常规组织病理技术样本
对比分析免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理检查中的效果差异
对比分析免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理检查中的效果差异【摘要】目的研究在肿瘤病理检查当中使用免疫组化技术和常规技术的差异。
方法将本院自2019年5月~2020年5月收治的64例肿瘤患者当作研究对象，所有患者均需使用免疫组化技术和常规技术进行病理检查，将手术的病理结果当作金标准，对比两组诊断结果准确率。
结果对比诊断准确率，免疫组化技术的准确率明显高于常规技术（P＜0.05）。
患者接受免疫组化技术诊断后的满意度评分更高，对比差异明显（P＜0.05）。
结论进行肿瘤病理检查时，免疫组化技术的准确率高于常规技术，能够将误诊率和漏诊率降低，为临床诊断和治疗疾病提供更为有效的参考价值，且患者接受诊断过程中心理和生理的舒适度更好，值得推广和应用。
【关键词】免疫组化技术；常规技术；肿瘤病理检查[Abstract] Objective To study the difference between immunohistochemical technique and conventional technique in tumor pathological examination. Methods 64 tumor patients treated in our hospital from May 2019 to may 2020 were taken as the research object.All patients needed to use immunohistochemical technology and conventional technology for pathological examination. The pathological results of the operation were regarded as the gold standard. The accuracy of the diagnostic results of the two groups were compared. Results compared with the diagnostic accuracy, the accuracy of immunohistochemical technique was significantly higher than that of conventional technique (P < 0.05). The patients' satisfaction scorewas higher after being diagnosed by immunohistochemistry (P < 0.05). Conclusion in tumor pathological examination, the accuracy ofimmunohistochemical technology is higher than that of conventional technology, which can reduce the misdiagnosis rate and misseddiagnosis rate, provide more effective reference value for clinical diagnosis and treatment of diseases, and the patients have better psychological and physiological comfort in the process of diagnosis, which is worthy of popularization and application.[Key words] immunohistochemical technique; Conventional technology; Pathological examination of tumor人们生活方式和饮食习惯的改变，导致患有肿瘤的患者逐渐增多。
