抗A、抗B血型定型试剂的注意事项

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项

ABO血型鉴定的方法步骤与注意事项一.原理根据红细胞上有或无A抗原或B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。

可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。

所谓正定型，是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或抗—B。

二.试剂和材料1．抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清（制备方法见本节附注）2．5％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注；3．受检者血清；4．受检者5％红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。

三.方法1．试管法(1)取洁净小试管3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A十B，用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十B。

分型血清各l滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。

(2)另取洁净小试管3支，分别标明A、B和O细胞。

用滴管分别加入受检者血清l滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％试剂红细胞悬液l滴，混和。

(3)立即以1000r／min离心1min。

(4)将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。

如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。

(5)观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。

(6)凝集强度判断标准2.玻片法（1）取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和抗-A十B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴于标明的方格内，再各加受检者2％红细胞悬液1滴，混和。

(2)另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A 细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。

(3)将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约15min，以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应。

ABORhD血型定型检测试剂卡操作指南

输血相容性检测培训课件ABO/RhD血型定型检测试剂卡操作指南【试验目的和原理】ABO血型鉴定是通过检测被检者红细胞上是否存在A和/或B抗原（正定型）以及被检者血浆中是否存在抗A和/或抗B抗体（反定型）来确定。

对于成年个体被检者，红细胞上的A和/或B抗原与血浆中的抗A和/或抗B抗体存在一种对应关系。

其独特性质在于：红细胞上缺乏A和/或B抗原，则血清中存在与所缺乏的抗原对应的强反应性抗体，如红细胞上缺乏A抗原，则可以预见血浆中存在抗A抗体。

常规的ABO定型必须包括正定型（红细胞定型）和反定型（血浆定型），并将正反定型结果相互验证，只有正反定型结果一致时才能准确定型。

Rh阳性和阴性的鉴定是通过检测被检者的红细胞上是否有D抗原，有D抗原为Rh阳性，没有D抗原则为Rh阴性。

ABO/RhD血型定型检测试剂卡采用凝胶作为微柱凝胶卡的填充物，将生物化学的凝胶分子筛过滤技术、离心技术和血型血清学的抗体特异性结合在一起，其中抗A凝胶管中灌注了含抗A抗体的凝胶，抗B凝胶管中灌注了含抗B抗体的凝胶，抗D凝胶管中灌注了含IgM 抗D抗体的凝胶。

A细胞、B细胞及Ctr管中灌注了不含血型抗体的凝胶，抗A、抗B及抗D凝胶管用于红细胞上A、B及D抗原检测，而A细胞、B细胞及Ctr管用于检测血浆中的抗体。

当抗原抗体反应时，凝集的红细胞在离心力的作用下不能通过凝胶而留在凝胶上层或游离在凝胶中，呈现阳性反应；而抗原抗体没有反应时，未凝集的红细胞在离心力的作用下可通过凝胶而沉积在微柱凝胶管的底部，呈现阴性反应。

【ABO/RhD血型定型检测试剂卡的用途】1、用于输血前检测（1）鉴定ABO，以备选择 ABO血型相配合的血液用于交叉配血。

（2）鉴定RhD血型，以备选择RhD血型相配合的血液用于交叉配血。

2、用于围产期检查（1）用于产前夫妇的ABO、RhD血型检测，进行新生儿溶血病产前预测。

（2）用于产后母子的ABO、RhD血型检测，进行新生儿溶血病产后诊断。

抗A抗B血型定型试剂

抗A抗B血型定型试剂（单克隆抗体）包装规格：10ml预期用途：1、专用于定性鉴定人ABO血型（正定型）2、ABO血型系统是临床输血、器官移植中最重要的血型系统，错误的ABO血型定型导致的输血反应将给受血者带来十分严重的后果。

因此，《中国输血技术操作规程》规定，ABO血型鉴定必须通过正反定型。

正定型是用已知的抗A和抗B血型定性试剂测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原；反定型是用已知ABO血型的红细胞测定血清中有无相应的抗A抗体或/和抗B抗体。

检验原理：根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，以及血清中有无抗A或（和）抗B抗体，可以将红细胞血型分为A型、B 型、AB型和O型。

