猪瘟病毒Elase检测试剂盒(中文翻译)
经典猪高热病毒抗原ELISA试剂盒
JENO Biotech Inc.
描述：VD Pro®CSFV抗原检测试剂盒采用双夹心ELISA法。
介绍：
CSFV抗原ELISA检测试剂盒是用来检测CSFV感染的细胞、白细胞以及猪组织提取物样品中是否存在CSFV抗原。
此检测方法快速、简单、特异性好，而且与其它瘟病毒属病毒如牛病毒性腹泻粘膜病病毒（BVDV）和博尔纳病病毒（BDV）之间不存在交叉反应。
CSFV抗原ELISA检测试剂盒与反转录聚合酶链式反应（RT-PCT）和病毒分离有很好的相关性。
原理：
CSFV抗原ELISA检测试剂盒是在抗E2单克隆抗体包被的ELISA板上进行的。
白细胞、组织匀浆液或组织培养液的提取样品或稀释样品滴加到ELISA板的每一个孔里，如果样品中存在病毒抗原（gp55），在滴加过氧化物酶连接的抗E2单克隆抗体和TMB显色液后颜色会发生变化。
结果用OD的比值来表示，由样品孔中的OD值和阳性对照孔中的OD 值得出。
试剂盒成分
1. CSFV抗E2单克隆抗体包被的板子………………………………………....2块
2. 10×样品处理缓冲液（STB）………………………………………………..30ml
3. 10×洗涤液…………………………………………………………………….100ml
4. 全血处理缓冲液（WTB）……………………………………………..…….100ml
5. 稀释缓冲液………………………………………………………………...….50ml
6. HRPO 抗-CSFV连接液………………………………………………..……..20ml
7. 强阳性对照（SPC）…………………………………………………………..1.0ml
8. 弱阳性对照（WPC）…………………………………………………………1.0ml
9. 阴性对照（NC）…………………………………………………………..….1.0ml
10. TMB显色液…………………………………………………………………..20ml
11. 终止液………………………………………………………………..……….10ml
12. 指导手册……………………..……………………………………………….1份
重要的注意事项
在开始任一程序时请阅读下列注意事项。
警告
1. 不要混合不同批次试剂盒的成分。
2. 不要使用过期的产品。
3. 实验结束后，用蒸馏水洗涤仪器。
4. 注意防止试剂盒成分污染。
贮存注意事项
所有试剂储存在2-8℃，直至过期。
使用时试剂恢复到室温，使用完毕后继续放到2-8℃。
样品准备
样品可以储存在-70℃，但是为了得到准确的结果尽量使用新鲜样品。
每一动物取1-2个组织，优先取脾、扁桃体、肺、脑、肠系膜淋巴结或肾。
一般来说脾和扁桃体样品得到的结果最敏感。
1. 用剪刀将1-2g的组织剪成小块。
2. 将组织块放入研钵，加3-5ml1×样品处理缓冲液(STB)，并加少量海砂。
3. 磨碎组织，室温孵育1小时并轻轻摇动。
4. 12,000×g离心1min（或1,500×g离心10 min），取上清备用。
白细胞浓缩液
●用Ficoll密度梯度离心分离白细胞
1. 向离心管中3mlFicoll密度梯度分离液（ex, Histopaque-1077®）表面小心地覆盖3ml肝
素或EDTA抗凝血液。
2. 1,000×g离心10min，用移液管从离心管中吸取约1ml白细胞层，然后与0.5mlPBS混匀。
3. 12,000×g离心白细胞1min，弃上清液。
4. 用300μl 1×STB重悬白细胞，涡旋机上充分混匀，室温孵育1h并轻轻搅动。
5. 12,000×g离心1min（或1,500×g离心10 min），取上清备用。
●用LuecoSep®分离白细胞
