实验一动物细胞组织制片及观察

实验一动物的细胞、组织制片及观察

一、目的：进一步掌握动物细胞的基本结构，掌握动物细胞、组织制片方法，了解红、白细胞形态、功能，掌握ABO血型的测定原理及方法，了解动物的四类基本组织的结构和功能。

二、内容：人口腔黏膜上皮细胞制作及观察，动物肌肉组织制片及观察，人血涂片制作及观察，人血型鉴定，动物四大组织永久装片观察。

三、实验器材、药品：显微镜,放大镜,载玻片,盖玻片,解剖刀,解剖剪，解剖针，解剖盘,牙签,滴管,吸水纸，生理盐水，亚甲基蓝溶液，瑞氏染液，采血针、小离心管、洁净载片、双凹玻片、消毒棉签、标准血清A和B、生理盐水、75%酒精、消毒棉球。

四、实验操作及观察

（一）人口腔黏膜上皮细胞的制作及观察

用牙签粗的一端，放在自己的口腔里，轻轻地在口腔颊内刮几下(注意不要用力过猛，以免损伤颊部)。将刮下的白色粘性物涂在加一滴0．9％NaCl溶液的载玻片上，加一滴0．1％的亚甲蓝，然后加盖玻片，在低倍显微镜下观察。口腔上皮细胞常数个连在一起。由于口腔上皮细胞薄而透明，因此光线需要暗些。找到口腔上皮细胞后，将其放在视野中心，再转高倍镜观察。口腔上皮细胞呈扁平多边形。试辨认细胞核、细胞质、细胞膜。核染色较深。

（二）肌肉组织

切一小块肌肉放在滴有0.65%生理盐水的载片上，用解剖针顺肌纤维方向把肌肉分成细丝，留下几条最细的，盖上盖片，镜下观察。找到后移至视野中心加一滴1%的醋酸高倍镜下观察。

（三）人血涂片的制作及观察

用75%酒精棉球消毒左手无名指指端侧面，待酒精挥发后用消毒的采取针刺破皮肤，深约2-3mm，使血能自然流出。滴一滴血于干净载片上，用另一边缘光滑的载片一侧在血滴上以45度角推一下，涂成一薄而均匀的血层，用瑞氏染液染色4分钟后冲去染液，自然干后镜检，观察各种血细胞。

（四）ABO血型鉴定

1.制备红细胞悬液：指端或耳垂采血1滴，置于盛有1ml生理盐水的小试管内，摇匀即成。

2.取双凹玻片一块，用蜡笔在两端分别写上A、B字样，用小滴管在两侧凹内分别滴加1滴A型血清和B型血清，再用小滴管在两侧凹内各滴1滴红细胞悬液。

3.将玻片轻动数次，或用牙签搅拌，使红细胞悬液与标准血清充分混匀。放置15分钟左右，用肉眼观察有否凝集，判定自己的血型。

（五）动物四大组织永久装片观察

五、注意事项

制作口腔黏膜上皮细胞临时装片时，注意必须将从颊部刮下的细胞在载玻片上涂得薄而均匀。滴加生理盐水不宜过多，恰在盖玻片之下为宜。染液不可加得过多，以免妨碍观察。

制作人血涂片时需涂成薄而均匀的血层，染色时间不能过长或过短，染色完成后染液应冲洗干净。

制作横纹肌分离装片时要在1%的醋酸溶液中分离，且分离得越细越好。

六、作业

绘制人口腔黏膜上皮细胞3-4个并发送所绘上皮细胞照片；发送五种白细胞照片；发送动物肌肉分离装片照片；发送四种组织永久装片照片各一。