果蝇的遗传分析(双因子杂交实验)
果蝇的双因子杂交论文
果蝇双因子杂交试验摘要：果蝇具有容易饲养，生活周期短，生长迅速，繁殖力强，后代数量多等优点，因而常被作为模式生物进行遗传学研究。
实验通过对黄体对黑体，长翅对残翅两对性状的杂交实验所得结果验证了独立分配定律，对试验结果进行了X2测验并分析了其中的影响因素。
关键词：果蝇双因子独立分配规律X2测验前言：果蝇(Drosophila melanogaster)属双翅目小型昆虫，是经典的遗传学实验材料。
摩尔根的论断，其学生穆勒则开创了x射线诱变的先河。
作为一种良好的动物实验材料,果蝇具有生长迅速,繁殖力强;后代数量大,便于统计分析;个体小,外饲养管理方便;变异类型多,易于观察和杂交组合;染色体巨大,且数量较少,便于观察研究等优点。
通常作为遗传学实验材料的果蝇是果蝇属（Drosophila）的黑腹果蝇(D.melanogater)。
果蝇广泛地存在于全球温带及热带气候区，而且由于其主食为腐烂的水果，因此在人类的栖息地内如果园，菜市场等地区内皆可见其踪迹。
果蝇的整个生活史包括卵、幼虫、蛹、和成虫。
果蝇在生命科学领域的研究价值主要存在于两个方面:一方面是果蝇本身作为被研究对象供人们研究;另一方面是果蝇作为一种模式生物被应用于生命科学研究的各个领域,果蝇的研究具有非凡的意义。
因此选择果蝇作为实验的亲本材料，通过其F1，F2代的统计分析来研究其体色（黄体对黑体），及翅长（长翅对残翅）的遗传方式。
1实验材料与实验方法：1．1实验材料：黄体残翅（♂）×黑檀体长翅（♀）1．2 实验方法与步骤1．2．1 果蝇形状特征鉴别观察附表二果蝇成虫的雌雄鉴别方法雄蝇雌蝇肉眼鉴别体形较小体形较大。
腹部呈圆桶状，尾端钝圆呈黑色。
腹部呈椭圆形，尾端尖长。
腹部背面有3条细黑纹及1条宽黑纹致使尾端呈一明显黑点。
腹部背面有5条排列均匀的黑色横纹，见明显黑点。
腹部可见4个腹片。
腹部可见6个腹片解剖镜下鉴别腹部尾端可见抱握器及阴茎。
腹部可见生殖孔和腔板。
双因子杂交、伴性遗传和三点测交遗传实验报告
生命科学学院遗传学实验报告实验五六七：双因子杂交、伴性遗传和三点测交一、实验目的：1、通过对果蝇的杂交实验，正确理解分离定律的实质，并验证与加深理解三个的遗传规律。
2、认识伴性遗传的正、反交差别，掌握伴性遗传的特点。
3、掌握绘制遗传学图的原理和方法，加深对重组值、遗传学图、双交换、并发率和干涉等概念的理解。
4、掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理的方法。
二、实验器材：1、材料： 18号果蝇（野生型）及三种突变体果蝇即14号果蝇（黒身残翅）、w号果蝇（白眼）和6号果蝇（白眼卷刚毛小翅）2、试剂：乙醇、乙醚、果蝇培养基等3、器具：麻醉瓶、酒精灯、白瓷板、毛笔、镊子、培养管、棉球等三、实验原理：果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便、染色体数目少（2n=8）和突变性状多等特点，是研究遗传学的好材料。
本次设计实验就是利用果蝇进行一系列的遗传学验证实验和染色体基因相对顺序和距离的测定，下面简要介绍关于双因子杂交、伴性遗传和三点测交的基本原理。
1、双因子杂交：果蝇的灰体基因（E）与黑檀体基因（e）为一对相对性状，位于ⅢR70.7位置，而长翅（Vg）与残翅（vg）为另一对相对性状，位于ⅡR67.0位置。
这两对基因是没有连锁关系的，位于不同染色体上的非等位基因。
因此非同源染色体的这两对非等位基因可以很好的验证自由组合定律。
自由组合规律：位于非同源染色体上的两对非等位基因，其杂合体在形成配子时，等位基因彼此分离，进入不同的配子中，非等位基因可自由组合进入同一配子，结果产生4种比例相等的配子。
若显性完全， F1自交产生F2代表现出4种表型，比例为9：3：3：1。
双因子杂交的遗传规律：双因子杂交正交双因子杂交反交18♀×14♂ 14♀ × 18♂2、伴性遗传：位于性染色体上的基因叫作伴性基因，其遗传方式与位于常染色体上的基因有一定差别，它在亲代与子代之间的传递方式与雌雄性别有关，伴性基因的这种遗传方式称为伴性遗传（sex-linked inheritance ）。
实验二果蝇的双因子实验
实验二果蝇的双因子实验引言：果蝇（Drosophila melanogaster）是被广泛应用于遗传学研究的经典模式生物。
它拥有短的世代间隔、易于繁殖和培养，且具有丰富的遗传工具和资源，因此被用来研究多种生命现象。
本实验旨在通过进行果蝇的双因子实验，对果蝇的基因互作进行研究，揭示其遗传规律。
通过交叉杂交基因型不同的果蝇并观察后代群体的表型分布，我们可以推断不同基因之间的相互作用关系。
材料与方法：1.果蝇培养器；2.采集的野生型果蝇；3.各种突变型果蝇（例如白眼果蝇、翅脉丧失果蝇等）；4.容器和培养基（用于培养果蝇）；5.显微镜和显微镜玻片。
实验步骤：1.建立草果蝇的基因库：分别捕捉野生型和各种突变型果蝇，建立其基因库以保证实验的供给；2.选定两个突变型果蝇：从基因库中选出两个具有突变表型的果蝇，例如白眼果蝇和翅脉丧失果蝇；3.进行双因子交叉杂交：将白眼果蝇和翅脉丧失果蝇进行交叉杂交，产生F1代杂交种；4.分析F1代杂交种的表型分布：观察F1代杂交种群体的表型分布，统计白眼和翅脉丧失的个体数量；5.分离F1代个体：将F1代个体分离并进行单独培养；6.分析F2代个体的表型分布：观察F2代个体的表型分布，统计白眼和翅脉丧失的个体数量；7.统计与推断：根据F2代个体的表型分布，进行数据统计和推断双因子的遗传关系。
结果与讨论：在进行双因子实验后，观察到F2代果蝇群体中白眼果蝇占比为25%，翅脉丧失果蝇占比为25%，白眼和翅脉正常的果蝇各占比25%。
根据这些数据，我们可以推断果蝇的白眼和翅脉丧失是由两个基因的双重显性突变所导致。
通过这个实验，我们不仅可以揭示果蝇基因的互作关系，还可以更深入地了解基因的表达和功能。
此外，通过观察果蝇表型的变异，我们还可以研究基因的表达调控和胚胎发育等生命过程。
总结：通过果蝇的双因子实验，我们可以揭示基因之间的互作关系，从而更好地理解基因的遗传规律。
果蝇作为经典的遗传学模型生物，为我们提供了研究基因的工具和资源。
实验四 果蝇的单因子和双因子杂交
实验四果蝇的单/双因子杂交实验（6学时）一．实验目的1 掌握果蝇单/双因子的杂交方法和杂交结果的统计处理方法，验证并加深理解遗传的自由组合定律和分离定律的原理．2 记录单/双因子杂交结果，掌握数据统计处理方法．二．实验原理按照孟德儿第一定律，即分离定律，基因是一个独立的单位。
基因完整地从一代传递到下一代，有该基因的显隐性决定其在下一代的形状表现．一队杂合状态的等位基因保持相对的独立性，在减数分裂形成继配子时，等位基因随同源染色体的分离而分配到不同的配子衷曲。
理论上配子的分离比是１∶１，即产生带Ａ和a基因的配子数相等，因此，等位基因杂合体的自交后代表现为基因型分离比ＡＡ:Aa:aa是1:2:1，如果显性完全，其表型分离比为3:1，这就是分离定律的基本内容。
