临床检验技师血液检验考试复习资料：自身溶血试验及纠正试验
检验技士考试临床血液学考点：溶血性贫血
检验技士考试临床血液学考点：溶血性贫血检验技士考试临床血液学考点：溶血性贫血血性贫血(hemolytic anemia)是一个良性疾病，系指红细胞破坏加速，而骨髓造血功能代偿不足时发生的一类贫血。
骨髓具有正常造血6-8倍的代偿能力，如果骨髓增加红细胞生成，足以代偿红细胞的生存期缩短，则不会发生贫血，这种状态称为“溶血”或代偿性溶血性疾病。
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【定义】溶血(hemolysis)是红细胞遭到破坏，寿命缩短的过程。
当溶血超过骨髓的代偿能力，引起的贫血即为溶血性贫血(hemolytic anemia，HA)。
骨髓具有正常造血6～8倍的代偿能力，溶血发生而骨髓能够代偿时，可无贫血，称为溶血性疾病。
【HA的临床分类】按发病机制，HA的临床分类如下：(一)红细胞自身异常所致的HA1.红细胞膜异常(1)遗传性红细胞膜缺陷，如遗传性球形细胞增多症、遗传性椭圆形细胞增多症、遗传性棘形细胞增多症、遗传性口形细胞增多症等。
(2)获得性血细胞膜糖化肌醇磷脂(GPI)锚连膜蛋白异常，如阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)。
2.遗传性红细胞酶缺乏(1)戊糖磷酸途径酶缺陷，如葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症等。
(2)无氧糖酵解途径酶缺陷，如丙酮酸激酶缺乏症等。
此外，核苷代谢酶系、氧化还原酶系等缺陷也可导致HA。
3.遗传性珠蛋白生成障碍(1)珠蛋白肽链结构异常不稳定血红蛋白病，血红蛋白病S、D、E 等。
(2)珠蛋白肽链数量异常地中海贫血。
4.血红素异常(1)先天性红细胞卟啉代谢异常如红细胞生成性血卟啉病，根据生成的卟啉种类，又分为原卟啉型、尿卟啉型和粪卟啉型。
(2)铅中毒影响血红素合成可发生HA。
(二)红细胞外部异常所致的HA1.免疫性HA(1)自身免疫性HA温抗体型或冷抗体型(冷凝集素型、D—L抗体型);原发性或继发性(如SLE、病毒或药物等)。
实验诊断学之临床血液学检验
临床血液学检验Ⅰ、血液一般检验----红细胞系统一、红细胞生成起源二、红细胞及血红蛋白增多1、男：RBC>6.0×1012/L,Hb>170g/L女：RBC>5.5×1012/L,Hb>160g/L2、红细胞及血红蛋白增多的【临床意义】⑴、相对增多：血浆容量减少血液浓缩⑵、尽对增多①继发性：非造血系统疾病，要紧环节是EPO增多代偿性增加：血氧饱和度低，组织缺氧所致生理性：新生儿、高原居民病理性：慢性心肺疾病、异常血红蛋白病非代偿性增加：无血氧饱和度低和组织缺氧肿瘤和肾病所致：肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、子宫肌瘤、肾盂积水、多囊肾等②原发性：真性红细胞增多症三、红细胞及血红蛋白减少1、贫血：男<120g/L,女<110g/L贫血程度：轻度：>90g/L中度：90-60g/L重度：60-30g/L极重度：<30g/L2、红细胞及血红蛋白减少的【临床意义】⑴、生理性减少：婴幼儿〔生长发育迅速〕，妊娠中、后期〔血容量增加，血液稀释〕，老人〔骨髓造血减少〕⑵、病理性减少①生成减少骨髓造血障碍造血干细胞异常：再障骨髓浸润：急性白血病等缘故不明或多种机制：慢性感染、肿瘤、肝病、内分泌病等伴发的贫血细胞分化和成熟障碍DNA合成障碍：巨幼细胞贫血血红蛋白合成障碍血红素合成障碍：IDA珠蛋白合成障碍：海洋性贫血②破坏过多红细胞内在缺陷〔遗传性〕：遗球、红细胞酶缺陷的溶贫、珠蛋白生成障碍性贫血、异常血红蛋白病、PNH 红细胞外在缺陷〔获得性〕：免疫性、机械性③失血急性失血慢性失血四、网织红细胞〔reticulocyte〕【定义】网织红细胞是晚幼红细胞到成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞，胞质中尚残存多少不等的核糖核酸等嗜碱性物质。
