现代分离技术教案

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物质的分离、除杂和提纯(教案)

物质的分离、除杂和提纯(教案)

一、物质的分离1.1 学习目标:(1) 理解并掌握物质分离的基本方法及其适用范围。

(2) 学会运用物理方法进行物质的分离。

1.2 教学内容:(1) 物质分离的基本方法:过滤、蒸发、蒸馏、萃取、离子交换等。

(2) 适用范围及操作原理:了解各种分离方法适用的范围和操作原理。

1.3 教学活动:(1) 讲解物质分离的基本方法及其适用范围。

(2) 通过实验演示,让学生掌握物理方法进行物质的分离。

1.4 作业与评估:(1) 完成课后练习,巩固所学知识。

(2) 评估学生的实验操作能力和对物质分离方法的理解程度。

二、除杂和提纯2.1 学习目标:(1) 理解并掌握除杂和提纯的基本原理和方法。

(2) 学会运用化学方法进行物质的除杂和提纯。

2.2 教学内容:(1) 除杂和提纯的基本原理:了解除杂和提纯的基本原理,如吸附、离子交换、结晶等。

(2) 适用范围及操作方法:了解各种除杂和提纯方法适用的范围和操作方法。

2.3 教学活动:(1) 讲解除杂和提纯的基本原理及其适用范围。

(2) 通过实验演示,让学生掌握化学方法进行物质的除杂和提纯。

2.4 作业与评估:(1) 完成课后练习,巩固所学知识。

(2) 评估学生的实验操作能力和对除杂和提纯方法的理解程度。

三、常用的分离和提纯方法3.1 学习目标:(1) 学习并掌握常用的分离和提纯方法。

(2) 学会运用这些方法解决实际问题。

3.2 教学内容:(1) 常用的分离方法:过滤、蒸发、蒸馏、萃取、离子交换等。

(2) 常用的提纯方法:吸附、离子交换、结晶、电解等。

3.3 教学活动:(1) 讲解常用的分离和提纯方法及其应用。

(2) 通过实验演示,让学生掌握这些方法的操作技巧。

3.4 作业与评估:(1) 完成课后练习,巩固所学知识。

(2) 评估学生的实验操作能力和对常用分离和提纯方法的理解程度。

四、实验操作技巧4.1 学习目标:(1) 学习并掌握实验操作技巧,提高实验准确性和安全性。

(2) 学会运用实验操作技巧进行物质的分离和提纯。

中考化学实验专题复习:物质的分离、除杂和提纯(教案)

中考化学实验专题复习:物质的分离、除杂和提纯(教案)