通过果蝇一队因子的杂技哦啊实验，即可以验证它．位于非同源染色体上的两对基因，在减数分裂形成配子时可以自由组合；又由于配子的随机结合，导致它们所决定的两对相对性状在杂种第二代是自由组合的．一对基因所决定的性状在杂种二代是３：１之比，两对不相互连锁的基因所决定的性状，在杂种二代就呈９：３：３：１之比．三．材料与用品１．材料饲养的野生型和几种常见突变型果蝇。
单因子杂交实验可选用黑腹果蝇的长翅纯合体、残翅纯合体作为实验材料．双因子杂交实验可选用黑腹果蝇的长翅灰体、残翅黑檀体作为实验材料．２．用具及药品⑴．用具双筒解剖镜、显微镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、培养瓶、白瓷板、毛笔、棉塞、软木塞或橡胶塞、恒温培养箱、小滴瓶、载片、盖片、吸水纸、纱布等．⑵．药品琼脂、蔗糖、乙醇、氯仿、丙酸、玉米粉、酵母粉．四．实验步骤（一）⑴．选择处女蝇将长翅果蝇和残翅果蝇培养瓶内已羽化的成蝇全部杀死，此后凡羽化后未超过８h的雌营即是处女蝇．⑵．杂交正交：长翅果蝇（母）×残翅（公）；反交：残翅果蝇（母）：长翅果蝇（公）．各做两瓶，每瓶性培养基中各移入３～５对种蝇．贴好标签，注明杂交组合、杂交日期及实验者姓名．⑶．移去亲本７～８天后移去亲本⑷．观察Ｆ１４～５天后Ｆ１成虫出现，观察其翅膀形态后处死．连续观察记录３d，各自记录正、反交．⑸．F1在新培养瓶内，每瓶各放入３～５对Ｆ１果蝇，培养．⑹．移去Ｆ１７～８天后，移去Ｆ１成蝇，麻醉致死，放入废蝇盛留瓶．⑺观察Ｆ２４～５天后Ｆ２成蝇出现，观察翅膀形态后处死，隔天记录一次，连续观察统计４次正、反交的结果并记录．⑻数据处理及χ2测验χ2=Σ (O-E) 2/E式中，Ｏ是观察值，Ｅ是预期值根据χ2自由度，查表，若P≥5%,说明观察值与理论值相符合.可以认为观察值是符合实验步骤（二）1 选择处女蝇将长翅果蝇和残翅果蝇培养瓶内已羽化的成蝇全部杀死，此后凡羽化后未超过８h的雌蝇即是处女蝇．选取野生型处女蝇和突变型处女蝇，分别放于含新鲜培养基的培养瓶内保存备用．２．杂交正交：野生处女蝇（母）×黑檀体、残翅雄蝇（公）；反交：黑檀体、残翅处女蝇（母）×野生型雄蝇．各做２瓶，每瓶中分别移入３～５对种蝇．贴好标签，注明杂交组合、杂交日期及实验者姓名．３．移去亲本７～８d后移去亲本果蝇处死．４．观察Ｆ１４～５d后Ｆ１成蝇出现，观察其性状后处死．连续观察并记录正、反交３d５．Ｆ１互交按原来的正、反交各选３～５对Ｆ１成蝇，移入新培养瓶中，继续培养．６．移去Ｆ１７～８d后移去Ｆ１成蝇．７．观察Ｆ２及实验结果记录４～５d后Ｆ２成蝇出现，观察Ｆ２性状后处死，隔天观⑻数据处理及χ2测验χ2=Σ (O-E) 2/E式中，Ｏ是观察值，Ｅ是预期值根据χ2自由度，查表，若P≥5%,说明观察值与理论值相符合.可以认为观察值是符合分离五实验报告1 统计分析果蝇实验结果，并用χ2测验验证实验结果是否与分离/自由组合规律相符？2 根据你的实验结果记录，对所做杂交过程作一遗传分析，对所研究的性状及基因可得出哪些结论？3 果蝇杂交时，为什么要选择处女蝇？Ｆ１代是否要选择处女蝇，为什么？4 在做果蝇杂交时会出现表型分离比不符合３：１的比例．为什么？分析此次实验成败原因5 果蝇麻醉时的注意事项有哪些？6 在进行亲本杂交和Ｆ１自交后一定时间为什么要倒去杂交亲本？。
试验八、果蝇双因子杂交试验
实验材料：
野生型和残翅、黑檀体突变型果蝇。
实验用品：
用具：显微镜、双筒解剖镜、放大镜、镊子、 麻醉瓶、白瓷板、毛笔、载玻片、盖玻片等。
