无菌操作的具体流程

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无菌技术的操作流程

无菌技术的操作流程

无菌技术的操作流程一、无菌技术的基本原理无菌技术是通过消灭或抑制微生物的生长繁殖,从而保证实验环境或产品的无菌状态。

其基本原理包括:采用无菌材料和设备、严格控制操作环境、采取无菌操作方法、使用无菌培养基和培养条件、进行无菌检测等。

二、无菌技术的操作步骤(一)准备无菌材料无菌技术的第一步是准备无菌材料,包括培养基、培养皿、试管、移液器、培养瓶等。

这些材料要经过高温高压灭菌,确保其无菌状态。

(二)准备无菌操作环境无菌技术的操作环境也需要保持无菌。

首先要进行有效的空气净化,关闭门窗,打开洁净工作台或灭菌柜。

然后在工作区域内进行彻底的清洁消毒,使用酒精或其他消毒剂擦拭操作台面、手套箱和实验器具。

(三)无菌操作方法无菌技术的核心是无菌操作方法。

首先要正确佩戴手套和口罩,以避免人员对实验环境的污染。

然后进行手部消毒,使用酒精或其他消毒剂彻底清洁双手。

在进行无菌操作时,要注意避免接触非无菌物品,尽量保持双手不离开工作区域。

(四)制备无菌培养基制备无菌培养基是进行微生物培养的重要步骤。

首先要准备好所需的培养基成分,然后按照一定比例将其溶解在适量的蒸馏水中。

接下来将培养基装入试管或培养瓶中,用高温高压灭菌器对其进行灭菌处理。

(五)接种微生物接种微生物是进行无菌培养的关键步骤。

首先要选择合适的接种方法,常用的有平板接种法、斜面接种法和液体接种法等。

然后将待接种的微生物用无菌技术转移到培养基上,注意避免污染。

(六)培养微生物接种微生物后,要进行培养以促进其生长繁殖。

培养条件包括适宜的温度、湿度和光照等因素。

在培养过程中,要避免对培养基的污染,定期观察和记录微生物的生长情况。

(七)无菌检测无菌技术的最后一步是进行无菌检测,以确认实验环境或产品的无菌状态。

常用的无菌检测方法有菌落计数法、涂布法和生物指示剂法等。

通过这些方法,可以判断培养基是否受到污染,进而采取相应的措施。

三、无菌技术的注意事项(一)注意个人卫生在进行无菌操作时,要注意个人卫生,佩戴手套和口罩,保持双手的清洁,并避免对实验环境的污染。

无菌操作流程及注意事项

无菌操作流程及注意事项

无菌操作流程及注意事项1. 简介无菌操作是实验室和医疗领域中常用的一种技术,旨在防止微生物的污染。

在无菌操作中,需要使用无菌技术和设备,以确保实验样品或手术场所不受外界微生物的污染,并保持操作人员的安全。

本文将详细介绍无菌操作的步骤和注意事项,以确保流程清晰且实用。

2. 步骤2.1 准备工作在进行无菌操作之前,需要进行一些准备工作,包括:•准备所需的材料和设备:如培养皿、试管、移液器、超净台等。

•检查设备是否工作正常:确认超净台和灭菌器工作正常,并检查培养皿和试管是否完好。

•消毒工作区域:使用消毒剂彻底清洁工作区域,包括超净台、桌面、抽屉等。

2.2 穿戴个人防护装备在进行无菌操作之前,必须穿戴适当的个人防护装备,包括:•实验室外套:穿戴干净的实验室外套,确保不会将外界的微生物带入工作区域。

•手套:戴上无菌手套,以防止手部对样品的污染。

•口罩:佩戴口罩可以防止呼吸道上的微生物进入操作区域。

2.3 设备处理在进行无菌操作之前,需要对使用的设备进行处理,包括:•灭菌:将需要使用的器具放入灭菌器中进行高温高压灭菌,确保器具表面无微生物存在。