根据抗A和抗B抗体与对应红细胞抗原的凝集反应，可以鉴定ABO血型。

ABO血型表现型反应格局表见下表：ABO血型表现行反应格局表主要组成成分：1、本品由抗A血型定型试剂、抗B血型定型试剂各1支组成。

2、本品由法国GIAGAST公司提供的杂交瘤细胞培养上清液和本公司自制的杂交瘤细胞培养上清液按4:1比例混合后，加入适量稳定剂、染色剂、防腐剂配置而成。

贮存条件及有效期:1、储存条件：2-8℃避光保存。

如果长时间储存在高温或反复冻融会使试剂失去活性。

2、有效期：储存条件下有效期24个月。

适用仪器：本品为非仪器配套试剂。

样本要求：按照临床输血技术规范中的血液样本采集步骤，采集患者或供血者、受血者的血液，红细胞抗凝或不抗凝样本。

严重溶血、脂血、污染标本不适用本项检测。

检验方法：1、平板法（玻片法）（1）加1滴抗A或抗B试剂于玻片上。

（2）再加1滴10%的被检红细胞悬液。

该红细胞悬液可以是盐水悬液，也可以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞。

（3）在圆形的玻片区域中混匀，（直径约为20mm大小），前后缓慢摇晃玻片。

2分钟左右肉眼判读结果，并记录。

2、试管法（1）加1滴抗A或抗B试剂于两支预先标记好的试管中（75*12mm或75*10mm）。

（2）再加一滴2-5%的被检红细胞悬液于试管中。

ABO血型鉴定操作规程

ABO血型定型编号：□□□□/J 04-2016操作规程版号；2016-A版第0次修改1.目的；为确保实验结果的准确，特别订本规程。

2.范围；适合进行ABO血型鉴定相关科室的全体工作人员。

3.职责；3.1科主任负责本规程的培训，考核及督促实施。

3.2科室工作人员按文件进行操作并建立相关记录，为实验结果的准确性负责。

3.3全科人员熟练掌握原理及操作。

4.原理根据红细胞表面有无A抗原和B抗原，将血分为A型、B型、O 型和AB型四种。

可利用红细胞凝集试验、通过正、反定型准确鉴定ABO血型。

正定型是用已知抗A和B分型血清来测定红细胞表面有无相应的A抗原或B抗原；反定型是用已知的A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的抗A或抗B。

反定型中使用O细胞是为了检测抗A、抗B以外的不规则抗体。

5,试剂5.1抗-A、抗B分型血清。

5.2～5%、B、O、试剂红细胞。

6试剂的质量控制；6.1每个工作日在实验开始前，对试剂进行外观检查，包括；有效期、有无渗漏等，试剂红细胞无明显溶血。

6.2每个工作日在实验开始前，对所有的抗-A、抗-B、试剂红细胞按《血型试剂确认操作规程》进行特异性验证。

6.3将试剂的厂家、批号及检测结果记录到《血型试剂质量控制记录»中。

7.工作程序：7.1正定型：取洁净小试管2支，分别标记“抗A”、“抗B”，分别滴加抗A、抗B试剂1滴于试管底部，再分别加入受检者2%~5%红细胞1滴，混合。

7.2反定型：另取洁净小试管3支，分别标记“A C”、“B C”、“O C”，各加入受检者血清2滴于试管底部，再分别加入A、B和O型2%~5%试剂红细胞1滴，混合。

7.3以3400转/15秒（或1000转/1分钟）离心将试管轻轻摇动，仔细观察细胞扣有无凝集或溶血现象。

观察结果时既要看有无凝集，也要注意凝集强度，这将有助于亚型等的发现。

8.结果判定:凝集强度的判断依据《红细胞凝集强度判读标准》进行。

血型正定型反定型抗A 抗B A C B C O CA + - - + -B - + + - - O - - + + - AB + + - - -9正反定型不一致的原因；有技术问题或红细胞和血清本身问题，常见者有以下情况；分型血清效价太低，亲和力不强。

