血钙浓度检测试剂盒说明书 可见分光光度法

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血清钙Ca比色法测定

血清钙Ca比色法测定

血清钙Ca比色法测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。

2 实验原理在碱性条件下,加入8-羟基喹啉能防止镁和铁的干扰钙离子的测定情况下,Ca2+和邻甲酚酞络合酮形成紫色复合物钙 +O-CPC 碱性环境钙-O-CPC复合物其钙离子与邻甲酚酞络合酮复合物的颜色与钙浓度成正比,可用利用其吸光度的变化来测定钙离子的含量。

3 标本采集3.1 病人准备:无特殊要求。

3.2 类型:血清、肝素血浆或尿液。

3.3 标本存放:血清/血浆稳定性:20~25℃保存可稳定7天;4~8℃保存可稳定3周;-20℃保存可稳定8个月。

尿液稳定性:20~25℃保存可稳定2天;4~8℃保存可稳定4天;-20℃保存可稳定3个月;对24h尿液标本加浓盐酸10ml,并加热标本,使草酸钙溶解。

3.4 标本运输:室温条件下运输3.5 标本拒收标准:细菌污染的不能做测定。

4. 实验材料:4.1 试剂:上海罗氏诊断产品有限公司CA试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014)4.1.1 试剂组成R1 氨基乙醇缓冲液:1mol/L,pH10.6R2 邻甲酚酞络合酮:0.3mmol/L;8-羟基喹啉:13.8mmol/L;盐酸:122mmol/L4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存:15-25°C下保存期限:见试剂标签上的有效期机上稳定期:42天。

4.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。

4.2 校准品:使用罗氏多项生化校准品提供的Ca校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪。

6 操作步骤6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。

钙(Ca2+) 偶氮砷III法生化检测方法

钙(Ca2+) 偶氮砷III法生化检测方法

目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理在中性条件下血清中的钙离子与砷酸盐反应,生成复合物。

此复合物在630nm有最大吸收,通过比色可求出钙的含量。

2.标本采集与处理2.1 受检者的准备:病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况。

孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。

此外,有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。

2.2 静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂:血浆使用肝素或EDTANa2(1mg/mL)作为抗凝剂。

2.4 标本处理:血标本室温放置30min~45min后离心分离血清或血浆,在两小时内检测完毕;如两小时内不能检测完毕,将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3.试剂3.1 试剂:本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司Ca试剂盒,为液体单一试剂,各组分如下:3.2 校准血清:使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次:空白定标:每日需做试剂空白定标。

全点定标:试剂换批号使用时或质控结果超过规定的±2SD范围,需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性:原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。

试剂开瓶后,在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天,试剂应避免污染。

试剂颜色为紫色,当试剂变色,按照试剂失效处理。

补钙剂中钙含量的测定-原子吸收分光光度计法测补钙制剂的钙含量

补钙剂中钙含量的测定-原子吸收分光光度计法测补钙制剂的钙含量

原子吸收分光光度计法测补钙制剂的钙含量一、实验原理钙是人体必需的常量元素,缺失时会引起儿童佝偻病,成人骨质疏松及软骨病。

据统计,人体通过饮食摄入的钙明显缺乏,因此需要补钙剂补充。

目前,市场上的补钙制剂中大量有效成分为碳酸钙。

因此需要一种方便快捷能批量检测碳酸钙的分析方法,对其质量进行检评。

传统的EDTA滴定法,因其成分复杂,通常含色素,使其终点较难判断,重现性差,用原子吸收分光光度法测定其含量,可以克服这一难题,结果满意。

二、主要试剂和仪器仪器:岛津从一6501F原子吸收分光光度计药品:钙标准储备液: 1000μg/ml GBSG62012—90(国家钢铁研究总院)。

钙标准使用液100μg/ml,取10ml于100ml容量瓶中用1%的盐酸定容到刻度。

镧溶液:20g/L,称取23.45g氧化镧,溶于75ml盐酸,用水定容至1000ml。

盐酸(优级纯),硝酸(优级纯),超纯水。

三、工作条件及标准曲线绘制波长:422.7nm,光谱通带:0.5nm,灯电流:10mA,燃烧器高度:7.0mm 标准曲线绘制吸取钙标准使用液0.0,5.0,10.0,15.0,20.0,25.0m1分别置100ml容量瓶中,加入20g/L镧溶液lml,用1%盐酸定容至刻度,按仪器工作条件分别测定其吸光度。