•前消毒:在使用培养皿、试管等实验器具之前,用70%乙醇或其他消毒剂擦拭器具表面,杀灭潜在的微生物。

2.4 环境控制在进行无菌操作时,需要控制操作环境以防止微生物污染,包括:•超净台:将操作区域放置于超净台上,并打开超净台风机以产生局部无尘环境。

•环境清洁:保持操作区域干净整洁,并定期清洁工作区域。

2.5 样品处理在进行无菌操作时,需要特别注意样品的处理,包括:•样品传递:将需要处理的样品放置在超净台上,并使用无菌移液器等工具进行传递,避免直接接触样品。

•无菌操作:使用无菌技术和设备进行样品处理,如使用无菌移液器、无菌培养皿等。

•避免污染:避免将非无菌物品接触到样品中,如手指、试剂瓶口等。

2.6 结束工作在完成无菌操作后,需要进行一些收尾工作,包括:•废弃物处理:将使用过的培养皿、试管等废弃物放入专用的废弃物容器中,并进行适当的处理。

无菌技术基本操作流程

无菌技术基本操作流程

无菌技术基本操作流程无菌技术是实验室中常用的一项操作技术,用于保证实验过程中无外源性的微生物污染。

无菌技术的基本操作流程包括无菌操作准备、无菌操作过程以及无菌操作后的处理。

本文将详细介绍无菌技术的基本操作流程。

一、无菌操作准备1. 实验器材准备:首先,需要准备好无菌操作所需的实验器材,如培养皿、试管、移液管、试剂瓶等。

这些器材在使用前应经过高温高压灭菌或采用其他合适的方法进行无菌处理。

2. 工作台清洁:清洁工作台表面和周围环境,使用75%酒精或其他消毒剂擦拭工作台面。

确保工作台表面干燥无尘,避免微生物的污染。

3. 个人防护:进行无菌操作前,必须进行个人防护,包括佩戴无菌手套、实验服和口罩等,以防止人员对实验物品的污染。

二、无菌操作过程1. 灭菌操作:准备好所需的培养基、培养物或其他实验物品后,将其放入高温高压灭菌器中进行灭菌处理。

确保在灭菌过程中,温度和压力都能达到需要的标准,以保证灭菌效果。

2. 无菌操作技巧:在进行无菌操作时,需要掌握一些基本的技巧。

例如,使用酒精灯对操作器具进行烘烤,使用无菌吸管或移液器进行液体的移取,使用火焰对操作区域进行消毒等。

这些技巧能有效减少外源性微生物的污染。

3. 空气质量控制:无菌操作过程中,空气中的微生物也是一种潜在的污染源。

因此,需要注意控制实验室的空气质量,可以通过空气过滤器、超净工作台等设备来净化空气,降低微生物的含量。

三、无菌操作后的处理1. 废弃物处理:无菌操作后产生的废弃物需要进行特殊处理,以避免对环境和他人的污染。

例如,将使用过的无菌吸管、培养皿等放入专门的废弃物容器中,进行高温高压灭菌或其他合适的处理方式。

2. 设备清洁和消毒:无菌操作结束后,需要清洁和消毒使用过的实验器材和操作区域。

使用75%酒精或其他合适的消毒剂对器材进行彻底清洁,以确保下次使用时不会造成污染。

3. 记录和整理:无菌操作结束后,应及时整理和记录实验过程中的关键信息,如操作时间、操作人员、实验物品名称和编号等,以便后续的数据分析和结果验证。

六项无菌操作简要流程

六项无菌操作简要流程

六项无菌操作简要流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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无菌技术操作流程简写

