清华大学 有机化学及实验 实验指导 实验五、从番茄酱中提取番茄红素和β胡萝卜素
番茄红素和β-胡罗素教案
结构式如下： 番茄红素
讲授 30 分钟， 其余时间学 生动手操作
β -胡萝卜素
1.二氯甲烷：沸点低(40℃)，易挥发，具有高毒性。二氯甲烷密度为 1.325。 2.苯：为致癌物，使用后要及时盖好瓶塞，避免吸入其蒸气，必要时可在通风橱
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药品：番茄酱、95％乙醇、二氯甲烷、环己烷、石油醚 (b.p30～60℃，60～90℃)、 苯、饱和氯化钠溶液、无水硫酸钠、氧化铝、硅胶、三氯化锑试剂 其它：电水浴锅、滤纸、脱脂棉、剪刀、天平、紫外灯
三、实验内容
1.提取：称取 5g 番茄酱于 100mL 烧瓶中，加 10mL 95％乙醇回流加热 5min[2]， 冷却后过滤[3]，滤液保存于锥形瓶中，再将固体残渣每次用 10mL 二氯 甲烷回流提取两次，每次回流 3～5min[4]。将三次滤液合并倒入分液漏 斗中，加 10mL 饱和氯化钠溶液萃取，静止分层后分出有机层，于一干 燥的 100mL 锥形瓶中，加适量无水硫酸钠，塞紧瓶塞干燥。
环己烷
苯-环己烷(1 ：9)
四、实验装置图
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图一：提取 B
图二：分离 图三：展开剂 A
图四：展开剂
注意事项：
[1]用乙醇先提取之目的是将番茄酱脱水，由于下步使用的提取剂二氯甲烷不与水混溶， 故只有除去水后它才能有效地从组织中提取出类胡萝卜素。
[2]有机物过滤，因其不象过滤无机物那样容易，故常用折叠滤纸过滤。 [3]装柱是关键，柱装不好会使样品洗脱时参差不齐，分离效果不好。操作时避免吸入氧 化铝或硅胶的粉尘。 [4]洗脱时，不能让空气进入柱内，否则会影响分离效果。石油醚是易燃液体应远离火焰。 [5]样品浓度不能过稀，否则薄层层析时的颜色会很浅，不利于观察样品斑点。 [6]点样时样品点布局要符合要求，否则易出现边缘现象和样品展开时相互扩散而混乱，。 [7]展开时层析缸壁可贴几条沾有展开剂的滤纸条，防止出现边缘现象。另外也要注意在 展开剂配制时，勿混入其它试剂，如水等。 [8]若观察荧光，注意勿过多吸入溶剂蒸气。时间长，会观察不到荧光。荧光物质不一定 是被分离物质，可能会有其它荧光点。 思考题 1．为何用饱和 NaCl 溶液萃取，萃取目的是什么? 2. 用柱层析法分离番茄红素和β -胡萝卜素开始不用石油醚而直接用苯洗脱是否可以？ 3．为什么番茄红素与β -胡萝卜素相比，在柱层析中移动较慢，Rf 值较小? 4．番茄红素与β -胡萝卜素薄层层析时，在环己烷和苯-环己烷（1：9）中分别展开的结 果，它们的 Rf 值有何不同？从两种物质结构上能否判断哪个极性大些?