组织病理切片步骤
组织病理切片步骤1. 采集组织样本在进行组织病理切片前，首先需要采集患者的组织样本。
通常，医生会通过手术或活检等方式获得组织样本。
为了确保样本的准确性和完整性，医生会根据患者的情况进行选择。
2. 固定组织样本采集到的组织样本需要进行固定处理，以保持其形态结构和细胞组织的完整性。
常用的固定剂包括福尔马林等。
固定处理的时间和方法要根据不同的组织类型和病理分析的需要进行调整。
3. 预处理组织样本在进行切片之前，需要对固定的组织样本进行预处理。
这包括去除固定剂、脱水、清洗和浸泡等步骤。
通过这些预处理，可以将组织样本从固定剂中解除，并使其逐渐适应后续处理的要求。
4. 切片制备切片制备是组织病理学中非常重要的步骤。
在这一步骤中，医生会将预处理的组织样本切割成非常薄的切片。
常用的切片工具是显微切片机。
切片的厚度一般在4-6微米之间，以确保组织结构的清晰可见。
5. 染色切片制备完成后，需要对切片进行染色，以突显组织结构和细胞组分。
常用的染色方法包括血液学染色、组织学染色和免疫组织化学染色等。
不同的染色方法可以提供不同的信息，有助于医生做出准确的病理诊断。
6. 镜检染色完成后，医生会使用显微镜对染色的切片进行观察和分析。
通过观察组织结构、细胞形态和染色结果，医生可以了解组织的病理变化，并做出相应的诊断。
镜检是组织病理学中最核心的步骤之一。
7. 病理报告根据对切片的镜检结果，医生会撰写病理报告。
病理报告中包括对组织病变的描述、病变类型的确定以及可能的诊断建议等内容。
病理报告是医生向临床医生提供病理诊断的重要依据，也是指导治疗和预后评估的重要参考。
通过以上的步骤，组织病理切片可以提供丰富的病理学信息，为医生做出准确的诊断和治疗决策提供重要依据。
这一过程需要医生的精确操作和细致观察，以确保结果的准确性和可靠性。
对于患者来说，组织病理切片是了解疾病发展和制定个体化治疗方案的重要工具。
病理学实验室技术测试题目
病理学实验室技术测试题目摘要本文档旨在提供一个病理学实验室技术测试题目的样本，以帮助评估实验室员工的专业能力和知识水平。
1. 选择题请选择正确的答案，并在题后括号内标注答案编号。
1. 组织病理学主要研究的是（）a) 细胞变异b) 组织变异c) 器官变异d) 系统变异2. 组织切片染色中，常用于染色细胞核的染料是（）a) 血液b) 酸性染料c) 增强染料d) 峰值染料3. 病理学实验室中最常见的检测设备是（）a) 超声波设备b) 电子显微镜c) 病理学切片机d) 核磁共振设备4. 工作中病理学技术人员需要注意的安全问题包括（）a) 身体姿势b) 环境温度c) 实验仪器的品质d) 技术操作的正确性5. 病理学技术操作中需要保持的洁净环境包括（）a) 不戴口罩b) 常用工具杂乱无序c) 无洁净手术台d) 精确测量当量2. 简答题请简洁回答以下问题。
1. 简述病理学实验室的主要职责。
2. 为什么在病理学实验室工作时要注意安全问题？3. 请列举三种常见的病理学技术操作和步骤。
4. 解释病理学技术人员需要具备的核心能力。
5. 说明病理学技术操作中的质量控制措施。
3. 实践题请完成下面的实践操作。
你在病理学实验室中接收到一份切片标本，你需要进行标本染色涂片。
请列出操作步骤和所需材料。
参考答案1. (b) 组织变异2. (b) 酸性染料3. (c) 病理学切片机4. (d) 技术操作的正确性5. (d) 精确测量当量简答题参考答案:1. 病理学实验室的主要职责包括接收、处理、分析和解释送检的病理学标本，提供病理学诊断和研究服务。
2. 在病理学实验室工作时，安全问题至关重要，因为工作环境中可能出现有害物质、尖锐物品和高压设备，不正确的操作可能导致伤害和事故发生。
3. 三种常见的病理学技术操作和步骤包括：- 组织切片制备：取得组织标本，固定、切片、染色和封片。
