枯草芽孢杆菌实验报告
芽孢杀菌实验报告
一、实验目的1. 掌握芽孢的基本特性及芽孢杀菌的原理。
2. 了解不同杀菌剂对芽孢的杀灭效果。
3. 培养实验操作技能，提高分析问题、解决问题的能力。
二、实验原理芽孢是细菌在不良环境下形成的一种特殊形态，具有很强的抵抗性。
芽孢的细胞壁厚、渗透压低，对高温、紫外线、化学药品等具有较强的抵抗力。
芽孢杀菌实验旨在通过观察不同杀菌剂对芽孢的杀灭效果，了解芽孢的抵抗力及杀菌原理。
三、实验材料1. 菌株：枯草芽孢杆菌2. 芽孢悬液：将枯草芽孢杆菌在肉汤培养基中培养，收集菌体，用无菌生理盐水洗涤，制成芽孢悬液。
3. 杀菌剂：70%乙醇、1%氯化钠溶液、1%氢氧化钠溶液、1%盐酸溶液、1%碘酊4. 实验器材：无菌试管、无菌吸管、酒精灯、显微镜、培养皿、恒温培养箱等四、实验方法1. 制备芽孢悬液：将枯草芽孢杆菌在肉汤培养基中培养，收集菌体，用无菌生理盐水洗涤，制成芽孢悬液，调整芽孢浓度为1×10^7 CFU/mL。
2. 分组处理：将芽孢悬液分别加入无菌试管中，每组10mL。
设置以下实验组：A组：70%乙醇处理组B组：1%氯化钠溶液处理组C组：1%氢氧化钠溶液处理组D组：1%盐酸溶液处理组E组：1%碘酊处理组F组：对照组（无菌生理盐水处理）3. 处理：将各实验组置于37℃恒温培养箱中处理30分钟。
4. 细菌计数：将处理后的芽孢悬液进行10倍稀释，取适量涂布于琼脂平板上，37℃恒温培养24小时，计算芽孢存活率。
5. 观察结果：通过显微镜观察芽孢的形态变化，分析不同杀菌剂对芽孢的杀灭效果。
五、实验结果与分析1. 芽孢存活率：各组芽孢存活率结果如下：A组：70%乙醇处理组，芽孢存活率=（对照组芽孢存活率-实验组芽孢存活率）/对照组芽孢存活率×100%≈0.0%B组：1%氯化钠溶液处理组，芽孢存活率≈15%C组：1%氢氧化钠溶液处理组，芽孢存活率≈10%D组：1%盐酸溶液处理组，芽孢存活率≈5%E组：1%碘酊处理组，芽孢存活率≈2%F组：对照组，芽孢存活率=100%2. 结果分析：（1）70%乙醇对芽孢具有较好的杀灭效果，芽孢存活率极低。
芽孢杆菌的抑菌实验报告
一、实验目的本研究旨在探究芽孢杆菌的抑菌性能，通过体外实验方法，评估其对特定细菌和真菌的抑菌效果，为芽孢杆菌在生物防治、食品保鲜等领域的应用提供科学依据。
二、实验材料1. 实验菌株：枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli）、白色念珠菌（Candida albicans）。
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、沙堡培养基。
3. 实验仪器：恒温培养箱、电子天平、移液器、牛津杯、无菌水、无菌滤纸等。
三、实验方法1. 菌悬液的制备：将实验菌株分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基和沙堡培养基中，37℃恒温培养24小时，然后用无菌水稀释至适宜浓度。
2. 抑菌实验：- 将牛肉膏蛋白胨培养基和沙堡培养基分别铺成平板。
- 在平板中央放置牛津杯，并加入适量实验菌株菌悬液。
- 将平板置于恒温培养箱中，37℃培养24小时。
- 观察并记录抑菌圈的大小。
四、实验结果1. 枯草芽孢杆菌对细菌的抑菌效果：- 对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果较好，抑菌圈直径分别为15mm和12mm。
- 对枯草芽孢杆菌自身菌株无抑菌作用。
2. 枯草芽孢杆菌对真菌的抑菌效果：- 对白色念珠菌的抑菌效果较好，抑菌圈直径为10mm。
- 对枯草芽孢杆菌自身菌株无抑菌作用。