从番茄酱中提取番茄红素和胡萝卜素27页PPT
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献 生
谢谢！
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 、如果我们国家的法律中只有某种 神灵， 而不是 殚精竭 虑将神 灵揉进 宪法， 总体上 来说， 法律就 会更好 。—— 马克·吐 温 37、纲纪废弃之日，便是暴政兴起之 时。— —威·皮 物特
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
《从番茄中提取番茄红素和β-胡萝卜素》实验综述报告
０ ２ ６ Ｏ ，６ —８
作 为萃取剂 。因为 Ｃ Ｈ ： Ｃ ｌ ： 不 与水 混溶 ， 所 以必须先除去样品中的水 分 才能有效地从组织 中萃取胡萝 卜 素来 。 故在此之前先用 ９ ５ ％的乙 醇 把番茄组织 中的水 分除去 。根据番茄 红素与 Ｂ一胡 萝 卜 素极性
的差别 ， 用柱层析可 以将它们分离 。分离 效果可 以用薄层层析进行
检验 。 ４ 实 验 步 骤
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番茄红素 Ｒ，
Ｂ 一 胡萝 卜 素
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２ ～ｇ —６ ７
６ 注意事项 ４ ． １ 仪器及药 品 ６ ． １ Ｂ一胡萝 卜 素对光及 氧非常敏感 ， 对酸 、 碱也敏感 ， 重金 属 始 回流装置 、 旋转蒸 发仪 、 分 液漏斗 、 层析柱 、 层析缸 、 圆底烧瓶 、 离子特别是铁离子也可使其颜色消失。 抽 滤装 置 、 柱色谱 、 玻璃 棒 、 破碎 机 、 番 茄（ 市售 ） ９ ５ ％乙醇 、 二氯 甲 ６ ． ２番茄红素 的耐光 、 耐氧化性也很差。实验 时要特别注意。 烷、 中性 Ａ ｌ ２ （ ） ， 、 环 己烷 、 石油醚（ ６ ０ — ９ ０ ＇ ： Ｃ） 、 硅胶板 。 ７ 思 考 题 ４ ． ２ 步 骤 ７ ． １一般每公斤新鲜成熟 的番茄含 Ｏ ． ０ ２克番茄红 素 ， 试分析 可 ４ ． ２ ． １ 提 取 能导致提取率降低 的原因。 新鲜番茄洗净 ， 称取 ３ ０克 ， 用破碎机破碎 ， 放人 ５ ０毫升 圆底烧 ７ ． ２柱色谱分离 Ｂ一胡萝 卜 素和番茄红素 时若分离效果不好可 瓶 中， 加入 ｌ ５毫升 ９ ５ ％乙醇 ， 摇匀 ， 装上 回流冷凝管 。 在水浴 上加热 能 的原 因有哪些？ 回流 １ ０ 分 钟趁热抽滤 （ 只把溶液倒 出 ， 残渣 留在瓶 中） 。再加入 １ ０ 参考文献 毫升二氯 甲烷 ， 在水浴上 回流 ５ 分 钟。冷却 ， 将上层溶 液倾 出抽滤 ， ［ １ 】 王清廉， 沈风 嘉． 有机 化学实验【 Ｍ】 ． 北京 ： 高等教育 出版社， １ ９ ９ ２ ． 固体仍 留在烧瓶 中， 再加 １ Ｏ毫升二氯 甲烷重复萃取一次 。 合并 乙醇 ［ ２ 】 阚健全 ． 食 品化 学［ Ｍ 】 ． 北京 ： 中国农业大学出版社， ２ ０ ０ ８ ． 和二氯 甲烷 的提取液 ，倾 人 １ ２ ５毫升分 液漏斗 中 ，加几 毫升饱和 ［ ３ ］ ｚ艺旋， 杨志伟等． 番茄红素提取的研 究进展［ Ｊ 】 ． 安徽 化工， ２ ０ １ ６ ， ０ ６ ： ８ －２ ０． Ｎ ａ Ｃ １ 溶液， 振摇 ， 静置分层 。将分 出的二 氯 甲烷溶液 置于旋转蒸发 】 仪上 ， 旋 蒸 至 仅 有 少 量 的粘 稠 状 物 质 ， 盖上盖子待用 。 ４ ． ２ ． ２柱色谱分离 Ｂ一胡 萝 卜 素和番茄红素 称取 １ ０克 中Ｊ 胜氧化铝 ， 置 于烧 杯中 ， 加人 １ Ｏ毫升石油 醚， 搅拌 均匀成浆状 。将 它从 色谱柱顶加入 ， 此 时柱 中应 先加入 ７毫升石油 醚 。打开活塞 ， 让液体流人接收瓶 中。继续将 料注人柱 中 ， 直到得到 １ ５厘米 高的氧化铝柱 。在这 过程 中 ， 应轻 轻 叩击柱子 ， 并要 以稳 定 的速率装柱 ， 使柱装 得均匀。 装好的柱不能有 裂缝 和气泡 ， 否则影响 分离效果 。在装 好的氧化铝柱表 面放 上 ０ ． ５ 厘 米厚 的棉花 ， 然后放 走过剩的溶剂 ， 直至溶剂 面刚刚达 到棉花顶部上 面， 关闭活塞 。 将粗制的类胡萝 卜 素溶于 １ —２毫升石油醚 中，用滴管加人柱 顶。 并 留下几滴供 以后 的薄层色谱用 ， 打开活塞 。 让有色物质 流到 柱上 。当柱顶 刚变 干时 即关 闭活塞 。用滴管沿柱的四壁加人几毫升