- 组织培养：将组织扩增并培养使其生长。
- 免疫组化：使用抗体标记来检测特定抗原。
病理取材规范下的组织样本采集与处理流程分析
病理取材规范下的组织样本采集与处理流程分析病理学是一门研究疾病本质及其发展规律的学科，而组织样本的采集与处理是病理学研究中至关重要的环节。
规范的组织样本采集与处理流程能够确保所获得的病理标本具有高质量和准确性，并为病理学家提供可靠的诊断依据。
本文将对病理取材规范下的组织样本采集与处理流程进行详细分析。
首先，在进行组织样本采集之前，必须进行仔细的病例评估和准备工作。
医生或病理学家需要仔细了解患者的病情，包括病史、症状、体格检查结果等。
同时，还需要参考相关的影像学检查结果，如X光片、CT扫描、磁共振成像等。
这些信息将对采集过程有重要指导作用。
其次，选择合适的采样器械和标本容器也是非常关键的。
根据不同组织类型，可选择采用剪刀、镊子、手术刀等采样器械进行组织样本采集。
在选择标本容器时，应注意容器的质量和材料，以确保所采集的组织样本在固定和染色过程中不会出现破损和变形等问题。
第三，准确的组织样本的采集位置和部位也是十分重要的。
根据病变的性质和病变区域的特点，医生或病理学家需选择合适的采集位置，并确保采集的组织样本包含病变部位。
在采集过程中，应尽量避免损伤周围正常组织，以保持标本的完整性和准确性。
在组织样本采集完成后，标本的处理和保存也是至关重要的环节。
首先，必须及时将采集到的组织样本进行标记和记录，以避免标本混淆和信息丢失。
其次，应将组织标本置于适当的液体固定剂中进行固定。
常用的液体固定剂有福尔马林、柠檬酸铅等，可以有效保护组织的形态和结构。
液体固定剂的选择应根据不同组织类型和需要进行合理调整。
在标本固定完成后，需要进行脱水、透明质化和包埋等步骤。
脱水过程将标本中的水分替换为有机溶剂，透明质化则使用透明质酸酯类溶液使组织透明，以提供更好的显微镜观察条件。
最后，标本需要被包埋在石蜡或其他固化剂中，以便进行薄片切割。
组织样本采集与处理流程中还需进行组织切片制作、染色和显微镜观察等环节。
组织切片制作是将标本切成薄片以供显微镜观察的过程，采用微tome或切片机进行。
2024年卫生专业技术资格考试病理学技术(中级380)基础知识试题及解答参考
2024年卫生专业技术资格考试病理学技术(中级380)基础知识复习试题(答案在后面)一、A1型单项选择题（本大题有40小题，每小题1分，共40分）1、细胞坏死的主要标志是下列哪一项的变化？A. 细胞膜B. 细胞核C. 细胞器D. 细胞浆E. 细胞连接2、关于肿瘤的描述，下列哪项是正确的？A. 良性肿瘤通常边界不清，与周围组织紧密粘连。
B. 恶性肿瘤生长缓慢，不会侵犯周围正常组织。
C. 所有恶性肿瘤都具有转移能力。
D. 肿瘤的发生仅由遗传因素决定。
E. 通过病理检查可以确定肿瘤性质为良性还是恶性。
3、题干：病理切片染色过程中，哪种染料的吸收光谱范围最接近人眼可见光的范围？A、苏木精B、伊红C、磷钨酸D、天狼猩红4、题干：以下哪种病理切片固定方法对细胞形态的破坏最小？A、酒精固定B、甲醛固定C、冷固定D、热固定5、在病理学技术中，哪种方法主要用于观察细胞和组织的超微结构？A、普通光学显微镜观察B、电子显微镜观察C、冷冻切片观察D、荧光显微镜观察6、在病理学技术中，用于固定细胞和组织的常用固定剂是以下哪种？A、乙醇B、甲醛C、水合氯醛D、冰醋酸7、下列哪项不是细胞坏死的标志？A、细胞核固缩B、细胞膜破裂C、细胞器肿胀D、DNA片段化E、细胞表面磷脂酰丝氨酸外翻8、在HE染色切片中，下列哪种组织结构会呈现深红色？A、细胞核B、肌肉纤维C、脂肪滴D、嗜碱性颗粒E、细胞质中的RNA9、题干：在病理切片染色过程中，哪种染色剂常用于增强细胞核的对比度？A、苏木精B、伊红C、磷钨酸D、酸性复红 10、题干：以下哪种病理学技术可用于检测细胞凋亡？A、苏木精-伊红染色B、电镜观察C、Tunel染色D、免疫组化11、在病理学技术中，哪种方法主要用于观察细胞和组织的超微结构？