神经实验1 坐骨神经腓肠肌标本的制备
实验一坐骨神经腓肠肌标本的制备骨骼肌收缩
分析实验中存在的问题与不足
01
在实验过程中，由于实验操作不够熟练，导致部分标本受损， 影响了实验结果。
02
在数据记录和分析方面，存在一定的人为误差和仪器误差，可
张力换能器
用于测量骨骼肌的收缩张力。
显微镜
用于观察手术过程中的组织结构和操作。
刺激电极
用于施加电刺激，引发骨骼肌收缩。
实验试剂：生理盐水、任氏液等
生理盐水
用于清洗组织和维持组织湿润。
任氏液
是一种模拟人体内环境的溶液，用于维持骨骼肌的正常生理状态。
03
实验步骤
制备坐骨神经腓肠肌标本
暴露坐骨神经和腓肠肌
理盐水中。
2. 用手术刀将腓肠肌与周围 组织分离，并保留坐骨神经
的完整性。
04
05
3. 将制备好的标本放入实验 溶液中，进行后续实验操作。
了解骨骼肌收缩的实验操作流程
实验步骤
2. 用刺激器刺激神经，观 察肌肉收缩反应。
1. 将制备好的坐骨神经腓 肠肌标本放置在实验台上， 用夹子固定。
3. 记录肌肉收缩的幅度、 速度和持续时间等数据。
实验结果
随着刺激强度的增加，骨骼肌的收缩幅度增大；随着刺激 频率的增加，骨骼肌的收缩速度加快；不同刺激波形对骨 骼肌的收缩也有影响。
结果分析
通过比较不同刺激条件下骨骼肌收缩的变化，可以深入了 解骨骼肌对不同刺激的生理反应和适应机制，为临床治疗 和康复提供理论支持。
05
结论与讨论
总结实验结果
实验结果显示，坐骨神经腓肠肌标本在适宜的刺激条件下能够产生明显的收缩反 应，证明了实验的可行性。
实验一坐骨神经腓肠肌标本的制备
【实验器材】
• 蛙类解剖手术器械、蛙板、任氏 液、铁支架、微调固定器、张力 换能器、计算机、生物信号采集 处理系统。
2020/12/25
【方法和步骤】
• 1．制备在体坐骨神经腓肠肌标本 • 2．实验装置（如图） • 3．仪器设置
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（1）不同刺激强度对腓肠肌收缩的影响
• 选用最大刺激强度刺激，使刺激频率按1Hz、 2Hz、4Hz、6Hz、8Hz、12Hz、16Hz逐渐增加 ，分别记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不 同频率刺激时的肌肉收缩（曲线）变化，从而引 导出单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩。
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实验结果记录
1．记录下不同的刺激强度值对肌肉收缩的 幅度值，绘制不同刺激强度与腓肠肌收缩张 力的关系曲线。 2．分别记录下引起肌肉单收缩，不完全强 直收缩和完全强直收缩时的刺激频率和收缩 幅度（张力）。
实验一 坐骨神经腓肠肌标本的制备
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步骤
• 1．毁脑脊髓 取牛蛙一只，用左手握住，以示指压其头
部前端使其尽量前俯，右手持探针自枕骨大孔 处垂直刺入，到达椎管，即将探针改变方向刺 入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织； 再将探针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使逐 渐刺入整个椎管内，捣毁脊髓。此时牛蛙下颌 呼吸运动应消失，四肢松软，即成为一毁脑脊 髓的牛蛙）。否则须按上法再行捣毁。
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思考题
• 1．为什么在一定范围内增加刺激强度 ，骨骼肌收缩力增加？
• 2．何谓标本的最适刺激强度？
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• 逐渐增大刺激强度，找出刚能引起肌肉出现 微小收缩的刺激强度（阈强度）。继续增强 刺激强度，观察肌肉收缩反应是否也相应增 大。继续增强刺激强度，直至肌肉收缩曲线 不能继续升高为止。找出刚能引起肌肉出现 最大收缩的最小的刺激强度，即最适刺激强 度。