中考化学实验专题复习:物质的分离、除杂和提纯(教案)一、教学目标:1. 理解物质的分离、除杂和提纯的基本原理。

2. 掌握常见的物质分离和提纯方法,如过滤、蒸发、蒸馏、萃取等。

3. 能够运用所学的知识解决实际问题,提高实验操作能力和科学思维。

二、教学内容:1. 物质的分离方法:过滤、蒸发、蒸馏、萃取等。

2. 除杂原则:不增、不减、易分离、易复原。

3. 提纯方法:结晶、干燥、吸附等。

4. 实验操作技巧和注意事项。

三、教学过程:1. 导入:通过回顾已学的物质分离和提纯方法,引导学生思考如何选择合适的方法进行实验。

2. 讲解:详细讲解物质的分离、除杂和提纯的基本原理和方法,结合实例进行解释。

3. 演示:进行实验演示,展示常见的物质分离和提纯操作,让学生直观地理解实验过程。

4. 练习:学生分组进行实验练习,运用所学的知识进行物质的分离和提纯操作。

5. 讨论:学生分组讨论实验过程中遇到的问题和解决方法,分享实验心得。

四、教学评价:1. 学生能够理解物质的分离、除杂和提纯的基本原理。

2. 学生能够掌握常见的物质分离和提纯方法,并能够运用所学的知识解决实际问题。

3. 学生具备一定的实验操作能力和科学思维。

五、教学资源:1. 实验仪器和试剂:烧杯、漏斗、滤纸、蒸馏器、萃取剂等。

2. 教学课件和教案:提供详细的课件和教案,帮助学生理解和掌握所学内容。

3. 参考资料:提供相关的参考书籍和网络资源,供学生进一步学习。

六、教学重点与难点:教学重点:1. 掌握过滤、蒸发、蒸馏、萃取等物质分离方法的操作步骤及适用条件。

2. 理解除杂原则及应用。

3. 学会使用结晶、干燥、吸附等方法进行物质的提纯。

教学难点:1. 不同分离方法的选择与操作。

2. 除杂原则在实际操作中的应用。

3. 复杂物质体系中物质的分离与提纯。

七、教学方法:1. 采用问题驱动的教学方法,引导学生思考和探索。

2. 利用实验演示和分组实践,提高学生的动手操作能力。

3. 采用讨论和小组合作的方式,培养学生的团队协作和沟通能力。

高中化学无机物质分离教案

高中化学无机物质分离教案

高中化学无机物质分离教案教学目标1. 理解并掌握常见无机物质的物理和化学性质。

2. 学会使用过滤、结晶、蒸馏等基本分离技术。

3. 能够根据物质性质选择合适的分离方法。

4. 培养学生的实验操作能力和科学探究能力。

教学内容1. 无机物质的基本性质。

2. 无机物质的常见分离方法。

3. 实验操作步骤及注意事项。

教学过程引入新课通过展示几种混合的无机物质,让学生观察并思考如何将这些物质分离开来。

引导学生回顾物质的物理和化学性质,为后续的分离方法选择打下基础。

讲解新知详细讲解过滤、结晶、蒸馏等分离技术的基本原理和适用范围。

例如,过滤适用于固体与液体的分离;结晶适用于溶解度随温度变化大的物质;蒸馏适用于沸点差异较大的液体混合物。

实验操作分组进行实验操作,每组选择一种或几种分离方法对给定的无机物质混合物进行分离。

教师在旁边指导,确保学生操作的安全和正确性。

结果分析实验结束后,让学生记录实验数据,分析实验结果,讨论分离效果的好坏及其原因。

鼓励学生提出改进意见和新的分离方案。

课堂小结总结不同分离方法的适用条件和优缺点,强调实验操作中的安全注意事项。

教学评价通过实验报告和小组讨论的方式,评价学生对无机物质分离方法的理解程度和实验操作能力。

教学反思教师应根据学生的实际操作情况和实验结果,反思教学方法和过程,以便不断优化教学策略。

安全提示在整个教学过程中,安全始终是第一位的。

教师要确保学生了解所有化学品的潜在危险,并采取适当的预防措施,如佩戴安全眼镜、实验服和手套等。

高中生物的分离技术教案

高中生物的分离技术教案

高中生物的分离技术教案
教学内容:分离技术的基本原理和应用
教学目标:
1.了解分离技术的定义和分类;
2.掌握几种常见的生物分离技术的原理和方法;
3.了解分离技术在生物学领域的应用。

教学重点:
1.分离技术的定义和分类;
2.几种常见的生物分离技术原理和方法。

教学难点:
1.理解分离技术原理;
2.掌握生物分离技术的应用。

教学准备:教材、实验器材(如离心机、电泳仪等)、幻灯片等
教学过程:
一、导入(5分钟)
1.引入分离技术的概念,让学生回顾上节课所学的相关内容;
2.提出分离技术的应用问题,引起学生的思考。

二、讲解(15分钟)
1.介绍分离技术的定义和分类;
2.详细讲解几种常见的生物分离技术的原理和方法,如离心法、凝胶电泳、柱层析等;
3.举例说明各种分离技术在生物学领域的应用。

