交泰丸干预对氯苯丙氨酸致大鼠失眠的代谢组学研究
中药治疗对氯苯丙氨酸失眠模型大鼠影响的基础研究进展
中药治疗对氯苯丙氨酸失眠模型大鼠影响的基础研究进展失眠作为一种常见的疾患，给人们的正常工作和生活带来严重的不良影响，甚至会诱发或加重多种身体疾病。
目前催眠镇静的药物以苯二氮卓类和巴比妥类为主，虽起效快，但均可引起不可避免的不良反应。
大量研究表明中药治疗失眠具有无成瘾性、依赖性等特点。
腹腔注射氯苯丙氨酸是目前常用的失眠造模方法，通过搜集、整理中药对PCPA诱导失眠模型大鼠影响的实验文献，从动物行为学改变及作用机制等方面进行阐述，以期为研究者更深入地研究中药治疗失眠的机制提供参考。
[Abstract] As a common disorder，insomnia often brings serious effects on people′s normal work and life，and even induces a variety of physical diseases. Although sedative-hypnotic drugs like benzodiazepine and barbiturate effect quickly，they can cause unavoidable side effects. Treatment of insomnia with Chinese medicine has characteristics of no addiction and dependence. PCPA is a universal drug used in insomnia model. This article collects and arranges the experimental literature documents about treatment with Chinese medicine for insomnia rats induced by PCPA，and discuss from animal behavior，and mechanism of action in order to provide reference for researchers.[Key words] Chinese medicine；PCPA；Insomnia；Fundamental research失眠是以频繁而持续的入睡困难和/或睡眠维持困难并导致睡眠感不满意为特征的睡眠障碍。
交泰丸对PCPA大鼠下丘脑5-HT、NE的影响
交泰丸对PCPA大鼠下丘脑5-HT、NE的影响
余运龙;全世建
【期刊名称】《时珍国医国药》
【年(卷),期】2011(22)11
【摘要】目的为了探明交泰丸镇静催眠的作用机理。
方法以PCPA失眠大鼠模型为实验对象,选择中枢神经递质5-HT、NE作为药效学指标,采用高效液相-电化学检测器进行检测。
结果交泰丸中、高剂量组,与模型组比较,NE、5-HT含量有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。
结论交泰丸镇静催眠的药效可能是通过调节中枢神经递质5-HT、NE而发挥作用。
【总页数】2页(P2803-2804)
【关键词】交泰丸;5-HT;NE;镇静催眠
【作者】余运龙;全世建
【作者单位】广州市番禺区沙湾人民医院;广州中医药大学
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.交泰丸对 PCPA 大鼠失眠模型镇静催眠的效果研究 [J], 廖小英;周慧;全世建
2.不同波形电针对PCPA致失眠大鼠下丘脑5-HT和GLu、GABA含量的影响 [J], 蒋洁;赵百孝;哈略;赵华
3.交泰丸对睡眠剥夺大鼠下丘脑Orexin A及γ-氨基丁酸的影响 [J], 全世建;焦蒙
蒙;黑赏艳;钱莉莉
4.交泰丸对PCPA大鼠大脑中逢核5-HT的影响 [J], 余运龙;全世建
5.交泰丸对PCPA失眠大鼠大脑r-氨基丁酸及受体的影响 [J], 余运龙;全世建因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
交泰丸自微乳在失眠模型大鼠体内的药动学研究
交泰丸自微乳在失眠模型大鼠体内的药动学研究白丹妮;魏喜红;沈梦婷;王庆伟;苏瑾【期刊名称】《海南医学院学报》【年(卷),期】2022(28)21【摘要】目的:考察交泰丸自微乳中小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱在失眠大鼠体内的血药浓度经时过程,评价交泰丸自微乳的药代动力学及相对生物利用度。
方法:采用对氯苯丙氨酸(PCPA)腹腔注射法建立失眠大鼠模型,分别灌胃交泰丸自微乳与混悬液,采用UPLC-MS/MS法测定给药后不同时间血浆中小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱的含量,计算药动学参数。
结果:在所建立的色谱条件下,4种成分的线性关系良好,精密度、准确度、稳定性均满足测定生物样品要求。