A、普通光学显微镜观察B、电子显微镜观察C、冷冻切片观察D、荧光显微镜观察12、在病理学技术中，染色前对组织进行固定的主要目的是什么？A、增强组织硬度B、防止组织自溶C、便于切片D、增加组织透明度13、下列哪项不属于组织切片技术？A. 石蜡切片法B. 冰冻切片法C. 振动切片法D. 组织化学染色法14、在HE染色中，嗜酸性物质指的是：A. 能够与酸性染料结合的物质B. 能够与碱性染料结合的物质C. 不易与任何染料结合的物质D. 在染色过程中容易被酸洗掉的物质15、病理切片厚度通常控制在多少微米较为适宜？A. 5-10微米B. 10-15微米C. 15-20微米D. 20-30微米16、在病理切片染色过程中，苏木精-伊红染色法（HE染色）中，苏木精染液的主要作用是什么？A. 使细胞核着色B. 使细胞质着色C. 使细胞膜着色D. 使细胞外基质着色17、在病理学技术中，哪种方法主要用于观察细胞和组织的超微结构？A、普通光学显微镜观察B、电子显微镜观察C、冷冻切片观察D、荧光显微镜观察18、在病理学技术中，用于固定细胞和组织的常用固定剂是以下哪种？A、甲醛B、乙醇C、水合氯醛D、冰醋酸19、在组织切片过程中，如果组织块过硬，最可能导致的问题是：A. 切片过薄，容易破裂B. 切片过厚，细胞结构模糊C. 组织脱水不足，切片时易碎D. 固定不充分，影响染色效果 20、下列哪项不是免疫组化技术中的步骤？A. 抗原修复B. 加入一抗C. DNA提取D. 显色反应21、病理切片染色过程中，下列哪种染色剂主要用于增强细胞核的染色效果？A. 苏木精B. 伊红C. 碘液D. 氯化钴22、在病理学技术中，以下哪种染色方法用于检测肿瘤细胞的角蛋白？A. 苏木精-伊红染色B. 罗氏染色C. 罗斯登染色D. 色素沉着法23、下列哪一项不是细胞凋亡的特征？A、细胞肿胀，细胞器膜破裂B、染色质边缘化与核周固缩C、形成凋亡小体D、DNA片段化24、免疫组织化学技术中，用于标记抗体的是哪种物质？A、苏木精B、伊红C、荧光素或酶D、银盐25、题干：以下哪种病理切片染色技术适用于观察细胞核的结构？A. 苏木精-伊红染色法（H&E染色）B. 瑞氏染色法（Giemsa染色）C. Masson染色法D. 碘化钾染色法26、题干：在病理学技术中，以下哪项操作是为了防止切片脱片？A. 切片前将切片刀煮沸消毒B. 切片时使用微温的固定液C. 切片后立即将切片放入固定液中D. 切片过程中不断用酒精擦拭切片刀27、下列哪种细胞器在病理条件下最常发生肿胀？A. 线粒体B. 高尔基体C. 溶酶体D. 内质网E. 核糖体28、在肿瘤细胞中，以下哪项不是用来评估恶性程度的指标？A. 细胞异型性B. 核分裂象的数量C. 肿瘤边界清晰度D. 细胞外基质成分E. 侵袭周围组织的能力29、题干：在病理切片染色过程中，以下哪种染色剂通常用于固定细胞核？A. 苏木精B. 伊红C. 酒精D. 稀盐酸 30、题干：在病理切片制作过程中，以下哪项操作不正确？A. 切片厚度应控制在3-5微米B. 切片应置于37℃的温水中展平C. 切片染色时，苏木精染色时间不应过长D. 切片脱蜡时，应使用二甲苯31、在病理切片的制作过程中，以下哪个步骤不属于常规的切片步骤？A. 厚度调整B. 涂片C. 染色D. 烘干32、在苏木精-伊红染色中，以下哪种物质用于将细胞核染成蓝色？A. 苏木精B. 伊红C. 磷钨酸D. 硫酸铝33、在病理学技术中，用于固定组织切片的常用固定液是：A. 甲醛B. 碘酒C. 氢氧化钠D. 乙醇34、在HE染色过程中，若切片出现气泡，可能的原因是：A. 切片清洗不充分B. 苏木精染色时间过长C. 脱蜡处理不当D. 染色缸中水量不足35、题干：在细胞学检查中，以下哪种细胞形态特点最符合良性病变？A. 细胞核与细胞质比例失调B. 细胞核异型性明显C. 细胞大小不一，核仁明显D. 细胞质嗜碱性，核膜清晰36、题干：在组织学切片制作中，以下哪种方法用于固定组织？A. 乙醇浸泡B. 甲醛蒸熏C. 热固定D. 水浸泡37、病理学技术中，用于固定组织标本的方法是：A. 高温煮沸法B. 酒精固定法C. 氯仿固定法D. 