不同月龄金线莲多糖和总黄酮含量的比较

１ 材 料 与方 法
１ １ 植物 材料来 源 ． 金 线莲样 品由福建省 金线 莲栽培 企业 提供 ， 共有 ４种栽 培类 型 ， 分别 为 Ｆ 一１ 厂 家 Ｊ （
甲生产 的福建种 ）Ｆ 一２ 厂 家 甲生产 的台湾种 ） Ｆ ３ 厂家 乙生 产 的尖 叶福 建 种 ） Ｆ 一４ 厂家 乙生 ，Ｊ （ ，Ｊ一 （ 和 Ｊ （ 产 的 圆叶福建种 ） 。 １２ 仪器 和药 品 ． Ｋ ３０ Ｑ ０ Ｅ超 声波仪 （ 山市 超声 仪 器有 限公 司 ） Ｕ 昆 ； Ｖ一１０ ６０紫 外 可见 分 光 光度 计 （ 北 京瑞 利分 析仪器 有 限公 司 ） Ｂ １０ ； Ｓ一 １Ｓ电子天平 （ 国赛多 利斯公 司 ） Ｈ一 ００ 德 ； ２ ５Ｒ离 心 机 （ 湘仪 离 心机 仪 器有 限公 司 ）Ｓ ２０型高速多 功能粉 碎机 。 甲醇 、 ＪＰ一 ０ 乙醇 、 亚硝 酸钠 、 硝酸 铝 、 氧化 钠 、 氢 葡萄 糖 、 酚和 浓 苯 硫 酸等试 剂均 为 国产分 析纯 ； 丁标 准 品为上 海 同田生物技 术有 限公 司生 产 ， 号 ：１ ３ ０ １ 芦 编 １０ ３ ２ 。
不 同月龄 金 线 莲 多糖 和 总黄酮 含 量 的 比较
黄瑞平 黄颖桢 陈菁瑛 赵云青 ， ， ，
（ １福建省种植业技术推广 总站 ， 建 福州 ３０ ０ ； 福 ５０ ３２福建省农业科学院 农业 生物资源研究所 ， 福建 福州 ，５ ０ ３ ３０ ０ ） 摘 要： 对福建主要的栽培类 型及其 ０ ４月龄的金线莲进行 多糖 和总黄酮含量测 定 ， ， 结果 表明 ： 多糖含量 随
１ ４ 总黄酮含 量 的测 定 ． １４ １ 标 准溶 液的 制备 精 确称 取 适 量芦 丁 标准 品 ， 纯 甲醇 溶解 并 定 容 ， 置成 质 量 浓度 为 ０ ２ｇ・ ．． 用 配 ． Ｌ 的标 准液 。 １ ４ ２ 标 准 曲线 的绘 制 分 别 精 确量 取 芦 丁标 准 品溶 液 ０ ０ ０ ５ １ ０ １ ５ ， ． ， ． ，． Ｌ于 试 管 ．． ． ，． ， ． ， ． ２ ０ ２ ５ ３ ０ ｍ （ ８ｍ ×１０ｍ 中 ， １ ｍ ８ ｍ） 加入 ＝３ ０％ 的乙醇溶 液至 ５ ０ ｍ ， 匀 ， ． Ｌ 摇 加入 ０ ５ｍ ＝５ 的亚硝 酸 钠 溶液 ， ． Ｌ ％
着金线莲的栽培 月龄 的增加而降低 ， 总黄酮含量则随着金线莲的栽培月龄的增加 而上 升。
关键词 ： 线莲 ； 金 多糖 ； 黄酮 总
中图分类号 ：Ｑ ９９ ９ ４ ．
文献标志码 ：Ａ
金线 莲 （ ｎｉｏｈｌ ｏｂｒｈｉ（ ｌ ）Ｌｎ１又称 金 线 兰 、 不 换 、 Ａ ｏｃ ｃｉｓｒ ｕｇ ｉ Ｗａ ． ｉｄ） ｔ ｕ ｘ １ 金 鸟人 参 等 ， 一种 名 贵 珍稀 中草 是 药 … 。金线 莲为 兰科花 叶开唇 兰属多 年生 草本植 物 ， 我 国主要 分布 在福 建 、 在 台湾 、 浙江 、 西 、 江 广东 和广 西 等地 。金线 莲 以全 草入 药 ， 有 清凉 退火 ， 血 固肺 ， 伤解 毒 ， 具 凉 祛 滋补 强壮 等 功效 ， 台湾被 称 为 “ 在 中
收 稿 日期 ： ０ ２— ４—１ ２１ ０ ６ 基金项 目： 福建省种业创新 与产业化工程项 目“ 金线莲等兰科药 用植物种业创新 与产业化示范 推广 ” 闽财 指 （ ［０ １ ６ ２号 ） ２１］１ 作者简介：黄瑞平 （ ９３一） 男 ， １７ ， 福建福清人 ， 福建省种植业技术推广总站高级农艺 师 ， 硕士．