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论
坐骨神经腓肠肌标本制备实验结论一、实验目的二、实验原理三、实验步骤四、实验结果五、实验结论一、实验目的本次实验的主要目的是通过坐骨神经腓肠肌标本制备，了解人体肌肉组织的结构和特点。
同时，通过对标本制备过程中各个步骤的操作，掌握标本制备技能和方法。
二、实验原理1. 坐骨神经腓肠肌标本制备原理坐骨神经腓肠肌标本制备是指将动物或人体组织切割成薄片并进行染色处理，使其能够在显微镜下观察。
在这个过程中，需要进行以下几个步骤：（1）取样：从动物或人体中取出需要观察的组织样品。
（2）固定：将组织样品放入固定液中进行固定处理。
（3）包埋：将固定后的组织样品放入包埋剂中进行包埋处理。
（4）切片：将包埋后的组织样品切成薄片。
（5）染色：将切片进行染色处理，使其能够在显微镜下观察。
2. 坐骨神经腓肠肌结构原理坐骨神经腓肠肌是人体下肢的一部分，由坐骨神经支配。
它主要由三个部分组成：大腿后侧的半膜状肌、半腱状肌和小腿后侧的胫长伸肌。
这三个部分都是由肌纤维束组成的，每个束内又包含有许多个单独的肌纤维。
三、实验步骤1. 取样：从动物或人体中取出需要观察的组织样品。
2. 固定：将组织样品放入10%福尔马林液中进行固定处理，固定时间为24小时。
3. 包埋：将固定后的组织样品放入包埋剂中进行包埋处理，包埋时间为48小时。
4. 切片：将包埋后的组织样品切成厚度为5微米左右的薄片。
5. 染色：将切片进行染色处理，常用染色方法有HE染色法和Masson染色法等。
本次实验采用HE染色法进行染色处理。
6. 封片：将染好色的切片放入玻璃片上，加上封片胶，用玻璃片盖住，使其能够在显微镜下观察。
四、实验结果经过以上步骤的操作，制备出了坐骨神经腓肠肌标本。
在显微镜下观察到了肌纤维束组成的三个部分：半膜状肌、半腱状肌和胫长伸肌。
每个束内又包含有许多个单独的肌纤维。
五、实验结论通过本次实验，我们了解到了坐骨神经腓肠肌标本制备的基本步骤和操作方法，并且通过观察标本结构，掌握了人体肌肉组织的结构和特点。
生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
本实验旨在通过制备坐骨神经腓肠肌标本的过程，掌握基础的组织学实验技能，同时加深对神经肌肉解剖结构的理解。
材料与方法：
材料：成年大鼠标本、无水乙醇、石蜡、光学显微镜、麻醉手套、组织取样器、组织取样盒、理化试管架等。
1.准备标本
用麻醉手套将成年大鼠净化神经集中于坐骨神经下1-2厘米范围内，然后将腓肠肌标本从骨骼中取出。
2.固定标本
将取出的腓肠肌标本置于10%的无水乙醇中固定24小时；
3.去水
从10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%到80%的无水乙醇渐次去除，每步时间为1小时；
4.透明
将固定去水的腓肠肌标本分别置于50%敌敌畏-乙醇溶液、70% 敌敌畏-乙醇溶液和100% 敌敌畏透明液溶液中，每步时间为2小时，至标本彻底透明。
5.包埋
取出已透明的腓肠肌标本，置于石蜡组织取样盒中，根据实验需求，选择合适的包埋方向。
6.取薄片
将石蜡包埋的腓肠肌标本取出，用微型切片机切制厚度为5微米的切片，将切片拉直后在干净的水晶片上展开。
7.染色与制成玻片
用哈里斯血液染色将切片染色，脱色后洗净水片后，在水晶片上滴几滴覆盖剂，然后用平凡玻片将组织接口反过来盖住薄片，压紧即可。
实验成果：
经过制备和染色后，我们取得了成年大鼠坐骨神经腓肠肌的标本，通过光学显微镜的观察与检测，我们发现该标本包含完整的腓肠肌结构及肌纤维分离范围。
切片上清晰可见腓肠肌内有明显的核团和细胞质呈透明状，同时染色后肌纤维呈现出红色，血管呈现出蓝色，系统性地展示了腓肠肌肌纤维和血管位置的分布情况。
结论与意义：。
实验一坐骨神经腓肠肌标本的制备、刺激强度和刺激频率与骨骼肌收缩反应的关系
2．在荐椎上方剪断皮肤和脊柱，弃其 头部和内脏，然后左手握住断开的脊柱 后部，右手向后撕裂皮肤，接着将两后 肢一分为二，即剪断耻骨联合（尾杆骨 留在一侧）纵向剪开脊柱。