无菌技术操作流程简写

无菌技术操作流程简写一、介绍无菌技术是一种控制和预防微生物污染的方法。

在医疗、食品、制药等领域广泛应用。

本文将简要介绍无菌技术的操作流程。

二、准备工作在进行任何无菌实验前,必须确保工作区域及工具均处于无菌状态。

准备工作如下:1.清洁工作区:彻底清洁工作台,并用消毒剂擦拭。

2.穿戴无菌操作衣:穿戴无菌手套、衣服、帽子和口罩。

3.消毒操作工具:用高温高压灭菌器对操作工具进行灭菌处理。

三、操作流程1.打开无菌工作台:先进行手消毒,戴上无菌手套,然后打开无菌工作台的超净台面。

2.取出试验物品:将需要的无菌试验物品从包装中取出。

3.开启燃烧盖:打开无菌工作台的燃烧盖,并点燃蜡烛。

4.操作物品处理:将试验物品经过消毒的工具夹子夹取,置于燃烧盖上方进行燃烧处理。

5.灭菌试剂处理:将需要使用的灭菌试剂按照要求使用。

6.移液操作:使用无菌的移液器对液体进行移液操作。

7.杀菌操作:将操作好的液体或物品放入高温高压灭菌器进行杀菌。

8.清理工作区:实验结束后,对工作区进行彻底清洁。

四、注意事项1.不要触摸无菌操作区域以外的物品。

2.所有操作都必须在无菌条件下进行。

3.移液器在使用前需进行严格的清洁和消毒。

4.使用灭菌器时,遵守使用说明。

5.工作完成后,正确处理无菌试验物品及废弃物。

五、总结无菌技术框架下的操作流程可以帮助我们有效控制和预防微生物污染。

在操作过程中,我们需要按照一定的步骤和要求进行,严格遵守消毒和无菌处理的相关操作规范。

这样可以确保实验结果的准确性与可靠性,保护实验人员和被试物品的安全和健康。

希望本文对于理解无菌技术操作流程有所帮助!。

无菌技术操作流程

无菌技术操作流程

无菌技术操作流程无菌技术在生物制药、医疗卫生、实验室等领域的应用十分广泛。

无菌技术可以有效避免病原菌和其他微生物的污染,保障产品或实验的质量和安全性。

本文将详细介绍无菌技术操作流程。

一、前期准备1.隔离准备:将操作区域进行物理隔离,确保操作区域的洁净度。

2.检查准备:检查操作室内的所有设备和耗材是否齐备,看是否存在污染或损坏情况。

3.消毒准备:将操作区域、设备和耗材进行彻底消毒。

4.个人卫生准备:穿戴专业的防护服、手套、口罩等卫生用品,确保个人卫生干净。

二、取样1.实验前先进行直接检测,以保证取的物质没有污染,并进行对照。

2.用酒精、火焰或UV紫外线等方式对采集工具进行消毒,以确保操作的无菌化。

3.隔离并涂布取样:将样品放入无菌培养基中,涂布或喷洒到培养基的表面,须在无菌条件下进行。

4.取样后关闭培养器的盖子,并以适当的温度和湿度条件下进行培养。

三、进一步处理1.菌落提取:对于培养出的菌落,用消毒的、过滤的、无菌的三角勺将菌落取出,并将其转移到相应的液体培养基中。

2.培养基物筛选:将样品涂布在不同的选择性培养基或新鲜的有机物含量不高的培养基上,将不同的菌落分离开来并进行培养,以便鉴别和检测。

3.鉴别:用鉴别性培养基进行培养和检测,根据培养结果和生理学方法对菌株进行鉴别。

四、最终检测1.最终检测:对于鉴别得到的菌株,进行最终检测,确定其是否达到无菌水平。

2.环境检测:对于操作区域、设备和耗材,进行定期的环境检测,以确保无菌环境的质量和稳定性。

3.生产过程的监控:在生产过程中,对生产环境、设备和人员进行监控,确保无菌水平的稳定性和质量。

以上就是无菌技术操作流程,无菌技术的实施对产品或实验的质量和安全性至关重要,因此必须进行严格的操作和监测,确保无菌水平和品质。

此外,在操作过程中也必须加强个人卫生和消毒管理,以保证实验环境能够维持高质量和高效率。

无菌技术的操作流程

无菌技术的操作流程

无菌技术的操作流程无菌技术是现代生物实验室中常用的一项技术,它用于在无菌条件下进行微生物的培养和实验操作。

无菌技术操作流程的规范和正确性对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。

