猪乙型脑炎病毒灭活疫苗佐剂筛选及免疫效果评估
猪乙型脑炎痘苗和检测技术研究进展论文
猪乙型脑炎痘苗和检测技术研究进展论文猪乙型脑炎痘苗和检测技术研究进展论文猪乙型脑炎又称日本乙型脑炎，由黄病毒科黄病毒属乙型脑炎病毒引起，是一种急性中枢神经系统人兽共患传染病，国际兽医局将该病列为B类传染病。
该病不仅危害集约化养猪业，造成巨大的经济损失，也影响人类健康，严重威胁公共卫生安全。
目前尚无有效的治疗方法，强化检测技术和疫苗质量的提高是控制该病的有效手段，现将猪乙型脑炎疫苗和检测技术的研究进展情况进行综述。
1 疫苗研究进展1.1 常规疫苗目前，在畜牧业生产中用于预防猪乙型脑炎的常规疫苗有灭活苗和减毒活疫苗，其中灭活苗由北农科院畜牧兽医研究所采用猪乙型脑炎强毒株WH-1株研制成功，并于1996年获准投入市场，该疫苗接种各类猪群后无应激反应、胎内感染及病毒血症，安全性好，保护率高，但是存在免疫保护期短、免疫剂量大等不足之处。
减毒活疫苗也由湖北农业院畜牧兽医研究所研发，其使用SA14-14-2毒株，经接种地鼠肾原代细胞增殖，将病毒液冻干制成。
研究表明，病毒活疫苗安全性高、免疫原性好，特别是对后备母猪及初产母猪可产生高效的细胞免疫和体液免疫。
缺点在于可能出现毒力返强，存在潜在的致病危险，同时地鼠肾原代细胞未通过WHO认证，这严重影响了疫苗的应用范围。
1.2 基因工程疫苗随着分子生物学、分子免疫学、基因工程学等生物技术的发展，科研人员对猪乙型脑炎基因工程疫苗进行了大量的研究，取得一系列成果。
近年来，科研人员采用反向遗传学基因工程技术构建嵌合病毒作为防治猪乙型脑炎的新型疫苗，即：重组嵌合病毒疫苗。
如将猪乙型脑炎病毒的E基因替换猪瘟病毒的.E基因，构建猪乙型脑炎-猪瘟嵌合病毒，免疫小鼠及猪后，均产生了乙型脑炎病毒特异性抗体。
将猪乙型脑炎病毒的prM和E基因代替黄热病毒的同种基因，构建乙型脑炎-黄热嵌合病毒，实验证明，具有较高的安全性和特异性抗体水平，免疫抗体转阳率达99.1%，并且已在澳大利亚注册成功。
猪场细小病毒病和乙型脑炎的防控及产品应用
３ ～４ 天 ，患病幼 畜呈现稽 留热 ，精神沉郁 ，最后
身躯麻痹而死 ；育肥猪持续 高热 ；妊娠母猪主要 表现 为流产 ，产出大小不 等的死胎 ，畸形胎 ，木 乃伊胎及弱仔 ，流产后一般不影 响下次配种 。公
猪单 侧 或两 侧 性睾 丸肿 大 ， 炎症 ，逐 渐萎 缩 变
硬。 由于 Ｊ Ｅ Ｖ通 常在蚊一渚一 蚊等 动物间 循环 ， 猪被认为是Ｊ Ｅ Ｖ最重要 的自然增殖动物 。
皮 炎 、肠 炎 、 呼 吸道 等 症 状 和 疾 病
病 毒血 症 ，持续 时 间可长达４ 天 ，为蚊 虫吸血传
４ ． １ ３每 胎母 猪都 要 免疫 细小疫 苗
细小病毒不但 会单独，在Ｊ Ｅ Ｖ的猪一 蚊一 人 （ 猪 ）循
环 传播 中发挥重要 的作 用 ，因此 ，种猪群的有 效 免疫具 有特别重要 的意 义。
－ Ｉ Ｉ Ｌ Ｅ涵 雨 Ｉ Ｉ
本栏 目 由上 海 海利 生物 技 术 股 份 有 限 公 司协 办
炎型强毒 株 。１ ９ ８ ５ 年 ，Ｋｒ ｅ ｓ ｓ ｅ 等再一 次对其致 病
性进 行了系统地研究 ，证 明 Ｐ Ｐ Ｖ 可 以导致 皮陕
炎症 。之后 的 多位学者 在严 重皮肤 炎症的猪体病
性猪 流 行性 腹 泻 （ Ｐ ＥＤ）， 并延 长了其 流行 时
间 ，认 为 感染细 小病毒 的 仔 措会 发生 免 疫抑 制
２ ． ２ ． ２乙型脑炎传播媒介分析
乙型 脑 炎 发病具 有 明 显的季 节 性 ， 多发生
在吸血 昆虫大量孳生 的夏秋季节 。目前， 已知３ ０
而 对Ｐ ＥＤＶ高 良 敏 感 。同 时 ，他 提 到 在 韩 国的
２ ． ２ 乙型脑炎的疾病介绍
猪乙型脑炎减毒活疫苗的安全性和免疫原性试验
剂 灭 活 疫 苗 ”外 ，有 关 乙脑 活 疫 苗 的研 究 报 道 甚 少 ， 为 了 丰 富 疫 苗 的种 类 ，满 足 防 疫 的需 要 ，我 们 联 合
研 制 出猪 乙型 脑 炎 减 毒 活 疫 苗 ，并 在 安 全 性 、免 疫
原血凝素 由云南流行病研究所提供 。Ｊ Ｖ阳性血 清 ， Ｅ