三、实验演示(20分钟)
1.老师进行实验演示,让学生观察各种分离技术的操作;
2.让学生参与实验操作,体会分离技术的具体步骤和原理。

四、讨论与总结(10分钟)
1.引导学生讨论分离技术的优缺点;
2.总结各种分离技术在生物学研究中的重要性和应用价值。

五、作业布置(5分钟)
布置相关作业,巩固和拓展学生对分离技术的理解和运用。

教学反馈:
1.定期进行课堂测验,检查学生对分离技术的掌握程度;
2.鼓励学生积极参与实验操作,及时纠正错误。

教学延伸:
1.组织学生参加实验室参观,了解更多现代生物分离技术的应用;
2.开展生物科技创新活动,培养学生对生物技术的兴趣和探索精神。

生物分离技术教案

生物分离技术教案

生物分离技术教案一、引言生物分离技术是一种基于分子生物学原理的实验技术,可以用于分离和纯化目标生物分子,如DNA、RNA、蛋白质等。

这项技术在生命科学研究和生物工程领域具有广泛的应用。

本教案旨在介绍生物分离技术的基本原理、常用方法和实验步骤,帮助学生掌握相关知识和实验操作技巧。

二、背景知识1. 分子生物学基础知识:DNA、RNA、蛋白质的结构和功能,基因的表达调控等。

2. 实验操作基础:常见实验室操作技巧,如离心、洗涤、电泳等。

三、实验目的通过本实验,学生将能够:1. 了解生物分离技术的原理和方法;2. 学会使用离心、电泳等实验技术进行生物分离;3. 掌握常见的DNA、RNA、蛋白质纯化方法。

四、实验步骤1. DNA的提取和纯化a. 采集样品,如血液或植物组织。

b. 利用细胞裂解液破坏细胞膜,释放DNA。

c. 添加酶解液分解蛋白质,去除杂质。

d. 进行离心,分离DNA沉淀。

e. 删除上清液,洗涤DNA沉淀。

f. 重悬DNA沉淀,得到纯化的DNA。

2. RNA的提取和纯化a. 采集样品,如细胞培养物。

b. 利用细胞裂解液裂解细胞,释放RNA。

c. 加入酒精沉淀RNA,分离RNA沉淀。

d. 删除上清液,洗涤RNA沉淀。

e. 重悬RNA沉淀,得到纯化的RNA。

3. 蛋白质的分离和纯化a. 采集样品,如细胞裂解物。

b. 利用离心将细胞碎片与细胞液分离。

c. 添加沉淀剂使蛋白质沉淀。

d. 删除上清液,洗涤蛋白质沉淀。

e. 重悬蛋白质沉淀,得到纯化的蛋白质。

五、实验结果和讨论通过实验,可以观察到提取和纯化过程中目标生物分子的得率、纯度和活性等指标。

学生需要分析实验结果,讨论各步骤的操作是否准确,是否达到了预期的效果,并提出改进的建议。

六、实验应用1. 生物分离技术在基因工程领域的应用:通过纯化DNA、RNA等生物分子,可以进一步进行基因克隆、基因表达调控等实验研究。

2. 生物分离技术在药物研发领域的应用:通过纯化蛋白质等生物分子,可以研究其结构和功能,为新药物的设计和开发提供依据。

物质分离实验教案模板初中

物质分离实验教案模板初中

物质分离实验教案模板初中教学目标:1. 了解并掌握物质分离的基本方法和原理。

2. 能够独立完成简单的物质分离实验。

3. 培养学生的实验操作能力和观察能力。

教学内容:1. 物质分离的基本方法:过滤、结晶、萃取、分液、蒸馏等。

2. 物质分离实验的操作步骤和注意事项。

教学过程:一、导入(5分钟)1. 引导学生回顾已学的物质性质和微粒知识。

2. 提问:如何将混合物中的不同物质分离出来?二、新课内容(15分钟)1. 讲解物质分离的基本方法:过滤、结晶、萃取、分液、蒸馏等。

2. 通过示例和图示,讲解各种分离方法的原理和操作步骤。

3. 强调实验操作中的注意事项,如安全操作、仪器使用等。

三、实验操作(15分钟)1. 学生分组,每组选择一种物质分离方法进行实验。

2. 指导学生根据实验步骤进行操作,如准备仪器、配置溶液等。

3. 学生在实验过程中观察并记录实验现象。

四、实验结果与讨论(10分钟)1. 学生汇报实验结果,分享实验过程中遇到的问题和解决方法。

2. 教师引导学生分析实验结果,验证分离方法的适用性。

3. 讨论实验操作中的注意事项和实验结果的准确性。

五、总结与反思(5分钟)1. 教师引导学生总结物质分离实验的原理和方法。

2. 学生反思实验过程中的操作和观察,提出改进意见。

3. 布置课后作业,要求学生复习实验内容和实验报告。

教学评价:1. 课后收集学生的实验报告,评估学生的实验操作和实验结果。

2. 在下一节课开始时,进行实验操作的复述和提问,检查学生的掌握情况。

教学资源:1. 实验室仪器和试剂。

2. 实验指导书和图示。

教学建议:1. 实验前,教师应检查学生的实验仪器的准备情况。

2. 实验过程中,教师应加强对学生的指导,确保实验安全。

3. 实验结束后,教师应及时批改实验报告,给予学生反馈。

初中物理物质分离教案

初中物理物质分离教案

初中物理物质分离教案【教学目标】1. 让学生了解和掌握物质分离的基本方法及其原理;2. 培养学生运用物理知识解决实际问题的能力;3. 增强学生对物理实验的兴趣,提高学生的实验操作技能。