abo血型鉴定注意事项

abo血型鉴定注意事项
ABO血型鉴定是一种重要的血型试验，以下是注意事项：
1.在进行ABO血型鉴定前，需要进行严格的洗手和消毒，以避免各种污染和交叉感染。

2.鉴定前需要准备好必要的实验室物品和试剂，保持其质量和洁净度。

3.抽取静脉血时，需要选择合适的采集部位和采集器具，避免对患者造成不必要的伤害或感染。

4.在进行ABO血型鉴定时，应严格按照试剂的使用方法和标准操作步骤进行操作，确保准确可靠。

5.在解读ABO血型鉴定结果时，需要仔细核对数据和记录，排除数据错误或录入失误的可能性。

6.对于特殊情况或不确定的结果，应及时与其他医务人员和专家进行交流和讨论，以避免对诊疗和治疗造成影响。

7.鉴定结果应妥善保存和管理，保护患者的隐私和数据安全。

医院人ABO血型正定型标准操作程序

人ABO血型正定型标准操作程序
【项目名称】抗A、抗B血型鉴定
【实验用途】专用于鉴定人ABO血型
【标本种类】新鲜全血
【仪器和材料】抗A、抗B血型定型试剂（单克隆抗体）
【试剂稳定性】：原装试剂在2~8℃避光保存，有效期24个月【操作步骤】
①平板法（玻片法）：本品与受检者全血或10％红细胞生理氯化钠悬液按1:1使用，不必再稀释，按照有无凝集判定结果。

②试管法：本品与受检者5％红细胞生理氯化钠悬液按1:1使用，不必再稀释，摇匀，1000r/min离心1分钟或室温静置1小时，按
【注意事项】
①、对含有较多自身冷凝集素的受检者，在鉴定血型时往往被误定为AB血型，遇到此种情况，需用37℃生理氯化钠溶液洗涤受检者红细胞2-3次，以去除吸附在红细胞上的冷凝集素，然后再鉴定血型。

②、在做配型试验时，如发现有不配现象，则取受检者血清，用已知A或B血型红细胞进行反定型试验，以核实原鉴定的血型是否正确。

③、用立即试管法不能测出亚型（如Ax），需延长作用时间。

④、本品如出现浑浊或变色则不能使用，若开瓶使用时间较长后，最好用已知A、B、O血型红细胞检查结果是否与已知血型相符，以防制品污染、变质失效，而造成鉴定错误。

⑤、试剂应在有效期内使用。

S006红细胞ABO血型(反定型)鉴定标准化操作规程

红细胞ABO血型（反定型）鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO血型在临床上同型输注，确保临床输血安全、有效，根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。

二、方法采用试管法检测红细胞ABO血型（反定型）。

三、原理用已知的A1、B、O标准红细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体，结合正定型结果判断ABO血型。

四、适用范围适用于输血前患者与献血者红细胞ABO血型(反定型)确认。

五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：人ABO血型反定型用红细胞试剂盒；2、试剂生产厂家：上海血液生物医药有限公司；3、批准文号：国药准字S2*******；4、包装规格：A1、B、O试剂各1支， 10ml /支；5、贮藏条件；2-8℃保存，不能冰冻。

6、有效期：自检定合格之日起2个月；7、试剂性能：外观、溶血率%、特异性、抗原性均符合检定规程要求。

七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管3支，分别标明A1型细胞、B型细胞、O型细胞，用滴管分别加入受检者血清1滴于试管，再分别用滴管加入A1、B、O型试剂红细胞悬液1滴。

2、，摇动试管，立即以1000rpm离心1min或3400rpm离心15s。

3．先观察是否有溶血，溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染；将试管轻轻摇晃，使沉于管底的红细胞浮起，观察细胞扣情况，并判断凝集强度（见下表）。

如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。

红细胞ABO血型（反定型）结果凝集强度判断对照表4、ABO血型（反定型）表现型反应格局表九、质量控制1、对新进批号的试剂应作亲和力与效价验定。

血库技术操作规程

ABO血型正定型操作规程1、原理根据红细胞表面有无A抗原和（或）B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。

可利用红细胞凝集试验，通过正定型鉴定ABO血型。

正定型用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原。

2、试剂2.1 抗A、抗B血型定型试剂，有批文准号。

2.2 受检者3~5%红细胞盐水悬液。

3、操作3.1 试管法3.1.1 取洁净小试管2支，分别标明抗A、抗B，用滴管分别滴加抗A、抗B分型试剂各一滴于试管底部，再用滴管分别加入受检者3~5%红细胞盐水悬液1滴混匀。