药品：乙醚等。
实验步骤：
1 选择处女蝇：放出并杀死培养瓶中的全部成 蝇，然后羽化后未超过8小时的雌蝇即为处女蝇。
2 杂交：野生型果蝇和突变型果蝇杂交，正反 交各做一瓶。23℃恒温培养。
3 移走亲本：待F1幼虫出现即可放掉亲本。
4 观察F1：观察F1的翅膀形态、体色。 5 F1互交：在新培养瓶内，放入3~5对F1果蝇， 培养。
6 移去F1：待F2幼虫出现即可放掉并处死F1果 蝇。
7 观察F2：观察F2的翅膀形态、体色后处死， 连续观察统计数据。
8 数据处理及统计分析：分析实验结果与预期 理论的符合程度。
vv XWy ×VVXwXw
Vv XWXw
VvXwY
V XWXw V XwXw V XWY V XwY
vvXWXw vvXwXw vvXWY vvXwY
蝇具有趋光性，并且喜欢向上爬。利用这些特性，我们 就能很方便地将果蝇转移到麻醉瓶中进行麻醉。
1、轻拍培养瓶，使果蝇落于培养瓶底部；
2、右手两指取下培养瓶塞，将培养瓶与麻醉瓶 紧密对接；
实验八 果蝇的两对因子的自 由组合
实验目的：
1 掌握果蝇两对性状的杂交方和杂交结果的 统计处理方法；
2 理解自由组合定律的原理。
实验原理：
位于非同源染色体上的两对基因，在减数分裂 形成配子时可以自由组合；由于配子的随机结合， 两对相对性状在杂种第二代是自由组合的，呈现 9:3:3:1的表型分离比。
2 讨论：
① F1是否要选处女蝇？为什么？ ② 分析实验成功的经验，失败的原因。
实验二：果蝇的双因子实验
实验二 果蝇的双因子实验一：目的1：掌握实验果蝇的杂交技术并学习记录交配结果和掌握统计处理方法2：通过双因子杂交，验证和加深理解遗传学基本规律---------自由组合规律3:验证两对非等位基因间的自由组合现象和遗传规律 二：原理1）、黑腹果蝇 (Drosophila melanogaster) 是被人类研究得最彻底的生物之一。
是一种原产于热带或亚热带的蝇种。
它和人类一样分布于全世界各地，并且在人类的居室内过冬。
在遗传，发育，生理， 和行为等的研究方面，果蝇是最常见的研究对象之一。
原因是它易于培养， 繁殖快，使用经济： 它在室温条件下，十天就可以繁殖一代； 且只有四对染色体， 易于遗传操作； 还有它有很多突变体可以利用。
中文学名： 黑腹果蝇 拉丁学名： Drosophila melanogaster 别称： fruit fly 二名法： Drosophila melanogaster 界： 动物界 门： 节肢动物门Arthropoda 纲： 昆虫纲 Insecta 亚纲： 有翅亚纲目： 双翅目 Diptera亚目： 长角亚目、短角亚目 科： 果蝇科Drosophilidae属： 果蝇属Drosophila 亚属： Sophophora种： 果蝇分布区域： 全球温带及热带气候区2）、果蝇的生态学特性果蝇又称小果蝇（Drosophilidae 科，Drosophila 属），英文全名 fruit fly 。
它和危害农作物的果实蝇（Trypetidae 科，Bactocera 属）不同，果实蝇危害瓜果类果实非常严重，是农业技术上的一大隐忧.刚形成的蛹呈微黄色，之后颜色逐渐加深，羽化前呈深褐色。
果蝇类昆虫在自然条件下大多数以腐烂的瓜果等为食，可为害多种瓜果蔬菜及许多植物的多汁器官，甚至连甜酒也成为取食对象n]。
研究表明，果蝇具有强烈的趋化性，嗅到水果发出的气味就会飞来取食、交尾和产卵[7]。