【教学内容】1. 过滤法:不溶性固体与溶液的分离;2. 蒸发法:分离可溶性固体与溶液;3. 蒸馏法:分离沸点不同的液体混合物;4. 萃取和分液法:分离溶解性差异较大的液体混合物;5. 渗析法:分离溶液中的胶体和悬浮物;6. 重结晶法:分离溶解度受温度影响较大的固体混合物。

【教学过程】一、导入(5分钟)1. 教师通过提问方式引导学生回顾已学的物理知识,如:我们已经学过哪些物质的性质?这些性质有哪些应用?2. 学生回答后,教师总结:本节课我们将学习一种非常重要的物质性质——溶解性,以及如何利用这一性质来分离混合物。

二、新课讲解(20分钟)1. 过滤法:教师通过讲解和演示,介绍过滤法的原理和操作步骤,以及注意事项。

学生跟随教师一起进行实验操作,巩固过滤法的应用。

2. 蒸发法:教师讲解蒸发法的原理,引导学生思考如何分离可溶性固体与溶液。

学生进行实验操作,体验蒸发法的过程。

3. 蒸馏法:教师介绍蒸馏法的原理和操作步骤,学生跟随教师进行实验,了解蒸馏法的应用。

4. 萃取和分液法:教师讲解萃取和分液法的原理,学生进行实验操作,掌握萃取和分液法的应用。

5. 渗析法:教师介绍渗析法的原理,学生进行实验操作,了解渗析法的应用。

6. 重结晶法:教师讲解重结晶法的原理,学生进行实验操作,掌握重结晶法的应用。

三、课堂练习(15分钟)1. 教师给出几个实际问题,要求学生运用所学的物质分离方法进行解答。

2. 学生独立思考,教师巡回指导,共同讨论得出答案。

四、课堂小结(5分钟)1. 教师引导学生回顾本节课所学内容,总结物质分离的方法及其应用。

2. 学生分享自己在实验过程中的收获和感受。

五、课后作业(课后自主完成)1. 复习本节课所学内容,整理笔记;2. 完成课后练习,巩固物质分离方法的应用。

高中生物细菌分离教案模板

高中生物细菌分离教案模板

高中生物细菌分离教案模板一、教学目标1. 了解细菌的分类和分离方法2. 掌握细菌的分离技术和实验操作方法3. 培养学生的实验操作能力和科学研究意识二、教学内容1. 细菌的分类和特点2. 细菌的分离和鉴定方法3. 实验操作:细菌的分离实验三、教学重点1. 理解细菌的分类体系和特点2. 掌握细菌的分离方法和实验操作技巧四、教学步骤1. 导入:介绍细菌的概念和重要性,引出细菌的分类和分离方法。