混匀后静置 ３～ ｉ， ８ｍｎ 加入 ０ ３ｍ ＝ ０ ． Ｌ １％的硝酸铝溶液 ， 混匀 ， 静置 ６ ８ ｉ， ～ ｎ 加入 ４０ｍ ｍ ｌ Ｌ ｍ ． Ｌ１ ｏ ・ Ｎ Ｏ 溶液 ， 匀 。约 １ ｉ ， 分光 光度计 于 ５ ０ｎ ａＨ 混 ０ｍ ｎ后 用 １ ｍ处 测定 吸光度 。以试剂 空 白溶 液 为参 比 ， 以质 量 浓 度为横 坐标 ， 吸光 度 为纵坐标 ， 绘制 标 准 曲线 。 １ ４ ３ 样 品 溶液 的制备 取适 量药 材 ， ．． 粉碎 ， ４ 过 ０目筛 ， 精确 称取 ５ ０ ０ ｇ 置 于 ２ ０ ｍ ．０ ， ５ Ｌ锥形 瓶 中 ， 无 加 水 乙醇 ２０ｍ 超 声处 理 （ 率 ３０Ｗ ， ０ Ｌ， 功 ５ 频率 ５ Ｈｚ温度 ８ ２ｈ 滤 纸过 滤 。取滤 液 减压 浓缩 称 重计 ０ｋ ， ０ｏ ， Ｃ） 数， 并精 确溶 于 １０ｍＬ无 水 乙醇 中 ， ０ 即得金 线莲样 品溶 液 。 １４４ 样品 总黄 酮含量 的测 定 精确 吸取 样 品液 ２０ｍＬ 按 １４２中 的显 色方 法测定 吸 光度 ， ．． ． ， ．． 以芦 丁为 标 准 品计算 金线莲 的总黄酮含 量 ， 含量 以干燥 品计 。
第 ３卷 第 ２期
２１ ０ ２年 ６月
热 带 生 物 学 报
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＲｏＰ ＣＡＬ ＯＦ Ｔ Ｉ ｏＲＧＡＮＩ Ｍ Ｓ Ｓ
Ｖｏ． ． １３ Ｎｏ ２ Ｊｎ２ １ ｕ． ０２
文 章 编 号 ：６４— ０４ ２ １ ）２— １４—０ １７ ７５ （０ ２ ０ ０ ７ ３
２１ ０ ２正
３ 讨
论
对 福建 金线莲 主要 的栽培 类型 及 ０ ４个 月龄 的金线 莲 进 行 多糖 和 总黄 酮 含 量 的测 定 ， 果 表 明 ， ， 结 多
糖含量随着栽培月龄的增加而降低 ， 总黄酮含量则随着栽培月龄 的增加而上升。这是由于金线莲在组织 培养过 程 中 ， 培养基 营养较 丰 富 ， 物 的合成 代 谢 较 旺盛 ， 糖作 为 植 物 营养 物 质 在 体 内持 续 积 累 ； 植 多 金线 莲在移 人基 质栽培 后 ， 生长 相对缓 慢 ， 长环 境条件 相 对复 杂 ， 照条件 较 好 ， 其 生 光 黄酮 作 为次 生代 谢 物 ， 在 特定环境 条件 下 （ 光照 的刺激 ） 如 会增 加其合 成 量 Ｊ所 以 ， ， 金线 莲 总 黄酮 含 量 随着 栽 培月 龄 的增 加 而增
第 ２期
黄瑞平等 ： 同月龄金线莲多糖和总黄酮含量 的比较 不
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于试 管 （ ８ｍ ×１０ｍ 中 ， １ ｍ ８ ｍ） 加蒸馏 水 至 １０ｍＬ 加入 ＝ ． ． ， ２ ０％ 的苯 酚溶液 １ ０ｍ 浓 硫 酸 ５ ０ｍＬ 混 ． Ｌ， ． ，