五、讨论与分析1. 抑菌效果分析：- 本实验结果表明，枯草芽孢杆菌对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌具有一定的抑菌效果，说明其具有一定的生物防治潜力。
- 抑菌效果与菌株的种类和浓度有关，本实验中枯草芽孢杆菌的抑菌效果较好，可能与菌株本身的抑菌物质和代谢产物有关。
2. 实验局限性：- 本实验仅针对部分细菌和真菌进行了抑菌实验，未涉及更多菌株，实验结果可能存在局限性。
- 实验条件可能影响抑菌效果，如温度、pH值等。
六、结论本实验结果表明，枯草芽孢杆菌对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌具有一定的抑菌效果，为芽孢杆菌在生物防治、食品保鲜等领域的应用提供了理论依据。
产枯草芽孢杆菌实训报告
一、种子的制备
➢ 种子的制备
➢ 培养基
➢ 牛肉膏 0.5g 蛋白胨 1g 氯化钠 0.5g
蒸
馏水
➢ 将配置好的培养基放入250ml的三角瓶中装液 量为100ml，数量11个 。装液后进行高温灭菌。
➢ 一级种子的制备
➢ 选取长势良好的菌种，挑取菌落2~3环接种 导液体摇瓶中。
行升温，当温度达到120摄氏度、压强时，保持温度和 压力20min。 ➢ 灭菌后，关闭蒸汽进气阀，开大放气阀，当压强下降 到时开启通气阀。使罐内压力保持在左右。 ➢ 开启冷水阀门，对发酵罐进行降温。
五、接种
➢ 当罐温降到37摄氏度后，关闭冷水。用酒精将 接种口处仔细擦洗，并放上接种火圈。
➢ 减少进气，使罐压保持在，点燃接种火圈。 ➢ 拧下进料口螺盖，放入酒精中,以免染菌。 ➢ 按接种瓶的瓶口在火焰上灼烧一下，并在火焰
罐体经行升温，当温度达到120摄氏度、压强 时，保持温度和压力20min。 ➢ 灭菌后，关闭蒸汽进气阀，开大放气阀，进行 泄压。
四、实罐灭菌
➢ 泄压后，从进料口开始添加培养基，并开始搅拌（转 速130r/min）
➢ 进料完毕后开始调节PH值 ➢ 调好PH后，对罐体进行夹套预热85摄氏度以上。 ➢ 温度到达后，关闭夹套进气开关。通热蒸汽对罐体经
➢ 取上述溶液1ml，加入DNS试剂于沸水浴中加热2min进行显色，取出后 用水迅速冷却 ，加去9ml蒸馏水，摇匀，在540nm波长处测定吸光值。
➢ 2）空白液的处理： ➢ 发酵液离心处理：8000rpm，5min ➢ 1ml离心后的发酵液+5ml 1%淀粉溶液直接加热煮沸5min，取1ml，加入
实验六：枯草芽孢杆菌生长曲线测定
实验器材
(1)活材料：枯草芽孢杆菌(E.coli)。
③将其分装至三个锥形瓶内，在分装至小试管内，高压灭菌。
2.接种：取10支装有牛肉膏蛋白胨培养液的试管，贴上标签(注明菌名、培养处理、培养时间、组号)。按无菌操作法用吸管向每管准确加入0.2mL的枯草芽孢杆菌培养液，接种后，轻轻摇荡，使菌体混匀。
3.培养：将接种后的培养管置于摇床上，在37℃下振荡培养。其中9支培养管分别于培养的0、2、4、6、8、16、18、20和24h后取出，放冰箱中贮存，待测定。
《微生物学》实验报告
开课时间室：A区文科楼5102012年11月22日
学院
生物工程学院
年级、专业、班
10级生工01班
姓名
吕亚慧
成绩
课程
名称
微生物学实验
实验名称
枯草芽孢杆菌生长
曲线测定实验
指导
教师
李苹
教
师
评
语
教师签字：
年 月 日
实验目的：
1、了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代代；
2、学习液体培养基的配置以及接种方法；
实验结果及数据处理
管号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
OD值
0.102
0.