2. 理论学习:讲解细菌的分类体系和特点,细菌的分离和鉴定方法。

3. 实验操作:a. 实验前准备:准备所需材料和设备,消毒实验台面、试管等。

b. 样品处理:取样品并进行适当的处理,使细菌更容易分离。

c. 分离试验:根据实验要求进行分离试验,观察细菌的生长情况。

d. 结果记录:记录实验结果,对不同细菌进行鉴定和分类。

4. 总结:让学生总结实验过程中的经验和收获,加深对细菌分离的理解。

五、教学反馈1. 实验报告:要求学生完成实验报告,包括实验目的、方法、结果和结论等。

2. 学生互评:让学生相互交流实验心得和经验,共同提高实验技能。

六、拓展延伸引导学生了解细菌的应用领域和意义,探讨细菌在环境和健康领域的作用。

七、教学资源1. 实验材料:试管、琼脂培养基等。

2. 实验设备:培养箱、显微镜等。

3. 资料参考:生物学教材和相关学术文章。

八、教学评估1. 实验报告的评分2. 学生实验操作的表现评价以上为高中生物细菌分离教案模板范本,具体内容可根据实际教学情况进行调整和完善。

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第一讲绪论2学时※、通过本章学习应该掌握的内容1、何谓分离技术2、分离技术的分类与特点3、现代分离技术与食品工业4、食品分离过程的特点及其方法5、食品分离技术的评价及其发展趋向1.1何谓分离技术分离过程就是通过一定的手段,将混合物分成互不相同的几种产品的操作过程,它包括提取和除杂两个部分。

分离过程运用的手段可以是物理的,化学的,或者是物理和化学手段的互相结合。

1.2分离技术的分类与特点目前工业上分离技术的形式多种多样,常见的有二三十种。

随着放大技术和工业规模的扩大,将会有更多的分离技术从实验室规模扩大到工业化生产方面来。

1.2.1所有的分离技术,都可分为机械分离和传质分离两大类。

机械分离:处理两相或两相以上的混合物,其目的是简单地将各相加以分离,过程中间不涉及传质过程。

例如过滤、沉降、离心分离、旋风分离等。

这些过程有相当部分已经成为食品工程中常规的单元操作,不是本课要讨论的内容。

传质分离:分离过程中间有传质现象发生,传质分离技术处理的物料可以是均相体系,亦可以是非均相体系,但更多的是均相体系。

传质分离过程包括平衡分离过程和速率控制分离过程。

平衡分离过程是指借助于分离媒介(热能、溶剂、吸附剂),使均相混合物系统变成两相系统,再以各组分在媒介中的不同分配系数为依据而实现分离的过程。

速率控制分离过程则主要是根据混合物中各个组分扩散速度的差异来实现分离的过程,分离过程所处理的原料产品通常属于同一相态,仅仅是组成上存在差异,利用浓度差、压力差以及温度差等作为分离推动力。

表1-1 分离过程分类举例1.2.2 按分离技术的应用规模来分类,则又可将分离技术分为:1.2.3 如果按分离性质分类则有:⑴物理分离法:以被分离对象在物理性质方面的差异作为分离依据,采用有效的物理手段进行分离,包括热扩散法、梯度磁性分离法以及过滤、沉淀、离心分离等各种机械分离法。

⑵化学分离法:依据被分离对象在化学性质方面的差异,采用有效的化学手段进行分离的技术,如沉淀分离法、溶剂萃取法、离子交换法等。

⑶物理化学分离法:被分离对象中,有时存在着不止一个特性方面的差异,包括在物理和化学方面的差异,据此可以采用物理手段与化学手段相结合的技术进行分离。

一般来说,被分离组分之间的性质差别越大越多,分离的手段越多,分离越容易,分离得到的结果越精细,产品越好。

1.3分离技术与食品工业1.3.1 食品分离技术是食品工业的基础。

绝大多数食品工业都离不开食品分离技术,其中不少食品行业都是以分离过程为主要生产工序。

例如油料生产要从油料种子中将植物油分离出来;淀粉生产从小麦籽粒等中将淀粉分离出来;速溶咖啡、速溶茶的生产需要从咖啡和茶原料中提取出水溶性成分并去除对产品品质不利的其他成分。

这些行业,离开了分离技术,生产根本无法进行;分离水平不高,产品的质量也提高不了。

1.3.2 食品分离技术能提高食品原料的综合利用程度。

在食品加工过程中,运用分离技术就可以有效利用食品原料中的各种成分,提高原料的综合利用程度,就提高了食品原料的利用价值。

过去采用压榨法分离植物油,由于原料要经过热处理,其中的蛋白质因为受热而变性,只能用作饲料,大大降低了其利用价值;若采用低温脱溶的萃取法或水溶法分离,则能保持原料中蛋白质不变性,可以有效地加以分离和利用。