1. 向LuecoSep®(Gieiner)中加入3ml Ficoll密度梯度分离液（Histopaque-1077®），1,000×g
离心30s。
2. 向LuecoSep®中加入3ml肝素或EDTA抗凝血液，1,000×g离心10min。
3. 分离相（例如）
血浆-白细胞-Histopaque-盘状物- Histopaque-RBC
用移液管吸取1ml白细胞层，与0.5ml PBS混匀。
4. 12,000×g离心白细胞1min，弃上清液。
5. 用300μl 1×STB重悬白细胞。
涡旋机上充分混匀，室温孵育1h并轻轻搅动。
6. 12,000×g离心1min（或1,500×g离心10 min），取上清备用。
全血
全血可能是筛选检查有效的样品，但敏感性较白细胞浓缩液差。
如果全血样品有阳性反应，那么白细胞浓缩液或组织提取液也可以确定为阳性。
1. 轻轻翻转管子混匀全血样品。
如何血液出现凝结，应重新收集样品。
2. 全血样品与全血处理缓冲液（WTB）等体积混匀，室温孵育10 min。
A．微孔板：500μl全血和500μlWTB。
B．圆锥形管：5ml全血和5mlWTB。
3. 12,000×g离心3-5min（或1,500×g离心10 min），弃上清液。
4. 吹散沉淀，加等体积的1×STB（微孔板为100-200μl）。
涡旋机上充分混匀，室温孵育
1h并轻轻搅动。
5. 12,000×g离心1min（或1,500×g离心10 min），取上清备用。
细胞培养物
1. 去除细胞培养基，用细胞刮刀从培养瓶刮取细胞。
2. 1,500×g离心细胞10 min，弃上清液。
3. 加300μl 1×STB，涡旋机上充分混匀，室温孵育1h并轻轻搅动。
4. 12,000×g离心1min（或1,500×g离心10 min），取上清备用。
1. 1×洗涤缓冲液
向100ml 10×洗涤缓冲液（浓缩液）中加去离子水至终体积为1000 ml。
2. 1×样品处理缓冲液（1×STB）
样品处理缓冲液必须用去离子水以1:10稀释。
检测程序
1. 准备所有试剂和样品，像下列模板例子一样记录样品位置。
2. 向CSFV抗E2单克隆抗体包被板的每个孔中加50μl稀释液。
3. 向含有稀释液的孔中加入50μl样品、阳性对照和阴性对照，最终稀释比例为1:2。
板模板例子（1-孔测试）
*S：样品；SPC：强阳性对照；WPC：弱阳性对照；NC：阴性对照。
4. 盖上盖子，37℃孵育90min或室温过夜。
5. 每个孔用1×洗涤缓冲液（每孔300μl）洗涤5次，每次洗涤需完全去除孔内液体。
6. 向每个孔中加100μl HRPO抗-CSFV连接物。
盖上盖子，37℃孵育60min。
7. 像步骤5一样，每个孔用1×洗涤缓冲液（每孔300μl）洗涤3次。
8. 向每个孔中加100μl TMB显色液。
9. 盖上盖子，室温孵育10min，肉眼观察颜色变化情况。
10. 向每个孔中加50μl终止液终止酶反应，并于450nm测定吸光值。
结果说明
A. 有效性
1. 强阳性对照的平均OD值（SPCx）应大于0.80。
2. 弱阳性对照的平均OD值（WPCx）应大于0.35。
3. 阴性对照的平均OD值（NCx）应小于0.30。
B. 判断
1. 根据下列公式计算样品的阳性百分率%SP
%SP=(样品的OD值-NCx)／(SPCx-NCx)×100
2.
3. 如果结果可疑，检查样品（是否被细菌污染等），并重新试验。
4. 如果重新试验后结果仍然可疑，那么核对畜牧场流行病学情况，重新采集猪血清进行
试验。
信息及技术协助
Jeno Biotech公司为您提供了品质与技术支持。
我们的技术服务小组由有经验的科研工作者组成。
如果你有任何关于JNKit®的问题，请联系我们。
Jeno Biotech Inc.