交泰丸自微乳给药后,小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱的Cmax分别为(412.68±28.45)、(68.65±3.92)、(34.06±3.13)、(40.60±1.22)ng/mL,AUC_(0−∞)分别为(672.70±72.55)、(146.04±25.01)、(71.49±18.67)、(72.25±9.54)ng⋅mL^(-1)⋅h^(-1)。
与混悬液组相比,4个成分在失眠大鼠体内的C_(max)、AUC_(0−t)、AUC_(0−∞)均显著提高(P<0.01)。
结论:自微乳能促进交泰丸有效成分在失眠大鼠体内的吸收,提高其生物利用度。
【总页数】8页(P1614-1620)【作者】白丹妮;魏喜红;沈梦婷;王庆伟;苏瑾【作者单位】佳木斯大学药学院【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.交泰丸对 PCPA 大鼠失眠模型镇静催眠的效果研究2.交泰丸中肉桂对黄连小檗碱在大鼠体内药动学的影响3.交泰丸干预对氯苯丙氨酸致大鼠失眠的作用机制研究4.基于阴阳寤寐学说的交泰丸调节失眠大鼠GABA信号通路的药理作用机制研究5.交泰丸水提液中小檗碱及其单体在大鼠体内药动学比较因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
交泰丸在正常和PCPA失眠大鼠的药动学和PKPD结合模型研究.docx
交泰丸在正常和PCPA失眠大鼠的药动学和PKPD结合模型研究研究生优秀毕业论文pL／min的速度灌流。
以给药后为0点，每30 min收集1管透析液，其中30肛L测定神经递质含量，另30止测定交泰丸中生物碱，持续10 h，将样品放入LC—MS／MS系统进行测定。
结果1．交泰丸主要活性成分小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱和药根碱在血浆的含量测定成功建立了同时测定大鼠血浆中交泰丸主要活性成分小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱和药根碱的分析方法。
该方法简单、灵敏、快捷，需要的血浆量少，分析时间短，且方法学考察符合生物样品检测的要求，可为交泰丸的药动学研究提供可靠又便捷的检测手段。
2．交泰丸单次和多次给药后在正常和PCPA失眠模型大鼠的药动学研究原小檗碱型生物碱在单次给药后正常大鼠体内的生物利用度较差，且达峰时问长，多次给药交泰丸后原小檗碱型生物碱的药动学参数都与单次给药组具有显著性差异，这提示多次给药有可能增加原小檗碱型生物碱在体内的吸收，导致药物在体内的累积。
原小檗碱型生物碱在失眠大鼠体内的吸收比正常组好，生物利用度大大增加，这有利于其在疾病体内迅速达到有效治疗浓度，从而发挥其药理作用。
3．交泰丸主要活性成分小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱和药根碱在脑微透析液中的含量测定成功建立了同时测定大鼠脑微透析液中交泰丸主要活性成分小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱和药根碱的分析方法，该方法在原有方法的基础上，优化了色谱条件，达到了更低的定量下限，缩短了分析时间，并且简化了样品处理过程，使得方法操作简便有效。
专属性、准确度、精密度、线性、稳定性、交互效应和柱后效应考察结果表明该方法符合生物样品检测要求。
4．交泰丸主要活性成分在正常和失眠模型大鼠的PK—PD结合模型研究正常组与模型组的脑内药动学行为具有显著性差异，模型组五个原小檗碱型生物碱的生物利用度高于正常组，此外，对比血浆药动学的研究结果，五个原小檗碱型生物碱的脑部药动学与血浆药动学行为显著不同(主要表现为C。
失眠动物模型HPA轴和表观遗传修饰的变化及交泰丸的干预作用
失眠动物模型HPA轴和表观遗传修饰的变化及交泰丸的干预作用赵俊云;杨晓敏;胡秀华;曹;简郭血骄;杨向竹;郭健【摘要】目的:探讨交泰丸对PCPA致失眠大鼠血清HPA轴和表观遗传修饰的影响.方法:腹腔注射PCPA复制大鼠失眠模型,灌胃交泰丸干预3 d,ELISA法检测外周血血清HPA轴激素ACTH、CORT、CRF水平及表观遗传修饰主要酶DNMT1、HDAC的活性和血清Acetyl-Histone H3的水平.结果:PC-PA致失眠大鼠的血清HPA轴激素水平上升,但与正常组无显著差异,交泰丸干预可显著降低失眠大鼠的血清HPA轴激素水平.失眠大鼠的血清DNMT1活性较正常组显著上升,交泰丸干预可显著降低失眠大鼠的血清DNMT1活性. PCPA致失眠大鼠的血清Acetyl-Histone H3水平上升,但与正常组无显著差异,交泰丸干预可显著降低失眠大鼠的血清Acetyl-Histone H3 水平.结论:交泰丸可通过调节HPA轴激素水平治疗心肾不交型失眠.交泰丸可能通过DNA去甲基化以及组蛋白乙酰化等表观遗传修饰恢复机体的内稳态.