培养时间
0
2
4
6
8
16
紫外诱变实验报告结果
一、实验目的1. 通过紫外线诱变技术，提高微生物的产酶能力。
2. 筛选出具有较高酶活性的突变菌株。
二、实验原理紫外线诱变是一种物理诱变方法，通过紫外线照射微生物细胞，导致DNA分子发生突变，从而产生具有新的遗传特性的菌株。
本实验采用紫外线照射枯草芽孢杆菌，通过透明圈法初筛，筛选出具有较高淀粉酶活性的突变菌株。
三、实验材料1. 菌种：枯草芽孢杆菌2. 器材：紫外线灯、培养皿、涂布器、吸管、恒温摇床、培养箱、直尺、棉签、橡皮手套、洗耳球3. 培养基：可溶性淀粉培养基、牛肉膏培养基、0.5%碘液四、实验方法1. 紫外线照射：将枯草芽孢杆菌接种于牛肉膏培养基中，培养至对数生长期。
将培养好的菌液用无菌水稀释至一定浓度，取适量菌液均匀涂布于培养皿上，放入紫外灯照射箱中，照射距离为20-30cm，照射时间为1-3分钟。
照射过程中，严格控制死亡率在50%-80%。
2. 初筛：将照射后的菌落用无菌水洗涤，制成菌悬液。
取适量菌悬液涂布于可溶性淀粉培养基上，37℃培养24小时。
观察透明圈的大小，筛选出具有较大透明圈的突变菌株。
3. 酶活性测定：采用淀粉酶活力测定方法，测定筛选出的突变菌株的淀粉酶活性，并与原始菌株进行对比。
五、实验结果1. 紫外线照射后，部分菌株出现透明圈，且透明圈大小不一。
2. 经过初筛，筛选出10株具有较大透明圈的突变菌株。
3. 酶活性测定结果显示，筛选出的10株突变菌株的淀粉酶活性均高于原始菌株，其中菌株A的淀粉酶活性最高，达到原始菌株的1.8倍。
六、讨论与分析1. 紫外线照射能够有效诱导枯草芽孢杆菌产生淀粉酶活性突变菌株，且突变频率较高。
2. 初筛过程中，透明圈大小与淀粉酶活性具有一定的相关性，透明圈越大，酶活性越高。
3. 实验结果表明，通过紫外线诱变技术，可以有效地提高枯草芽孢杆菌的产酶能力，为微生物育种提供了一种新的方法。
七、结论1. 紫外线诱变技术是一种有效提高微生物产酶能力的方法。
2. 本实验筛选出的突变菌株具有较高淀粉酶活性，为后续的发酵生产和应用提供了有利条件。
枯草芽孢杆菌实验报告【内容充实】
0.1mol/L盐酸溶液：量取9.4mL浓盐酸，用水稀释定容至1000mL。
草酸铵结晶紫番红碘液95%酒精无菌水香柏油吸水纸擦镜纸
2.3培养基
2.3.1斜面培养基
牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g琼脂15~20g，自来水1000ml，pH 7.2~7.4
2.3.2鉴定培养基……………………………………………………………………2
2.3.3摇瓶培养基……………………………………………………………………2
3试验方法………………………………………………………………………2
3.1仪器的准备…………………………………………………………………………2
3.2培养基的配置………………………………………………………………………2
3.3初步筛选及鉴定……………………………………………………………………2
3.3.1采集土样………………………………………………………………………3
3.3.2富集培养………………………………………………………………………3
3.3.3稀释分离、纯化………………………………………………………………3
3.3.4初筛……………………………………………………………………………3
1.2实验原理
选择合适与待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求，或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。
将土壤稀释液倒在不同类型的培养基平板上，在适宜的环境中培养几天，细菌或是其他的微生物便能在平板上生长繁殖，形成菌落。将初次筛选得到的微生物接到淀粉培养基上培养，因为只有能够产生淀粉酶的细菌才能够利用培养基中的淀粉成分来完成自身的生命活动，才能够生存。故在淀粉部分不显现蓝色，出现透明圈，可以通过透明圈的大小来初步判断培养物中是否有产淀粉酶微生物及产淀粉酶的能力。
微生物实验报告
二、实验过程
细菌培养基：蛋白胨 10g
牛肉膏 3g 氯化钠 4g 蒸馏水 1000mL（若为固体培养基，加20g琼脂），pH7.4
斜面培养基：蛋白胨 10g
牛肉膏 3g 氯化钠 4g 琼脂 20g 蒸馏水 1000mL,pH7.4
二、实验过程
发酵培养基：
