鸡IL-2重组杆状病毒的构建及其病理组织学研究
重组鸡白细胞介素2的诱导表达与生物学活性测定
重组鸡白细胞介素2的诱导表达与生物学活性测定陈吉刚;陈维虎;周继勇;王金勇;齐静;郑肖娟;俞照正;孙红霞【期刊名称】《中国农业科学》【年(卷),期】2005(038)005【摘要】将去除信号肽的鸡IL-2基因编码框克隆到原核表达载体pBAD/His B,实现了重组鸡IL-2(rchIL-2)蛋白在大肠杆菌中的高效表达.SDS-PAGE分析显示,表达蛋白的分子量约为18 kD.用rchIL-2为抗原制备了单克隆抗体和多克隆抗体,建立了检测rchIL-2含量的抗原捕获ELISA,探讨了天然chIL-2蛋白的体外表达动力学.非变性条件下纯化的rchIL-2 (0.4 ng) 对Con A活化的鸡T淋巴细胞具有明显的增殖活性,而对鸭及鹅的T淋巴细胞无增殖活性.抗chIL-2多克隆抗体可完全中和rchIL-2和天然chIL-2蛋白的生物学活性,而单克隆抗体无中和rchIL-2和天然chIL-2蛋白生物学活性的功能.这些研究结果证实,大肠杆菌表达的rchIL-2及其多克隆抗体拥有生物学功能,而获得的单克隆抗体不具有chIL-2的中和特性.【总页数】6页(P1034-1039)【作者】陈吉刚;陈维虎;周继勇;王金勇;齐静;郑肖娟;俞照正;孙红霞【作者单位】浙江大学动物预防医学研究所病毒与免疫研究室,杭州,310029;浙江省象山县农林局,象山,315700;浙江大学动物预防医学研究所病毒与免疫研究室,杭州,310029;浙江大学动物预防医学研究所病毒与免疫研究室,杭州,310029;浙江大学动物预防医学研究所病毒与免疫研究室,杭州,310029;浙江大学动物预防医学研究所病毒与免疫研究室,杭州,310029;浙江省象山县农林局,象山,315700;浙江省象山县农林局,象山,315700【正文语种】中文【中图分类】S8【相关文献】1.表达鸡白细胞介素18重组禽痘病毒的构建及其表达产物生物学活性的检测 [J], 陈红英;黄青云;崔保安;李新生;管倩;刘金朋2.重组人白介素-8表达质粒的构建、诱导表达及生物学活性测定 [J], 柳勤;何菱3.表达鸡白细胞介素2重组鸡痘病毒的构建及其体外表达产物生物活性的检测 [J], 邵卫星;彭大新;卢建红;韦栋平;刘玉良;刘秀梵4.共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒部分生物学特性测定 [J], 王云峰;石星明;王玫;刘胜旺;童光志;崔红玉;木古丽;徐灵龙;何来;贺笋;葛俊伟;李一经5.鸡IL-18基因重组真核表达载体的构建及其表达产物的生物学活性 [J], 温纳相;黄青云;陈荣光;束长娥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡白细胞介素2原核表达及多克隆抗体的制备
鸡白细胞介素2原核表达及多克隆抗体的制备于涟;谢荣辉;卢觅佳;黄耀伟;李建荣【期刊名称】《浙江大学学报（农业与生命科学版）》【年(卷),期】2003(029)001【摘要】鸡白细胞介素2(IL-2)是一种在机体免疫调节中具有多种功能的细胞因子.本研究将萧山鸡白细胞介素2基因克隆入原核表达载体pET-28b,获得了重组表达载体pET-28b-IL-2,将此重组表达载体转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达萧山鸡IL-2.SDS-PAGE结果表明,萧山鸡IL-2在大肠杆菌中得到了表达,以此表达产物制成油乳剂苗免疫家兔,用ELISA和Western blotting检测兔血中的多克隆抗体,结果均为阳性.因而为进一步开展鸡IL-2的结构和功能研究奠定了基础.