下面将详细介绍无菌技术的操作流程。

一、准备工作1. 实验前准备:清洗实验台面、操作台和实验仪器,保持干净整洁,并将所需的培养基、试剂和器械准备齐全。

2. 环境准备:确保实验室的环境无尘、无菌,使用紫外线灯照射操作区域,杀灭空气中的微生物。

二、个人防护1. 穿戴实验服、手套和口罩,避免将自身的微生物带入操作区域,减少对实验的污染。

2. 手部消毒:使用75%酒精或其他有效的手部消毒剂对双手进行彻底的消毒,确保双手洁净无菌。

三、无菌技术操作流程1. 开启无菌工作台或无菌柜,并等待5-10分钟,使其内部环境达到无菌状态。

2. 打开培养基瓶盖前,先对其外表面进行消毒,然后将瓶盖旋开一定角度,以避免瓶口受到外界污染。

3. 取出所需培养基,使用酒精灯或Bunsen燃烧器对瓶口进行消毒,避免外界空气中的微生物进入培养基中。

4. 取出需接种的微生物试管或培养皿,在火焰中将试管口或培养皿盖轻轻烧烤一下,杀灭表面的微生物,避免外界污染。

5. 使用灭菌的移液器或接种环,将微生物接种到培养基上,注意避免接触到瓶口或其他可能污染的物体。

6. 接种完成后,立即将瓶盖或培养皿盖盖好,避免外界的污染。

如果是试管,则立即用胶带封口。

7. 在接种完毕后,将移液器或接种环进行高温烧烤,以保证其表面的无菌状态。

8. 实验结束后,关闭无菌工作台或无菌柜,并对操作区域进行清洁消毒,确保下次实验时的无菌环境。

四、注意事项1. 操作要快且准确,以减少外界污染的可能性。

2. 避免与培养基的瓶口或试管口直接接触,以防止微生物的污染。

3. 注意消毒的方法和时间,确保彻底杀灭微生物。

4. 避免操作时产生气流,以防止空气中的微生物进入操作区域。

5. 定期对无菌工作台或无菌柜进行检测和维护,确保其正常工作和无菌状态。

无菌操作流程

无菌操作流程

无菌操作流程无菌操作流程是指在实验室中进行微生物培养、细胞处理等涉及无菌操作的一系列步骤。

以下是一个常用的无菌操作流程:1.准备工作。

收拾清洁实验台面,并将所需实验器材放置在无菌条件下。

2.消毒操作台面。

用70%酒精或其他合适的消毒剂将操作台面彻底消毒,以杀灭可能存在的细菌和其他微生物。

3.穿戴个人防护装备。

戴上实验室防护眼镜、口罩、手套等器材,防止细菌的介入或被人体内的细菌感染。

4.准备培养基和培养器具。

将所需培养基和培养器具(试管、平板等)放在无菌条件下,并确保其盖子或盖上塑料膜以阻挡细菌污染。

5.点火杀菌。

使用火焰托将所需培养器具(包括镊子、移液器等)进行火焰消毒,以杀灭可能存在的细菌。

6.取菌。

用无菌镊子将细菌菌落或细胞分离物取出,并尽量避免与其他物体接触。

避免取到细菌菌落外的其他物质,以防止细菌污染。

7.移菌。

将细菌菌落或细胞分离物移至预先准备好的培养基中,使用无菌的移液器按照之前的需求精确地转移或滴加细菌。

8.混匀。

将培养基中的细菌充分混匀,以保证细菌均匀分布在培养基上。

9.封闭培养器具。

将培养基的培养器具进行密封,以防止外界的细菌进入。

10.培养。

将培养器具放置在适当的温度和湿度下,在恰当的时间内培养。

11.消毒废弃物。

将无菌操作中使用过的培养器具和其他废弃物进行消毒处理,以杀死可能残留的细菌。

12.清洁操作台面。

清除实验台面上的任何待处理或已处理的物质以及实验仪器,使用适当的消毒剂进行彻底清洁。

以上是无菌操作流程的基本步骤,用于保证实验室中的微生物和细胞研究的无菌条件。

无菌操作的关键是避免外界细菌污染和对实验材料的细菌污染,从而保证实验结果的准确性和可靠性。

实施无菌操作也需要操作者具备一定的实验技巧,并且严格遵守实验室的规定和操作规程。

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无菌操作的具体流程清洗与灭菌一、实验目的能独立地进行用于细胞培养的各种器皿的清洗与消毒,掌握干热灭菌法、湿热灭菌法和滤过除菌法的操作,了解化学消毒法的使用方法。

