口蹄疫疫苗免疫对比试验及疫苗质量问题研究

次对 不 同检测试 剂进行对 比检测 发现 ， 同样 本应 相 用 不 同检 测 试剂 进行 检测 ，检 测 结果存 在 很大 出 入 。本 次试验 口蹄 疫免疫 抗体检测 试剂 ， 咨询 珠 在 海市 出入境检验 检疫局 薄清如博 士后 ， 决定选用 优 耐特 Ｖ １ 剂 。据薄清如 博士介绍 ， Ｐ试 珠海市 出入境 检验 检 疫局 近几 年一 直使 用该 检 测试剂 检 测 口蹄 疫 免疫抗 体 ， 多次检 测对 比发现 ， 检测 试剂 结 经 该
１ ．６ ２ ．０ Ｈ１ ． ％。 ７８ ％、 ５８ ％￣ ２５ ０
Ａ苗推 荐 剂量 组 免疫 抗 体合 格 率 比对 照组 高 ８ ７个 百分 点， ． ７ Ａ苗推荐 剂量 ３ 量组 比对照组 高 倍 １．１ 百 分 点 ， 苗 推 荐 剂 量 组 比对 照 组 高 ３ １ ６ 个 ７ Ｂ ． ４ 个 百分点 ： Ａ苗推 荐剂量 ３倍量 组 比 Ａ苗推荐 剂量 组 高 ７ ４个 百 分 点 ， ． ９ Ａ苗 推 荐 剂 量 ３倍 量 组 比 Ｂ苗 推荐剂量组 高 １ ． 个 百分 点， ３０ ３ Ａ苗推荐剂量组 比 Ｂ 苗推荐剂量组高 ５３ 个 百分点。 ． ６ ２ 口蹄 疫免疫抗 体均值 结果与分析 ． ２ 因本 次试验 免 疫抗 体分 多 批检 测 ，每 批检 测 ＋一 临界 值 不 同， ／” 对照 组与 各试 验组 问 免疫抗 体 均 值 的差 异不 能直 接用 Ｏ Ｄ值 进行 比较 。考虑 到 检 测试剂 的 临界值＝ ． ｘ ０２ 阳性对 照孔平 均 Ｏ ３ Ｄ值 ， 对 各试 验样本 的 Ｏ Ｄ值按 “ 标准 化 Ｏ Ｄ值＝ 始检 原 测 Ｏ Ｄ值／ 相应 检测 批次 的临界值 ”的公式进 行标 准 化 ， 对各 组 标准 化 Ｏ 再 Ｄ值 均值进 行 统计 分析 ， 对 于 比较各 组 间免疫 抗体 均值 差异 仍有 一定 参考 意 义 。据 此公 式 整理 的各 参试 样 本 标准 化 Ｏ Ｄ值
果稳定 、 复性好 。 重 本次 免疫对 比试 验 的检测 结果亦显 示 ， 应用 该
检测试剂检 出的抗体合格率和 抗体均值与疫苗免疫 剂量 具有很好 的相 关性 ： Ａ苗推荐剂 量组和 Ａ苗推 荐剂 量 ３倍量 组采用 同种疫 苗 ， Ａ苗推荐剂 量 组按 说 明书推荐剂量进行 免疫，免疫抗体 合格率仅 比对 照组 高 ８ ７个 百分点 ， 准化 Ｏ ． ７ 标 Ｄ终值均 值仅 比对 照组高 ０２ ５２ Ａ苗推荐 剂量 ３倍量 组加大免 疫剂 ． ； ５ 量， 按说 明书推荐剂量 的 ３ 倍量进行 免疫， 免疫抗体
生理盐 水 １ ， ３个试验组 分别每头颈 部肌 肉注射 ｍＬ Ａ苗 １ Ｌ（ 明书推 荐免疫剂 量） Ａ苗 ３ｍ 说 明 ｍ 说 、 Ｌ（ 书推荐免 疫剂量 ３倍量） Ｂ苗 ｌ Ｌ （ 明书推荐 免 、 ｍ 说 疫 剂 量 ） 。 （） ３ 二免 。 首免 ２ 后 ， ８ｄ 对照组每头颈部肌 肉注 射生理盐 水 ２ｍ ， Ｌ ３个试验 组分别每头颈 部肌 肉注 射 Ａ苗 ２ｍ 说 明书推荐免疫剂 量） Ａ苗 ６ｍＬ 说 Ｌ（ 、 （ 明书推荐 免疫剂量 ３倍量） Ｂ苗 １ｍ （ 明书推荐 、 Ｌ说 免疫剂量） 。 （） ４ 试验 结束 期抗体检 测 。加 强免 疫 ２ ８ｄ后 ， 所有 试验 猪 逐 头前 腔静 脉采 血 ５ｍ ， 离 血清 并 Ｌ分 逐份 做好 耳 号标记 ，送 实验 室做 口蹄疫 免 疫抗 体 检测 。 ２ 结 果 和 分 析 ２１ 口蹄疫免疫抗体合格 率结果与分析 ． 从表 １ 可见 ，未进行相应疫苗免疫或注射 生理 盐 水处 理前 ，对照 组及 各试验 组抗 体合 格 率均 为 ９ ． ％； ４１ ２ 经两 次相 应疫苗免疫 或注射生理 盐水 ２ ８ｄ 后， 对照组 免疫抗体合格 率为 ９０ ％， ． ９ Ａ苗推 荐剂量 组、 Ａ苗 推荐剂量 ３倍量组 、 Ｂ苗推荐剂量组 依次为