Bioventure Plaza#402, 198-60, Hupyung-dong,
Chunchon, Kangwondo, Republic of Korea 200-160
Tel: 82(0)33 258 6700, Fax:82(0)33 258 6702
E-mail:jenobio@
www. 。
猪瘟抗体阻断ELISA检测试剂盒技术参数
感染后11天可检测到血清阳性、敏感性99%，与中和抗体试验相当；特异性100%，与BVDV/BDV无交叉反应
猪蓝耳病抗体检测试剂盒技术参数
产品名称
猪蓝耳病抗体检测试剂盒
单价
13000.00元（人民币）
规格
5板/盒
储存条件及有效期
2~8℃保存；有效期为12个月
产品成分
1、包被板5×96孔
2、酶标结合物（1号液）55mL
6、样品稀释液（5号液）50mL
7、终止液（6号液）30mL
8、阳性对照品2mL
9、阴性对照品3mL
10、封板膜15片
11、说明书1份
检测样品类型
猪血清或血浆
试剂类型
即取即用型
检测靶物
可检测出猪瘟病毒抗体，与BVDV/BDV无交叉反应
软件支持
免费提供软件供分析数据
结果判断
阻断率PI≥40%，判为猪瘟抗体阳性；PI＜40%，判为猪瘟抗体阴性
3、洗涤液10×（2号液）2504号液）30mL
6、样品稀释液（5号液）50mL
7、终止液（6号液）30mL
8、阳性对照品2mL
9、阴性对照品3mL
10、封板膜15片
11、说明书1份
检测样品类型
口腔黏液
试剂类型
即取即用型
检测靶物
能够最早监测免疫或感染，可检测出美洲株、欧洲株、第三种病毒LENA以及高致病性蓝耳病毒株
软件支持
免费提供软件供分析数据
结果判断
S/P≥0.4，判为猪蓝耳病抗体阳性；S/P＜0.4，判为猪蓝耳病抗体阴性。
性能指标
感染后8-14天可检测到血清阳性，敏感性99%、特异性100%
猪瘟抗体阻断ELISA检测试剂盒技术参数
猪瘟抗体检测卡说明书(完整版)
猪瘟抗体快速检测试剂盒——（胶体金法）使用说明书【名称】通用名称：猪瘟抗体快速检测试剂盒（胶体金法）英文名称：Rapid Anti-CSFV Test汉语拼音：Zhuwen Kangti Kuaisu Jiance ShijiHe(Jiaoti Jin Fa)【用途】用于检测猪血清/血浆/全血样品中猪瘟(Classical Swine Fever, CSF)抗体。
【实验原理】猪瘟抗体快速检测试剂盒（胶体金法），系采用胶体金免疫层析技术，检测样品（血清、血浆或全血）中猪瘟抗体的方法。
在玻璃纤维纸上预包被金标记灭活猪瘟抗原（Au-Agl），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被猪瘟抗原(Ag2)和兔抗猪瘟抗体。
当检测样品为阳性时，样品中猪瘟抗体与胶体金标记猪瘟抗原（Au-Ag1）结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的猪瘟抗原(Ag2)形成“Au-Ag1-猪瘟抗体-Ag2-固相材料”免疫复合物而凝聚显色，游离金标记抗原则在对照线处与兔抗猪瘟抗体结合而富集显色。
阴性样品则仅在对照线处显色。
操作简便，快速，结果直观、准确，灵敏度高，容易判定。
【试剂盒组成】1.猪瘟抗体检测卡50头份2.说明书1份3.一次滴管50根【操作方法】1.用1.5ml样品管，采血0.5-1ml待检测血清自然析出或用离心机离心10分钟左右，使血清析出。
2.将检测卡平置于桌面上，用吸管吸取被检血清，在检测卡的椭圆形加样孔内加入2滴约80~100ul。
在室温下反应20分钟判定结果。
（检测卡如在4℃保存，必须恢复至室温后方可进行检测）【结果判定】阳性：对照线区（C）和检测线区(T)各出现一条紫红色线。
检测线(T)的颜色越深，表明猪瘟抗体的滴度越高。
阴性：只有对照线区（C）出现一条紫红色线。
无效：未出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线，对照线区(C)未出现紫红色线。
【诊断参考】被检样品加样后20分钟可与对照卡的色带滴度进行参考比较。
动物疫病ELISA检测试剂盒产品技术标准2024年
动物疫病ELISA检测试剂盒1 范围本文件规定了动物疫病ELISA检测试剂盒的产品规格、技术要求、试验方法、检验规则、标志、包装、说明书、运输和贮存。
本文件适用于动物疫病ELISA检测试剂盒。
2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 1.1-2020 标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则GB/T 20001.10 标准编写规则第10部分：产品标准GB/T 191 包装储运图示标志3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。
4 技术要求4.1 外观a)外观整洁完好、各组份齐全无错漏。
b)液体组份澄清、无沉淀/絮状物；瓶盖密封紧实；包被板无漏气。
c)各标识标签正确、清晰。
4.2 性能4.2.1 特异性用试剂盒检验病毒阴性样品及特异性阳性样品，结果应均为阴性。