二、实验原理清洗与消毒是组织培养实验的第一步,是组织培养中工作量最大,也是最基本的步骤。

体外培养细胞所使用的各种玻璃或塑料器皿对清洁和无菌的要求程度很高。

细胞养不好与清洗不彻底有很大关系。

清洗后的玻璃器皿,不仅要求干净透明,无油迹,而且不能残留任何物质。

如有毒的化学物质,哪怕残留0.1个,也可能影响细胞生长。

灭菌手段的选择十分重要,对不同的物品需采用不同的灭菌方法。

假如选用的方法不对,即使达到了无菌却使被灭菌药品丧失了营养价值、生物学特性或其他使用价值也不行。

以下在每种灭菌步骤中都介绍其使用范围。

三、实验材料、用品材料:无臭氧型紫外灯,微孔滤膜(直径25):孔径为0.22μm,微孔滤膜(直径90):孔径为0.22 μm,过滤器(直径25)。

药品:70%或75%酒精,0.1%新洁尔灭,煤酚皂溶液(来苏儿水),0.5%过氧乙酸,乳酸,37%甲醛,高锰酸钾,NaOH,盐酸,重铬酸钾,浓硫酸(工业),DEPC水[体积分数0.1%的焦炭酸二乙酯(diethylpyroearbonate)]。

仪器:超净台,干燥箱,高压锅,过滤器,过滤泵。

四、实验步骤(一)清洗1.新玻璃器皿的清洗先用自来水刷洗,再浸泡5%稀盐酸以中和玻璃表面的碱性物质和其他有害物质。

2.使用过的玻璃器皿的清洗(1)使用过的培养用品应立即浸入清水,避免干涸难洗。

(2)用洗涤剂清洗玻璃器皿,自来水清洗数遍,倒置自然干燥。

(3)浸酸性洗液过夜。

(4)从酸性洗液捞出后自来水冲洗10.15次去除残余酸液,蒸馏水涮洗3次,倒置烘干。

(5)包装(牛皮纸或一般纸)。

(6)高压(15磅20 min)或干热(170℃2 h)灭菌。

(7)贮存备用。

3.胶塞的处理(1)新胶塞应先用清水清洗之后再用0.2%NaOH煮沸lO-20 min。

(2)自来水清洗10次。

(3)再用1%稀盐酸浸泡30 min。

(4)自来水清洗10次,蒸馏水涮洗3次。

晾干,高压灭菌(见(二)消毒与灭菌)。

旧胶塞不必用酸碱处理可直接用洗涤剂煮沸和清洗数次,过蒸馏水,晾干,包装并高压灭菌后,便可使用。

(二)消毒1.物理消毒法(1)紫外线消毒用于消毒空气、操作台面和一些不能用干热、湿热灭菌的培养器皿,如塑料培养皿、培养板等。

这是常使用的消毒方法之一。

(2)干热灭菌主要用于玻璃器皿的灭菌。

将用于细胞培养的器皿放人干燥箱内,加热至160℃,保温90-120 min。

用于RNA提取实验的用品则需180℃,保温5-8 h。

(3)湿热灭菌此方法也称为高压蒸汽灭菌,是最有效的一种灭菌方法。

主要应用范围是布类、橡胶制品(如胶塞)、金属器械、玻璃器皿、某些塑料制品以及加热后不发生沉淀的无机溶液(如Hanks 液、PBS、20×SSC等)。

手动高压灭菌锅操作如下:①首先查看高压锅内的水是否充足,放人物品盖好盖。

②加热高压锅。

将放气阀打开,放气5—10 min,以排除锅内的冷空气。

③待锅内水沸腾后,落下放气阀继续升温升压,玻璃器皿等用15磅(121℃)30 min,胶塞、塑料制品、溶液等可用10磅(115 ℃)20 min。

调节火力大小保持该压力。

④停止加热,待压力自然下降至0再打开放气阀排汽,开盖,取出高压灭菌的物品烘干。

电热自动灭菌锅使用说明(型号:SANYO Autoclave MLS-3020):①放气筒加水至LOW水平线处,将与高压锅相连的导气管插入放气筒里,然后将放气筒归于原位。

②打开高压锅盖,加入蒸馏水至高压锅底的水位线,水位线位于V型凹槽的1/3-2/3处。

③打开电源。

④设定高压温度及时间,高压锅的温度范围为105-121℃,高压灭菌一般采用121℃20—30 min。

⑤把待高压的物品置于高压锅内,顺时针方向将exhaust钮旋至close位置。

⑥关闭高压锅盖,旋至显示屏上左上角的红亮点刚出现为止。

⑦按start钮,开始高压,在温度达80℃时显示器开始显示温度,当温度达到所需的设定温度时,在显示屏的左下角有一长形的指示灯闪亮,直到高压时间结束后指示灯灭,此时蜂鸣器报警一声。

