动物实验的基本技术和方法PPT课件

• 应熟练掌握各种实验动物的抓取方法，用轻 柔的手法把对动物施加的恐惧和痛苦降到最 低。
• 一般说来动物是不会主动攻击人的。 1. 小鼠抓取的注意点 2. 大鼠抓取的注意点 3. 豚鼠抓取的注意点
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4. 兔抓取的注意点 • 最好戴人造革围裙和袖套，以免爪子抓伤。 • 采用正确地抓取方法。 • 可采用兔固定器固定进行实验操作，或一人抓
动物实验基本知识 和操作技术
上海中医药大学实验动物中心 汤家铭
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进行动物实验操作前必须注意的事
一、动物福利和动物实验伦理问题 什么是动物福利？ • 动物福利是指动物在整个生命过程中应得到人类的保护，
其基本原则是要善待动物，保证动物的健康和ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ乐。 • 动物福利的提出是基于这样一个观点，即动物与人一样，
2. 所用实验动物的品种、品系、性别、数量等能否 得到
3. 所需要的动物实验技术是否熟练掌握 4. 所用动物实验器具、试剂是否准备好 5. 所用的仪器设备是否处于可运行状态
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6.预实验 正式实验前的演习 预实验可用少量动物进行 预实验结果不能并入正式实验结果一起 分析。
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一、动物的抓取
• 动物的抓取是顺利进行各项动物实验操作最 基本的一个环节。
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（二）动物实验分组设计的基本类型 1.完全随机化设计 2.按体重分层随机区组设计 3.配对设计
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（二）按体重分层随机区组设计 先确定实验的组数，将动物称重，按体重的轻重顺序编号，再用随机化
工具，如随机数字表等，将动物随机分配至处理组及对照组。 • 随机区组法举例 • 以用四氧嘧啶诱发小鼠糖尿病模型，用药物进行治疗观察疗效为例，实
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二、动物实验分组设计
（一）一般动物试验分组设计的基本原则： 随机、对照和重复。
• 随机：就是按照机遇均等的原则来进行分 组。其目的是尽量减少各种干扰因素造成 的实验误差，不受实验者主观因素或其他 偏性误差的影响。
• 随机化的手段可采用编号卡片抽签法，随 机数字表或采用计算器的随机数字键。
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• 对照：是要求在实验中设立可与实验组比较，用以消 除各种无关因素影响的对照组。 对照应有可比性：同时同地同条件 对照设立有两种方式：
取固定，一人实验操作。
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豚鼠和兔的抓取
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5. 犬抓取注意点 • 实验用犬有专用的比格犬和农村收购来的草犬。 • 犬是通人性的，草犬购入后，饲养人员和实验
人员要经常亲近它们，使它放松对你的警惕， 容易直接抓取它们。 • 不要轻易使用长柄铁钳，钳伤造成的伤害会使 它对你更加恐惧，影响以后实验的进行。 • 抓取后用绳子将嘴绑住。
有思维、有情感，应当给予与人一样的生存权。 • 台湾学者夏良宙（1990年）把动物福利概括成两句话：
善待活着的动物， 减少动物死亡的痛苦。 应该再加一句：动物死后应得到妥善处理。
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在国际上被普遍认可的动物福利包括以下5个内 容，即：
1.应提供给动物满足生长发育和繁衍后代的营养食 物和清洁的饮水，使其免受饥渴。（吃好喝好）
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• 重复：是指同一处理要设置多个样本数。 重复的主要作用是估计试验误差、降低试 验误差和增强代表性，提高实验结果的精 确度，保证实验结果能在不同个体中稳定 地重复出来。
• 样本数过少，实验处理效应不能充分显示； 样本数过多，又会增加实际工作中的困难。 因此在进行实验前必须确定最少的样本例 数。最少的样本例数可按一般估测方法确 定，也可通过统计学方法进行测算确定。
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• 动物实验的伦理判断标准： 1.必须权衡实验的目和得出的结论与动物由
此而受到的伤害和死亡。 2.必須清楚而且明确「沒有任何替代方法可
达到所做的动物实验的目的」这个前提。 3.必须将动物的痛苦、压迫和不适减到最低
程度。
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二、 动物实验是实践性非常强的技术 和方法，不能仅靠书本理论知识，需 要通过反复实践加以掌握。 目的：
• 保证实验的顺利进行。 • 减少动物承受的痛苦。
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• 成为熟练掌握动物实验操作技 术的能手或专家应该是大学/研 究所每一个动物饲养管理人员 所追求的目标。
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动物实验前的准备
1. 所用动物实验设施是否符合本实验要求 普通设施，清洁级、SPF设施，感染性设施，有 毒有害供试品设施，放射性设施 实验室、手术室
• 自体对照 1.实验前后对照 2.身体左右对照 • 组间对照 （以手术造成兔腹主动脉损伤动脉粥样硬化模型为例） 1.正常（空白）对照组：正常饮食，不做手术 2.假手术组：正常饮食，做手术 3.模型组：手术+高脂饲料 4.已知疗效药物组：手术+高脂饲料+已知疗效药物 5.未知疗效药物组：手术+高脂饲料+未知疗效药物 6.赋型剂对照：手术+高脂饲料+赋型剂
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• 饲养繁殖实验动物的目的是用实验动物作 为人类的替难者进行各种生物医学研究。 一方面随着生物医学的发展，实验动物的 使用量逐年增加，使用种类也逐年扩大； 另一方面从动物福利和动物实验伦理学考 虑，又需要尽量减少一些不必要的动物实 验，特别是人类的宠物诸如猫、犬、猴等 ，或者在不得不做的动物实验中尽可能将 动物的痛苦、压迫和不适降到最低。
2.应提供给动物适当的栖息之地和饲养场所，使其 能休息和睡眠。（休息好）
3.应提供预防动物疾病和患病后及时诊疗的措施， 使其免受疾病和伤害的痛苦。（健康成长）
4.应提供给动物安静的饲养环境，无刺激动物发生 应激和恐惧的场面和声音。（平静生活）
5.应提供给动物同类一起自由玩耍、表达天性的空 间和自由。（表达天性）
验中可分为5组：正常对照组、模型组、药物治疗低剂量组、高剂量组 和已知可治疗糖尿病药物组，每组10只，5雌5雄。按下列步骤进行分 组： 1）雌雄分开：分组时雌、雄动物分开分别进行。 2）用记号笔在小鼠尾巴上随机编1-25号。 3）按编号称重，记录每只小鼠的体重。 4）按动物体重顺序依次重新编号。 5）共5个实验组分成5个区组，每个区组都有5只体重相近的动物。第一 区组5只动物为1、2、3、4、5号，第二区组为6、7、8、9、10号， 余类推。 6）抄录随机数表。抄录数字的个数等于区组数减1，如5个区组就抄录4 个数字。第5个动物无随机数字，其分组为调剂。以后的区组按顺序依 次抄录数字。 7）将小鼠分到各组中。