吉林大学《有机化学实验》番茄色素的提取分离
番茄色素提取过程
饱和氯化钠 萃取
加入少量干燥剂
（2）滤渣重新装回圆底烧瓶内，加 入10mL 二氯甲烷，加热回流5min, 冷却后用折叠滤纸过滤，将滤液直 接过滤至分液漏斗内。 (3) 重复（2） （4）加入10mL饱和氯化钠溶液 萃取，静置分层后，分出有机层 于一干燥的锥形瓶中，加适量无 水硫酸钠并塞紧瓶塞干燥。
边缘现象：两边高
4.显色 可见光下观察 紫外灯下观察 显色剂显色： 通用：10% 硫酸乙醇溶液；碘蒸气； 大部分有机样品：磷钼酸/乙醇 溶液 专用： 碘化铋钾 —生物碱； 三氯化铁 —黄酮； 茚三酮 — 氨基酸
实验步骤
1 提取： （1）番茄酱约5g于100mL烧瓶 中，加10mL 95%乙醇，在电热套内 加热回流5min,冷却后用折叠滤纸 过滤，将滤液直接过滤至准备好的 分液漏斗内。
固定相
组分
柱色谱
柱色谱（柱上层析）常用的有吸附柱 色谱和分配柱色谱两类。吸附柱色谱 常用氧化铝和硅胶做固定相。在分配 柱色谱中以硅胶、硅藻土和纤维素作 为支持剂，以吸附较大量的液体作为 固定相，而支持剂本身不起分离作用。 吸附剂
固定相
组分
常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和 活性炭等
• 柱色谱 色层的展开首先选用极性较小的溶剂，使 最容易脱附的组分分离。然后加入不同比 例的极性溶剂配成的洗脱剂，将极性较大 的化合物自色谱柱中洗脱下来。常用洗脱 剂的极性：
1.制板（纸）
2.点样
毛细管点样：毛细管与板（纸）垂直， 点样位置、点样距离：不被展开剂浸泡、以显色后点之间易分开为准。 点样量、样品浓度：轻轻点一次即可。 本次实验：点三个样品——提取液，番茄红素，胡萝卜素
3.展开
将薄层板斜放入层析缸中（或将滤纸挂在层析缸中），层析缸中流 动相（展开剂）的量以不浸泡样点为宜。有些层析缸如下图，易进 行先饱和后展开操作，提高重现性和避免边缘现象。
大学有机化学实验二番茄红素和β-胡萝卜素的提取及薄层层析法分离法预习报告
实验二番茄红素和β-胡萝卜素的提取及薄层层析法分离一、实验目的（1）理解薄层层析的分析原理（2）学习从番茄中提取番茄红素和β-胡萝卜素的方法（3）掌握薄层层析法基本操作（4）学会用薄层层析法鉴定番茄中的番茄红素和β-胡萝卜素二、实验原理番茄红素主要来源于番茄（西红柿）、南瓜、西瓜、柿子、桃、芒果、葡萄、草莓、柑橘等果实，茶的叶子及胡萝卜、甘蓝等根部也含有番茄红素。
由于番茄红素具有抗氧化、抑制突变、降低核酸损伤、减少心血管疾病及预防癌症等多种功能，因此，番茄红素日益受到营养界的关注。
番茄红素β-胡萝卜素存在于黄、红色蔬菜中，以胡萝卜中含量尤富。
番茄中也含有一些β-胡萝卜素。
它是维生素A的前体，人体中缺乏维生素A可引起夜盲症，而且会影响正常的生长发育。
β-胡萝卜素番茄红素和β-胡萝卜素都是类胡萝卜素。
本实验先用乙醇将番茄脱水，然后用环乙烷提取，最后利用二者的极性差异用薄层层析法（TLC法）鉴定。
三、实验步骤（一）、番茄中番茄红素和β-胡萝卜素的提取1、除水分称取番茄4g于研体中→捣烂→在漏斗中沥去水分→用纸巾包裹残渣→在研体中滤去水分→加3ml95%乙醇→搅拌→压出乙醇液并弃去→重复一次除水操作→得到残渣2、提取番茄红素和β-胡萝卜素置残渣于研体中→加2ml环己烷→搅拌→提取液移至干燥的小试剂管中→加少量的无水硫酸钠→充分振摇→试管口塞上棉花，置于暗处备用（二）薄层层析1、点样TLC板→画起点线、终点线和标记样品点→点样2、展开层析缸（底部垫滤纸）→加适量环己烷后展开→取出TLC板→立即用铅笔标记溶剂前沿和圈出斑点3、计算计算比移值Rf四、思考题（一）拖尾现象产生之原因及解决方法：1、点样量太多，展开剂不能全部负载。
解决方法：寻出合适之点样量后，再进行层析。
2、展开剂pH值偏高。
如以中性展开剂层析酸性物质时，常形成斑点拖尾。
解决方法：在展开剂中加入酸，使解离受到抑制，即可防止斑点拖尾。
3、展开剂的pH值偏低。
研究型、综合性大学化学实验的设计与探讨——番茄红素和β-胡萝卜素的提取及含量的分析测定
研究型、综合性大学化学实验的设计与探讨——番茄红素和β-胡萝卜素的提取及含量的分析测定
梁少敏;罗亚红;周炽晖;陈志豪;梅俊超;樊亚鸣
【期刊名称】《化工高等教育》
【年(卷),期】2007(24)6
【摘要】我们设计了一套综合性的大学化学实验--番茄酱中天然色素的提取、分离及含量测定.其中通过三种实验技术的组合,四个可调控位点(A-D)的设计,构成了一整套实验方案.从而将传统分块的化学实验有机地结合起来,在训练实验操作技能的同时,还使学生感受到了科学研究中的多种思路与最佳解决方案.