蛋白胨 甘油 氯化钠 0.1％硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)溶液 枸橼酸钠 20％硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶液 磷酸氢二钾 肉浸液
筛选结果
三、实验结果
菌种优化结果
三、实验结果
三、实验结果
酶活力测定结果
三个发酵培养菌液进行测酶活，对比后酶活最大的一个。
发酵培养基酶活力：
①结果数据记录：
稀释1000倍 D=1000
B-A=0.2ml
硫代硫酸钠滴定B液浓度0.01mol/L（经硫代硫酸钠直接滴
定碘准确测出的浓度）
碘滴定液浓度
0.01mol/L
人们在研究青霉素酶的过程中，除了发现它的有害一面外，也发现了一些有利的 方面。如:在β-内酰胺类抗生素药品的质量检验中，利用青霉素酶进行无菌检查是 一种非常有效、简便、快捷的方法，可定量检验出青霉素类药品中污染微生物的 程度。因此研究青霉素酶有了另一番意义。
青霉素作诱导剂使用，细胞上特殊接受体与青霉素结合成分 ( penici l l i n 2binding component , PBC) 相似，可用青霉素结合成分与诱导剂的 “亲和力” 不同来解释青霉素酶产率的高低。PBC与诱导剂相结合是青霉素酶合成过程中很 重要的影响因素之一。
1000、 2000、 5000、 10000、 20000单位进行重复优化，
增加枯草芽孢杆菌的产酶能力，并将10000万单位的菌种进行
实验题目枯草芽孢杆菌的分离
实验题目枯草芽孢杆菌的分离、纯化和鉴定一、实验目的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）广泛存在于土壤、植物根际体表等，其好氧、嗜温，极易分离与培养。
由于枯草芽孢杆菌生长快，具有广谱抗菌活性和很强的抗逆能力，并且对人畜无毒，不污染环境，因此已作为一种理想的生防菌广泛应用于多种植物病害的防治且备受关注。
本实验通过温度筛选法和选择性培养基筛选法分离枯草芽孢杆菌，并针对其生理生化特征进行纯化和鉴定及16S rDNA基因序列进行分析。
二、实验原理枯草芽孢杆菌，是芽孢杆菌属的一种。
单个细胞 0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。
无荚膜，周生鞭毛，能运动。
革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆倒柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。
菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。
需氧菌。
可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。
在遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。
广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖。
枯草芽孢杆菌的分离方法：（1）温度筛选法：枯草芽孢杆菌能产生芽孢，在孢子状态下稳定性好，能耐氧化；耐挤压；耐高温，能长期耐60°C高温，在120°C温度下能存活20分钟，利用枯草芽孢杆菌的这一特性，可利用高温水浴使不能产生芽孢的细菌失去活性，得到芽孢菌属，经过进一步的分离及生理生化鉴定得到枯草芽孢杆菌。
（2）选择性培养基筛选法：枯草芽孢杆菌培养基的组分是由葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、磷酸二氢钾、碳酸钙等5种原料构成,将5种原料作为枯草芽孢杆菌培养有影响的因素,通过试验数理统计的直观和理论分析,对其配方进行优化，当培养基的配方为无水葡萄糖3.50g/L、蛋白胨0.83g/L、酵母膏0.50g/L、磷酸二氢钾0.35g/L和碳酸钙0.25g/L,温度(34±2)℃时,培养16h即可达到生长峰值。
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草酸铵结晶紫 番红 碘液95%酒精无菌水 香柏油吸水纸 擦镜纸
2.3 培养基
2.3.1斜面培养基
牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g琼脂 15~20g，自来水1000ml，pH 7.2~7.4
2.3.2鉴定培养基
可溶性淀粉20g,硝酸钾1g，磷酸氢二钾0.5g,氯化钠0.5g, 硫酸镁0.5g，硫酸亚铁0.01g，琼脂20 g,自来水1000ml，校正pH至7.2～7.4,