4.2.2 敏感性用试剂盒检验敏感性质控品，结果应符合相应产品质量标准要求。
4.2.3 精密度用试剂盒平行测定精密性参考品，试剂盒变异系数不大于15%。
4.2.4 稳定性配套组分于37℃置7天后检测，结果应符合4.2.1～4.2.3项要求。
5 试验方法5.1 外观用目测法测定，结果应符合4.1的要求。
5.2 性能5.2.1 特异性对待检阴性样品及特异性阳性样品按照试剂盒说明书进行检验，每种样品至少做两个平行，结果应符合4.2.1的要求。
5.2.2 敏感性取经确证的敏感性质控品，按照检测试剂盒的说明书进行检验，每种样品至少做两个平行，结果应符合4.2.2的要求。
5.2.3 精密度使用待检试剂盒平行测定精密性参考品，计算变异系数，确定试剂盒的精密度，结果应符合4.2.3的要求。
CV （%）=√[∑(xi−x ̅)2]n i=1/（n−1）x ̅×100%式中：CV ——变异系数xi ——每个检测数据x ̅——所有检测数据平均值n ——检测数量6 检验规则6.1 组批和抽样以同批原料在同一生产线、一次性制备的产品为同一批次。
猪瘟ELISA抗体检测试剂盒说明书
猪瘟ELISA抗体检测试剂盒猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒使用说明书【简介】试剂盒由抗原包被的微孔板，酶标羊抗猪IgG及其它试剂制成，应用间接ELISA原理检测猪血清中抗猪瘟病毒抗体。
【用途】猪瘟ELISA诊断试剂盒用于检测猪血清中猪瘟病毒抗体。
评估猪场猪瘟疫苗免疫状况，感染猪的血清学诊断。
【原理】本试剂盒是采用猪瘟抗原包被微孔板，在试验中，加入稀释的对照血清和待检血清，经温育后，若样品中含有抗猪瘟病毒的特异性抗体，则将与检测板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加TM B底物液，与酶反应形成蓝色产物，加入HF溶液终止反应后，用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD 值。
【试剂盒主要成分】1 包被抗原的微孔板 2块（96孔/块）2 阴、阳性对照血清各1管（0.5ml/管）3 羊抗猪酶标二抗 1瓶（20ml/瓶）4 20倍浓缩洗涤液 1瓶（30ml/瓶）5 底物A液、B液各1瓶（10ml/瓶）6 终止液 1瓶（10ml/瓶）7 样品稀释液 1瓶（50ml/瓶）8 血清稀释板 2块（96孔/块）9 说明书 1张【样品制备】取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。
【洗涤液配制】使用前，浓缩的洗涤液应恢复至室温（25℃左右），并摇动使沉淀的盐溶解（最好在37℃水中加热5-10m in），然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释（例如：每板用20 ml浓缩液加上380ml水），稀释好的洗涤液在4℃可以存放7天。
【样品稀释】在血清稀释板中按1：40的体积稀释待检血清（195μl样品稀释液中加5μl待检血清）。
注意：阳性对照和阴性对照1：40稀释，（234μl样品稀释液中加6μl对照血清）。
【注意事项】1 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，使用后放回2-8℃。
2 不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。
猪C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒说明书
猪C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒说明书猪C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶7终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8标准品（800pg/ml）0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶1密封袋1个猪C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
400pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液200pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液100pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液50pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液25pg/ml号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl （样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒(一步法)说明书和内包装标签(2022版)