采用有效的分离方法,可以从茶叶下脚料中分理出茶多酚、儿茶素单体、咖啡碱、茶碱、可可碱等组成成分,使原料利用率大为增值。

1.3.3 分离技术能保持和改进食品的营养和风味。

食品加工过程中,经常运用到热处理,如果没有良好的分离技术,食品不但保持不了原有的色、香、味等风味,而且还会使营养受到不应有的破坏。

采用现代分离技术可以将一些需在高温下完成的工艺改为在常温下进行,这样就可以大大地改善食品的色、香、味及营养。

例如采用膜分离技术代替常规的蒸发浓缩和真空浓缩来浓缩咖啡、果汁、茶汁等;用超滤法提取植物蛋白酶和大豆蛋白质,可以最大限度地保存生物大分子的生物活性,提高制品的质量;茶饮料在存放一定时期后会产生浑浊沉淀现象,原因在于茶多酚与其它成分结合成大分子络合物,而茶多酚又是茶的品质成分。

因此,必须采取恰当的分离手段,把导致沉淀的成分去除,同时要能够保留茶多酚这种风味成分。

1.3.4 分离技术使产品符合食品卫生的要求。

食品分离技术包括提取原料中的有益组分和去除其中的有害成分。

去除原料的有害成分,可以使最终产品符合卫生法规,提高和改善原料的利用价值。

例如棉籽中含有棉酚这种有害物质,在加工棉籽油和提取棉籽蛋白过程中必须把棉酚分离去除。

再如油菜籽中含有芥子苷,具有毒性,在加工菜油或提取菜籽蛋白时也必须将其去除。

1.3.5 分离技术现代能改变食品行业的生产面貌。

过去利用盐田法制盐,一个较古老的方法是在盐田里利用太阳能将海水浓缩,然后结晶制取食盐。

改进的生产工艺是将盐田里经过初步浓缩得到的卤水,再经过多效真空浓缩、结晶制取食盐。

1.4分离过程的特点及其方法1.4.1分离过程的特点⑴分离技术的分离对象种类繁多,结构复杂。

⑵产品质量与分离过程关系密切。

⑶食用安全性要求高。

⑷食品在分离过程中易腐烂变质。

1.4.2 分离技术方法的确定⑴查找待分离组分的基础性研究资料,包括待分离组分的相对分子质量、化学结构、理化性质以及生物活性等。

⑵选择和确立对该组分进行定性、定量测定的方法,目的在于能对分离效率有一个有效的评价。

⑶了解原料的特性以及待分离组分的存在和含量情况。

⑷确定选用分离技术并对分离条件进行实验选择。

⑸对分离效果进行评价。

⑹中间试验和工业生产应用的放大设计。

1.5食品分离技术的发展趋向1.6本章作业1、现代分离技术在生物技术中的地位?2、现代分离技术的特点是什么?3、现代分离技术可分为几大部分,分别包括哪些单元操作?4、在设计下游分离过程前,必须考虑哪些问题方能确保我们所设计的工艺过程最为经济、可靠?第二讲沉淀分离技术2学时※、通过本章学习应掌握的内容1、什么是沉析?2、沉析法纯化蛋白质的优点有哪些?3、沉析的一般操作步骤是什么?4、何谓盐析?其原理是什么?5、盐析操作时常用的盐是什么?6、影响盐析的主要因素有哪些?7、有机溶剂沉析法的原理是什么?8、影响有机溶剂沉析的主要因素有哪些?9、等电点沉析的工作原理是什么?10、其它常用的沉析方法有哪些?2.1沉淀分离的目的及其方法沉淀分离技术是经典的化学分离技术。

沉淀的概念是指溶液中的介质在适当条件下由液相变成固相而析出的过程。

沉淀技术的目的包括两个:⑴通过沉淀使目标成分达到浓缩和去杂质的目的。

当目标成分是以固相形式回收时,固液分离可除去留在溶液中的非必要成分;如果目标成分是以液相形式回收时,固液分离可使不必要的成分以沉淀形式去除。

⑵通过沉淀可使已纯化的产品由液态变成固态,有利于保存和进一步的加工处理。

沉淀分离技术通常包括下列各种沉淀方法:⑴无机沉淀剂沉淀分离法:通常是以盐类作为沉淀剂的一类沉淀方法,如盐析法,多用于各种蛋白质和酶类的分离纯化,以及某些金属离子的去除。

常用的沉淀剂有:硫酸铵、硫酸钠、柠檬酸钠、氯化纳等。

⑵有机沉淀剂沉淀分离法:以有机溶剂作为沉淀剂的一种沉淀分离方法,多用于生物小分子、多糖及核酸类产品的分离;有时也用于蛋白质的沉淀和金属离子的去除;用于酶的沉淀分离时,易导致酶的失活。