果蝇对不同水果嗜好程度有差异，该试验表明，黑腹果蝇对几种水果嗜好性顺序依次是葡萄、苹果、香蕉、桃、梨。
遗传学实验报告——果蝇杂交实验
遗传学实验报告果蝇双因子杂交、伴性遗传杂交和三点测交实验目的：学习果蝇杂交方法、遗传学数据统计处理方法；实验验证自由组合规律、伴性遗传规律；通过三点测交学习遗传作图。
实验原理: 1. 双因子杂交本实验使用18号野生型果蝇和14号纯合黑檀体、残翅果蝇进行杂交，其中黑檀体对灰体为隐性，残翅对长翅为隐性，两对基因位于非同源染色体上。
正交 反交18♀×14♂ 14♀ × 18♂双因子杂交遗传图解 2. 伴性遗传杂交本实验使用18号野生型果蝇与纯合白眼果蝇杂交，其中白眼相对于红眼是隐性性状，白眼基因位于X 染色体上。
正交 反交18♀ × w ♂ w ♀ × 18♂伴性遗传图解F 1⊗F 2: 灰长：灰残：黑长：黑残=9：3：3：1P灰长黑残F1⊗ F 2: 灰长：灰残：黑长：黑残=9：3：3：1 灰长P 黑残P X +X + X w YP X w X w X+YF 1: X +X w X +YF 1: X +X w Xw Y⊗ ⊗F 2: X + X + X +X + Y X w Y ♀红眼 ♀红眼 ♂红眼 ♂白眼 1 : 1 : 1 : 1 F 2: X +X w X w X X + Y X w Y ♀红眼 ♀白眼 ♂红眼 ♂白眼 1 : 1 : 1 : 1♀红眼♂白眼 ♂白眼♀红眼3. 三点测交本实验使用6号纯合白眼、卷刚毛、小翅果蝇与18号野生型果蝇杂交，获得F 1代后再自由交配即可获得具有8种表型的测交F 2代。
白眼、卷刚毛、小翅均为X 染色体上的隐性性状。
P 6号♀（wsnm/wsnm ） × 18号♂(+++/Y)白卷小红直实验材料：18号野生型果蝇 ，14号纯合黑檀体、残翅果蝇，白眼果蝇，6号纯合白眼、卷刚毛、小翅果蝇；麻醉瓶、酒精灯、玻璃板、毛笔、培养管、酒精棉球、乙醚、解剖镜 实验步骤：1. 杂交前提前将装有不同表型果蝇培养管中的成年果蝇全部放出，确保8-10小时后培养管中的雌果蝇都是刚刚孵化的处女蝇。
遗传学实验五 果蝇的二因子自由组合实验
实验方法
7. 杂交及测交示意图
P vgvg++(♀) × ++ee(♂) (纯合灰体残翅处女蝇)（纯合黑体长翅雄蝇）
F1
+vg+e（灰体长翅）
♀♂相互交配，无须处女蝇
F2 灰体长翅：灰体残翅：黑体长翅：黑体残翅=9：3：3：1
[+][+] [+][vg] [b][+] [b][vg]
测交： +vg+e(♀) × ++ee(♂)
性状不符，表明实验有差错，不能进行下去。发生差错的原因可能是亲 本雌果蝇不是处女蝇；地F1幼虫出现后亲本未倒干净；杂交时雄蝇选择 有误；以及亲本原种不纯等等。. 5. 按原来的正、反交各选5－6对F1成蝇（♀、♂），换新的培养瓶，继续饲 养（此时不需要处女蝇）。 6. 6－7天后，除去F1亲本。再过3－4天，F2代成蝇出现，麻醉后（可以 深麻醉）倒在白瓷板上，进行统计，每隔两天统计一次，连续统计6－7 天（当F3出现就失去意义了）。
结果及分析
3. X2测验及结果分析
长灰
长黑
残灰
残黑
合计
实验观察数（O）
预期数（9：3： 3：1）（c） 偏差（O－C） （O－C）2/C
自由度＝n—1=4—1=3 X2=∑（O－C）2/C P所在范围，即查表可得P值。
作业
1. 总结二因子自由组合的遗传特点。 2. 如果统计测验结果与预期的不相符合，试分析
实验方法
1. 收集雌果蝇品系的处女蝇。 2. 准备好培养基，把已麻醉的残翅♀、♂果蝇和黑檀体♀、♂果蝇，按正、