3．分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱 端腹面向上，趾端向外侧翻转，使其 足底朝上。用大头针将标本固定，在 蛙板上用玻璃钩分离坐骨神经。 4．分离股骨 5．游离腓肠肌 6．用锌铜弓检验标本
（二）标本与仪器的连接
1、刺激强度与肌肉收缩的关系：点击桌 面RM6240并口2.0j→实验→肌肉神经→ 刺激强度对骨骼肌收缩的影响→手动点 击左侧，选择→显示刺激标注→强度（v） →记录键→开始刺激→记录键→存盘。
2、刺激频率与肌肉收缩的关系： 实验→肌肉神经→刺激频率对骨骼肌收 缩的影响→常规实验→手动：点击左侧， 选择→显示刺激标注→频率[Hz]→点击 刺激器强度（修改数值）→记录键→开 始刺激→开始存盘 。
注意事项：
1 避免蟾蜍体表毒液和血液污染标版，压 挤、损伤和用力牵拉标本，不可用金属器 械触碰神经干。 2 在操作过程中，应给神经和肌肉滴加任 氏液，防止表面干燥，以免影响标本的兴 奋性
3 标本制成后须放在任氏液中浸泡数分 钟，使标本的兴奋性稳定，再开始实验 效肌肉收缩的关系”曲 线、编辑并打印结果；标出最适刺激强 度
2标记“刺激频率与肌肉收缩的关系”曲 线、编辑并打印结果；标出单刺激、不 完全强直收缩和完全强直收缩
五、预习报告
实验二 神经干动作电位的测定、神经 冲动传导速度的测定、坐骨神经不应期 的测定
实验一
坐骨神经腓肠肌标本的制备、刺激强度 和刺激频率与骨骼肌收缩反应的关系
哈尔滨师范大学生命科学与技术学院
实验目的
1、学习并掌握坐骨神经—腓肠肌标本 的制备方法。 2、观察刺激强度和收缩反应的关系。
坐骨神经-腓肠肌标本的制备
8、检验标本
01.
用经任氏液蘸湿的锌铜弓的两极，接触 神经，观察腓肠肌是否收缩！
02.
此标本用于神经干兴奋传导、神经-肌肉 接点的传递以及骨骼肌收缩等实验研究
பைடு நூலகம்意：
1. 保护标本——神经和肌肉：不用赃的皮肤碰标 本，不用自来水冲洗标本，不用金属接触神经以 及损伤肌肉。
2. 注意标本的完整，尤其注意保存股骨头一定的长 度
202X
坐骨神经——腓 肠肌标本的制备
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• • 方法
目的要求： 学习蛙类动物毁髓的方法 学习掌握蛙类腓肠肌及坐骨神经——腓肠肌标本的制备
步骤：
双毁髓
剥离后肢标本
分离两后肢
分离坐骨神经
分离股骨头
游离腓肠肌
检验标本
完整的神经肌肉标本应包括以下几个部分
1、首先准备手术所需的用品
动物瘫软如泥。
3、剥离后肢标本
动物腹面向上放置于蜡盘，手术镊轻轻提 起耻骨联合上方，剪开皮肤，再剪开体壁 肌肉，然后轻轻提起内脏，自耻骨部剪断 （勿伤脊神经），把内脏拨向头端，剪断 脊柱。然后一手捏住脊柱后端，另一手向 后撕剥皮肤，并除去头端肢体和内脏
4、分离两后肢
把去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上， 于耻骨联合处按压刀刃，切开耻骨联合。 然后用金冠剪剪开两后肢相连的肌肉， 并纵向剪开脊柱。
5、分离坐骨神经
将一侧后肢的脊柱端腹面向上，趾端向外 侧翻转，使其足底向上，用固定针将标本 固定在玻璃板下面的蛙板上。用玻璃分针 分离坐骨神经。股部的坐骨神经在股二头 肌与半膜肌之间。
6、分离股骨头或胫腓骨头
动物小，留股骨头 1cm
动物大，留胫腓骨 头1cm
7、游离腓肠肌
高中生物《蛙的坐骨神经、腓肠肌标本制备及骨骼肌收缩实验》PPT课件
2.观察并记录刺激强度不变时，改变刺激频率引起 肌肉持续收缩的形式—不完全强直或完全强直。
二、实验原理
坐骨神经是由多条神经纤维组成的神经干，神经干中各组成纤维的 兴奋性有所不同。
刚刚引起肌肉收缩所需的刺激强度称为阈刺激强度。 随着刺激强度的增加，坐骨神经干中发生兴奋的纤维数目随之增多，
肌肉收缩的幅度也随之增大。 当神经干中的全部纤维都发生兴奋时，所需的最低刺激强度称为最
大刺激强度。 阈刺激强度至最大刺激强度之间的刺激称为阈上刺激强度。 超过最大强度的刺激，神经所支配肌肉的收缩幅度不再增强。
肌肉组织对于一个阈上强度的刺激发生一次迅速的收缩 反应，称为单收缩。
两个同等强度的阈上刺激，相继作用于神经肌肉标本， 如果刺激间隔小于单收缩的时程，则出现两个收缩反应 的重叠，称为收缩的总和。