用煌焦油蓝或新亚甲蓝进行活体染色，这些嗜碱性物质被凝聚沉淀并着色，在胞浆中呈现蓝色细颗粒状，颗粒间又有细丝状联缀而构成网状结构，故称网织红细胞。
临床检验血液 (12)
临床检验血液 (12)临床医学检验主管技师考试辅导临床血液学检验自身免疫性溶血性贫血及其实验诊断一.自身免疫性溶血的检验及其应用1.免疫性溶血性贫血的定义和分类：免疫性溶血性贫血是由抗体参与的溶血反应所致的贫血。
这类免疫反应是由于红细胞表面抗原，或与外来的抗原（如药物等）相结合，在相应抗体（IgG 或IgM）作用下，或激活补体的参与，导致红细胞凝集或破坏而发生溶血；或在脾或肝脏内的单核-巨噬细胞的吞噬作用下被破坏。
免疫性溶血性贫血的分类见下表。
免疫性溶血性贫血的分类分类抗体型别自身免疫性溶血性贫血温反应性抗体型冷反应性抗体型冷凝集素综合征阵发性冷性血红蛋白尿症通常为湿抗体，IgG为主为温抗体IgG为主，少部分IgA.C3 通常为IgG.补体几乎均为IgM 一般为IgG 药物免疫性溶血免疫复合型.IgG.IgM等同种免疫新生儿溶血症血型不合输血 ABO.Rh.MN型 ABO.Rh型2.抗人球蛋白试验：包括直接（DATG）和间接（IATG）法（1）原理：抗人球蛋白试验（Coombs试验）检测自身免疫性溶血性贫血的自身抗体（IgG）。
分为检测红细胞表面有无不完全抗体的直接抗人球蛋白试验（DAGT）和检测血清中有无不完全抗体的间接抗人球蛋白试验（IAGT），以前者最常用。
直接试验应用抗人球蛋白试剂【抗IgG和（或）抗C3d】与红细胞表面的IgG分子结合，如红细胞表面存在自身抗体，出现凝集反应。
间接试验应用Rh（D）阳性O型正常人红细胞与受检血清混合孵育，如血清中存在不完全抗体，红细胞致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出现凝集。
结果：均为阴性。
（2）临床意义：阳性见于自身免疫性溶血性贫血.冷凝集素综合征.阵发性寒冷性血红蛋白尿.药物致免疫性溶贫.输血引起溶贫和新生儿同种免疫性溶贫。
阴性不能排除免疫性溶贫。
3.冷凝集素试验（1）原理冷凝集素为IgM类完全抗体，在低温时可使自身红细胞.O型红细胞或与受检者血型相同的红细胞发生凝集。
2017年主管检验技师考试临床血液学检验讲义第十二章自身免疫性溶血性贫血及其实验诊断
第十二章自身免疫性溶血性贫血及其实验诊断一、自身免疫性溶血的检验及其应用二、自身免疫性溶血性贫血的实验诊断一、自身免疫性溶血的检验及其应用1.免疫性溶血性贫血的定义和分类免疫性溶血性贫血是由抗体参与的溶血反应所致的贫血。
这类免疫反应是由于红细胞表面抗原，或与外来的抗原（如药物等）相结合，在相应抗体（IgG或IgM）作用下，或激活补体的参与，导致红细胞凝集或破坏而发生溶血；或在脾或肝脏内的单核-巨噬细胞的吞噬作用下被破坏。
免疫性溶血性贫血的分类见下表。
免疫性溶血性贫血的分类2.抗人球蛋白试验包括直接（DATG）法和间接（IATG）法。
（1）原理：用于检测自身免疫性溶血性贫血的自身抗体（IgG）。
分为检测红细胞表面有无不完全抗体的直接抗人球蛋白试验（DAGT）和检测血清中有无不完全抗体的间接抗人球蛋白试验（IAGT），以前者最常用。
直接试验应用抗人球蛋白试剂[抗IgG和（或）抗C3d]与红细胞表面的IgG分子结合，如红细胞表面存在自身抗体，出现凝集反应。
抗人球蛋白直接试验原理示意图及结果观察（玻片法）间接试验应用Rh（D）阳性O型正常人红细胞与受检血清混合孵育，如血清中存在不完全抗体，红细胞致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出现凝集。