%Objective: To investigate the effect of Jiaotai Pill on serum HPA axis and epigenetic modification in PCPA-induced insomnia rats. Methods: The model of insomnia was induced by intraperitoneal injection of PCPA in rats. The rats were administrated with JiaotaiPill(Cinnamon:Berberine=10:1) for 3 days. Levels of ACTH, CORT, and CRF, enzyme activities of epigenetic modification, such as DNMT1 and HDAC, as well as serum level of Acetyl-Histone H3 were measured by means of ELISA mothod. Results: Serum hormones of HPA-axis were increased in PCPA-induced insomnia rats, but there was no significant difference between the model rats and the normal rats; Jiaotai Pill could sig-nificantly reduce thehormone levels. Activity of serum DNMT1 was significantly higher in the insomnia rats than that in the normal rats; which could be obviously reduce by the intervention of Jiaotai Pill. Serum levels of Acetyl-Histone H3 was increased in insomnia rats, however, there was no significant difference between the insomnia rats and the normal rats. Jiaotai Pill could significantly reduced the level of Acetyl-Histone H3. Conclusion: Jiaotai Pill can regulate the hormone levels of HPA -axis when treating insomnia of the pattern of abnormal physiological coordiantion between heart-yang and kidney-yin, which is achieved by restoring homeostasis and by epigenetic modifications, such as DNA demethylation and histone acetylation.【期刊名称】《中医药学报》【年(卷),期】2018(046)004【总页数】3页(P19-21)【关键词】失眠;交泰丸;HPV轴;表观遗传修饰【作者】赵俊云;杨晓敏;胡秀华;曹;简郭血骄;杨向竹;郭健【作者单位】北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029;北京中医药大学,北京100029【正文语种】中文【中图分类】R285.5失眠为睡眠障碍中最为常见的类型，其主要表现为入睡困难、早醒、睡眠质量低下和睡眠时间减少，继而造成注意力下降、记忆力减退等生理学改变。
交泰丸对PCPA大鼠失眠模型镇静催眠的效果研究-综合医学论文
交泰丸对PCPA大鼠失眠模型镇静催眠的效果研究-综合医学论文交泰丸对PCPA大鼠失眠模型镇静催眠的效果研究廖小英：广州市番禺区沙湾人民医院广东广州511483周慧：广州市番禺区市桥人民医院广东广州511490全世建：广东省中医药大学广东广州510405交泰丸对PCPA大鼠失眠模型镇静催眠的效果研究廖小英周慧全世建SEDATION AND HYPNOSIS EFFECT OF JIAOTAI PILLS ON RAT INSOMNIA IN PCPA RAT MODELLIAO Xiaoying, ZHOU Hui, QUAN Shijian【摘要】目的探讨交泰丸镇静催眠的药效。
方法建立PCPA（对氯苯丙胺酸）大鼠失眠模型，将动物分组，分为模型组、交泰丸高、中、低剂量组及地西泮阳性对照，采用高效液相检测方法，观察交泰丸对失眠模型失眠状态（失眠状态观察什么？）及下丘脑中枢神经递质5－HT及GABA的影响。
结果交泰丸滴丸高、中剂量及地西泮组与模型组相比，大鼠失眠状态及均中枢神经递质5－HT均有显著性差异，但交泰丸高、中剂量组与模型组相比，中枢神经递质GABA无显著性差异。
结论交泰丸滴丸具有镇静催眠药效，其作用机理可能与影响中枢神递经质5-HT有关，与中枢神经递质GABA关系不明显，本研究对进一步开发交泰丸具有重要意义。