表1钙的标准曲线以吸光度为纵坐标(Y),浓度为横坐标(x)的线性方程:Y =0.0497X+0.0262,r=0.9994。

表明碳酸钙浓度在5—25μg/ml范围内,线性关系良好。

四、样品测定取lO片样品称量,然后磨细混匀,再称取总量的1/10,加少量水润湿后用2 ml盐酸溶解,纯水定容至100ml容量瓶中,混合过滤后,取续滤液l ml 加5ml 1+1硝酸,再加入20g/L的镧溶液1ml,纯水定容至100ml容量瓶中。

按仪器工作条件测定吸光度,与标准系列比较,计算出每片的含钙量。

五、结果加标回收率试验取6份样品测定其结果,然后加标准物质测定结果,计算回收率,见表2。

植物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书中文版

植物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书中文版

植物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途植物钙离子浓度荧光定量检测试剂是一种旨在通过钙离子特异性荧光探针Fluo-4,与钙离子结合后,其荧光强度显著增强,在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化,来测定植物组织裂解悬液中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

其适合于各种植物组织,包括种子(seed)、叶片(leaf)、根(root)、胚胎叶(cotyledon)、上胚轴(epicotyl)等裂解萃取样品中总钙离子的浓度检测。

产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。

技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质,占1150克。

其中99%的钙以氟磷灰石钙(calcium fluorophosphate apatite)形式存在于骨组织中。

非骨组织钙成分主要存在于细胞内。

钙具有两种主要形式:一种是非弥散型蛋白结合钙,其构成约40%至50%的血清中的总钙含量;另一种为弥散型游离钙,其进一步分成具有活性的复合钙(complexed calcium)和离子钙(ionized calcium)。

钙对神经肌肉兴奋性(neuromuscular excitability)、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。

钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法(flame photometry)、原子吸收分光光度法等技术,但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰,或者受限于仪器的特殊的要求。

Fluo-4,一种与钙离子结合,其荧光强度迅速增强100倍的荧光探针,可以敏感测定微量游离钙离子水平。

在荧光分光光度仪下,激发波长485nm,散发波长520nm,来定量测定植物组织细胞的钙浓度。

产品内容清理液(Reagent A)60毫升裂解液(Reagent B)20毫升反应液(Reagent C)6毫升饱和液(Reagent D)2毫升阴性液(Reagent E)2毫升产品说明书1份保存方式保存清理液(Reagent A)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;反应液(Reagent C)避免光照;有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于样品操作的容器15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器DOUNCE匀浆器:用于组织匀化微型台式离心机:用于样品沉淀培养箱:用于反应物孵育黑色96孔板:用于样品荧光测定的容器荧光酶标仪:用于样品荧光分析实验步骤一、样品准备1.准备好新鲜的植物组织(叶片、谷粒、种子等),并秤重以确定1克组织重量2.(选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管3.(选择步骤)加入3毫升清理液(Reagent A)清洗1次4.即刻用刀片切碎组织5.放进一个预冷的15毫升锥形离心管6.加入预冷的1毫升裂解液(Reagent B)7.涡旋震荡5秒,充分混匀8.即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约80下)9.将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管,放进4℃微型台式离心机离心10分钟,速度为5000g(或7500RPM,例如eppendorf 5415)10.小心移出上清液(注意:不要触碰沉淀物)到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管11.(选择步骤)如果上清液含有肉眼可见的残渣,重复离心5分钟一次,速度为5000g(或7500RPM,例如eppendorf 5415)12.即刻移入到1.5毫升离心管13.移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-GMS30030.1)14.放进-70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用二、测定准备1.准备好上述制备的待测样品,置于冰槽里备用2.设定好荧光酶标仪(22℃):激发波长485nm,散发波长520nm三、荧光测定1.准备1个黑色96孔板,标记为:样品孔、空白对照孔、最大对照空2.移取100微升(20微克蛋白)上述制备的样品到样品孔里3.移取100微升饱和液(Reagent D)到最大对照空里4.移取100微升阴性液(Reagent E)到空白对照空5.分别加入100微升反应液(Reagent C)到所有孔里6.轻轻摇动黑色96孔板,混匀7.室温下(22℃),孵育30分钟,避免光照8.即刻放进荧光酶标仪测读:获得相对荧光单位(relative fluorescence unit;RFU)9.计算样品钙离子浓度:纳摩尔(注意:不要遗忘乘上稀释倍数)【(样品RFU-空白对照孔RFU)÷(最大对照空RFU-样品RFU)】X 345 (纳摩尔;解离常数)注意事项1.本产品为20次操作2.操作时,须戴手套3.避免使用EDTA等处理样品4.孵育反应完成后即刻进行荧光测定5.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度6.检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围7.样品浓度可以按照蛋白量或组织量定义8.本公司提供系列钙生化检测试剂产品质量标准1.本产品经鉴定性能稳定2.本产品经鉴定检测敏感。