抗人球蛋白间接试验原理示意图及结果观察（试管法）结果：健康人直接和间接抗人球蛋白试验均为阴性。
（2）临床意义：阳性见于自身免疫性溶血性贫血、冷凝集素综合征、阵发性寒冷性血红蛋白尿、药物致免疫性溶血性贫血、输血引起溶血性贫血和新生儿同种免疫性溶血性贫血。
阴性不能排除免疫性溶血性贫血。
3.冷凝集素试验（1）原理：冷凝集素为IgM类完全抗体，在低温时可使自身红细胞、O型红细胞或与受检者血型相同的红细胞发生凝集。
凝集反应的高峰在0～4℃，当温度回升到37℃时凝集消失。
参考值：正常人血清抗红细胞抗原的IgM冷凝集素效价＜1:32（4℃）。
（2）临床意义：阳性见于冷凝集素综合征（＞1:1000），支原体肺炎、传染性单核细胞增多症、疟疾、肝硬化、淋巴瘤及多发性骨髓瘤者亦可增高，但不超过1:1000。
临床医学检验主管技师考试辅导临床血液学检验 溶血性贫血的实验诊断讲义
溶血性贫血的实验诊断溶血性贫血定义：是由于某种原因使红细胞存活期缩短，破坏增加，超过了骨髓代偿能力所引起的一类贫血。
续表溶血性贫血检验的基本方法及应用显示溶血的检验（1）血浆游离血红蛋白测定1）原理：利用血红蛋白具有类过氧化物酶活性的特点，采用过氧化物酶法检测。
血红蛋白可催化H202释放新生态氧，使联苯胺氧化成为蓝紫色。
根据显色深浅，可测出血浆游离血红蛋白的量。
参考值：＜40mg/L。
2）临床意义：血管内溶血时显著升高；珠蛋白生成障碍性贫血、自身免疫性溶贫时轻度增高；血管外溶血、红细胞膜缺陷性溶贫时不增高。
（2）血清结合珠蛋白（Hp）测定1）原理：在待测血清中加入一定量的血红蛋白液，使之与待测血清中的结合珠蛋白（HP）形成Hp-Hb 复合物。
通过电泳法将结合的Hp-Hb复合物与未结合的Hb分开，测定Hp-Hb复合物的量，从而得到血清中结合珠蛋白的含量。
参考值：0.8～2.7g/L2）临床意义：增高见于妊娠、慢性感染、恶性肿瘤等，但不能排除溶血；减低见于各种溶血、肝病或无结合珠蛋白血症、巨幼细胞贫血等。
（3）血浆高铁血红素白蛋白测定1）原理：血浆中游离的血红蛋白可被氧化为高铁血红蛋白，再分解为珠蛋白和高铁血红素，后者先与血中的血红蛋白结合，血红蛋白消耗完后，高铁血红素与白蛋白结合形成高铁血红素白蛋白，后者与硫化胺形成一个容易识别的铵血色原，用光谱仪观察结果，在绿光区558nm处有一最佳吸收区带。
结果：阴性。
2）临床意义：血管内溶血时阳性。
（4）血红蛋白尿测定1）原理：血管内有大量红细胞破坏，血浆中的游离血红蛋白超过1000mg/L时，血红蛋白可随尿排出，尿中血红蛋白检查阳性。
其特点为外观呈浓茶色或透明的酱油色，镜检无红细胞，但隐血试验呈阳性反应。
结果：尿隐血试验阴性。
2）临床意义：血型不合的输血、大面积烧伤、恶性疟疾、某些传染病、溶血性中毒症等，明显增多。
遗传性或继发性溶血性贫血，如蚕豆病、阵发性寒冷性血红蛋白尿症、行军性血红蛋白尿症及阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。
临床医学检验技术(中级)相关专业知识模拟试卷25(题后含答案及解析)
临床医学检验技术（中级）相关专业知识模拟试卷25(题后含答案及解析)题型有：1. A1型题 2. A3/A4型题 3. B1型题 4. X型题1．对于某些严重感染，病人的血清抑菌力／杀菌力应高于A．1：4B．1：8C．1：16D．1：64E．1:128正确答案：D2．α颗粒中不存在的物质是A．Ca2+B．vWFC．血小板衍生促生长因子(PDGF)D．β-TGE．纤维蛋白原正确答案：A3．关于嗜酸性粒细胞增多症，正确的说法是A．外周血嗜酸性粒细胞>5％白细胞总数，或其绝对值>0．25×109100×109／LB．中性粒细胞计数>1．0×109／LC．血红蛋白浓度>90g／LD．外周血白血病细胞<5％E．骨髓中白血病细胞<10％正确答案：A29．肝豆状核变性应检查A．血清总蛋白B．血清清蛋白C．