3.3初步筛选及鉴定
3.3.1采集土样
用无菌铲铲去表层5-10厘米，用无菌器具规采取50-100克，装入无菌纸袋中并记录采集的时间、地点及植被情况等等。
3.3.2富集培养
将采集的土样称取5克，放入装有45毫升无菌水的三角瓶中，放入恒温振荡培养箱中于37度下培养10-20分钟。
3.3.3稀释分离、纯化
表4-424h碘液检验
1号
2号
3号
4号
颜色
深蓝色
深蓝色
3.3.4初筛
透明圈实验
将疑枯草芽孢杆菌用平板划线法接种于鉴定培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24-48h后，用胶头滴管将碘液直接滴于菌落周围，观察现象。阳性反应（淀粉被分解）菌落周围出现透明圈，呈紫色；阴性反应则无透明环，呈深蓝色。（透明圈的大小可初步判断该菌水解能力的强弱，即产生胞外淀粉酶活力的高低）。
3.5.2酶液稀释………………………………………………………………………4
3.5.3酶液测定………………………………………………………………………4
4结果分析……………………………………………………………………5
4.1平板涂布分离………………………………………………………………………5
4.2平板划线分离………………………………………………………………………5
4.3初筛…………………………………………………………………………………5
4.4复筛…………………………………………………………………………………5
4.5摇瓶培养……………………………………………………………………………6
4.6酶活力测定…………………………………………………………………………6
5参考资料………………………………………………………………………7
以0.50mL 0.1mol/LHCl溶液5.00mL碘液使用液和1.00mL磷酸缓冲溶液的混合溶液做空白，于660nm波长下，用1cm比色皿迅速测定其吸光度，根据吸光度查附录“吸光度与测试α-淀粉酶酶浓度对照表”，求得测试溶液的浓度C 。
4.结果分析
4.1平板涂布分离
经48h培养后，结果见表4-1
用一支新的无菌移液管，由低浓度开始（10-3,10-4,10-5），从各试管土壤稀释液中各吸取1ml，对号注入生长培养基平板上，用灼烧冷却后的无菌玻璃棒涂匀，每个浓度做三个平板（重复），倒置于37℃温箱中培养24到48小时。
培养后，挑选10-5梯度上的单菌落进行平板划线分离，共划四个平板，并进行编号1、2、3号，于37℃倒置培养24h。
表4-3透明圈大小
1号
2号
3号
4号
透明圈大小／㎝
1.9
2.2
2.6
2.0
经分析，菌落周伟产生透明圈，可判断该菌可以产生淀粉酶，由于菌体本身利用淀粉的能力不同，而导致透明圈直径各异。
4.4复筛
在显微镜下观察，发现菌体成杆状且呈现蓝紫色，初步判断其为杆菌且为阳性菌。
4.5摇瓶培养
培养52h后，用碘液检验，结果见表4-4
②培养皿若干个并洗净晾干，每5个一包，高压灭菌。
③移液管洗净塞上脱脂棉，用报纸条包好、捆扎高压灭菌。
④准备一个三角瓶装入自来水300-400毫升，上棉塞并用纸包好高压灭菌。
3.2培养基的配置
按各培养基配方配置培养基，并将生长培养基分装6支试管，上棉塞，放入大烧杯中待灭菌。其余的培养基分装入三角瓶，上棉塞，包扎灭菌。
2.3.3摇瓶培养基
玉米粉2g，黄豆饼粉1.5g，氯化钙0.02g，硫酸镁0.02g，氯化钠0.25g，磷酸氢二钾0.2g，磷酸氢二钠0.2g，柠檬酸钠0.2g，硫酸铵0.075g,(溶解后加)，校正pH值7.0
3.实验方法
3.1仪器的准备
①准备试管若干支，洗净晾干，其中7支各装9毫升蒸馏水（或自来水），上塞，10支一捆121度高压灭菌20-30分钟。
6附录……………………………………………………………………………8
枯草芽孢杆菌的分离、纯化、筛选及鉴定
1.实验目的及原理
1.1实验目的
（1）学习从土壤中分离、纯化枯草芽孢杆菌的原理和方法。（2）习掌握枯草芽孢杆菌的鉴定方法。
（3）掌握微生物的摇瓶培养方法及淀粉酶活力的测定的原理和方法。
（4）培养学生综合应用微生物实验方法的能力。
吸取20.00mL 20g/L可溶性淀粉溶液和5.00mLpH6.0磷酸缓冲溶液于大试管中，在60℃恒温水浴中预热平衡5min。
加入待测酶液1.00mL，立即摇匀并用秒表计时，准确反应5min。
立即用结晶干燥的吸管吸取上述反应液1.00mL至预先盛有0.50mL 0.1mol/L HCl溶液和5.00mL碘液使用液的10mL具塞比色管中，摇匀。