甲醛固定法38、在病理切片的制作过程中，用于将组织切成薄片的方法是：A. 热切片法B. 冷切片法C. 刮片法D. 涂片法39、在病理切片制作过程中，哪一步骤容易出现切片脱片现象？A. 染色B. 切片C. 固定D. 水洗 40、在病理组织学检查中，哪种染色方法主要用于检测细胞核的异型性？A. 苏木精-伊红染色B. 钙化染色C. 酸性品红染色D. 色素沉着染色二、A2型单项选择题（本大题有50小题，每小题1分，共50分）1、题干：在病理切片染色过程中，以下哪种染色剂主要用于细胞核的染色？A、苏木精B、伊红C、碳酸锂D、磷钨酸2、题干：在病理学技术中，以下哪种方法用于检测病毒包膜？A、免疫组化B、原位杂交C、电镜观察D、细菌培养3、题干：以下哪种病理切片染色方法适用于观察肿瘤细胞的多形性和异型性？A. 苏木精-伊红染色（HE染色）B. 吉姆萨染色（Giemsa染色）C. 阿辛蓝染色（Alcian blue染色）D. 立方体染色（Cubitin染色）4、题干：在病理学检查中，以下哪种组织固定方法最常用于固定活体组织？A. 甲醛固定B. 碘酊固定C. 乙醇固定D. 甘油固定5、题干：在病理切片制备过程中，下列哪种方法主要用于固定组织？A. 热固定B. 冷固定C. 醇固定D. 碘固定6、题干：在苏木精-伊红染色法中，苏木精染液的主要作用是？A. 使细胞核着色B. 使细胞质着色C. 使细胞器着色D. 使细胞膜着色7、题干：以下哪种细胞学检查方法主要用于检查宫颈癌？A. 涂片法B. 细胞培养法C. 免疫组化法D. 流式细胞术8、题干：在病理切片的制作过程中，哪种染色方法主要用于细胞核的染色？A. 苏木精-伊红染色B. 吉姆萨染色C. 酸性品红染色D. 碱性品红染色9、题干：以下哪种病理切片染色方法适用于观察细胞内脂肪滴？A. 苏木精-伊红染色法B. 番红-固绿染色法C. 碘化钠苏木精染色法D. 阿辛蓝-油红O染色法 10、题干：在病理切片检查中，以下哪种细胞成分的检测通常采用PAS染色法？A. 蛋白质B. 糖原C. 脂肪D. 纤维蛋白11、在病理切片染色过程中，以下哪种染料用于细胞核染色？A. 苏木精B. 伊红C. 碘D. 酚品红12、在病理切片中，以下哪种结构通常不会出现？A. 纤维组织B. 血管C. 神经组织D. 毛细血管13、在病理学技术中，用于固定组织切片的常用固定剂是：A. 生理盐水B. 甲醛C. 乙醇D. 甘油14、在制作病理切片时，将组织块置于固定液中后，下列哪个步骤是为了防止组织收缩？A. 脱水B. 清洗C. 浸蜡D. 置于固定液中15、在病理学技术中，用于固定组织样本的常用试剂是：A. 生理盐水B. 甲醛溶液C. 乙醇D. 硫酸16、在制作石蜡切片时，以下哪个步骤不是必要的？A. 组织固定B. 组织脱水C. 组织透明D. 组织熔蜡17、题干：在病理切片制作过程中，下列哪种方法主要用于固定组织？A. 乙醇脱水B. 甲醛固定C. 碘液染色D. 苏木精染色18、题干：下列哪种病理切片技术用于观察细胞的超微结构？A. 光学显微镜切片B. 电子显微镜切片C. 冰冻切片D. 涂片19、在组织化学技术中，当需要检测组织中的钙盐沉积时，常用的染色方法是哪种？A. 丽春红染色B. 阿尔辛蓝染色C. Von Kossa染色D. PAS反应法 20、在病理学技术中，若要进行细胞凋亡的检测，并希望同时观察细胞的形态结构，最适合的技术是哪一种？A. 透射电子显微镜观察B. 荧光显微镜观察C. 免疫组化技术结合荧光标记D. 冰冻切片结合H&E染色21、患者，男，55岁，近期出现疲劳、体重减轻的症状。
病理组织检查新方法
病理组织检查新方法
组织病理检查主要使用以下几种方法：
1. 切片：将组织标本切割成非常薄的切片，一般为5微米到10微米的厚度。
切片后通常染色，以使细胞和组织的结构更容易观察。
2. 染色：常用的染色方法包括常规组织染色（如HE染色）、免疫组化染色、特殊染色等。
常规组织染色可使细胞和组织的结构清晰可见，免疫组化染色可检测特定蛋白质的表达情况，特殊染色可用于检测特定的病理改变。
3. 镜下观察：将切片放在显微镜下进行观察，以评估细胞和组织的形态、结构、染色性质、细胞和组织的异常等。