【总页数】4页(P83-86)
【作者】梁少敏;罗亚红;周炽晖;陈志豪;梅俊超;樊亚鸣
【作者单位】广州大学,化学化工学院,广东,广州,510006;广州大学,化学化工学院,广东,广州,510006;广州大学,化学化工学院,广东,广州,510006;广州大学,化学化工学院,广东,广州,510006;广州大学,化学化工学院,广东,广州,510006;广州大学,化学化工学院,广东,广州,510006
【正文语种】中文
【中图分类】G64
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β―胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定
β―胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定β—胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定一、实验目的1、学习从天然产物中提取有机化合物的方法。
2、学习用薄层层析法检验有机化合物的基本原理，点样，展开和计算Rf 值的方法。
二．仪器和试剂仪器三角瓶（50ml）、分液漏斗（150ml）、蒸馏瓶（50ml）、普通蒸馏装置（或减压蒸馏装置）、漏斗、色谱柱、硅胶薄层板、量筒、烧杯、层析缸。
试剂胡萝卜、丙酮、石油醚（bp30~60℃）、硅胶（层析用，200~300目）、无水硫酸钠、石油醚（bp60~90℃）、丙酮：石油醚（1：9）（V/V）。
三．实验方案1、含类胡萝卜素石油醚溶液的制备将新鲜胡萝卜洗净、擦干,切去尾部，切碎。
称取碎鲜胡萝卜【1】10g于小研钵中,研碎。
碎胡萝卜移至50mL三角烧瓶中，每次用丙酮10mL萃取2次，再用石油醚（bp30~60℃）萃取固体两次，每次10mL。
把石油醚溶液加到丙酮液中。
在分液漏斗中将混合液与50mL饱和氯化钠溶液【2】振荡，分去下层，用蒸馏水洗涤上层液两次，每次50mL，分去水，用无水硫酸钠干燥石油醚液（约1h）,把混合液倒入50mL圆底烧瓶中，热水浴加热蒸馏，除去溶剂，得固体。
在制得的固体物加入3mL石油醚（bp60~90℃）拌硅胶1g，在通风橱内抽干，得黄色硅胶颗粒，待上柱。
2、装柱和分离取20cm*1cm色谱柱一根，垂直装置，以50ml三角烧瓶作洗脱液的接受器。
用镊子取少许脱脂棉【3】放于干净的色谱柱底部，轻轻塞紧，再在脱脂绵上盖一层厚0."5cm的海石砂（或用一张比柱内径略小的滤纸代替），关闭活塞，向柱内倒入石油醚（bp60－90℃）至约为柱高的3／4处，打开活塞，控制流出速度为1滴/s。
通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入层析硅胶。
用洗耳球轻轻敲打柱身，使填装紧密。
当装填到3/4时，再在上面加一层0."5cm厚的海石砂，操作时一直保持上述流速，注意不能使液面低于砂子的上层。
番茄酱中番茄红素和β—胡萝卜素
番茄酱中番茄红素和β—胡萝卜素的提取别离及分析测定一、实验目的1、理解有机溶剂提取番茄红素和β—胡萝卜素的方法及原理2、掌握萃取别离过程的根本操作3、掌握层析柱的操作4、掌握分光光度法的测定色素含量的方法5、掌握实验数据的处理及色素含量的计算方法二、实验原理番茄酱浓缩了番茄中的番茄红素和β-胡萝卜素，二者的构造均属于类胡萝卜素。
因而在构造上极为相似。
番茄红素构造化学式如下：β-胡萝卜素构造化学式如下：类胡萝卜素为多烯类色素，不溶于水而溶于脂溶性有机溶剂。