3.5酶活力的测定
3.5.1摇瓶培养
选产生透明圈最大的菌株进行摇瓶培养，将菌溶于5毫升无菌生理盐水中吸取此液体加入液体培养液中，30度摇瓶培养72小时。
3.5.2酶液稀释
取发酵液进行4000r/min 离心5分钟，取上清夜，用磷酸缓冲液稀释酶活力为65—70U/ml，便于准确测定。
3.5.3酶液测定
微生物技术综合实验
年 级：13级生物工程（专升本）
班 级：2013011201
学 号：1301014026
姓 名：徐 红 贞
指导老师：凤霞 教授
日期：二零一三十月五号
1实验目的及原理………………………………………………………………1
1.1实验目的……………………………………………………………………………1
20g/L可溶性淀粉溶液：称取2.00g可溶性淀粉于250mL烧杯中，用少量水调成糊状，在搅拌下加入约80mL沸水，继续加热煮沸至透明（20min），冷却后用水定容至100mL（此溶液需当天配制，存放冰箱备用）
pH6.0磷酸缓冲溶液：称取磷酸氢二钠45.23g，柠檬酸8.07g，用水溶解定容至1000mL，配好后用酸度计校正其pH至6.0
3.4复筛及鉴定
革兰氏染色：
（1）涂片：左手持培养皿，右手持接种环，用接种环从培养皿中取一环菌，于载玻片中央涂成薄层（事先在背面做好标记圆圈）即可，或先滴一滴无菌水于载玻片中央，用接种环从斜面上挑出少许，与载玻片上的水滴混合均匀，涂成一薄层。
（2）干燥：涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥，但勿靠近火焰。
2.2 实验试剂
碘液储备液：称取22.0g碘化钾溶于约300mL水中，加入11.0g碘，搅拌溶液，移入500mL容量瓶，用水定容，贮于棕色瓶中备用（每月配制一次）。
碘液使用液：称取20.0g碘化钾，溶于约300mL水中，移入500mL容量瓶中，准确加入2.00mL碘液储备液，用水定容，贮于棕色瓶中备用（每天配制一次）。
（5）培养学生自行设计实验流程、综合分析问题解决问题和判断实验结果的能力。
1.2实验原理
选择合适与待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求，或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。
将土壤稀释液倒在不同类型的培养基平板上，在适宜的环境中培养几天，细菌或是其他的微生物便能在平板上生长繁殖，形成菌落。将初次筛选得到的微生物接到淀粉培养基上培养，因为只有能够产生淀粉酶的细菌才能够利用培养基中的淀粉成分来完成自身的生命活动，才能够生存。故在淀粉部分不显现蓝色，出现透明圈，可以通过透明圈的大小来初步判断培养物中是否有产淀粉酶微生物及产淀粉酶的能力。
取装有9毫升无菌水试管5支，用记号笔编上10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7取已稀释成10-1土壤液，振荡后静置30秒，用无菌的移液管吸取1毫升土壤悬液加入10-2的无菌水试管中，并在试管轻轻反复吸数次，使之充分混匀，即成10-2土壤稀释液。同法从10-2的试管中吸取1毫升稀释液加入编号为10-3的无菌水试管中，混匀后即为10-3土壤稀释液，依次连续稀释为10-4、10-5、10-6、10-7土壤稀释液。并做9个平板，每个稀释度做3个。
表4-1平板涂布菌落状况
1
2
3
菌落形态
10-3
10-4
10-5
菌体成片生长，有3个单菌落
平板四周有菌生长
有杂菌生长充满平板
菌体成片生长，有1个单菌落
菌体充满整个平板，无单菌落
有杂菌生长，并有单菌落
菌落充满整个平板，有5个单菌
落
有2个单菌落
有1个单菌落
有褶皱，表面光滑，湿润呈圆形乳白色
经分析，由于操作不熟练导致10-4、10-5梯度有少量菌体生长，10-6梯度中菌体少且培养时为倒置培养从而导致无菌落生长。
3.2培养基的配置………………………………………………………………………2
3.3初步筛选及鉴定……………………………………………………………………2
3.3.1采集土样………………………………………………………………………3
3.3.2富集培养………………………………………………………………………3
3.3.3稀释分离、纯化………………………………………………………………3
4.2平板划线分离
挑选10-5梯度的菌落进行平板划线分离，经48h培养后，每平板最大菌落结果见表4-2
表4-2平板划线菌落状况