4. 免疫组织化学（IHC）：通过使用特定的抗体标记目标蛋白质，来确定组织中是否存在特定的抗原或蛋白质。
这可以帮助鉴定肿瘤类型，评估细胞增殖指标，以及检测预测治疗反应相关的标记物。
5. 分子病理学方法：如聚合酶链式反应（PCR）、原位杂交、蛋白质电泳等，用于检测与疾病相关的蛋白质、DNA或RNA的表达水平。
这些方法通常由病理学家或临床实验室专业人员进行操作和解读。
通过组织病理检查，可以确定许多疾病的诊断、分型和预后评估等。
病理分析方法
病理分析方法病理分析方法是医学中一项重要的技术手段，用于诊断和研究疾病的发病机制。
本文将介绍几种常用的病理分析方法，包括组织切片、细胞学检查、免疫组织化学和分子生物学技术。
一、组织切片组织切片是一种常见的病理分析方法，它通过将患者组织或细胞取材，经过固定处理后，切成薄片，然后染色和显微镜观察，以寻找异常的细胞结构和病变。
在组织切片中，常用的染色方法包括常规的血液染色方法（如瑞士染色和艾尔伯染色）以及免疫组织化学染色方法。
这些染色方法可以帮助病理学家准确地鉴定和分类疾病，进而做出正确的诊断。
二、细胞学检查细胞学检查是一种通过显微镜观察细胞形态学和结构的方法，用于研究细胞的生理和病理状态。
这种方法通常使用细胞刮片或细针穿刺术采集细胞样本，然后进行染色和显微镜观察。
细胞学检查可用于诊断和研究包括癌症和感染在内的多种疾病。
三、免疫组织化学免疫组织化学是一种通过特异性抗体与标记物之间的免疫反应来检测和定位特定分子在组织中的表达的方法。
在免疫组织化学中，常用的标记物包括酶和荧光染料，它们能够与特定抗原相互作用并产生特异性信号。
这种分析方法常用于研究特定蛋白质的表达和定位，从而揭示疾病的发生和发展机制。
四、分子生物学技术分子生物学技术在病理分析中扮演着重要角色，它能够研究和分析病理性基因变异和功能异常。
常用的分子生物学技术包括聚合酶链反应（PCR）、蛋白质电泳和DNA测序等。
这些技术可以帮助研究者检测和鉴定DNA、RNA和蛋白质的变化，从而揭示疾病的分子机制。
综上所述，病理分析方法包括组织切片、细胞学检查、免疫组织化学和分子生物学技术等多种手段。
这些方法在医学诊断、疾病研究和药物开发中发挥着重要作用，为疾病的早期诊断和治疗提供了重要依据。
随着技术的不断进步，病理分析方法将会进一步发展，为医学科研和临床实践提供更加精准、高效的分析手段。
组织学技术与染色方法
组织学技术与染色方法组织学技术是研究组织构造和生物学特性的基础。
在生物学、医学和病理学领域，人们广泛应用组织学技术来研究细胞和组织的结构和功能。
染色方法是组织学技术中的一种重要方法，它可以改变组织的颜色和形态结构，从而使人们更加清晰地观察和研究组织。
本文将介绍组织学技术和染色方法的相关内容。
一、常规组织学技术常规组织学技术是指在组织学和病理学研究中常用的组织学技术，主要包括固定、包埋、切片和染色等步骤。
其中，固定是针对活体组织的一种处理方法，用于保持组织的形态结构和化学结构，同时杀死细胞，以避免组织或细胞的萎缩变形。
主要方法有酸性酒精、福尔马林等。
包埋是将固定后的组织放入合适的包埋剂中，使组织变硬，便于制备切片。
切片是将包埋后的组织切成同样大小的薄片，然后染色或进行其他特殊处理，便于观察和诊断。
二、染色方法染色是组织学技术中的一项重要方法。
染色可以使组织或细胞的不同结构和化学成分显示出不同的颜色，从而方便人们观察和研究组织。
1. 常用染色方法（1）H&E染色H&E染色是组织学研究中最常用的染色方法之一。
该方法主要利用酸性染料和碱性染料的性质不同，在染色后能够将细胞核染成深蓝色，胞浆和细胞质染成淡粉红色，从而方便人们观察和区分不同的细胞类型和组织结构。
（2）伊红染色伊红染色是一种常用的组织学样本染色方法，主要用于染色血液和骨髓切片。
该方法主要利用伊红染料的亲和性，将细胞核染成红色或紫色，细胞质和其他组织及细胞结构则染成红色，能够明显突出血液细胞和骨髓组织结构。