匀， 沸水浴 加热 ２ｍｎ冷 却后 用分光 光度 计 于 ４ ０ｎ ｉ， ９ ｍ处 测定 吸光 度 。 以试 剂 空 白溶 液 为参 比， 以质 量浓 度 为横坐标 ， 吸光度 为纵坐标 ， 制标 准 曲线 。 绘 １ ３ ３ 样 品溶液 的制备 取 适量 药材 ， ．． 粉碎 ， ４ 过 ０目筛 ， 确称取 ５ ０ ０ｇ 置于 １０ｍＬ容 量瓶 中 ， 精 ．０ ， ０ 加水 ５ ． Ｌ， ８ ０ ０ｍ 于 ０℃水 浴加 热 ９ ｉ， ０ｍｎ 冷却 至室 温 ， 人 蒸馏水 ， 容 至 １０ｍ ， 加 定 ０ Ｌ 提取液 摇匀 后过 滤 ， 弃初 段 滤液 １ Ｌ， ０ｍ 收集余 下滤液 。精 确吸取 余下 滤液 ２０ｍ 加 入 １ ． ． Ｌ， ５０ｍＬ无 水 乙醇 ， ０ ・ ｎ 离 心 ， ６００ｒ ｍｉ 弃 上 清液 ， 淀用 ＝ ０ 的 乙醇 洗涤 ２次 ， ０ ｍｎ 离心 ， 上清 液 ， 沉 ９％ ６００ｒ・ ｉ 弃 沉淀 加 水溶 解 ， 容 至 １０ｍＬ 定 ０ ， 即得 样 品液 。 １３４ 样 品 多糖含 量 的测 定 ．． 精 确吸 取样 品液 ０ ２ｍ 按 １３２中 的显 色方 法测定 吸 光度 ， ． Ｌ， ．． 以葡萄 糖 为 标 准 品计 算金 线莲 中多糖含 量 ， 含量 以干燥 品计 。
０ ９ ｙ＝６ ７ ７ ９ ． ９９ ６； ． ４ ｘ＋０． ４ ３， ０１ Ｒ ＝０． ９ ９ ９ ３。
葡 萄 糖 质 量 含￣ ／ｇ Ｌ ｔ（ ・ －）
芦 丁 质 量 含量 ／ｇ Ｌ （ ・－ ）
图 １ 葡萄 糖 标 准 曲 线 图
图 ２ 芦 丁 标 准 曲线 图
２ ２ 金 线莲不 同栽 培类 型及不 同栽 培月 龄的 多糖和 总黄 酮 的含 量 ．
４种 不 同栽 培 类 型及 不 同栽 培 月龄
的金线 莲 的多糖 、 总黄酮 含量测 定结 果见 表 １ 由表 １可见 ， ， 多糖 含 量 范 围为 ２ ２ ％ ～１ ． ２ ， 黄 酮含 ．２ ５４ ％ 总
２ 结
果
２ １ 多糖和 总 黄酮 回归 方 程 对金 线 莲 多糖 和 总 黄酮 的含量 进 行测 定 ， 别 得到 葡 萄糖 标 准 曲线 （ ． 分 图 １ 、 丁标准 曲线 （ ２ 以及 金 线 莲 的多 糖 和 总 黄 酮 含 量 测 定 回归 方 程 ： ）芦 图 ） Ｙ＝６ ８ ２８ ． ７ ｘ＋０ ０ ８６ Ｒ ． １ ， ＝
１ ３ 多糖 含量 的测定 ．
１３ １ 标 准溶 液的制备 ．． Ｌ 的标 准液 。
１ ３ ２ 标 准 曲线的绘 制 ．．
精 确称取 适量无 水 葡萄糖 标准 品 ， 以水 溶解 并定容 ， 置成质 量浓 度为 ｏ １ｇ・ 配 ．
分 别精确 称取 葡萄糖 标准 品溶液 ０ １ ｏ ２ ，． ，． ０ ８ ，． ， 分别 置 ． ， ． ｏ ４ ｏ ６， ． １ ０ｍＬ 并
量范 围为 ０ ３％ 一 ．６ ； ．８ ０ ７ ％ 随着 栽培 月 龄 的增加 ， 多糖呈 下 降趋 势 ， 黄酮 呈上 升趋 势 。栽 培 ４个 月后 ， 总 福建 种 的多糖 和 总黄酮 含量均 高 学 报 表 １ 金 线 莲 不 同栽 培 类 型 及 不 同 栽 培 月 龄 的 多糖 和 总黄 酮 含 量
加 。多糖 和总黄酮 是金线 莲 的主要有 效 成分 ， 是金 线莲 产 品质量 标 准 的 重要 控 制 成分 ， 其含 量 的差 异将 直接影 响金 线莲及 其相关 产 品 的应 用功效 。量 化指标 是 中药 现代 化 的重 要 部分 ， 金线 莲 的有 效成 分 制 对 定量化 标准 ， 有利 于指导 企业 的生产 ， 有 利 于对 产 品进 行 质量 跟 踪 和 监控 。为 了保 证 福建 金 线 莲 产业 也