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养猪 Ｓ Ｎ Ｒ Ｄ Ｃ Ｉ ＷＩ Ｅ Ｐ Ｏ Ｕ ＴＯＮ（） ２
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应用独立二样本均值差异 ｔ 检验对各试验 组与 对照组 问标准化 Ｏ Ｄ终值均值进行对 比：对照 组为 ０ ５ ＋ ．８ ， ． ２１０ ６３ Ａ苗推荐剂量组为 ０８７３ ０ ８ ， ５ ６ ． ± ． ６２ ０ ７ 比对 照组高 ０ ５ ， ． ５２ 差异 不显著 ； ２ Ａ苗推荐剂量 ３ 倍 量组 为 ０８ ９９ ０８４ ８ 比对照 组 高 ０３ ７８ 差 异 ． ± ．１ ， ５ ． ， ０ 显著 （＜． ） Ｂ苗推荐剂量组为 ０ ４ ± ． １ ， Ｐ０ ５ ； ０ ． ６７ ０ ４ 比 ７ ３ ７
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养 猪 Ｓ Ｎ Ｒ Ｄ Ｔ Ｏ ２ ＷＩ ＥＰ Ｏ ＵＣ Ｉ Ｎ ｆ１ ３３ 关 于母 源 抗 体 对 免 疫 效 果 的 干扰 问题 ＿
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中 图 分 类 号 ：８ ８２ ５３ ￥ ５ ．８ ． 文 献标 志 码 ： Ａ 文章 编 号 ： ０ — ９７２ １ ）２ ０ ９ — ４ １ ２ １ ５ （０ ２０ — ０ ７ ０ ０
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近年 来 ，口蹄疫 的免疫 防控 任务越来 越艰 巨。 对于部分猪场 口蹄疫免疫 失败 的现象 ，有 的学者把 它 归因于 口蹄疫 病毒 的血清 型或基 因系列 变异 ， 然 而 ，事实并不尽然 。近几年珠海市动植物 防疫监督 检验 中心在对珠海地 区 口蹄 疫免疫抗体监测过程 中 发现 ，部分猪场 的口蹄疫免疫抗体完全达不 到有 效 预防 口蹄疫 的要求 ， 的猪场长期不 合格 ， 的猪场 有 有 年 比一 年 差 。 为深入研 究这一‘ 问题 ，０ １ ７ １ 月 ，珠海 ２１ 年 — １ 市动 植物 防 疫监 督检 验 中心组 织珠 海市 安 富来 生 物 科技 有 限公 司在恩 平市 金津 猪场 就 当前养 猪 生 产 中广泛 使用 的某 生物制 药厂 生产 的两 种 Ｏ型 口 蹄疫疫苗进行如下免疫对 比试验 。
合格率 比对照组高 １ ． 个 百分 点， ６７ １ 标准化 Ｏ Ｄ终值 均值 比对照组 高 ０ ０ ， ． ７８ 且标准化 Ｏ ３ Ｄ终值均值 与 对照组对 比差异显 著。 ３ ． 两种 口蹄 疫疫苗的免 疫效果 ２ 本 次试 验选用 的两种 ０型 口蹄疫疫苗 ， 免疫效 果均 不理想 。按 说明书推荐 的免疫剂 量进行 免疫 ， 均无法达到有效预 防 口蹄疫 的要 求。Ａ苗的免疫抗