（3）PAS染色PAS染色是糖和糖蛋白类物质的特异性染色方法，主要用于组织中糖和糖蛋白的检测和定量。
该方法主要利用PAS染料与糖类物质形成复合物的性质，将糖染成淡红色或玫瑰红色。
2. 新兴染色技术（1）免疫组化染色免疫组化染色技术是一种利用抗体与特定抗原相互作用的特异性染色方法。
该技术可以检测和鉴定组织或细胞中特定的蛋白质、抗原等，从而在诊断和治疗等方面具有非常重要的应用价值。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
第二章常规组织病理技术
活体组织检查:活检的目的
●协助临床对病变作出诊断或为
疾病诊断提供线索
●了解病变性质、发展趋势,判
断疾病的预后
●验证及观察药物疗效,为临床
用药提供参考依据
●参与临床科研,发现新的疾病
或新的类型,为临床科研提供
病理组织学依据
活检的应用范围
●协助临床对病变作出诊断或为
疾病诊断提供线索
●了解病变性质、发展趋势,判
断疾病的预后。
●验证及观察药物疗效,为临床
用药提供参考依据
●参与临床科研,发现新的疾病
或新的类型,为临床科研提供
病理组织学依据
活检标本类型
●手术摘除的器官、组织,如阑
尾、甲状腺、胆囊、淋巴结
等
●穿刺抽取组织,如肝、肾、淋
巴结的穿刺组织●自病变部位切取的小块组织,
包括用纤维胃镜、纤维支气管
镜等内镜钳取的病变组织
●刮取的组织:刮出的子宫内膜
组织(诊刮),外科手术刮取的
病变骨组织等
活体组织标本的固定与送检
●固定存放送检
组织与细胞的取材
●一张好的切片是保证病理诊断
和科研结果准确性的前提和基
础
与正确的取材、合适的固定和良好的染色密切相关
组织处理要求
完整保存组织细胞的形态
最大限度保存组织或细胞成分的抗原性
抗原不弥散,以保证其准确定位
组织取材
(一)一般原则
●厚度0.2～0.3c m;面积1～
1.5c m2
●较薄的皮肤、腔道器官及囊壁
组织等应剪成细条缠绕成同心
圆状
●骨组织需先经脱钙处理
●若需保存新鲜组织,应将所取
组织用锡箔纸包好,浸入液氮
速冻,然后置-70℃冰箱中
(二)取材注意事项
刀剪应锋利、避免前后拉动和挤压
●避免使用有齿镊,动作轻柔以
免挫伤或挤压组织
●避开坏死组织和血凝块,去掉
异物
●取病变主体、病变与正常交界
和正常组织各一块
固定及常见固定剂
一、概念:将组织浸入某些化学试剂中,使组织细胞内的物质能尽量保持其生活状态时的形态结构和位置
二、固定的作用
1.保持组织、细胞与生活状态时相似的结构和形态,防止组织自溶和细菌繁殖导致的组织腐败
2.保持细胞内蛋白质等成分凝固并定位于原有部位
3.便于区别不同的组织成分:固定可使组织细胞中各种成分沉淀、凝固并易着色
4.有利于切片:固定剂兼有组织硬化的作用,能使组织细胞从半液体
状变为半固体状
5.有利于免疫组化染色和核酸原位杂交:完整保存及准确定位抗原、
D N A和R N A成分
三、组织固定的注意事项
1.取材后要及时固定,特别是温度高的季节,以免腐败
2.容器:最好选择广口的容器,一是避免组织受挤压变形,二是方便
取材时易于取出
3.固定液要足量,至少应为组织块总体的5倍以上
4.根据不同研究目的选择不同的固定液
M a s s o n染色,最好用甲醛升汞、Z e n k e r液或b o u i n液固定
●保存细胞内糖原应选用C a r n o y
液固定
●显示尿酸盐结晶可用100%酒精
固定
5.固定时间:视组织块大小、固定温度、固定液种类而定
●一般固定6小时以上,然后保存
于70%酒精中
●温度低于4℃时,固定时间应延
长
●比较大的标本除延长固定时间
外,还应做多个切面固定,以
免固定不均匀
四、固定方法
1.浸泡法
2.蒸汽固定法:常见于固定组织中的可溶性物质
3.灌注固定法:用于组织块过大或固定剂难以进入其内部的标本(如整个器官、整只动物)
4.滴加法:细胞涂片
5.微波固定法(63℃～65℃):具有核膜清晰、染色质均匀、组织结构收缩小等优点,但由于其固定时间不易掌握,一般不主张运用于小组织块固定
常见固定液及其配制
(一)单纯固定液:由单一化学物质组成
1.甲醛