当压力降至0 MPa时,蜂鸣器再报警一声。

温度降至80℃时,蜂鸣器报警10次。

显示屏温度指示消失,此时才可打开锅盖。

⑧关电源,开高压锅盖,取出已灭菌的物品,烘干。

(4)滤过除菌用于培养用液和各种不能高压灭菌的溶液的灭菌。

采用金属滤器和小型的塑料滤器,配上可以更换的微孔滤膜,极大地方便了操作。

滤器型号按直径大小划分。

如过滤量大的培养用液常用较大型号的金属滤器(直径90 mm、100 mm、142 mm……等),配以过滤泵使用。

过滤量较小的液体常用注射器推动的塑料小滤器(直径20 mm、25 mm等)。

滤膜孔径有0.60 μm、0.45 μm、0.35 μm、0.22 μm、0.10μm等,以0.22 μm除菌最为保险,但对于较粘稠难滤过的液体,仍需选用孔径较大的滤膜。

①在过滤器上装上微孔滤膜,孔径为0.22μm。

②用布包好,湿热灭菌后使用。

2.化学消毒法常用的消毒液有如下几种:(1)70%(或75%)酒精:超净台里常备70%酒精棉球(卫生级酒精),用于手和一些金属器械或工作台面的消毒。

(2)0.1%新洁尔灭:主要用于手和前臂的清洗以及工作后超净台面的清洁。

超净台旁应常备盛有0.1%新洁尔灭溶液的容器及纱布。

(3)来苏儿水(煤酚皂溶液):主要用于无菌室桌椅、墙壁、地面的消毒和清洗,以及空气喷撒消毒,特别是污染细胞的消毒处理。

使用浓度请按瓶上说明。

(4)0.5%过氧乙酸:是强效消毒剂,10 min即可将芽孢菌杀死。

用于各种物品的表面消毒,用喷撒和擦拭方式进行。

(5)乳酸蒸气:将乳酸放入坩锅内用酒精灯或电炉加热至沸腾为止。

将门窗紧闭1—3 d。

可将空气中漂浮的微生物杀死。

(6)37%甲醛加高锰酸钾:使用前先紧闭门窗。

将37%甲醛用酒精灯或电炉加热至沸腾后断电或灭火。

用一张纸盛好适量的高锰酸钾,迅速放人已加热好的甲醛中形成蒸气。

1—3 d后方可达到消毒空气的目的。

3.煮沸消毒急性消毒可用煮沸法,器械等煮沸15 min后使用。

五、注意事项1.清洗玻璃制品时,浸酸之后一定要用自来水冲洗10—15次。

因为残存的洗液对细胞粘附有很大影响。

清洗塑料制品时要用棉花或柔软纱布擦洗。

千万不要用硬毛刷,否则损害塑料表面后细胞不易贴壁。

Tip和Tube一定要用超声清洗处理后逐个清洗。

如没有洗净会影响下一次使用的效果。

2.干热灭菌时,应在白天使用烤箱,并不断观察,以免发生意外。

当温度超过100℃时,不能再打开烤箱门。

器皿烤完后,待温度降至100℃之下才能开烤箱门。

金属器械和橡胶、塑料制品不能使用干热灭菌方法。

.3.高压灭菌后器皿务必晾干或烘干,以防包装纸潮湿发霉。

4.牛血清、大部分培养基、胰酶和一些生物制剂是有机溶液,均不能高压(如TdR,秋水仙素,谷氨酰胺,异硫氰酸胍,MOPS等)。

5.滤过除菌时,滤器在使用前先装好滤膜(有时可在上面加一层定性滤纸),包好,经高压灭菌后才能使用。

滤过酶类制剂时应待滤器温度降至室温下再进行。

过滤时压力不宜过大,压力数字以2为宜。

压力太大时微孔滤膜可能破裂,或使某些微生物变形而通过滤膜。

装滤膜时位置要准确。

另外滤器包装时,螺钉不要拧得太紧,以防高压蒸汽不能进入,待高压灭菌之后,再拧紧使用。

6.使用化学消毒法时,配制75%酒精应用卫生级,不要用化学纯、分析纯和优质纯酒精。

来苏儿水不能用于皮肤消毒,它对皮肤有刺激性。