！玻璃针钝性分离 ！忌用金属器械触、夹神经，防止过
度牵拉神经。 ！用任氏液保持神经湿润。
图1-4分离坐骨神经
6 标本的活性检验：
完整的标本应包括四部分：一段脊柱骨、 坐骨神经、 腓肠肌、 一段股骨头。
7.仪器标本连接
1. 将张力换能器固定在铁支架上，肌 肉标本的股骨固定于支架下端，腓 肠肌跟腱的结扎线连于张力换能器 的受力片上，连线应松紧适宜，并 与桌面垂直，张力换能器的输入端 接Medlab系统的1通道插座。
刺激器参数
模式
自动调幅
显示方式
采样参数
记录仪
主周期
2s
采样间隔
1ms
波宽 初幅度 增量
2ms 0V 0.1-0.2V
X轴显示比例 通道
实验1 蛙坐骨神经––––腓肠肌标本制备
实验1 蛙坐骨神经––––腓肠肌标本制备、分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响【课程名称】【实验名称】【实验性质】【器材】蟾蜍或蛙；任氏液；二道生理记录仪、双脉冲刺激器、肌槽、常规手术器械、玻璃分针、毁髓针、锌铜弓、解剖盘、烧杯、滴灌、任氏液等。
【实验目的】1.学习坐骨神经–腓肠肌标本的制备方法。
2.分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响。
【实验原理】刺激坐骨神经能引起腓肠肌产生收缩。
在其他条件不变情况下，不断增大刺激频率可引起肌肉收缩形式发生改变。
若刺激频率较小，两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩和舒张所持续的时间（即单收缩）时，肌肉收缩表现为一连串的单收缩；若增大刺激频率，使两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩的收缩期时间，而小于单收缩时，肌肉呈现不完全强直收缩；若继续增加刺激频率，使两次刺激间隔时间小于一次肌肉收缩的收缩期时间，肌肉则表现出完全强直收缩。
【实验步骤】1、双毁髓：左手握蟾蜍，背部向上。
用食指按压其头部前端，拇指压住躯干的背部，使头向前俯；右手持毁髓针，由两眼之间中线向后方划触，触及两耳后腺之间的凹陷处即是枕骨大孔的位置。
将毁髓针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔，然后针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，以毁脑组织。
再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。
脊髓彻底捣毁时，可看到蟾蜍后肢突然蹬直，然后瘫软，此时的动物为双毁髓动物。
2、剥制后肢标本：左手持手术镊提起两前肢之间背部的皮肤，右手持手术剪横向剪断皮肤，然后往后肢方向撕剥皮肤。
剪开腹壁肌肉，用手术镊提起内脏，翻向头部，在看清支配后肢的脊神经发出部位后，于其前方剪断脊柱。
3、分离两后肢：将去皮的后肢腹面向上置于解剖盘上，右手持金冠剪纵向剪开脊柱，再剪开耻骨联合，使两后肢完全分离。
4、分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱端腹面向上，用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经，股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的裂缝，找出坐骨神经，剪断盖在上方的梨状肌，完全暴露坐骨神经，剪去支配腓肠肌之外的分支，再剪去脊柱及肌肉，只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。
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实验1 坐骨神经-腓肠肌标本的制备
一、实验目的
1. 学习蛙类动物双毁髓的实验方法
2. 学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法
3. 通过本实验熟悉刺激、兴奋、兴奋性和可兴奋组织的概念。
二、实验原理
蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，而其离体组织生活条件易于掌握，在任氏液的浸润下，神经肌肉标本可较长时间保持生理活性。
因此，常用蛙或蟾蜍坐骨神经腓肠肌离体标本来观察神经肌肉的兴奋性、兴奋过程以及骨骼肌收缩特点等。
三、实验器材
蟾蜍或蛙、常用手术器械（手术剪、手术镊、用术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针），蛙板，蛙钉，锌铜弓，培养皿，滴管，纱布，线，任氏液
四、实验步骤
1. 制备双毁髓蟾蜍（毁脑和脊髓）
取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。
左手握住蟾蜍，用食指压住头部前端使头前俯，右手持刺蛙针从枕骨大孔向前刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织，然后将刺蛙针退到枕骨大孔，不拔出而是将其尖转向后插入脊柱管中捣毁脊髓。
彻底捣毁脊髓时，可看到动物的后肢突然蹬直，而后瘫软如棉，此时的动物为双毁髓动物。
如动物仍表现四肢肌肉紧张或活动自如，必须重新毁髓。
2. 剥制后肢标本
剪除上肢和内脏在骶髂关节上0.5-1.0cm处用粗剪刀剪断脊柱。
用镊子夹住后端脊柱，以剪刀沿脊柱两侧剪除所有内脏及头胸部，留下后肢、骶骨、后端脊柱及紧贴于脊柱两侧的坐骨神经。
剥皮左手用镊子或直接用手捏住脊柱断端（注意不要压迫神经），右手捏住断端边缘皮肤，向下剥去全部后肢皮肤，将标本置于盛有任氏液的培养皿中。
将手和用过的器械洗净后再进行以下步骤。
3. 分离两后肢
将去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上，脊柱端在左侧，左手固定标本的股部两侧肌肉，右手持手术刀，于耻骨联合处向下按压刀刃，切开耻骨联合。
然后用手托起标本，用金冠剪剪开两后肢相连的肌肉组织，并纵向剪开脊柱(尾杆骨留在一侧)，使两后肢完全分离。
将分开的后肢，一只继续剥制标本，另一只放入任氏液中备用。
4. 分离坐骨神经
将一侧后肢的脊柱端腹面向上，趾端向外侧翻转，使其足底向上，用固定针将标本固定在蛙板上。
用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经。
股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的肌缝，找出坐骨神经。
坐骨神经基部(即与脊神经相接的部位)，背部有一梨状肌盖住神经，用玻璃分针轻轻挑起肌肉，便可看清下面穿行的坐骨神经。
剪断(或用玻璃分针扯断)梨状肌，完全暴露坐骨神经与其相连的脊神经。
再用玻璃分针轻轻挑起神经，自前向后剪去支配腓肠肌之外的神经分支，将坐骨神经分离至腘窝处。
取下脊柱端的固定针，保留神经发出部位的一小块脊柱骨，用金冠剪剪去其余部分脊柱骨及肌肉。
用手术镊轻轻提起连有神经的脊柱骨片，将神经移离开股骨。
5. 分离股骨头
沿膝关节剪去股骨周围的肌肉，再用金冠剪自膝关节向前刮干净股骨上的肌肉，保留1 cm股骨头并剪断股骨。
提起腓肠肌上的扎线，剪去膝关节下部的后肢，仅保留腓肠肌与股骨的联系。
6. 游离腓肠肌
用手术镊(尖头镊)在腓肠肌跟腱下面穿线，并用结线扎紧。
提起结线，游离腓肠肌。
7. 检验标本
用手术镊轻轻提起标本的脊柱骨片，使神经离开玻璃板。
再用任氏液蘸湿的锌铜弓，将其两极接触神经，如腓肠肌发生迅速收缩，则表示标本机能正常。
提起腓肠肌上的结扎线，
不使神经受到牵拉，轻轻将标本放入任氏液中保存。
稳定15-20min后即可进行实验。
此标本可以用于神经干兴奋的传导、神经—肌肉接点的传递以及骨骼肌的收缩等实验研究。
五．注意事项
1. 已剥离皮肤的组织避免接触皮肤毒液或其他不洁物。
2. 分离神经时，一定要用玻璃分针，不能随便用刀、剪进行操作。
3. 不能过分牵拉神经，以免造成损伤。
4. 标本制备过程中经常用任氏液湿润标本。
5. 避免用手指或金属器械接触或夹持标本的神经肌肉部分。
思考题
1.剥去皮肤的后肢，能用自来水冲洗吗？为什么？
2.金属器械碰压，触及或损伤神经及腓肠肌，可能引起哪些不良后果？
3.如何保持标本的机能正常？。