【关键词】交泰丸高效液相检测方法药效学研究【Abstract】ObjectiveTo discuss the sedative and hypnotic effect of Jiaotai Pills on insomnia in PCPA rat model. MethodsThe PCPA (PCPA acid) rats insomnia model was established, and the rats were divided into the model group, high, middle and low dosage of Jiaotai Pills group, and diazepam positive control group. The high performance liquid detective method was adopted to observe the effect of Jiaotai Pills on rat insomnia and hypothalamus neurotransmitters 5-HT and GABA. ResultsCompared with the model group, there existed significant difference in the insomnia state of rats and the central neurotransmitters 5 - HT in the high and middle dosages of Jiaotai Pill group and diazepam group. However, in the comparison of the high and middle dosages of Jiaotai Pill group and the model group, there was no significant difference in GABA in the central nervous system. ConclusionJiaotai Pills has sedative and hypnotic efficacy. Its mechanism may be related to the effects of central neurotransmitter 5-HT. Its relationship with GABA in the central nervous system is not obvious. The research has significant influence on thefurther development of Jiaotai Pills.【Key words】Jiaotai Pill; high-performance liquid chromatography method for detection; pharmacodynamic study【Author′s address】Shawan Peopleacute;s Hospital, Panyu District, Guangzhou, Guangdong, 511483, Chinadoi:10.3969/交泰丸源自明·韩懋《韩氏医通》，名见清·王士雄《四科简要方》。
针灸治疗对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠模型大鼠基础研究进展
针灸治疗对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠模型大鼠基础研究进展王红;吴建丽;王晓磊;杜冬梅;王天琪;王薇【摘要】针灸干预治疗对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导失眠模型大鼠的实验文献进行搜集、整理,发现与针灸改善失眠作用相关的基础研究主要集中在动物行为学、免疫功能、神经递质系统、氧化应激反应等方面,研究表明针灸是通过对这些异常的生物学行为或微观分子产生良性调节作用,以神经-体液调节为基础的多靶点、多途径发挥改善睡眠作用.本研究对这些研究文献进行综述,一方面表明了针灸促眠作用的有效性,为临床治疗提供依据,另一方面分析了当前探索针灸改善睡眠机制研究中存在的问题和不足,并对今后的研究提出了建议和期望.%This article collects and arranges the experimental literature documents about acupuncture treatment for insomnia rats induced by PCPA.The results show that the fundamental research of acupuncture for treating insomnia mainly focuses on the basis of animal behavior,immune function,neurotransmitter systems,oxidative stress,etc.These studies show that acupuncture has the effect on improving sleep based on nervous-humoral regulation of multiple targets and pathways by producing benign adjustment to abnormal biological behavior or microscopic molecular.This literature review not only shows the effect of acupuncture on promoting sleep and provides the basis for clinical treatment,but it also analyzes the currently existing problems and shortcomings in the research of the mechanism of acupuncture and puts forward some suggestions and expectations for the future research.