空气消毒时,所有的物品要事先准备齐全并使消毒者有较方便的退出途径。

因为甲醛或乳酸加热后放出的蒸气对人的角膜和呼吸道上皮有严重的刺激和伤害作用。

物制品无菌试验规程生物制品不得含有杂菌(有专门规定者除外),灭活菌苗、疫苗不得含有活的本菌、本毒。

在制造过程中应由制造部门按各制品制造及检定规程规定进行无菌试验,分装后的制品须经质量检定部门做最后检定。

各种生物制品的无菌试验除有专门规定者外,均应按照本规程的规定进行。

1抽样1.1原液及半成品原液及半成品应每瓶分别进行无菌试验,其抽样量应至少为0.1%,但不得少于1.0ml。

1.1.1大罐稀释的制品抽样数量不得少于10ml。

1.1.2原液及半成品每开瓶一次,应如上法抽验。

1.2成品每亚批均应进行无菌试验,样品应随机抽取,应具有代表性(包括分装过程的前、中、后样品)。

1.2.1分装量在100支(瓶)或以下者抽检不少于5支,101~500支(瓶)者抽检不少于10支(瓶),501~10000支(瓶)者抽检不少于20支(瓶,10001支(瓶)以上者抽检40支(瓶)。

1.2.2每瓶装量20ml以上的冻干血液制品,每柜冻干200瓶以下者抽检2瓶,200瓶及以上者抽检4瓶。

6~20ml抽检量加倍。

5ml和5ml以下者按1.2.1项抽检。

1.3凡规定需作支原体检查的制品,均应在半成品时按亚批进行检查,成品可不再做。

2无菌试验用培养基(培养基处方可附录1)2.1检查制品中本菌是否存活应采用适于本菌发育生长的培养基(在半成品时检查,有专门规定者除外)。

2.2检查需氧性和厌氧性杂菌应采用硫乙醇酸盐培养基。

检查不含汞类防腐剂制品中的需氧性和厌氧性杂菌时,该培养基中可不加硫乙醇酸盐。

检查霉菌和腐生菌应采用改良马丁培养基。

检查混浊制品可采用不含琼脂的硫乙醇酸盐培养基。

检查活菌苗时可加大琼脂含量,做成斜面。

2.3检查支原体应采用猪胃消化液半固体或牛心消化液半固体培养基。

2.4生物制品无菌试验用培养基亦可用经检定合格的干燥培养基配制。

2.5无菌试验培养基的灵敏度,乙型溶血性链球菌(32210株)应达到10-8,短芽胞杆菌(7316株)和生孢子梭状芽胞杆菌(64941株)应达到10-7,白色念珠菌(ATCc 10231)和腊叶芽枝霉应达到10-6。

2.6生物制品无菌试验培养基由质量检定部门与培养基制造部门会同进行灵敏度试验。

每当更换主要原材料时,应进行灵敏度试验,合格后方可应用(灵敏度试验法见附录2、3)。

2.7各生产单位的质量检定部门应定期抽检无菌试验培养基的灵敏度,检定所应定期抽检各所的无菌试验培养基。

3无菌试验方法3.1无菌试验取样、移种等全部操作,应在无菌操作室内或无菌条件下进行,无菌操作室应经常保持清洁,在每次操作前,应彻底消毒。

3.2菌苗、疫苗、类毒素、抗毒素类制品及粘稠不易过滤的血液制品应用直接接种法进行无菌试验。

人白蛋白及人丙种球蛋白(包括各种剂型及应用途径的制品)应用薄膜过滤法进行无菌试验,其他血液制品亦可用薄膜过滤法或直接接种法进行。

3.3直接接种法3.3.1菌苗、疫苗、类毒素、抗毒素类制品3.3.1.1每安瓿装量5.0ml以上者(不含5.0ml)取样不应少于1.0ml,装量在5.0ml以下者(含5.0ml)取样不得少于0.5ml,装量不足0.5ml者,全部吸取。

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