【总页数】4页(P10-13)【作者】于涟;谢荣辉;卢觅佳;黄耀伟;李建荣【作者单位】浙江大学,动物预防医学研究所,浙江,杭州,310029;浙江大学,动物预防医学研究所,浙江,杭州,310029;浙江大学,动物预防医学研究所,浙江,杭州,310029;浙江大学,动物预防医学研究所,浙江,杭州,310029;浙江大学,动物预防医学研究所,浙江,杭州,310029【正文语种】中文【中图分类】Q78【相关文献】1.鸡PERK的原核表达及多克隆抗体的制备 [J], 袁晓琴;刘梦茜;李春燕;陈仕怡;许丽惠;周五朵;吴异健;王全溪2.鸡干扰素调节因子7的原核表达及多克隆抗体的制备 [J], 崔鹏飞;邓国华;韦良孟;焦培荣;廖明3.鸡源性HMGB1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 [J], 曲昱蓉;詹媛;仇旭升;丁铲4.鸡IRF7原核表达及多克隆抗体制备 [J], 朱敏;王琳;许默儒;钱琨;邵红霞;叶建强;秦爱建5.牛白细胞介素2基因原核表达及多克隆抗体制备 [J], 盖仁华;王衡;郎跃深;李广兴;张瑞莉;马德星;张国庆;杨贵君因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡IL-2基因克隆及其重组质粒的构建与表达
鸡IL-2基因克隆及其重组质粒的构建与表达许发芝;仲大莲;刘玉华;余为一;李槿年;曾明华【期刊名称】《安徽农业大学学报》【年(卷),期】2004(31)1【摘要】利用一对自行设计的引物,通过反转录-聚合酶链反应(RT PCR),从ConA 诱导的5周龄SPF鸡脾细胞中扩增出鸡白细胞介素2(IL 2)基因片段,其长度为439bp,经酶切鉴定,初步确定为鸡IL 2基因。
再将该IL 2基因片段定向插入真核表达质粒pcDNA3中,经DNA序列鉴定,表明构建的重组质粒含有IL 2基因,该基因的cDNA序列与Sundick报道的结果基本一致。
然后,将IL 2基因片段插入原核表达载体pGEX 4T 1,并导入菌株BL21,经诱导培养、蛋白提取和SDS PAGE,获得分子量约为42000的蛋白条带,表明所克隆的鸡IL 2基因在原核细胞中得到表达。
【总页数】5页(P87-91)【关键词】鸡;IL-2基因;基因克隆;重组质粒;基因表达;RT-PCR;白细胞介素2;细胞因子【作者】许发芝;仲大莲;刘玉华;余为一;李槿年;曾明华【作者单位】安徽农业大学畜牧水产学院;中国科学技术大学生命科学学院【正文语种】中文【中图分类】S852.4;Q785【相关文献】1.鸡IL-2基因cDNA输卵管组织特异性表达载体的构建与表达 [J], 吴庭才;李银聚;张春杰;程相朝2.CVB3VP1与IL-2基因双表达重组质粒的构建及免疫效果 [J], 房文亮;谢立新;周雪燕;金玉怀;金士香;揣侠;王永祥3.鸡IL-2受体α亚基成熟蛋白基因的克隆及其胞外段的原核表达 [J], 涂真珍;李祥瑞;徐立新;严若峰4.鸡IL-2基因的克隆及GST-chIL2融合蛋白的表达 [J], 王文成;舒秀伟;宣华;陆承平5.弓形虫SAG1、SAG3基因的克隆和复合基因SAG1/SAG3真核表达重组质粒的构建 [J], 陈晓燕;马济宏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡白细胞介素-2研究进展
鸡白细胞介素-2研究进展
陈吉刚;周继勇;张德勇
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2001(022)004
【摘要】白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)主要是由激活的T淋巴细胞产生的一类重要的细胞因子,具有激活淋巴因子活化的杀伤细胞(LAK)和自然杀伤细胞,刺激T 辅助细胞和自然杀伤细胞产生细胞因子和促进细胞因子的繁殖以及刺激γδT细胞在体外生长等功能,因此它是免疫学研究的热点.近年来鸡IL-2基因克隆成功,使鸡IL-2的研究及应用得到一定的发展,同时也使鸡IL-2作为免疫佐剂和构建新型的基因工程疫苗呈现出一定的应用前景,本文主要对鸡IL-2研究取得的进展作一综述.【总页数】5页(P36-40)