由 中 国药 品生 物 制 品检 定所 提 供 。 １５２ 血 清 中和 试 验 采 用 固 定 病 毒 稀 释 血 清 的方 ．．
法检测 。
原 性 等 方 面取 得 了满 意 的结 果 。
１ 材 料 与 方 法
１１ 种 毒 ．
猪 用 Ｊ ＶＳ ４ １ — Ｖ Ｅ ＡＩ— ４ ２ Ｓ减 毒 株 ，供 制 造
１ Ｔ Ｉ ｓ为合 格 。 此 方 法 共试 生 产 了 ＿ 批 ， 号 ０。 Ｃ Ｄ ｏ 按 － 批 分 别 为 ９ ０ ，９ ０ ７ １ ７ ２和 ９ ０ 。疫 苗 用 磷 酸 缓 冲溶 液 按 ７３ 原 苗量 作 １ ： 释 溶 解 后 使 用 ， 毒含 量 ≥ １ ６￣ ６ ５稀 病 ０＂ １ 。 ０ ０
ＴＣＩ ｏ ｍＬ Ｄｓ／
１ 活苗 对 小 白 鼠 的安 全 性试 验 ． ６
将 三 批 减 毒活 疫
苗分别接种 体重 １ ２～１ 小 鼠各 １ ４ｇ ０只， 只脑 内注 每
射 ００ 。接 种 后 ３ｄ内死 亡者 不 计 ， 日观 察 １ ， ．３ｍＬ 逐 ４ｄ
３ｄ 如 有 小 鼠发 病 、 死 ，取脑 测 定 致病 力 ，对小 鼠 后 致 脑 内毒力 应 不超 过 １３ Ｄ ｄ００ 。同时用 体 重 １ ０ ｓ ．３ｍＬ Ｌ ０～
状 ，常 给 养 猪 业 造 成 巨 大 的 经 济 损 失 。 免 疫 注 射 是 防 治该 病 唯 一 可 靠 的 方 法 。 目前 ，除 湖 北 省 农 科 院 畜 牧 兽 医研 究 所 在 １ ９ ９ ６年 研 制 出 猪 “ 乙型 脑 炎 油 乳
仔猪日本乙型脑炎的诊断和防治
进一步深入研究仔猪日本乙型 脑炎的发病机制，有助于更好 地理解该病的传播途径和致病 机理，为防控提供理论支持。
针对不同地区和不同品种的仔 猪，研发更为安全、高效、方 便的疫苗，以提高疫苗接种覆 盖率和保护率。
加强与国际学术界和产业界的 合作与交流，共同研究解决仔 猪日本乙型脑炎的防控问题， 分享经验和最佳实践。
病理学诊断
病理学诊断是一种直观的方法，通过观察仔猪的病理变化，如脑炎症状和神经细胞变性等，可以诊断出仔猪是否患有日本乙型脑炎。
防治措施的有效性
01 02
疫苗接种
接种疫苗是预防仔猪日本乙型脑炎的有效方法。目前，市场上已经有针 对该病的疫苗，如灭活疫苗和减毒活疫苗。接种疫苗可以显著降低仔猪 感染该病的风险。
THANKS
感谢观看
仔猪日本乙型脑炎的诊 断和 • 防治措施 • 案例分析 • 结论
01
概述
病原学
病原
01
日本乙型脑炎病毒（JEV）
传播方式
02
蚊虫叮咬、直接接触感染猪、血液传播等
病毒特性
03
对温度敏感，不耐干燥和高温，对紫外线、乙醚、氯仿等敏感
流行病学
易感动物
猪、人、鸟类等
04
案例分析
案例一：诊断过程及治疗结果
诊断过程
发病仔猪出现高热、食欲不振、精神萎靡等症状，结合流行病学和病理学检查，确诊为日本乙型脑炎 。
治疗结果
经过及时治疗，部分仔猪康复，但仍有部分仔猪死亡或留下后遗症。
案例二：预防措施及效果
预防措施
对妊娠母猪进行免疫接种，提高母猪的免疫 力；对仔猪进行隔离饲养，避免与患病猪接 触；对猪舍进行定期消毒，消灭病原体。
防暑降温
在高温高湿季节，保持猪舍通风良好，同时提供足够的清洁饮用水 ，以防止高温高湿环境对仔猪造成的不适。
猪乙型脑炎疫苗免疫试验
猪乙型脑炎疫苗免疫试验段正赢;周丹娜;杨克礼;郭锐;刘威;刘泽文;袁芳艳;田永祥【期刊名称】《养猪》【年(卷),期】2017(000)003【总页数】2页(P95-96)【作者】段正赢;周丹娜;杨克礼;郭锐;刘威;刘泽文;袁芳艳;田永祥【作者单位】湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉 430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉 430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉 430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉 430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉 430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉 430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉 430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉 430064【正文语种】中文【中图分类】S858.285.3乙型脑炎（Japanese encephalitis,JE）又称日本乙型脑炎、流行性乙型脑炎，俗称乙脑，是由流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）引起的一种人畜共患传染病[1]，也是导致猪繁殖障碍的主要疾病之一。
不同剂量的猪瘟活疫苗单次免疫效果评价及疫苗存留试验
不同剂量的猪瘟活疫苗单次免疫效果评价及疫苗存留试验熊丁杰;汤波;范学政;徐璐;王琴;徐志文;郭万柱;周远成;刘俊;陈蕾【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2011(47)8【摘要】用1 200 RID、6 000 RID和24 000 RID 3种不同剂量的猪瘟活疫苗单次免疫9头30日龄的断奶仔猪,检测试验猪的抗体消长和疫苗毒核酸在猪体内的存留时间,并用6头猪进行攻毒保护试验.结果表明:不同免疫剂量的试验猪其抗体水平的动态变化没有显著差异,免疫后21 d试验猪的猪瘟抗体均成阳性,63 d后至578 d猪瘟抗体阻断率仍然高于85％,应用荧光定量RT-PCR技术检测,猪瘟疫苗毒核酸在猪血液和扁桃体中的检出时间分别达28 d和42 d;免疫后370 d进行猪瘟强毒攻击后,免疫猪没有出现明显的临床症状,存活且不带毒.本研究证实,没有其他疫病和母源抗体的仔猪单次接种合理剂量的猪瘟活疫苗就能产生坚强的保护力,提出加强种猪场各种病原监测,淘汰病原阳性种猪,净化种猪群对提高猪瘟疫苗免疫效果,最终控制猪瘟具有重要意义.【总页数】4页(P3-6)【作者】熊丁杰;汤波;范学政;徐璐;王琴;徐志文;郭万柱;周远成;刘俊;陈蕾【作者单位】中国兽医药品监察所猪瘟参考实验室,北京海淀100081;四川农业大学动物生物技术中心,四川雅安625014;中国兽医药品监察所猪瘟参考实验室,北京海淀100081;中国兽医药品监察所猪瘟参考实验室,北京海淀100081;中国兽医药品监察所猪瘟参考实验室,北京海淀100081;中国兽医药品监察所猪瘟参考实验室,北京海淀100081;四川农业大学动物生物技术中心,四川雅安625014;四川农业大学动物生物技术中心,四川雅安625014;中国兽医药品监察所猪瘟参考实验室,北京海淀100081;中国兽医药品监察所猪瘟参考实验室,北京海淀100081;中国兽医药品监察所猪瘟参考实验室,北京海淀100081【正文语种】中文【中图分类】S852.65+1【相关文献】1.四种不同剂量猪瘟活疫苗（传代细胞源）的田间免疫效果对比试验 [J], 陈明凯;姚文凤;苏伟桐;杨傲冰;吴文福;丁度锐2.猪瘟活疫苗与口蹄疫灭活疫苗同期与分期免疫效果对比试验 [J], 王克才;何利昆;谷志大;段亚良;杨国丽;郑洪玲;肖爱波3.猪瘟活疫苗、猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗最佳免疫程序确定试验 [J], 魏军;程万辉;孙容非;王建明;李红艳4.猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体二联灭活疫苗与猪瘟活疫苗混合免疫效果评价[J], 朱巧艳;廖永洪;田克恭;张国良;翟路峰;金云云;贺笋;宋国亮;李俊辉;焦金波;王尊宝5.二次免疫在猪瘟活疫苗免疫效果中的应用 [J], 王洋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
猪乙型脑炎灭活疫苗安全性与免疫效力的研究