结合珠蛋白D．C一反应蛋白E．铜蓝蛋白正确答案：E30．肝硬化黄疸的常见原因应除外A．胆红素来源过多B．胆红素摄取障碍C．胆红素结合障碍D．胆红素排泄障碍E．胆红素肝肠循环障碍正确答案：A31．宫颈炎患者的阴道涂片，其上皮细胞的变化不包括A．变性B．增生C．化生D．癌变E．核异质正确答案：D32．为免疫缺陷病的患者输血，应选择A．洗涤红细胞B．冰冻红细胞C．浓缩红细胞D．年轻红细胞E．照射红细胞正确答案：E33．骨髓象检查无粒／红比例减低的疾病是A．贫血B．粒细胞缺乏症C．急性化脓性感染D．真性红细胞增多症E．急性红白血病正确答案：C34．关于EPO的叙述，错误的是A．可用于治疗肾性贫血B．缺氧状态下，肾脏产生增加C．能促进幼红细胞增殖和成熟D．能刺激造血多能干细胞形成红系祖细胞E．是一种糖蛋白，主要由肺脏产生正确答案：E35．关于β2-微球蛋白的叙述，错误的是A．存在于有核细胞的表面，尤其是淋巴细胞和单核细胞的表面B．几乎全部在肾小管被重吸收C．可监测肾小管功能D．不能通过肾小球滤过E．恶性肿瘤患者，尿中浓度会升高正确答案：D36．关于胆汁酸特点的叙述，不正确的是A．分子中含有疏水性基团和亲水性基团B．能降低水／月旨两相之间的表面张力C．能乳化脂肪D．能分解蛋白质E．由胆固醇转变而来正确答案：D37．关于淀粉酶的叙述，错误的是A．淀粉酶是淀粉的内切酶B．淀粉酶能水解淀粉α-1.6糖苷键C．淀粉酶作用的最适宜的pH为6．9～7．0D．测定淀粉酶时反应体系中不能缺少Ca2+、Cl-E．巨淀粉酶血症的患者，血淀粉酶高正确答案：B38．关于肌红蛋白的叙述，正确的是A．是诊断心肌损伤最特异的指标B．半寿期较cTn长C．测定不受骨骼肌损伤的影响D．胸痛发生后3～6h开始升高E．胸痛发生后2～12h不升高，可排除心肌梗死的诊断正确答案：E39．关于免疫增殖病，错误的是A．患者免疫功能异常B．免疫球蛋白水平增高C．免疫细胞均呈恶性异常增生D．免疫器官和组织或细胞异常增生E．免疫球蛋白水平增高或免疫功能异常正确答案：C40．关于新生儿同种免疫性溶血症，叙述错误的是A．最常见ABO血型不合B．母体血型多为O型，胎儿可为A型C．直接抗人球蛋白试验阳性D．间接抗人球蛋白试验阴性E．抗体多为IgG不完全抗体正确答案：D41．红细胞Hayem稀释液中，有调节渗透压作用的是A．氯化钠B．结晶硫酸钠C．氯化高汞D．甲醛E．枸橼酸盐正确答案：A42．患者，男性，10岁，面色苍白、乏力5年。
2017年主管检验技师考试临床血液学检验讲义第八章溶血性贫血的实验诊断
第八章溶血性贫血的实验诊断一、溶血性贫血检验概述二、溶血性贫血的筛查项目与应用一、溶血性贫血检验概述1.溶血性贫血的定义2.溶血性贫血的分类3.确定有无溶血4.血管内与血管外溶血的鉴别5.溶血性贫血的红细胞形态异常6.溶血性贫血的实验诊断步骤1.溶血性贫血的定义是由于某种原因使红细胞存活期缩短，破坏增加，超过了骨髓代偿能力所引起的一类贫血。
2.溶血性贫血的分类（1）病因学分类，见下表。
（2）按溶血发生的部位分类：血管内溶血及血管外溶血。
血液循环中的成熟红细胞及红细胞膜结构示意图血红蛋白分子结构示意图主要溶血性贫血的病因分类血管内和血管外溶血发生机制示意图<血管内溶血的结果>血浆游离血红蛋白增多1.血红蛋白血症2.血浆结合珠蛋白降低3.血红蛋白尿-快速的血管内溶血4.含铁血黄素尿-慢性溶血（尿含铁血黄素试验-Rous试验）左：正常尿液与血红蛋白尿；右：含有铁颗粒的肾小管上皮细胞（普鲁士蓝染色）。
<血管外溶血的结果>胆红素正常代谢示意图血红蛋白代谢产物增多1.T-BIL，D-BIL？2.URO排出？3.U-BIL排出？4.粪胆原排出？3.确定有无溶血按下表实验判断。
