉血，轻摇抗凝。3000r/m离心10min，获乏血小板血浆。
[质量控制品]
STA血凝质控物两种。
[操作步骤]
（一），手工操作：
1.在试管内加入109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml，然后加入待检者(或正常对照) 1.8ml，混匀,高速离心,分离血浆。
ＸＸＸＸ医院
临床检验实验室
文件编号：
ABCD-SOP-06-05
血浆凝血酶时间测定( TT )
版序：ABCD
页码：第1页，共2页
[检测原理]
在凝血酶作用下，待检血浆中纤维蛋白原转变为纤维蛋白。当待检血浆中抗凝物质增多时，凝血酶时间延长。
[试剂和仪器]
1，试剂：
凝血酶溶液。
2，仪器：
（1），秒表，塑料试管，塑料注射器。
3，启动分自动分析仪进行检测。
ＸＸＸＸ医院
临床检验实验室
文件编号：
ABCD-SOP-06-04
血浆凝血酶时间测定( TT )
版序：ABCD
页码：第2页，共2页
[质量控制]
1，每天同步进行三种质控物检测，以控制室内检测质量，及时发现失控原因，并及时纠正。
2，参加室间质评工作，以使结果与全国水平一致。
3，每批试剂使用前必须应用标准品，质量控制品进行试剂评价。
4，为保证标本质量，统一使用一次性真空采血管采血。
[参考范围]
超过正常对照3s以上者为异常。
[临床意义]
1．凝血酶时间延长见于肝素增多或类肝素抗凝物质存在，纤维蛋白原降解产物（FDP）增多及DIC，低（无）纤维蛋白原血症等。
2．凝血酶时间缩短常见于血样本有微小凝块或钙离子存在时。
凝血酶时间测定
凝血酶时间测定
一、试管法
目的掌握凝血酶时间测定的试管法
原理在血浆中加如标准化的凝血酶溶液后，在凝血酶的作用下，其血浆凝固所需要的时间就是凝血酶时间
器材水浴箱、试管、试管架、吸样管，胶吸头、离心机、秒表。
试剂
1.凝血酶溶液有商品试剂盒子供应，将高浓度的凝血酶用生理盐水稀释5~10倍以
能使正常对照血浆的凝血酶时间在16~18s
2.正常参比血浆
标本同凝血酶原的时间测定
操作
1.分离乏血小板血浆与凝血酶原时间测定
2.预温取0.1ml参比血浆加入试管中，置于水温37的水中预热5min。
3.测定正常参比血浆的TT 于试管中加入凝血酶0.1ml，同时启动秒表记录时间。
以出
现浑浊的最初凝固点作为终点，记录血凝时间。
重复做2~3次，取其平均值，即是参比血浆的TT
4.测定待测血浆以同样的方法检测待测血浆的TT
5.报告方式XXs
参考值每个试验方法都有其相应的参考值。
通常16~18s 超过参考值3s以上的才有临床意义。
注意事项
1.标本血浆力求新鲜，应该在采血后1h内完成，置于冰箱内保存不超过4h
2.采血采血要稳。
准、快，不能混入组织液。
3.凝血酶
（1）凝血酶通常是悬浮液，用前一定要充分混匀。
（2）已经稀释好的凝血酶溶液不能久置室温下，在4度下可保存3天血凝仪法，，简单方便快捷。
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凝血酶时间（TT）标准操作规程（SOP）
【检验目的】
用于体外人血浆中凝血酶时间测定，该实验系检查受试者血浆纤维蛋白原转变为纤维蛋白能力的过筛试验。
【检验摘要】
TT延长：见于肝素增多或类肝素物质存在，SLE，肝病，肾病，低（无）纤维蛋白原血症，异常纤维蛋白原血病（纤维蛋白原机能不良血症），FDP增多，异常球蛋白血症或免疫球蛋白增多等疾病。
【检验方法】
凝固法
【检验原理】
待测血浆加入适量的凝血酶溶液，纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定凝固所需的时间，即为待测血浆凝血酶时间（TT）。
【检验试剂】
●测定时的各组分
上海太阳公司TT试剂：凝血酶、缓冲液、稳定剂、防腐剂
上海太阳公司TT缓冲液：缓冲液、稳定剂、防腐剂
●试剂稳定性与贮存
试剂+2～+8℃保存，可稳定至标签所示失效日期。
TT试剂溶解后+2～+8℃可保存7天，4小时内﹣20℃冻存，可稳定30天。
使用时请于37℃迅速融化。
●注意事项
TT试剂不需37℃预温，15～25℃室温直接使用；血浆预温不宜超过5分钟。
测定温度36.5℃～38.5℃，过低或过高温度均使TT延长。
【所需仪器及材料】
●仪器
血凝仪、台式离心机
●材料
上海太阳生物技术有限公司TT试剂、TT缓冲液
●质控血浆
●试剂准备
TT试剂用规定体积的TT缓冲液复溶。
【检验标本】
●类型：血浆
●稳定性：﹣80℃冻存，不宜超过30天。
﹣20℃冻存，不宜超过14天。
+2～
+8℃保存，不宜超过6小时。
+22～+24℃保存，不宜超过2小时。
●注意：
采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，贮血必须使用塑料试管或硅化玻璃管。
不宜使用普通玻璃器，避免凝血因子活化。
采血时止血带不可束缚过紧，并不应超过5分钟，否则导致凝血及纤溶因子活化。
血液应立即加抗凝剂，血浆制备必须及时，血浆分离应尽量去除血小板。
血浆分离后应尽快测定。
红细胞比容超过55%或小于20%时，应调整抗凝剂用量。
抗凝剂体积（ml）= 0.00185×血液体积（ml）×（100－比容）。
样本采集避免溶血及组织液污染。
不宜使用EDTA·Na2、肝素、草酸盐抗凝，应使用0.109mol/L枸橼酸钠抗凝。
【检验步骤】
打开血凝仪，等候一定时间，使仪器达到分析温度。
将TT试剂用规定体积的TT缓冲液复溶，轻摇混匀，并置于仪器试剂位。
根据血凝仪使用说明书及TT试剂使用说明书选择合适的参数，在仪器主菜单中选择TT项目进行检测。
【方法学评价】
●正常血浆测量值
正常血浆测试均值≤20秒
●重复性
质控血浆重复试验的变异系数（CV）≤5％
●瓶间差
瓶间相对极差≤7.5％。