猪乙型脑炎灭活疫苗安全性与免疫效力的研究赖月辉，牛晓芸，牛贝贝，朱炜斌，李嘉爱，黄秋雪，齐冬梅*（广东永顺生物制药股份有限公司，广东广州511356）摘要：本研究对猪乙型脑炎灭活疫苗（GD株）的安全性和免疫效力进行了评估。
用体重为8～10g SPF鼠进行5批疫苗的安全性比较，结果：5批猪乙型脑炎灭活疫苗（GD株）的安检鼠精神、食欲正常，没有出现不良反应，表明猪乙型脑炎灭活疫苗对SPF鼠是安全的。
用30日龄的健康易感仔猪进行疫苗的安全性比较，结果：5批猪乙型脑炎灭活疫苗（GD株）的安检猪体温、精神、食欲正常，没有出现不良反应，安检猪的平均增重与对照猪的平均增重无显著差异，猪的安全性试验结果表明猪乙型脑炎灭活疫苗对猪安全。
用体重为8～10g SPF鼠对猪乙型脑炎灭活疫苗进行免疫保护性试验，SPF鼠注射疫苗后21日，进行猪乙型脑炎病毒（GD株）（病毒含量为106.0TCID50/mL）强毒攻击，结果：攻毒后，5批猪乙型脑炎灭活疫苗（GD株）免疫小鼠的精神、食欲正常，全部健活，免疫组保护率10/10，对照组小鼠全部发病、死亡率10/10。
小鼠的免疫攻毒试验结果表明猪乙型脑炎灭活疫苗（GD株）可以刺激机体产生良好的免疫应答，对小鼠的保护率高。
关键词：猪乙型脑炎灭活疫苗；安全性；免疫效力中图分类号：S852.5+2文献标识码：A文章编码：1005⁃8567（2018）04⁃0043⁃04Study on the safety and immune efficacy of inactivtatedSwine Japanese Encephalitis Vaccine（strain GD）LAI Yuehui，NIU Xiaoyun，NIU Beibei，ZHU Weibin，LI Jiaai，HUANG Qiuxue，QI Dongmei*Guangdong Winsun bio⁃pharmaceutical co.，ltd Guangzhou511356Abstract：In this study，we evaluated the safety and immune efficacy of Swine Japanese Encephalitis vaccine （strain GD），inactivtated.Five batches of vaccine were used to estimate the vaccine on specific-pathogen-free（SPF）mouse and healthy piglet.SPF mouse inoculated with five batches of vaccine were orthophrenia，eusitia and with no adverse effect，respectively.Healthy piglets of30-day-old inoculated with5bathces of the vaccine were normothermia，orthophrenia，eusitia and with no adverse effect，respectively.No significant different of average weight gain was found between vaccinated piglets and unvaccinated piglets.Results indicate that this vaccine was safe to SPF mouse and healthy piglet.In the immune efficacy test，SPF mouse were challenged with virulent JEV21days after inoculation，mouse inoculated with five batches of vaccine were100%survived，while the mortality of unvaccinated mouse was as high as100%.The results of the mouse's