【期刊名称】《针灸临床杂志》【年(卷),期】2017(033)002【总页数】4页(P76-79)【关键词】针灸;对氯苯丙氨酸;基础研究;失眠;综述【作者】王红;吴建丽;王晓磊;杜冬梅;王天琪;王薇【作者单位】黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040【正文语种】中文【中图分类】R246.1失眠(Insomnia)是指入睡困难、睡眠时间过短、睡眠深度过浅或无法维持睡眠状态，导致较长时间内睡眠的质和量都不能令人满意，身体的精力和体力不能及时恢复而影响日常活动的一种主观体验[1]，中医学称为“不寐”“不得眠”等。
26199229_交泰丸对睡眠剥夺大鼠下丘脑GABA受体基因表达的影响
２０２１年 １１月第 ８卷第 １１期 Ｎｏｖｅｍｂｅｒ．２０２１，Ｖｏｌ．８，Ｎｏ．１１世界睡眠医学杂志 ＷｏｒｌｄＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｌｅｅｐＭｅｄｉｃｉｎｅ１ ８６７交泰丸对睡眠剥夺大鼠下丘脑 ＧＡＢＡ 受体基因表达的影响张瑜１ 唐娜娜２ 王秀峰１ 黄俊山１（１福建省中医药科学院，福建省中医睡眠医学重点实验室，黄俊山福建省名老中医药专家传承工作室， 福州，３５０００３；２江西中医药大学附属医院，南昌，３３０００６）摘要 目的：观察交泰丸对睡眠剥夺大鼠下丘脑 γ氨基丁酸（ＧＢＡＢ）受体基因表达的影响，寻找其药物靶点。
方法：采用 腹腔注射对氯苯丙氨酸（ＰＣＰＡ）建立失眠大鼠模型，造模成功后给予交泰丸及 ＧＢＡＢ受体（ＧＢＡＢＡ，ＧＡＢＡＢ）激动剂或抑 制剂单独和联合给药 １４ｄ。
实验结束后，通过 ＲＴＰＣＲ方法检测各组大鼠下丘脑组织中 ＧＢＡＢＡ和 ＧＡＢＡＢ受体 ｍＲＮＡ的 表达情况。
结果：与对照组比较，模型组大鼠下丘脑 ＧＢＡＢＡ和 ＧＡＢＡＢ受体 ｍＲＮＡ的表达均显著下调（Ｐ＜００５）。
与模 型组比较，交泰丸可以显著上调睡眠剥夺大鼠下丘脑 ＧＢＡＢＡ和 ＧＡＢＡＢ受体 ｍＲＮＡ的表达（Ｐ＜００５）。
交泰丸与 ＧＡＢＡ 受体（ＧＡＢＡＡ受体或 ＧＡＢＡＢ受体）激动剂联合，同样显著增加失眠大鼠 ＧＡＢＡＡｍＲＮＡ、ＧＡＢＡＢｍＲＮＡ的表达量（Ｐ＜ ００５）。
结论：交泰丸可以通过上调睡眠剥夺大鼠下丘脑 ＧＡＢＡ受体（ＧＡＢＡＡ受体或 ＧＡＢＡＢ受体）ｍＲＮＡ的表达来改善 睡眠，交泰丸有类似 ＧＡＢＡ受体激动剂的效应。
关键词 交泰丸；睡眠剥夺；ＧＡＢＡ受体ＥｆｆｅｃｔｏｆＪｉａｏｔａｉＰｉｌｌｏｎＧＡＢＡ ＲｅｃｅｐｔｏｒＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＨｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓｏｆＳｌｅｅｐｄｅｐｒｉｖｅｄＲａｔｓ ＺＨＡＮＧＹｕ１，ＴＡＮＧＮａｎａ２，ＷＡＮＧＸｉｕｆｅｎｇ１，ＨＵＡＮＧＪｕｎｓｈａｎ１（１ＦｕｊｉａｎＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＦｉｊｉａｎＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＳｌｅｅｐＭｅｄｉｃｉｎｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ， ＴｈｅＩｎｈｅｒｉｔａｎｃｅＳｔｕｄｉｏｏｆＦｕｊｉａｎＦａｍｏｕｓＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＥｘｐｅｒｔＨＵＡＮＧＪｕｎｓｈａｎ，Ｆｕｚｈｏｕ３５０００３，Ｃｈｉｎａ；２ＪｉａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３０００６，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＪｉａｏｔａｉｐｉｌｌｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆγａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄ（ＧＢＡＢ）ｒｅｃｅｐｔｏｒｇｅｎｅｉｎｈｙｐｏ ｔｈａｌａｍｕｓｏｆｓｌｅｅｐｄｅｐｒｉｖｅｄｒａｔｓ，ａｎｄｔｏｆｉｎｄｉｔｓｄｒｕｇｔａｒｇｅｔＭｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅｒａｔｍｏｄｅｌｏｆｉｎｓｏｍｎｉａｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆｐｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ（ＰＣＰＡ）Ａｆｔｅｒｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｍｏｄｅｌｉｎｇ，ＪｉａｏｔａｉｐｉｌｌａｎｄＧＢＡＢｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＧＢＡＢＡ，ＧＡＢＡＢ）ａｇｏｎｉｓｔ ｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｗｅｒｅｇｉｖｅｎａｌｏｎｅｏｒｉｎｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｆｏｒ１４ｄａｙｓＡｆｔｅｒｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｈｅｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＧＢＡＢＡａｎｄＧＡＢＡＢ ｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｔｈｅｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓｏｆｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＲＴＰＣＲＲｅｓｕｌｔｓ：Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｍＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＧＢＡＢＡａｎｄＧＡＢＡＢｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓｏｆｒａｔｓｉｎｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｄ（Ｐ＜００５）． Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ＪｉａｏｔａｉｐｉｌｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄｔｈｅｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＢＡＢＡａｎｄＧＡＢＡＢｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｈｙｐｏ ｔｈａｌａｍｕｓｏｆｓｌｅｅｐｄｅｐｒｉｖｅｄｒａｔｓ（Ｐ＜００５）ＪｉａｏｔａｉｐｉｌｌｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈＧＡＢＡｒｅｃｅｐｔｏｒａｇｏｎｉｓｔ（ＧＡＢＡＡｒｅｃｅｐｔｏｒｏｒＧＡＢＡＢｒｅｃｅｐ ｔｏｒ）ａｌｓｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＡＢＡＡｍＲＮＡａｎｄＧＡＢＡＢｍＲＮＡｉｎｉｎｓｏｍｎｉａｒａｔｓ（Ｐ＜００５）Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ： ＪｉａｏｔａｉｐｉｌｌｃａｎｉｍｐｒｏｖｅｓｌｅｅｐｂｙｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＡＢＡｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＧＡＢＡＡｒｅｃｅｐｔｏｒｏｒＧＡＢＡＢｒｅｃｅｐｔｏｒ）ｉｎ ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓｏｆｓｌｅｅｐｄｅｐｒｉｖｅｄｒａｔｓＪｉａｏｔａｉｐｉｌｌｈａｓｓｉｍｉｌａｒｅｆｆｅｃｔｔｏＧＡＢＡｒｅｃｅｐｔｏｒａｇｏｎｉｓｔ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ Ｊｉａｏｔａｉｐｉｌｌ；Ｓｌｅｅｐｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ；ＧＡＢＡｒｅｃｅｐｔｏｒｓ 中图分类号：Ｒ２８９５ 文献标识码：Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５－７１３０．２０２１．１１．００２ 睡眠是正常的生理活动之一，睡眠剥夺会引起 机体一系 列 不 良 反 应，影 响 人 的 正 常 工 作 和 生 活。
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交泰丸干预对氯苯丙氨酸致大鼠失眠的代谢组学研究为了阐明交泰丸干预对氯苯丙氨酸致大鼠失眠的药效及作用机制，SD大鼠一次性腹腔注射PCPA建立失眠模型，试验期间观察大鼠自发活动变化，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清神经生长因子（nerve growth factor，NGF）水平，并利用核磁共振氢谱（H-NMR）代谢组学技术建立大鼠血清及海马组织代谢物谱，分析交泰丸干预下大鼠自发活动，NGF 水平及与失眠相关潜在生物标志物的变化。