非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒（一步法）说明书和内包装标签（一）非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒（一步法）说明书【兽药名称】通用名非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒（一步法）商品名无英文名African Swine Fever Virus Real - time PCR Test Kit （One - step）汉语拼音Feizhouzhuwenbingdu Yingguang PCR Jiance Shijihe （Yibufa）【主要成分与含量】编号试剂盒组分装量用法ASFV01 -qf50缓冲液Bl5ml/瓶直接使用ASFV 02 - qf50缓冲液B25ml/瓶直接使用ASFV 03 - qf50PCR反应液900叱管直接使用ASFV 04 - qf50阳性对照1ml /管直接使用ASFV 05 - qf50阴性对照1ml /管直接使用【作用与用途】用于全血、血清、血浆、淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体和肌肉等样品中的非洲猪瘟病毒核酸的检测。
【用法与判定】1用法1.1样品处理1.1.1全血、血清、血浆直接进行下一步试验。
淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体、肌肉等组织样品取0.1〜0.2g,置研钵充分研磨，加入10倍体积约1〜2ml生理盐水，混匀；或置研磨管中，加入10倍体积约1〜2ml生理盐水及研磨珠，用组织研磨仪匀浆。
以5000转/分钟离心5分钟，留上清，即为组织匀浆液。
1.1.2取1.5ml离心管加入100川缓冲液B1,每管分别加入10可全血（EDTA抗凝剂）或20m组织匀浆液、血清、血浆样品、阳性对照和阴性对照混匀。
室温3分钟内涡旋混匀3〜5次。
1.1.3每管加入100W缓冲液B2,涡旋混匀，12000转/分钟离心1分钟，上清为待检核酸。
1.2扩增试剂准备取18WPCR反应液至PCR反应管；依次分别加入2囚阴性对照、样品和阳性对照待检核酸，盖紧管盖，每个反应管内反应体积为20N。
1.3将PCR反应管瞬时离心，置荧光PCR仪内，进行如下反应：1） 95℃预变性20秒；2）95c变性10秒，58c延伸20秒，共40个循环；设置58c收集FAM 荧光信号。
猪瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的研制和应用
ＺＨＵ ａ － ｕ ｎ ，ＷＡＮＧ ｎ ，ＮＩ Ｙｕ ｎｙ ａ Ｑｉ ＮＧ — ａ Ｙｉ ｏ，Ｓ ｂ ＨＥ Ｑｉｇｃ ａ Ｎ ｎ －ｈ ｎ
Ｃｈｎ ｓ ｏ ｒａ ｏ ｔｒ ａｙＭｅ ｉｎ ｉｅｅＪ ｕｎ ｌ ｆＶｅｅｉ ｒ ｄｃ ｅ ｎ ｉ
中 国兽 医杂 志 ２ １ ０ ２年 （ ４ 第 ８卷 ） ９期 第
２ １
猪 瘟 抗 体 间 接 Ｅ ＩＡ 检 测 ＬＳ 试 剂 盒 的 研 制 和 应 用
徐 璐 ，范 学政 ，徐 和 敏 赵 启 祖 ， ，邹 兴 启 ，朱 元 源 ，王 琴 ，宁 宜 宝 ，沈 青春
中 图分 类 号 ： ８ ２ ６ １ ￥５．５ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ５ ９ ６ ０ （ ０ ２ ０ — ０ １０ ０ ２ ０ ５ ２ １ ） ９０ ２ ３
Ｄｅ ｅ ｏ ｖ ｌ ｐｍ ｅ ｔ ａ ｐ ｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｎ ｉ ｅ ｔＥＬＩ Ａ ｉ ｏ ｄｅ ｅ ｔ ｎ ｎｄ ａ ｐｌｃ ｔｏ ｆｉ ｄ ｒ ｃ Ｓ ｋ ｔｔ ｔｃ ａ ｉ ｄｙ ａ ａ ｎ ｔｃ ａ ｓ ｃ ｌｓ ｎ ｅ ｅ ｉ ｕ ｎｔｂｏ ｇ ｉ ｓ ｌ ｓ ｉ ａ ｗｉ ｅ ｆ ｖ ｒ ｖ ｒ ｓ
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非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒风途说明书
非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒说明书【兽药名称】通用名称：非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒汉语拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe英文名称：African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit 商品名称：无【用法与判定】1 用法1.1待检样品釆集、保存及运输1.1.1样品釆集（1）活猪样品无菌采集抗凝血或血清5mL（2）病死猪剖检样品或屠宰场剖检样品无菌采集死猪的牌、肺、肾、扁桃体、淋巴结、肌肉等组织样品。
2〜8°C低温运至实验室用于检测。
（3）病猪污染的周边环境采集与病猪相关场所的粪便、饲料、污水样品。
2〜8°C低温运至实验室用于检测。