反交方式，分别放入不同培养瓶内，进行杂交，贴好标签。 3. 6－7天后，见到有F2幼虫出现，可除去亲本（除干净）。 4. 再过3－4天，检查F1成蝇性状，应该是灰体、长翅（正、反相同）。若
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果蝇的遗传分析（双因子杂交试验）
一、实验目的：
的分离现象及其比例，了解两对非等位基通过两对性状个体杂交，观察F
2
因间的自由组合。
同时掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。
二、实验材料：
灰体残翅 EEvgvg
黑檀体长翅 eeVgVg
三、实验原理：
果蝇的灰体基因（E）与黑檀体基因（e）为一对相对性状，位于ⅢR70.7位置，而长翅（Vg）与残翅（vg）为另一对相对性状，位于ⅡR67.0位置。
这两对基因是没有连锁关系的，位于不同染色体上的非等位基因。
根据非等位基因分离的自由组合定律，在F1代产生配子时，非等位基因的分离是独立的，它们彼此自由组合，产生四种基因型的配子（EVg，Evg，eVg，evg），且它们的比例相同。
这四种配子自由结合，因此在F2代会出现9种基因型的后代，若显性完全，就出现4种表型，比例为 9：3：3：1。
正交：灰体残翅EEvgvg（♀）×黑檀体长翅
（♂）eeVgVg P
↓
灰体长
翅EeVgvg F1
↓自交
四、实验内容：
1、选处女蝇：每组做正交1瓶，正交选灰体残翅为母本，黑檀体长翅为父本，将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处死，在8-12h内收集处女蝇5只，将处女蝇和5只黑檀体雄蝇转移到新的杂交瓶中，贴好标签，于25℃培养；
2、 7d后，释放杂交亲本；
3、再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型；
4、选取5对F1代果蝇，转入一新培养瓶，于25℃培养，其余F1代果蝇处死；
5、 7d后，处死F1亲本；
6、再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录，连续统计7d；
五、备注：
1、保证杂交所用的亲本雌果蝇一定是处女蝇；
2、杂交后倒掉亲本时，一定要倒干净，以免造成回交产生实验误差。
同样在F1自交后，倒掉F1时一定要倒干净，以免造成F1和F2的混杂产生实验误差。
六、实验结果
x2＝∑(O-E)2/E＝0.767
七、分析讨论
1.果蝇的杂交实验中，为什么要收集处女蝇？简单描述如何收集处女蝇？
因为雌性果蝇生殖器官有受精囊，可保存交配所用的大量的精子，能使大量的卵细胞受精。
因此，在做果蝇杂交实验的时候，雌果蝇必须是处女蝇，保证实验结果的可靠性。
雌蝇羽化出来 10h内一般不会交配，选择在这个时间段内收集雌蝇，均属处女蝇。
2.对杂交实验数据进行统计分析，并说明其遗传学意义；或计算遗传图距及基因顺序。
由df（自由度）=4-1=3，当p=0.05时，查x2表得x2=7.82.实验所求得的x2值与查表所得x2相比较时，0.767<7.82，统计学上认为在5%显著水准上差异不显著，观察频数与理论频数间的差异属于随机误差。
遗传学上则可认为该次果蝇杂交实验结果符合孟德尔第二定律：两对基因之间的遗传是自由组合的。
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