immune challenge test showed that inactivtated Swine Japanese Encephalitis vaccine（strain GD）could stimulate the body to produce a good immune response，which had a high protective rate for the mice.Keywords：inactivtated swine Japanese Encephalitis Vaccine；safety；immune efficacy广东畜牧兽医科技2018年（第43卷）第4期试验研究收稿日期：2018⁃06⁃20作者简介：赖月辉（1972⁃），女，广东广州人，兽医师，主要从事兽用生物制品的生产与研究工作。
猪乙型脑炎病毒在Vero细胞上的繁殖特性及其灭活疫苗的免疫原性研究
猪乙型脑炎病毒在Vero细胞上的繁殖特性及其灭活疫苗的免疫原性研究韩伟;周建民;郝霖雨;潘文;潘京学【摘要】试验旨在对猪乙型脑炎病毒(JEV,SA14-14-2株)在传代细胞上的繁殖培养特性及其制备的灭活疫苗免疫原性进行研究,确定猪JEV在细胞培养瓶中培养的关键技术参数及其灭活疫苗的免疫原性.以Vero细胞培养病毒,通过接种时间、接毒量、吸附时间、吸附温度、维持液pH、维持培养温度及培养时间7个条件的优化,将繁殖的病毒液冻融一次,采用病毒蚀斑数测定方法测定病毒滴度.按照优化好的条件繁殖一批毒液,经β-丙内酯灭活,与双相佐剂混合,制备成猪乙型脑炎灭活疫苗.两次免疫(间隔14 d)接种乙型脑炎抗体阴性仔猪,首次免疫前(0 d)、免疫后第7、14、21、28、35、42天采集血清,检测血清中和抗体.二免后第28天进行乙型脑炎P3强毒的攻击,攻毒前(0 d)、攻毒后第1、2、3、5、7、9天采集血浆,攻毒后第14天剖杀免疫猪,采集脑组织,检测血浆和脑组织中JEV.结果显示,用细胞培养瓶进行培养,将Vero细胞培养至48 h进行病毒接种,接种量为1 000 PFU/mL,病毒吸附温度为37℃,吸附时间为90 min,吸附后用pH 7.6～8.8维持液继续培养,培养温度为35℃,培养96 h后收获毒液,冻融一次,可获得较高滴度的病毒.仔猪免疫制备的灭活疫苗后血清抗体水平迅速升高,血浆和脑组织中均未检测出JEV,免疫组试验猪能抵抗强毒攻击,可获得有效免疫保护.本试验结果为猪乙型脑炎疫苗的生产提供了参考依据.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2018(045)012【总页数】7页(P3572-3578)【关键词】乙型脑炎病毒(JEV);Vero细胞;繁殖特性;病毒滴度;灭活疫苗;免疫原性【作者】韩伟;周建民;郝霖雨;潘文;潘京学【作者单位】中牧实业股份有限公司,北京100070;农业农村部兽用生物制品与化学药品重点实验室,北京100095;中牧实业股份有限公司,北京100070;农业农村部兽用生物制品与化学药品重点实验室,北京100095;中牧实业股份有限公司,北京100070;农业农村部兽用生物制品与化学药品重点实验室,北京100095;中牧实业股份有限公司,北京100070;农业农村部兽用生物制品与化学药品重点实验室,北京100095;中牧实业股份有限公司,北京100070;农业农村部兽用生物制品与化学药品重点实验室,北京100095【正文语种】中文【中图分类】S852.65猪乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)是由乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)引起的一种经蚊虫传播的人畜共患病，是严重威胁人畜健康的一种中枢神经系统的急性传染病[1]。
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猪乙型脑炎病毒灭活疫苗佐剂筛选及免疫效果评估流行性乙型脑炎在日本首次发现,又称日本乙型脑炎,由日本乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)引起的侵害人中枢神经系统,母猪流产和公猪睾丸炎的人兽共患传染病。