1.1.2样品保存采集的样品在2〜8°C保存应不超过24小时，-70°C条件下保存，避免反复冻融。
1.1.3样品运输泡沫箱加冰袋后密封进行运输。
包装和运输应符合农业农村部《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样品运输包装规范》和交通运输部门关于危险品运输管理的有关规定。
1.2样品处理1.2.1血液样品处理抗凝血样品置于离心管中，8000 r/min离心2分钟取上层血浆，编号待检。
非抗凝血样品置于离心管中，待凝固后，8000 r/min离心2分钟取200μL上层血清，编号待检。
1.2.2组织样品处理取适量脾脏、肝脏、淋巴结、扁桃体、肌肉等组织，置于研磨器或研磨管中研磨，再加适量生理盐水混匀，制成约10%的组织匀浆，8000 r/min离心2分钟，取200μL上清于RNase/DNase-free无菌离心管中，编号备用。
1.2.3环境样品处理1.2.3.1粪便、饲料样品处理方法取适量的粪便、饲料放入盛有PBS缓冲液的研磨管中研磨混匀，制成约10%的匀浆液.8000 r/min离心2分钟，取200μL上清于RNase/DNase-free无菌离心管中，编号备用。
猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测及注意事项
2 4 0 滋l ， 移 液 器 吹 匀 后 分 两 次 吸 取 ， 每 次 取 1 0 0 滋l 加 到 抗 原 包
的 浓 缩 洗 涤 液 加 上 190m l纯 水 )。
被 板 孔 )。
3 操作步骤
(2)
实 验 过 程 使 用 一 次 性 枪 头 移 液 器 标 准 操 作 （吸 液 时 摁
(1)
1 0 0 滋l 加 人 到 抗 原 包 被 板 孔 中 ， 阳 性 对 照 和 阴 性 对 照 各 设 2
(4)
所 有 试 剂 用 前 应 恢 复 至 室 温 （2 0 耀2 5 益 )， 回 温 至 少
孔 （轻 轻 振 匀 孔 中 样 品 ， 勿 溢 出 )， 用 封 板 膜 覆 盖 包 被 板 ， 置
后 一■次拍干)。
不准确。
(4)
每 孔 加 酶 标 记 物 1 0 0 滋l ， 用 封 板 膜 覆 盖 包 被 板 ， 置
(6)
不 同 批 次 试 剂 盒 组 分 不 能 混 用 ，尤 其 是 反 应 板 ，对
3 7 益 孵 育 3 0 min。
照 及 酶 标 抗 体 ，避 免 影 响 实 验 结 果 。
如 果 阻 断 率 逸 4 0 % 判 为 阳 性 ， 阻 断 率 在 30耀 40%，该 样 品 判 为
阳 性 和 阴 性 对 照 血 清 （例 如 : 1 2 0 滋 l 样 品 稀 释 液 中 加 1 2 0 滋l 待
可疑。
检Байду номын сангаас血 清 )。
5 检测中应注意事项
2 洗涤液准备
(1)
在 抗 原 包 被 板 设 阴 、 阳 性 对 照 各 2 孔 ，每 孔 的 阴 、
畜业技术 疫病防治
猪瘟病毒Elase检测试剂盒(中文翻译)
经典猪高热病毒抗原ELISA试剂盒JENO Biotech Inc.描述：VD Pro®CSFV抗原检测试剂盒采用双夹心ELISA法。
介绍：CSFV抗原ELISA检测试剂盒是用来检测CSFV感染的细胞、白细胞以及猪组织提取物样品中是否存在CSFV抗原。
此检测方法快速、简单、特异性好，而且与其它瘟病毒属病毒如牛病毒性腹泻粘膜病病毒（BVDV）和博尔纳病病毒（BDV）之间不存在交叉反应。
CSFV抗原ELISA检测试剂盒与反转录聚合酶链式反应（RT-PCT）和病毒分离有很好的相关性。
原理：CSFV抗原ELISA检测试剂盒是在抗E2单克隆抗体包被的ELISA板上进行的。
白细胞、组织匀浆液或组织培养液的提取样品或稀释样品滴加到ELISA板的每一个孔里，如果样品中存在病毒抗原（gp55），在滴加过氧化物酶连接的抗E2单克隆抗体和TMB显色液后颜色会发生变化。
结果用OD的比值来表示，由样品孔中的OD值和阳性对照孔中的OD 值得出。
试剂盒成分1. CSFV抗E2单克隆抗体包被的板子………………………………………....2块2. 10×样品处理缓冲液（STB）………………………………………………..30ml3. 10×洗涤液…………………………………………………………………….100ml4. 全血处理缓冲液（WTB）……………………………………………..…….100ml5. 稀释缓冲液………………………………………………………………...….50ml6. HRPO 抗-CSFV连接液………………………………………………..……..20ml7. 强阳性对照（SPC）…………………………………………………………..1.0ml8. 弱阳性对照（WPC）…………………………………………………………1.0ml9. 阴性对照（NC）…………………………………………………………..….1.0ml10. TMB显色液…………………………………………………………………..20ml11. 终止液………………………………………………………………..……….10ml12. 指导手册……………………..……………………………………………….1份重要的注意事项在开始任一程序时请阅读下列注意事项。