钙离子(CA)测定试剂盒(偶氮砷Ⅲ法)产品技术要求lideman

钙离子(CA)测定试剂盒(偶氮砷Ⅲ法)产品技术要求lideman

钙离子(CA)测定试剂盒(偶氮砷Ⅲ法)适用范围:本产品用于体外定量测定人血清中钙离子的含量1.1规格试剂(R)2×80mL;3×60mL;3×40mL;2×100mL;1×20mL。

校准品(选配):1×3mL。

1.2组成1.2.1试剂组成:单一试剂:紫红色液体。

表1 试剂组成1.2.2校准品的组成:单个水平的液体校准品,在水基质中添加碳酸钙(纯度:大于95%)。

定值范围:(2.0-3.0 )mmol/L。

2.1 外观液体单试剂:紫红色澄清液体。

校准品:无色至浅黄色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 空白吸光度在37℃、600nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应<1.6 ABS。

2.4 分析灵敏度浓度为2.5mmol/L时,吸光度变化范围在(0.4- 0.8)ABS之间。

2.5 线性范围测试血清样本,试剂线性在[1.00-4.00]mmol/L范围内:线性相关系数(r)应不小于0.990;在线性范围内,线性相对偏差应不超过≤10%。

2.6 精密度重复测试浓度在(2.5±0.5)mmol/L的控制血清,所得结果的重复性(变异系数,CV)应不大于 3.0 %。

2.7 批间差测试浓度在(2.5±0.5)mmol/L的控制血清,批间相对极差应不大于 5.0 %。

2.8 准确度:相对偏差:应不超过±5%。

2.9 稳定性2.9.1效期稳定性原包装试剂(含校准品),在(2-8)℃下有效期为18个月,取失效期的试剂盒检测其准确度和线性,试验结果满足2.5、2.8的要求。

2.9.2 开瓶稳定性:试剂(含校准品)开瓶后,在(2-8)℃保存,可以稳定14天。

在第15天检测线性和准确度,试验结果满足2.5、2.8的要求。

2.10校准品的溯源性参见附录A。

血清钙的测定方法

血清钙的测定方法

血清钙的测定方法血清钙测定是指通过实验室检测血液中的钙离子浓度的方法。

测定血清钙浓度可以帮助医生对某些疾病、症状进行诊断和治疗方案的制定。

目前常用的血清钙测定方法主要有光度法、电极法和离子选择性电极法。

光度法是一种常用且经济高效的血清钙测定方法。

其原理是利用光的吸收原理,通过测量吸光度来确定样本中钙离子的浓度。

具体操作是将待测血清样本与染色剂反应,在特定波长下测量吸光度,通过与标准曲线比较,即可得知血清样本中钙离子的浓度。

电极法是一种快速、精确的测定血清钙浓度的方法。

它利用电极与血液样本中的离子发生作用,通过测量电位差来推测钙离子的浓度。

电极法有两种常用的实现方式:直接电位法和指示电位法。

直接电位法是在测定中直接使用玻璃电极或计时示波器进行测量,可以得到一个稳定的、与测量离子浓度成正比关系的电位差。

而指示电位法是利用称为指示电极的电极来测定离子浓度的变化。

通过测量这些电位差,可以得到钙离子的浓度。

离子选择性电极法是一种常用的血清钙测定方法。

它利用一种称为离子选择性电极的特殊电极,通过与待测样本中的离子发生特异交换,以测定离子浓度。

离子选择性电极由膜电极和参比电极组成,其中膜电极用于选择性地吸附和测定离子。

在血清钙测定中,通常采用氯化钙和乙二胺四乙酸四钠制备的电极。

离子选择性电极法精密度高、重现性好,是目前公认的准确度最高的测定方法之一。

此外,还有一些其他的血清钙测定方法,如原子吸收光谱法、质谱法等。

这些方法在一定程度上也可以用来测定血清钙浓度,但通常比较复杂、昂贵,常用于实验室研究和专业领域中。

总结来说,测定血清钙浓度的方法有光度法、电极法、离子选择性电极法和其他一些方法。

不同方法有不同的原理和应用范围,医生可以根据需要选择合适的方法进行血清钙测定。

当然,在进行任何测定之前都需要对仪器进行校准,以确保测定结果的准确性和可靠性。

钙(Ca)(偶氮砷III法)试剂盒SOP

钙(Ca)(偶氮砷III法)试剂盒SOP

钙测定标准操作程序1. 摘要钙检测用于诊断和治疗甲状腺炎,骨病的一种,慢性肾病和手足抽搐(间歇性肌肉收缩或痉挛)。

2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中钙的浓度。

3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定Ca 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理;本SOP 的改动,可由任一使用本SOP 的工作人员提出,并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的钙(Ca )试剂盒采用的是偶氮胂Ⅲ法。