【作者】陈吉刚;周继勇;张德勇
【作者单位】浙江大学动物预防医学研究所,;浙江大学动物预防医学研究所,;浙江大学动物预防医学研究所,
【正文语种】中文
【中图分类】S852.4
【相关文献】
1.鸡白细胞介素18研究进展 [J], 王宪文;刘兴友;王岩;杭柏林
2.鸡白细胞介素18的研究进展 [J], 梁新峰;陈书明
3.鸡白细胞介素18（IL-18）与临床疾病相关性的研究进展 [J], 方礼禄;陈书明;武
文君
4.鸡白细胞介素6研究进展 [J], 赵娜;李烨初;张小荣;吴艳涛
5.鸡白细胞介素18与临床疾病相关性的研究进展 [J], 方礼禄;陈书明;武文君因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡白细胞介素—2的分子生物学研究进展
方 法， 才将鸡 Ｉ Ｌ一２基 因克 隆成 功。Ｋ ｉ ｒ 用 Ｒ Ｃ ａ ｅ 等ｌ ｓ Ａ Ｅ技术
获得了鸡 Ｉ Ｌ一２基 因的全序列 ， 明该基 因的启动子 、 证 外显 子、
内含子等 调控元件 与人和 鼠的 Ｉ Ｌ一２基 因 在 结 果 上 有 相 似 之
为 Ｐ Ｇ一６０ ０阻 止 了 Ｉ 一２的 二 聚 化 或 与 其 它 蛋 白 形 成 聚 Ｅ ０ Ｉ
１ 鸡 Ｉ Ｌ一２的基 因 表达
Ｓｎ ｌ ｕ ｄｃ 【 把 完 整 的 鸡 Ｉ 一２ 基 因 克 隆 入 ｐＤＮ 质 ｋ等 Ｉ ｃ ＡＩ
粒， 首次在 Ｃ Ｓ一７细胞 中表 达 了鸡 Ｉ Ｏ Ｌ一２基 因， 蛋 白具有 该
关健词 ： ； 鸡 白细胞 介素 一２ 基 因表 达； ； 分子 生物 学 摘 要 ： 鸡白细胞介 素 一２近年 来在分子 生物 学方面取得 的研 究进展作 一综述， 对 内容 涉及鸡 白细胞介 素 一２的基 因表
对 分 子 质 量 为 １ｋ ３ ｕ的 分 子 ， 且 他 们 用 等 电 聚 焦 估 计 鸡 Ｉ 一 而 Ｉ ２的 Ｐ 为 ５ ９ Ｆｅ ｅｉ ｓｎ等 应 用 Ｐ ｅ ｙ—ｓｐ ａｏｅ 阴 离 Ｉ ． 。 ｒ ｒ ｋｏ ｄ ｃ ｈｎ ｌ ｅｈ ｒ 、 ｓ 子 交 换 及 Ｓ ｐｒｓ 一１ Ｉ ｅｏｅ ２过 柱 等 方 法 ， 离 出 两 类 具 有 活 性 的 Ｉ 分 物 质 ， 一相 对 分 子 质 量 为 １ ｋ ， 二 相 对 分 子 质 量 约 为 ２ ～ 其 ４ ｕ其 ６ ３ ｋ ， 者 比前 者 活 性 更 强 ， 者 均 具 有 低 亲 水 性 。 Ｍｙｒ 等 ０ｕ后 两 ｅｓ
鸡白细胞介素-2原核表达及其活性鉴定
鸡白细胞介素-2原核表达及其活性鉴定韩顺子;黄霞;孟闯;耿士忠;康喜龙;潘志明;焦新安【期刊名称】《中国家禽》【年(卷),期】2024(46)5【摘要】试验旨在获得具有生物活性的鸡白细胞介素-2(ChIL-2)重组蛋白。
试验以克隆获得的ChIL-2基因为模板,分别构建原核重组表达菌BL21(pCold-ChIL-2)和BL21(pGEX-6P-1-ChIL-2),进行诱导表达和纯化;通过BrdU ELISA法检测重组蛋白诱导鸡脾脏淋巴细胞的增殖情况,评估其生物活性;以rHis-ChIL-2免疫小鼠制备多克隆抗体。
结果显示:成功构建了原核重组表达菌BL21(pCold-ChIL-2)、BL21(pGEX-6P-1-ChIL-2);经表达纯化后分别获得纯度较高的rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2蛋白,大小分别为14 ku和39.4 ku;rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2蛋白分别能够促进脾脏淋巴细胞显著或极显著增殖(P<0.01或P<0.001),均具有良好的生物活性;以纯化的rHis-ChIL-2免疫小鼠制备的多克隆抗体效价为5.12×105,可识别rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2,与真核表达的ChIL-2蛋白反应。