(1)优点:价格便宜、组织穿透力强、固定均匀、组织收缩小,可长期保存标本
(2)缺点:易挥发,有一定毒性
(3)性质:交联性组织固定剂
(4)适用范围:适合多种特殊染色,对脂类和类脂体、神经及髓鞘均有良好的固定效果;也可固定高尔基体、线粒体和糖类
(5)使用浓度:10%f o r m a l i n,即10m l市售原液(40%)加90m l的水,此液的甲醛实际浓度为4%
2.中性甲醛
以p H7.2～7.4的磷酸缓冲液(P B S)为溶剂配制的甲醛溶液,浓度同前
●优点:固定效果及对组织抗原
的保存均优于一般甲醛溶液
●是科研用组织最常见的固定液
3.乙醇
(1)优点:具有硬化、固定、脱水等作用,还能保存糖原和尿酸结
晶
(2)使用浓度:固定组织用80%～95%为好,70%的乙醇可用于保存组织;证明尿酸结晶和保存糖原用100％浓度
(3)缺点:
●组织渗透力较弱
●能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋
白,核蛋白沉淀后能溶于水,
使核染色不良
●高浓度乙醇固定的组织硬化显
著,组织收缩明显且脆,既影
响切片,又致组织形态改变,
影响诊断
●溶解脂肪、类脂质和血红蛋白,
还损害其它色素
(二)混合固定液:由多种化学物质混合组成
1.A-F液
酒精-甲醛固定液
●固定兼脱水,固定后可直接入
95%酒精脱水
●配制方法:95%以上浓度酒精
90m l,40%甲醛10m l,混合而成2.B o u i n液
(1)优点:渗透力强,对组织固定均匀,收缩很小,不会使组织变硬变脆,适用于睾丸活检等小组织的固定
(2)固定时间:小块组织只需数小时,较大脏器固定12～24小时(3)配制方法:苦味酸饱和水溶液75m l,40%甲醛水溶液25m l,冰醋酸5m l
80%酒精150m l,40%甲醛60m l,冰醋酸15m l,加入结晶苦味酸1g(用前配制)
3.Z e n k e r液
(1)优点:H E染色最好的固定液,此液固定的标本,胞核和胞质染色
清晰
(2)固定时间:12～24小时
(3)缺点:配制该液的试剂较昂贵,且需处理汞
(4)配制方法:
重铬酸钾2.5g,升汞5.0g,蒸馏水100m l
●将升汞、重铬酸钾和蒸馏水混
于烧杯中,加热(40～50℃)溶
解,冷却后过滤,贮存与棕色
瓶中
●临用时取贮存液95m l,加入冰
醋酸5m l
4.C a r n o y液
●(1)优点:
●穿透力强,能很好地固定胞质
和染色质
●特别适合固定外膜致密的组织
●在固定组织的同时,能溶解大
部分脂肪
●用于糖原及尼氏小体的固定
●对显示D N A和R N A的效果很好
(2)固定时间:小块组织固定1～2小时
(3)配制方法:无水乙醇60m l,冰醋酸10m l,氯仿30m l。
(4)缺点:氯仿有毒
组织的脱水、透明浸蜡和包埋:切片前的处理过程,主要目的是便于
切薄片和长期保存组织块
一、脱水
●用某些溶媒(脱水剂)置换组
织内水分的过程
●脱水剂必须能与水任意比例混
合
●常见脱水剂:有乙醇、丙酮及
叔丁醇(2-甲基-2-丙醇)
●丙酮引起组织收缩作用强而较
少应用
●为了减少组织的急剧收缩,应
使用从低浓度到高浓度递增的
顺序进行,一般从70%浓度开始,
经80%、95%直至无水乙醇
二、透明
●组织块中的水分被透明剂所取
代,组织块变得透亮的过程
●最常见的透明剂为二甲苯,因
其既能与酒精混合,又能溶解
石蜡
●处理时间一般为30m i n左右
●其它透明剂:苯、甲苯、氯仿、
环己酮、苯甲酸甲酯、香柏油、
冬青油和苯胺油等
三、浸蜡
●组织透明后在熔化的石蜡内浸
渍,让蜡液完全渗透入组织细
胞内的过程
用于浸渍的石蜡熔点为52℃～56℃
浸蜡时间一般为3小时,需更
换3次石蜡液
浸透或透入:用其它浸透剂
(火棉胶、碳蜡、明胶等)渗入组织内部的过程
四、包埋
组织块经过浸蜡或浸透后,再
用包埋剂包起来的过程
●包埋后的组织块具有一定的硬
度和柔韧性,有利于切薄片
●常见的包埋剂:石蜡、火棉胶、
碳蜡、明胶和塑料等,可根据
不同的研究需要选用。