本实验先用较高极性的溶剂提取较高极性的色素，同时脱去样品中的存在的少量水分；再用较低极性的溶剂补充提取较低极性的色素。
因为低极性溶剂不与水混溶，故先除去水分后才能有效地从组织中较完全地萃取类胡萝卜素。
根据番茄红素与β-胡萝卜素极性的差异，用柱层析可以将它们别离。
番茄红素在不同的有机溶剂里均有类似的吸收峰,最大吸收峰的波长在500nm附近，将别离后的样品溶解在适当的溶剂中,在最大吸收峰处用分光光度计测定溶液的吸光度；番茄红素标准品价格昂贵,且本身稳定性差,不宜长期保存。
根据苏丹红〔Ⅰ〕在500nm附近和番茄红素、β-胡萝卜素具有一样的吸收特性，以苏丹红代替番茄红素作为标准品，用氯仿作为溶剂及参比液，在500nm 附近测定苏丹红的系列吸光度，绘制标准曲线；用番茄红素的提取液的吸光度值在此标准曲线上查取相应浓度，以此来表征番茄红素的浓度。
通过换算得到番茄酱中该色素的含量。
β-胡萝卜素的含量采用色价的测定及计算方法。
色价是色素在商业上的浓度计量方式，定义为单位质量原料的提取物在1％浓度、以1cm比色皿在其最大吸收峰处的吸光度。
色价的特点是不需要校准样，也不需作标准曲线，简单快速。
具体操作是取样品m克，在天平上准确称重，用Vml石油醚溶解，以石油醚作参比液，在λmax下测量样品溶液的吸光度A，样品色价E按下式计算：三、物理常数名称分子式相对分子质量外观熔点℃溶解度最大吸收波长λ水乙醇氯仿石油醚番茄红素536.88针状深红色晶体174不溶微溶可溶可溶485～500nmβ-胡萝卜素536.88紫红或暗红色结晶或结晶性粉末176～182不溶微溶可溶可溶 480nm四、试剂和仪器1、试剂及原料亨氏番茄酱、95%乙醇〔C.P〕、二氯甲烷〔C.P〕、石油醚〔60-90℃〕、氯仿〔A.R〕、中性氧化铝〔C.P〕、氯化钠〔C.P〕、无水硫酸钠〔C.P〕、苏丹红Ⅰ〔C.P〕2、仪器回流装置、恒温磁力搅拌器、层析柱(15cm左右内径为1-1.2cm)、分析天平, 移液管、容量瓶、VIS-7220分光光度计五、实验步骤1、混合色素的提取称取新鲜番茄浆[1]10g于50ml枯燥的圆底烧瓶中，加极性的试剂(建议用95%乙醇)［A］20ml，摇匀，装上回流冷凝管及恒温磁力搅拌器，在相应温度的水浴中加热，回流5分钟，冷却后抽滤，滤液直接进入一个的50ml锥形瓶中。
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实验五：从番茄酱中提取番茄红素和β胡萝卜素
一、实验目的
1.学习从天然产物中提取有机化合物的方法。
2.学习用薄层层析法检验有机化合物的基本原理，点样，展开和计算R f值的方法。
二、提取方法
1.浸取法：选用合适的溶剂，根据相似相溶原理，直接把溶剂加到固体样品上加热回流提取，
本次试验就用的是此法。
平时熬中药也是使用的该方法。
用水煮中药就是把中药的有效成分提取出来。
2.水蒸汽蒸馏法：天然动植物中含有一些较易挥发的成分。
利用水蒸汽可以把这些物质蒸出
提取。
天然的很多香料的提取（如橙油的提取）就是用的此法。
3.连续提取法：原理同第一种方法，但是使用了一种特殊的装置—索氏提取器。
使用少量的
溶剂能重复用来浸取达到浓缩的目的。
如：茶叶种咖啡因的提取就是用此法。
三、本实验中的具体方法
1.取一平勺番茄酱于50ml圆底烧瓶中，加5 ml 95％的乙醇，装上冷凝管，回流3-5分钟，冷
却。
用玻璃漏斗垫棉花过滤。
滤液置于带塞子的锥形瓶内，滤渣放回原烧瓶。
加入乙醇的目的是破坏细胞壁，为下一步用石油醚的提取创造条件。
2.上部的滤渣及棉花一起放入烧瓶中，加入10 ml石油醚，加热回流10分钟，冷却，过滤。