结果显示交泰丸能明显抑制失眠大鼠的自发活动，显著升高失眠大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中NGF水平。
交泰丸能对失眠所致大鼠血清和海马组织代谢紊乱产生有效的干预，并分别对血清和海马组织中6种和5种与失眠相关潜在生物标志物产生显著的回调。
研究表明交泰丸干预PcPA所致失眠的机制可能与调节NGF水平及调控机体氨基酸代谢、脂质代谢和胆碱代谢有关。
标签：交泰丸；失眠；代谢组学；核磁共振；对氯苯丙氨酸失眠是一个严重的健康问题，随着现代社会心理压力增加，失眠发病率逐年升高，因此提高睡眠质量对公众健康有着重要意义。
交泰丸记载于明代《韩氏医通》，由黄连和肉桂10：1配伍而成，方中黄连大寒大苦，清泄亢盛之心火，肉桂辛甘大热，助阳补火，两药配伍交通心肾，对心肾不交型不寐具有显著效果。
全世建等研究显示交泰丸治疗失眠的机制与调节下丘脑.垂体.肾上腺轴（HPA轴）的功能以及相关神经递质如促肾上腺皮质激素（ACTH）、促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）、肾上腺分泌的皮质酮（CORT）、5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）和肾上腺素（E）有关。
代谢组学采用自上而下的策略，将机体作为一个整体性的系统，从代谢网络的终端症状反映机体状况，阐明药物靶点相关干预。
目前尚未见交泰丸治疗失眠代谢组学研究的报道。
本研究采用H-NMR代谢组学方法探讨对氯苯丙氨酸（p-chlorophe.nylalanine，PCPA）致失眠及交泰丸干预下大鼠血清及海马组织的代谢指纹谱变化，阐明交泰丸干预失眠药效及作用机制。
1材料1.1实验动物雄性SD大鼠，180～200 g，购自中山大学实验动物中心，SPF 级，许可证号SCXK（粤）2011-0029。
1.2药品与仪器黄连和肉桂饮片购自广州采芝林大药房，经广东药科大学中药学院韩彬教授鉴定为正品；PCPA甲酯盐酸盐购自嘉兴思诚化工有限公司（批号MAYA-CR-912，纯度>98%）；蛋白含量测定和神经生长因子（nerve growth factor，NGF）试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；蛋白酶抑制剂Cocktail 购自美国Biotool公司；磷酸盐缓冲液（PBS）和氘水（D：0）均购自美国Sigma公司；ELX.808酶标仪（美国BioTek公司）；Bruker A V ANCEⅢ500 MHz全数字化超导核磁共振谱仪（瑞士Bruker公司）；UV-2401.PC型紫外.可见分光光度计（日本岛津公司）。
1.3交泰丸水提液的制备精确称取适量黄连、肉桂，以黄连和肉桂10：1混合，加10倍量水，浸泡1h，煎煮2次，每次1h，合并2次滤液，水浴浓缩至生药浓度0.5 g·mL-1。
2方法2.1模型建立及给药方法参考文献方法，将36只雄性SD大鼠置于12h光照和12h黑暗环境（温度22℃，相对湿度50%）下自由饮食。
适应3d后随机分正常组、模型组和交泰丸组。
交泰丸组灌胃交泰丸水提液（5 g·kg-1），每天1次，连续5d，对照组和模型组灌胃等体积生理盐水。
实验第3天，模型组和交泰丸组一次性腹腔注射PCPA 甲酯盐酸盐（564 mg·kg-1，相当于PCPA 450 mg·kg-1）建立失眠模型，正常组一次性腹腔注射等体积生理盐水。
末次给药3h后，每组一半动物用于测量下丘脑、海马、前额叶皮质和血清NGF水平，另一半动物用于血清及海马组织代谢组学分析。
2.2大鼠自发活动试验试验开始前将大鼠置于干净的饲养笼中提前适应3min，记录各组大鼠2min内自发活动时间和前肢离地举立次数作为正常活动反应指标。
末次给药后1h再次测量各组大鼠上述指标。
2.3大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清采集、处理及NGF水平检测大鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，收集的血液样品经凝固（4℃，60min）后离心（3500 r·min～，15min，4℃）得到血清。
冰上分离出大鼠下丘脑、海马和前额叶皮质，用冰冷的生理盐水冲洗，滤纸拭干称重。
各部分脑组织加入9倍量PBS（含1%蛋白酶抑制剂Cock.tail）冰水浴中匀浆，离心（3500 r·min-1，152in，4℃）得到上清液。
血清和组织上清液按试剂盒说明书操作进行NGF指标检测，并采用考马斯亮蓝法（Bradford法）测定组织样品蛋白含量。
数据以x±s 表示，采用SPSS17.0软件进行单因素方差分析，多组均数间的两两比较采用Tukey检验，P＜0.05认为差异有统计学意义。
2.4大鼠血清、海马组织采集、处理及H-NMR测定大鼠乙醚吸入麻醉后眼眶后静脉丛取血，收集的血液样品经凝固（4℃，60min）后离心（3500r·min-1，15min，4℃）得到血清，将400μL血清加入到5mm NMR测试管中，然后加入50μL磷酸缓冲液（0.2mol·L-1Na2 HP04-0.2 tool·L-1振蕩混匀，待测。