5. 原理偶氮胂Ⅲ在碱性条件下与钙离子结合形成稳定的有色络合物,在660nm 处,其吸光度与钙含量成正比。

有色络合物偶氮胂碱性−−→−++2a C III6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源:上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分:R1,AMPDR2, 偶氮胂三,8-羟基喹啉,二甲基亚砜7.3 试剂稳定性:试剂避光保存于2-8℃,若无污染,可稳定至失效期,本试剂有效期为12个月。

试剂不可冰冻。

工作液于2-8℃保存,可稳定7天。

7.4 试剂准备:试剂为即用式。

8. 标准品和质量控制8.1 校准程序:使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求,并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白,经校准测定,仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。

每日在测定前做一次质控。

该质控品为干粉包装,在2-8℃冰箱可稳定到失效期,使用前用5ml去离子水复溶,待质控物充分溶解(大约30分钟)后使用。

8.3质控数据管理:按程序对检验后的质控后结果进行转换,及时质控数据进行分析处理,如出现失控值,应及时分析失控原因,并填写好相关失控记录。

8.4质控判断规则:按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》8.5室间质评:分别参加某地区室间质评,对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。

钙离子试剂盒测定说明书

钙离子试剂盒测定说明书

<BioVision>Calcium Colorimetric Assay Kit钙比色生物试剂盒(Catalog #K380-250; 250 assays; Store kit at 4°C)1.钙相关介绍Calcium is essential for all living organisms, where Ca2+ sequestration and release into and out of the cytoplasm functions as a signal for many cellular processes. 99% of calcium is found in bones and teeth with the remaining 1% found in the blood and soft tissue. Serum calcium levels are tightly controlled (8.4-11.4 mg/dL) and any variation outside this range can have serious effects. Calcium plays a role in mediating the constriction and relaxation of blood vessels, nerve impulse transmission, muscle contraction, and hormone secretion.Calcium ion channels control the migration of calcium ions across cell membranes,permitting the activation and inhibition of a wide variety of enzymes. Causes of low calcium levels include chronic kidney failure, vitamin D deficiency, and low blood magnesium levels that can occur in severe alcoholism. BioVision’s Colorimetric Calcium Assay Kit utilizes thechromogenic complex(λ=575 nm) formed between calcium ions and0-cresolphthalein to provide a simple assay in the physiologically important range of calcium concentration 0.4-100 mg/dL (0.1-25 mM).4℃下避光保存,保质期一年。

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血钙浓度检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号:BC0720规格:50T/48S 产品内容:
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体×1瓶(空瓶,试剂自备)。

取30mL 试剂瓶,依次加入27mL 无水甲醇和3mL 丙酮,盖紧混匀即可。

标准液:液体1mL×1支,2μmol/mL CaCl 2•2H 2O 溶液,4℃保存。

临用前进行10倍稀释得到0.2μmol/mL 标准溶液。

产品说明:
血钙几乎全部存在于血浆中,所以血钙主要指血浆钙。

血浆钙有离子钙和结合钙两种形式,其中只有离子钙直接起生理作用,它与结合钙处于动态平衡,并受血液pH 的影响。

血钙水平与多种重要的生理功能相关,过高或过低都会影响正常生理功能。

本试剂盒用于检测血液中游离钙浓度。

在强碱溶液中游离钙与GBHA 反应生成红色钙-GBHA 复合物,在520nm 有吸收峰;通过测定520nm 吸光度,计算游离钙浓度。

自备仪器和用品:
可见分光光度计、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、无水甲醇、丙酮和蒸馏水。

操作步骤:
1.分光光度计预热30min 以上,调节波长到520nm,蒸馏水调零。

2.加样表:
名称(μL)
空白管标准管测定管血浆--50蒸馏水
50
-
-
0.2μmol/mL标品-50-
试剂一200200200
试剂二200200200
试剂三400400400混匀;静置5min后于520nm测定吸光度A,记为A测定管、A空白管、A对照管。

血钙浓度计算:
血钙含量(μmol/dL)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×100
=20×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:0.2μmol/mL;100:单位换算系数,1dL=100mL。

注意事项:
1、宜早晨空腹采血,并且采血后应该尽快完成测定;
2、尽量在10min内完成测定;
3、因反应完成后需尽快测定,建议每批次测定5-10个样本;
4、若A测定管高于0.8,建议用蒸馏水稀释后测定。

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