3.1.2 立即以1000r/min离心1分钟。

3.1.3 将试管从离心机取出，轻轻摇动试管，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集或溶血现象。

如肉眼未见凝集，应将反应物倒于玻片上，以低倍镜观察。

3.1.4 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。

3.1.5 凝集强度判断标准4+：红细胞凝集成一大块，血浆清晰透明。

3+：红细胞凝集成数小块，血浆尚清晰。

2+：红细胞凝块分散成数小块，周围可见到游离红细胞。

1+：肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞±：镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞。

MF：即混合凝集外观，是指镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍呈分散分布。

—：镜下未见凝集，红细胞均匀分布。

3.2 玻片法3.2.1 取清洁玻片一张（或凹玻板），用记号笔划成方格，标明抗A、抗B，分别滴加抗A、抗B血清一滴于相应的方格内，再加受检者5%红细胞悬液一滴混匀。

3.2.2 将玻片（或凹玻板）不断轻轻转动，使血浆与细胞充分混匀，连续1~5分钟，肉眼观察有无凝集或溶血反应，再在低倍镜下观察结果。

ABO血型反定型操作规程1、原理用已知的A1、B细胞测定被箭血清中有无相应的抗A或抗B抗体，结合正定型结果判断ABO血型。

2、试剂为成熟市售标准红细胞，主要组成组分为：A1、B型红细胞，葡萄糖、枸橼酸、核苷酸、抗生素等。

抗 a 抗 b 血型定型试剂(单克隆抗体+人血清)

抗 A 、抗 B 血型定型试剂（单克隆抗体）Kang A、Kang B Xuexing Dingxing Shiji (Dankelongkangti) Anti- A and Anti- B Blood Grouping Reagents (Monoclonal Antibody )本品系用A血型单克隆抗体或 B 血型单克隆抗体配制而成，用于鉴定人ABO 血型。

1 基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合凡例的要求。

2制造2.1 专用原材料2.1.1杂交瘤细胞杂交瘤细胞建株，需经几次克隆筛选，以 100 ％克隆孔上清相应抗体阳性的作为原始细胞株。

原始细胞株经传代，稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株为主细胞。

杂交瘤细胞库的建立及检定应符合“生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定规程”规定。

工作细胞库经血凝效价测定合格后方能用于生产。

2.1.2染色剂抗A可选用次甲基兰等蓝色染料、抗B可选用吖啶黄等黄色染料配制至适宜浓度。

2.1.3防腐剂可选用叠氮钠、硫柳汞钠盐等，配制至适宜浓度。

2.1.4稳定剂可选用蛋白质、葡萄糖、盐类等配制至适宜浓度，不得使用凝聚胺、聚乙二醇等促凝剂用于配制稳定剂。

2.2 制备程序2.2.1杂交瘤细胞培养物上清液的制备抗A 血型或抗 B 血型杂交瘤细胞经培养传代，待杂交瘤细胞过度生长后收取培养液上清．检测血凝效价合格后扩大培养即得。

2.2.2小鼠杂交瘤腹水的制备2.2.2.1小鼠腹腔预处理健康 BALB / c 小鼠腹腔用石蜡油预处理。

2.2.2.2接种检测抗 A 血型或抗 B 血型杂交瘤细胞培养物上清液抗体血凝效价合格后，用生理氯化钠溶液或不完全培养液重新悬浮细胞，接种于数天前用石蜡油处理过的小鼠腹腔内。

2.2.2.3腹水的收集接种后数周，处死小鼠收集腹水，离心去沉淀，以适当方法除纤维蛋白原，加入适宜的防腐剂，－30℃及以下保存。

2.3 半成品2.3.1 半成品配制合并杂交瘤细胞培养物上清，可加入少量腹水混合，加入染色剂，使抗 A 血型定型试剂呈蓝色，抗B血型定型试剂呈黄色，除菌过滤。

抗 a 抗 b 血型定型试剂(单克隆抗体)