冰上分离出大鼠海马组织，在冰水浴中用50%乙腈溶液匀浆（5 mL·g-1海马组织），离心（12 000 r·min-1，10min，4℃）后取上清液750μL冻干，冻干物用450μL磷酸缓冲液（0.2 tool·L-1磁管中。
H-NMR测试时，实验温度为298 K，血清样本采用Carr-Purcell-Meibom-Gill（CPMG）脉冲序列抑制血清中蛋白质及脂蛋白较宽的共振信号，总的回波时间100ms，弛豫延迟时间4s，采样时间3.28 s。
海马组织样本采用预饱和的DNOESY脉冲序列压制水峰，弛豫延迟时间2s，采样时间1.64 s。
血清和海马组织样本谱宽10kHz，采样点数64 K，采集次数128次。
2.5H-NMR图谱处理及多变量数据分析采用线宽为0.3 Hz的指数窗函数进行傅立叶变换。
采用软件MestReNova 6.1（西班牙Mestrelab Research公司）对所获谱图进行手动相位和基线校正后，对血清和海马组织样本，分别参照乳酸的甲基共振双重峰）和TSP对H-NMR谱的化学位移进行定标。
在6 0.5～9.5区域按0.01等间隔分段积分，对于血清和海马组织样本，分别将区域64.68～5.22，6 4.53～5.30设为0积分段。
然后将图谱积分值输出到Excel 2010（Microsoft Inc，Belle.vue，WA）中，对各分段积分值进行归一化处理。
归一化所得数据乘以1万后导入SIMCA-P12.0（Umetrics AB，Umea，Sweden），经Pareto标度化预处理后，进行正交偏最小二乘判别分析（orthogonalpartial least-squares discriminant analysis，OPLS-DA）。
3结果3.1交泰丸对大鼠自发活动的影响试验开始前各组大鼠自发活动时间和前肢离地举立次数没有明显差异。
末次给药后1h，与正常组相比，模型组大鼠2min 内自发活动时间和前肢离地举立次数明显增加（P＜0.05），与文献报道一致，表明失眠模型建立成功。
交泰丸组较模型组自发活动明显减少（P＜0.05），表明交泰丸能明显抑制失眠大鼠自发活动，见表1。
3.2交泰丸对失眠大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清NGF水平的影响与正常组比较，模型组大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中NGF水平均显著性降低（P＜0.05）；与模型组比较，交泰丸组大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中NGF水平均显著性升高（P＜0.05），表明交泰丸能显著回调失眠引起的大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中NGF水平的降低，提示交泰丸能通过调节NGF水平来有效干预失眠，见表2。
3.3血清和海马组织的H-NMR代谢物谱分析大鼠血清和海马组织的H-NMR 见图1，2。
代谢物谱峰的归属主要是依据化学位移值、峰的裂分隋况、耦合常数及参考文献报道。
3.4PCPA致失眠模型大鼠血清和海马组织代谢指纹谱的变化对照组和模型组的血清和海马组织样本点在PCI维可以完全区分开，说明PCPA诱导失眠后大鼠机体生理及物质代谢状况已经发生了明显的改变。
本研究采用7倍交叉验证法分别对OPLS-DA模型的可靠性进行验证，得到了OPLS-DA模型的主要参数，血清：海马组织。
从上述参数可以看出本研究建立的模型具有较高的可靠性，结果见图3A，B。
3.5表征代谢物谱差异的潜在生物标志物本研究使用OPLS-DA模型中变量重要性投影（variableimportance in the projection，VIP）参数评价潜在的生物标志物。
选取VIP>1的差异变量，再用t检验对筛选到的差异变量在对照组和模型组间进行验证，只有P＜0.05的差异变量才被认为是潜在的生物标志物。
按照上述原则，最终在血清和海马组织中分别筛选得到8种和7种具有显著差异的化合物，见表3，4。
3.6交泰丸对PCPA致失眠模型大鼠血清和海马组织代谢紊乱的干预作用交泰丸组样本点与模型组样本点可以完全分离，且与正常组样本点接近，表明交泰丸能有效干预失眠。
同时，交泰丸能分别使失眠大鼠血清和海马组织中6种和5种潜在生物标志物显著性回调（表3，4）。
从上述结果可以看出交泰丸能对PCPA 失眠模型大鼠血清和海马组织代谢紊乱产生有效的干预作用。
4讨论PCPA诱导的大鼠失眠模型是目前被广泛接受的用来研究失眠机制和药效评价的模型之一。
PC.PA可以选择性作用于色氨酸羟化酶，抑制大鼠大脑5.HT合成，造成睡眠昼夜节律消失，几乎达到完全失眠。
本研究中模型组较正常组大鼠自发活动显著增加，表明失眠模型建立成功。
同时，失眠大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中NGF水平均显著降低，并利用代谢组学技术分别从大鼠血清和海马组织中筛选出8种和7种与失眠有关的潜在生物标志物。
NGF广泛存在于参与睡眠.觉醒的胆碱能神经元中，由海马和脑皮质产生的NGF可通过胆碱能神经逆行运输至前脑基底核，维持胆碱能神经元的存活和功能，NGF水平的降低会导致快动眼睡眠时间减少，觉醒时间延长。
其通过与神经元和轴突末梢的激酶受体结合，诱导快动眼睡眠，是快动眼睡眠产生和觉醒抑制作用机制的内在调节器。