结果表明,原核表达的重组蛋白ChIL-2具有良好的生物活性,采用其制备的多克隆抗体可识别真核表达的ChIL-2蛋白,为后期ChIL-2的检测奠定基础。
【总页数】6页(P56-61)【作者】韩顺子;黄霞;孟闯;耿士忠;康喜龙;潘志明;焦新安【作者单位】扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室;扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室;江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心【正文语种】中文【中图分类】S855.3【相关文献】1.可溶性白细胞介素15受体α亚单位的原核表达、纯化及生物学活性鉴定2.人单链白细胞介素12的原核表达和生物学活性鉴定3.鸡白细胞介素-2原核表达与生物学活性初探4.水牛白细胞介素2的原核表达与活性鉴定5.鸡白细胞介素2原核表达载体的构建及表达产物的鉴定因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡的7种细胞因子的一些分子生物学特性
鸡的7种细胞因子的一些分子生物学特性邵卫星;彭大新;卢建红;刘秀梵【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2004(25)4【摘要】细胞因子是免疫系统的重要调节因子,能够影响免疫应答的类型和水平.近年来,禽细胞因子研究取得很大进展,随着更多鸡细胞因子基因的发现及其生物学特性的研究,临床应用细胞因子成为可能.文章对7种鸡细胞因子--干扰素(Ⅰ型和Ⅱ型),白细胞介素(IL-2、IL-6、IL-15和IL-18)和鸡髓细胞生长因子(cMGF)一些生物学特性作了综述,主要包括cDNA克隆的方法、cDNA及其编码蛋白的生物学特性、检测方法、主要生物学功能,并与相应的哺乳动物细胞因子比较,阐明鸡的细胞因子与哺乳动物的异同点.【总页数】5页(P11-15)【作者】邵卫星;彭大新;卢建红;刘秀梵【作者单位】扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室,江苏,扬州,225009;扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室,江苏,扬州,225009;扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室,江苏,扬州,225009;扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室,江苏,扬州,225009【正文语种】中文【中图分类】S852.4【相关文献】1.鸡源和鸭源EDSV某些分子生物学特性的比较 [J], 周锦萍;胡清海2.屈头鸡果预灌胃对哮喘小鼠气道Th1/Th2型细胞因子水平的调节作用 [J], 赵展庆;张万科;符妹垂;周小敏;余秉昌;林奇栋3.柔嫩艾美耳球虫在鸡巨噬细胞中的培养及子孢子感染巨噬细胞细胞因子的mRNA水平 [J], 蒋保余;王文青;曲自刚;肖星星;杨顺利;刘保红;曾巧英;蔡建平4.肾复康颗粒对人工诱发鸡肾肿病理模型的炎性细胞因子及IL-1R/NF-κB信号通路的影响 [J], 罗艺晨;杨庆昌;林春发;叶芮伶;尚杨斐;胡宇;刘娟5.刺五加多糖对鸡血液免疫相关细胞因子mRNA表达水平的影响 [J], 张英楠;徐晶;张桂山;杨树宝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡新城疫病毒F基因与鸡白介素-2（IL-2）基因在真核载体中串连表达及免疫原性