在缺少抗病毒药物治疗感染JEV的情况下,免疫接种是预防猪乙脑最有效的方法。
为了筛选出能增强猪乙型脑炎灭活疫苗免疫原性的佐剂,本研究将603纳米佐剂、Gel 01、ISA206、IMS 1313佐剂和灭活的猪源基因Ⅰ型SCYA201201株细胞培养物混合制备成4种不同佐剂灭活疫苗,进行小鼠中抗体消长规律、攻毒保护以及免疫小鼠后的免疫应答试验,为新型佐剂JEV灭活疫苗的研制提供科学依据。
1.不同佐剂JEV灭活疫苗的制备将猪乙型脑炎病毒SCYA201201株在BHK-21上连续传代,用0.2%甲醛灭活24h。
按使用说明分别将603纳米佐剂、Gel 01、ISA206和IMS 1313佐剂加到灭活的病毒液中,制备成猪乙型脑炎灭活疫苗。
通过安全性试验、物理性状和无菌检验制备出了质量合格的4种不同佐剂细胞灭活苗:ISA206油乳剂灭活疫苗、IMS1313水佐剂灭活疫苗、Gel 01水佐剂灭活疫苗、603油乳剂灭活疫苗。
2.不同佐剂JEV灭活疫苗产生的抗体消长规律将上述制备的4种JEV灭活疫苗分别采用腹腔注射的方式免疫3周龄小鼠,并在一周后加强免疫一次,同时设置商品化疫苗(HW1株)和PBS作为对照组。
在免疫前和免疫后2、4、6、8、10周应用ELISA方法检测灭活疫苗的IgG抗体水平。
结果显示:4种不同佐剂灭活疫苗免疫小鼠1周后,除对照组外,其余4种不同佐剂灭活疫苗组和商品化灭活疫苗组的小鼠都产生抗体。
加强免疫后4种灭活疫苗组小鼠抗体水平进一步提高,免疫后6周各组小鼠抗体水平达到最高值,与
免疫商品化灭活苗小鼠表现出差异显著(P<0.05),免疫8周后各组小鼠抗体水平变化不大,逐渐趋于稳定。
并于免疫后10周抗体水平有下降趋势。
其中Gel 01佐剂疫苗组抗体水平是4种灭活疫苗中最高,603纳米佐剂灭活疫苗组抗体水平在4种灭活疫苗中最低。
3.不同佐剂JEV灭活疫苗诱导的免疫应答将制备的4种灭活疫苗分别免疫小鼠,运用MTS法检测小鼠脾淋巴细胞的增殖情况,用试剂盒检测上清中IL-2、IL-4和INF-γ细胞因子的水平和血清中IgG1和IgG2A的含量。
结果显示:4种灭活疫苗免疫组的淋巴细胞增殖均高于PBS对照组,4种灭活疫苗均能使IL-2、IL-4、INF-γ、IgG1和IgG2A的含量上升,诱导小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答。
其中JEV Gel 01佐剂疫苗组中IL-2、IL-4和IFN-γ的含量较高,与PBS对照组差异显著(P<0.05);Gel 01和1313佐剂疫苗组中,IgG2A的含量显著高于IgG1的含量(P<0.05);JEV Gel 01佐剂疫苗组在刺激小鼠体液免疫和细胞免疫应答效果最好。
4.不同佐剂JEV灭活疫苗小鼠免疫攻毒保护试验4种灭活疫苗采用腹腔注射方式分别免疫3周龄小鼠,并于1周后加强免疫一次,二免后1周选用半数致死量相对稳定的猪乙型脑炎SC201301株(Ⅲ型)腹腔攻毒,每只0.6ml。
结果显示:ISA206佐剂灭活疫苗、IMS1313佐剂灭活疫苗、Gel 01佐剂灭活疫苗、603纳米佐剂灭活疫苗对小鼠的保护率分别为80%、70%、90%、60%,其中Ge101佐剂灭活疫苗的保护效果最好。
再将Gel 01佐剂灭活疫苗免疫小鼠,选用基因Ⅰ型乙脑病毒(YA1)进行攻毒保护试验,结果显示:Gel 01佐剂灭活疫苗组对基因Ⅱ型保护率分别100%,Gel 01佐剂灭活疫苗能抵抗基因型乙脑病毒的侵袭。
5.最佳佐剂JEV灭活疫苗对猪的安全性及免疫抗体的影响选取佐剂与抗原的最佳组合,Gel 01佐剂灭活疫苗免疫猪,观察灭活疫苗的安全性和对猪的免疫
效果。
结果显示:Gel 01佐剂灭活疫苗对猪安全、无副作用,而且免疫后二周,Gel 01佐剂灭活疫苗组与商品疫苗组相比抗体水平显著上升(P<0.05),加强免疫后两周抗体水平出现上升,显著高于HW1株商品化灭活苗组(P<0.05),说明Gel 01佐剂灭活疫苗能刺激猪产生乙脑抗体。