溶血存在的实验检查参考值溶血情况网织红细胞计数0.5%～1.5% ↑绝对值（24～84）×109/L ↑异形红细胞0～0.6% ↑嗜多色性红细胞0.2%～1% ↑骨髓红系增生活跃↑↑，（间期分裂细胞增多，可见核染色质小体及卡波环）粒红比例2～4:1 缩小或倒置胆红素总胆红素5.1～17.lμmol/L↑↑间接胆红素为主间接胆红素1.7～10.2μmol/L血清游离Hb ＜40mg/L 血管内溶血↑血清结合珠蛋白0.5～1.5g/L ↓高铁血红素白蛋白－+血红蛋白尿－+Rous试验－+血清乳酸脱氢酶109～245U/L ↑红细胞寿命（51CrT1/2）25～35天缩短溶血性贫血骨髓象示红系增生旺盛4.血管内与血管外溶血的鉴别见下表。
临床医学检验技术(士)：溶血性贫血的检验考试题
临床医学检验技术(士)：溶血性贫血的检验考试题1、单选患者，女性，30岁，3年前无明显诱因出现巩膜发黄，全身乏力，常感头昏，皮肤瘙痒，并多次出现酱油色尿。
近3个月来，乏力加重，无法正常工作而入院。
体格检查发（江南博哥）现重度贫血，巩膜黄染，肝肋下2cm，脾平脐，其余未见异常。
血常规显示WBC9.0×109/L，Hb40g/L，RBC1.06×1012/L，PLT110×109/L。
外周血可见晚幼粒细胞，成熟红细胞明显大小不等和形态异常，可见较多的小球形红细胞和嗜多色形红细胞，网织红细胞30%。
拟诊"溶血性贫血"入院。
为了进一步明确溶血的存在，应首选哪一方面的实验室检查（）A.肾功能测定B.肝功能测定C.LDH、总胆红素、间接胆红素、血红蛋白尿等测定D.补体测定E.红细胞沉降率测定正确答案：C2、单选红细胞渗透脆性增加见于（）A.球形红细胞增多症B.靶形红细胞增多症C.口形红细胞增多症D.镰状红细胞增多症E.珠蛋白生成障碍性贫血正确答案：A参考解析：红细胞渗透脆性增加见于遗传性球形细胞增多症、椭圆形细胞增多症等；降低见于阻塞性黄疸、珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血等。
3、单选不符合铁粒幼细胞性贫血的是（）A.血清总铁结合力增高B.血清铁增高C.转铁蛋白饱和度增高D.血浆铁转换率增高E.铁蛋白增高正确答案：A参考解析：铁粒幼细胞性贫血铁代谢的各项指标与缺铁性贫血明显不同，血清总铁结合力正常或减低。
4、单选下列疾病在蔗糖溶血试验时可以出现假阳性的是（）A.巨幼细胞性贫血B.多发性骨髓瘤C.白血病D.自身免疫性溶贫E.巨球蛋白血症正确答案：C参考解析：自身免疫性溶血性贫血有的可为阳性，白血病、骨髓硬化时可出现假阳性。
5、单选不符合溶血性贫血骨髓象特征的是（）A.小细胞低色素性贫血B.粒/红比值减低C.红细胞系统增生显著D.可见H-J小体和卡-波环等红细胞E.骨髓增生明显活跃正确答案：A参考解析：溶血性贫血骨髓象特征是：骨髓增生明显活跃，红细胞系统增生显著，粒/红比值减低，可见H-J小体和卡-波环等红细胞。
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自身溶血试验及纠正试验介绍：
在无菌条件下正常人肝素抗凝血在37℃环境下放置24-48h后，红细胞因能量消耗最终被破坏，即发生轻微溶血。
当加入葡萄糖、三磷酸腺苷(ATP)后，可获得不同程度的纠正。
该项试验是筛查和鉴别由于红细胞膜缺陷而产生溶血性贫血的较为灵敏的检查。
自身溶血试验及纠正试验正常值：
在生理盐水中：24h溶血率<0.005;48h溶血率<0.035；
加入10%葡萄糖：24h溶血率<0.004;48h溶血率<0.006；
加入ATP：24h可见肉眼溶血;48h不溶血。
自身溶血试验及纠正试验临床意义：
本试验主要用于溶血性贫血的病因诊断。
a)遗传性球形红细胞增多症明显增高，并可用葡萄糖和ATP纠正。
b)其他遗传性非球形红细胞溶血性贫血也可增高，并分别可被葡萄糖或ATP纠正。
c)丙酮酸激酶缺乏症、自身免疫性溶血性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿症、药物性溶血等增高，加葡萄糖不能纠正，加ATP能纠正。