滤
液和上面滤液合并，滤渣扔掉。
3.将合并的滤液倒入分液漏斗中，加入5 ml饱和食盐水，萃取，分层。
其中有机层进行薄板
层析，无机层作对比用。
加入饱和食盐水的目的：1）盐析，分层快且清；2）因为NaCl溶液是饱和水溶液，所以溶解有效成分少，即损失小。
4.有机相加入少量Na2SO4干燥—很重要。
β-胡萝卜素是合成VB6的原料，极性小，Rf值大，
在上边。
番茄红素极性大，Rf值小，在下边。
四、本实验中薄板层析的爬板
1.介绍色谱法包括薄层法，柱色谱，纸色谱气相色谱和液相色谱。
今天只作薄层色谱。
2.色谱法是分离和鉴定有机化合物的常用方法。
3.原理：利用混合物个组分在固定相和流动相的溶解度不同，即在两相间分配系数的不同而
使各组分分开。
4.特点：时间短；分离效果好；需要样品量少；适用于在较高温度下容易发生化学变化的化
合物。
5.事先准备：用铅笔和尺子轻轻画出起始线和终止线；
6.点样：用直径1mm的平头毛细管点取提取物，先在废纸上点一下（快速），然后在起始线
线上少量多次地点样（保证一定浓度，一般需要50次以上）。
待溶剂挥发以后，轻放到装好展开剂地展开缸内，不要让展开剂溅起或倾斜；
7.展开（爬板）：当展开剂爬到终止线时，停止爬行，取出。
因为β-胡萝卜素（黄点）易挥
发，所以要尽快画出黄点的位置；
8.Rf值的计算：分离效果好时Rf应为0.15 ~ 0.75之间。
9.意义：定性鉴定，监测化学反应等等。
10.点样：再薄板一端10mm（下）及另一端5mm（上）处用铅笔轻轻画一道痕迹，用直径小于
1mm的毛细管（平口）点样，点样时要做到少量多次，保证样品点小而又有一定的浓度，一块板上可以点两个点。
11.展开剂的选择：根据样品的极性而定，极性大的化合物可选用极性较大的展开剂。
为达到
较好的分离效果，可用混合溶剂。
做多次展开后可确定一合适的配比。
展开时，溶剂前沿离板顶5mm停止。
12.显示方法：A)有色化合物可直接观察；B)无色的，用显色剂显色，如碘熏法；紫外光显色，
用硅胶GF254，有样品点的位置再紫外灯光照射下发暗。
13.R f值计算公式：R f = 样品中某组份移动离开原点的距离/ 展开剂前沿距离原点中心的距离
五、注意事项
•本次实验使用95％乙醇和石油醚提取。
两种混合后用NaCl水溶液洗涤。
乙醇主要进入水相，建议水相不要弃去。
点样时在一块板上点两点：一为有机相，一为水相。
观察比较有何不同。
•展开剂的配比控制在石油醚:丙酮=9:1。
同时可以做一个比较，采用12:1。
在混合展开剂中丙酮的极性大于石油醚，因此如果丙酮含量增大，极性增大，使得分离效果很差。
如果增加石油醚的含量，使展开剂的极性变小，分离效果较好。
•观察：如果红点紧追黄点，且Rf>0.75，则要增加石油醚的用量如达到12:1。
•番茄红素为红色，β-胡萝卜素为黄色，展开后的薄板放置一段时间后，样品颜色褪去。
因为β-胡萝卜素极易氧化，故在提取和展开过程中，注意不要敞开口，要用瓶盖盖住。
•番茄红素的双键比β-胡萝卜素的双键多，因此番茄红素的极性大，在爬板时爬地慢，在下面，β-胡萝卜素的极性小，爬地快，且易氧化。
•展开缸用后不要用水洗！
•薄板展开后临摹在实验报告上，板用后洗干净放回窗台上地塑料筐内。
•在实验报告临摹一块走好的薄板—最理想的。
六、所用仪器
1．50ml圆底烧瓶
2．球形冷凝管
3．25ml锥形瓶
4．50ml锥形瓶
5．14#/19#变口
6．梨形分液漏斗
7．5ml量筒
8．10ml量筒
9．滴管
10．药勺
11．搅拌棒
12．展开缸
13．塞子2个
14．普通漏斗共15件。