体合 格率仅有 １ ． ％， ７ ６ Ｂ苗 的免疫抗体合格 率亦仅 ８ 有 １ ． ％。这 一结果， ２５ ０ 与部分猪场 的生产 实际基本 相符 。珠海 地区 Ａ猪场 （０ ８０头基础母 猪规模） Ｂ 和 猪场 （０ ４ ０头基础 母猪规模） 均选用 Ａ苗免疫 ，０日 ７ 龄免疫 １ Ｌ头、８日龄免疫 ２ｍｄ 对 出栏前 （ ／ ９ ｍ ｉ头。 约 １８日龄） ６ 活大猪 口蹄 疫免疫抗体抽样监测 （ 检测试 剂亦 选用 优耐特 Ｖ １ 剂） Ｐ试 结果显 示 ： 者合格 率 前 为 ０ ０２ ） 后者相应亦仅有 １％（／０ 。 （／０ ， ５ ３ ） ２ 对 比 口蹄疫疫 苗的免疫效果 ，不 同来源 的口蹄 疫疫苗差异 非常明显 。恩平市金津猪场选用某 品质 优秀 的口蹄疫疫苗进行 免疫 ，Ｏ日龄和 ９ ７ ８日龄相继 每头免疫 １ 头份 （ ｍＬ 。 ８日龄对仅经过一次免疫的 １ ）９ 猪群抽样检测 （ 检测试剂用优耐特 Ｖ １ Ｐ 试剂 ， 同） 下 ，
表 １ 口蹄疫 免疫抗体检测结果 （ ＯＤ值 ）
注 ：．表示 Ｏ １ ａ Ｄ值 ｔ０ ５ 阳性 ， ＞ ． 为 ３ 否则为 阴性 ； 表示 Ｏ ｂ Ｄ值 １０ ５ 为阳性 ， ＞ ．８１ ３ 否则为 阴性 ； 表示 Ｏ ｃ Ｄ值 ｔ０ ４ ＞ ． ５ ４为阳性 ， ２ 否则
为 阴性 。２Ａ 苗推 荐 剂 量 组 终值 Ｏ 值 数 字 下 标横 线 者 ＯＤ值 Ｉ０２ ５４为 阳性 ， 他 ＯＤ值 ≥Ｏ３ ８ １为 阳性 。 － Ｄ ＞ ． ４ 其 ．５
对照组 高 ０１４６ 差异不显著 。 ． ， ９ 各 试验 组 问标准化 Ｏ Ｄ终值 均值 对 比 ： Ａ苗推 荐剂量 ３ 倍量组 比 Ａ苗推荐剂量组略高 ００ ２６ 差 ． ， ５ 异不显 著 ； Ａ苗推 荐剂量 ３倍量组 比 Ｂ苗推 荐剂 量 组高 ０１３２ ．１ ，差异 不显著 ； Ａ苗推荐剂量 组 比 Ｂ苗 推荐剂量组略高 ００ ０６ 差异不显著 。 ． ， ６
一
１ 材 料 和 方 法 １１ 试 验 材 料 ． （） １试验猪 。试验猪场 ７ ０日龄健康猪 １６头 。 ３ （） ２ 试验 用疫苗 （ 以下 ｘ、 、 Ｘ均仅为代 号， ＹＸ 并 非特指） 。０型 口蹄疫 （ ｘ毒 株） 浓缩 苗 （ 以下 简称 Ａ 苗） 批号 为 Ｈ ｌｌ １；０型 口蹄疫 （ ， １Ｏ ０ Ｊ Ｙ毒株） 浓缩苗 （ 以下简称 Ｂ苗） 批号为 Ｈ１０ ３． 生产 厂家为 Ｘ ， １５ ０； Ｉ Ｘ 生物制药厂 。 （） ３ 检测试 剂 。猪 口蹄疫病 毒 Ｖ １ Ｐ 结构 蛋 白抗 体 酶联 免疫 吸 附试验 诊 断试剂 （ 以下简 称 优耐 特 Ｖ １ 剂） 生产厂家为上海优耐特生物 医药 有限公 Ｐ 试 ， 司 ， 号 为 ２ １ １０ ４ 批 ００２０ 。 １ 方 法 和 步骤 ． ２ （） 验猪挑选和 试验前抗 体检测 。试验猪 场 １试 同一批次 ６ ３日龄健康 、 精神 正常猪 ２ ０头 ， 头打 ０ 逐
２１ ０ ２第 ２期
养猪 Ｓ Ｎ Ｒ ＤＵ Ｔ Ｏ ＷＩ Ｅ Ｐ Ｏ Ｃ Ｉ Ｎ
口 蹄 疫 疫 苗 免 疫 对 比 试 验 及 疫 苗 质 量 问 题 研 究
李儒 曙 赵 庆文 游 淼 冷 和平 伍 时达 ， ， ， ，
（． １ 珠海市动植物 防疫监 督检验 中心 ， 广东 珠海 ５ ９ ０ ；． １０ ０ ２恩平市金津猪场， 广５ｍＬ头 ， 前 ／ 分离血清 并逐份 做好 耳号标记 ， 送珠海 市安富来 生物科 技有 限公司 猪病诊 断实验室做 口蹄 疫免疫抗体检测 。 （） ２ 试验分组和 首免 。根据上述抗体检测结果 ， 挑选 其 中抗体检 测值 最接近 平均值 的猪 １６头 ， ３ 按 配对试验分组方 法分成 ４组， 每组 ３ ４头 。 试验 猪 ７ ０日龄 时，对照组 每头颈 部肌 肉注射