鸡新城疫病毒F基因与鸡白介素-2（IL-2）基因在真核载体
中串连表达及免疫原性
亓丽红
【期刊名称】《中国畜牧兽医文摘》
【年(卷),期】2014(000)001
【摘要】为了探索鸡白介素-2（IL-2）对鸡新城疫病毒（NDV）F蛋白免疫效果的增强作用，本研究通过重叠延伸PCR技术（SOE—PCR）利用连接子
（G2SG3S）将鸡IL-2基因和鸡NOVF基因串连，
【总页数】1页(P100-100)
【作者】亓丽红
【作者单位】山东省农业科学院家禽研究所，山东省禽病诊断与免疫重点实验室，山东济南250023
【正文语种】中文
【相关文献】
1.鸡新城疫病毒F基因与鸡白介素-2(IL-2)基因在真核载体中串连表达及免疫原性[J], 亓丽红;朱剑英;艾武;黄兵;于可响;刘涛;秦卓明;宋敏训
2.鸡新城疫病毒F基因和鸡IL-2重组DNA疫苗的构建 [J], 姜永厚;陈奖励;宋秀龙;童光志;孔宪刚;刘忠贵
3.新城疫病毒F基因在新型杆状病毒表达系统中的表达及重组病毒的免疫原性 [J], 王兴龙;金宁一;丁壮;金扩世;米志强;王宏伟;郭志儒;殷震
4.新城疫病毒F基因在大肠杆菌中的高效表达及其免疫原性分析 [J], 游猛;潘志明;
耿士忠;文科;陈俊华;张磊;方强;蔡雯婷;焦新安
5.新城疫病毒F基因的真核表达及其免疫原性检测 [J], 刘兆球;姜世金;常维山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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鸡IL-2重组杆状病毒的构建及其病理组织学研究
葛菁萍;白程乐;高冬妮;申艳;于航;平文祥
【期刊名称】《中国农学通报》
【年(卷),期】2017(33)21
【摘要】以鸡白细胞介素2(IL-2)为免疫刺激因子,探讨鸡IL-2重组杆状病毒(BV-LMI-IL-2)对鸡脏器的影响,为IL-2促进疫苗免疫的研究提供理论依据。
以IL-2为目的基因,以p LMI为杆状病毒转移载体,构建BV-LMI-IL-2。
最终使用BV-LMI-IL-2与新城疫(NDV)抗原疫苗BV-LMI-F进行单独免疫和联合免疫,观察鸡腺胃、肝脏、心脏、十二指肠等器官病理变化情况。
免疫和攻毒试验结果显示:BV-LMI-F 与BV-LMI-IL-2联合免疫时,保护率提高了12.5%,说明BV-LMI-IL-2对疫苗起到了免疫增强作用,可以作为免疫增强剂使用。
对攻毒后的对照组死亡鸡只和免疫组死亡的鸡只剖检,观察病变器官和病理组织切片结果显示,联合免疫组器官无明显病理变化,证明鸡IL-2重组杆状病毒提高了对鸡脏器器官的免疫保护作用。
【总页数】7页(P142-148)
【关键词】白细胞介素2;重组杆状病毒;联合免疫;器官;病理组织学
【作者】葛菁萍;白程乐;高冬妮;申艳;于航;平文祥
【作者单位】微生物省高校重点实验室/黑龙江大学生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】Q786
【相关文献】
1.表面展示鸡传染性支气管炎病毒M41株S1蛋白的重组假型杆状病毒的构建 [J], 陈筱薇;樊惠英;林文耀;程晓亮;叶昱;陈春丽;廖明
2.表达鸡传染性支气管病毒S1蛋白的重组假型杆状病毒的构建 [J], 罗琼;樊惠英;罗开健;林文耀;程晓亮;任涛;廖明
3.鸡新城疫病毒F基因和鸡IL-2重组DNA疫苗的构建 [J], 姜永厚;陈奖励;宋秀龙;童光志;孔宪刚;刘忠贵
4.鸡GM-CSF和IL-2增强表达新城疫病毒F蛋白的重组杆状病毒疫苗的免疫效果[J], 于航;高冬妮;申燕;刘颖;平文祥;葛菁萍
5.IL-2重组杆状病毒载体的构建及表达 [J], 金立杰;刘东升;薛伟钢
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