常用到的沉淀剂有:丙酮、乙醇、甲醇等。

⑶非离子多聚体沉淀剂沉淀分离法:采用非离子型的多聚体作为目标成分的沉淀剂,适用于生物大分子的沉淀分离,如酶、核酸、蛋白质、病毒、细菌等。

典型的非离子型多聚体是聚乙二醇(PEG),根据其相对分子量的大小,有PEG600、PEG4000、PEG20000等型号。

⑷等电点沉淀法:主要是利用两性电解质在等电点状态下的溶解度最低而沉淀析出的原理。

适用于氨基酸、蛋白质及其它属于两性电解质组分的沉淀分离,如大豆蛋白“碱提酸沉”的提取方法。

⑸共沉淀分离法:又可称为生物盐复合物沉淀法,用于多种化合物特别是一些小分子物质的沉淀。

它是利用沉淀的同时对其它待分离成份吸附共沉淀而达到除杂的目的。

⑹变性沉淀分离法:又称为选择性变性沉淀法,是利用特定条件使目标成分变性,导致其性质的改变如溶解度下降而得以分离。

适用于一些变性条件下差异较大的蛋白质和酶类的分离纯化。

采取的变性条件有pH值、温度的改变以及添加剂、利用酶的作用等,腐竹的生产是利用大豆蛋白的热变性而进行分离的一个例子。

2.2沉析的特点操作简单、经济、浓缩倍数高,但针对复杂体系而言,分离度不高、选择性不强。

2.3沉析操作的一般过程1、在经过滤或离心后的样品中加入沉析剂;2、沉淀物的陈化,促进晶体生长;3、离心或过滤,收集沉淀物;2.4无机沉淀剂沉淀分离法一些金属离子的各种盐类形式,如硫酸盐、碳酸盐、草酸盐等,其溶解度都很小。

所以,当添加适当的无机沉淀剂形成上述各种化合物时,便会形成沉淀,使金属离子得以分离;另外,大部分蛋白质等生物大分子都可以通过在溶液中加入中性盐而沉淀析出,这一过程称为“盐析”。

这节重点介绍盐析法。

2.4.1 盐析法盐析分离法应用最早和最广泛的是在蛋白质和酶类的分离工作中,用盐析法分离蛋白质已有80多年的历史。

由于其它分离技术的出现,盐析法在选择性方面显得有些不足,但是在粗提纯阶段,盐析法至今仍普遍得到应用。

2.4.1. 1盐析原理首先需要了解生物大分子在水溶液中的存在状态:(1)两性电解质,由于静电力的作用,分子间相互排斥,形成稳定的分散系(2)蛋白质周围形成水化膜,保护了蛋白质粒子,避免了相互碰撞2.4.1.2盐析过程当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况:(1)“盐溶”现象—在低盐浓度下,蛋白质和酶类的溶解度随着随着盐的浓度提高而增大,这个过程称为盐溶。

这主要是中性盐离子对蛋白质分子表面活性基团及水活度的影响:(a)无机盐离子在蛋白质表面上吸附,使颗粒带相同电荷而互相排斥。

(b)无机盐离子增加了蛋白质的亲水性,改善了与水膜的结合,增加了蛋白质分子与溶剂分子相互的作用力,使蛋白质的溶解度增加。

(2)“盐析”现象—高盐浓度下,蛋白质溶解度随之下降,原因如下:(a)无机离子与蛋白质表面电荷中和,形成离子对,部分中和了蛋白质的电性,使蛋白质分子之间的排斥力减弱,从而能够相互靠拢;(b)中性盐的亲水性大,使蛋白质脱去水化膜,疏水区暴露,由于疏水区的相互作用导致沉淀;在盐析过程中,蛋白质的溶解度与溶液中盐的离子强度之间的关系可用Cohn表达式表示:lg(S/S0) = - K s I或lgS = lgS0 - K s I式中:S0----蛋白质在纯水中(I=0)的溶解度;S----蛋白质在离子强度为I的溶液中的溶解度;K s----盐析常数;I ----离子强度。

其中离子强度I=1/2∑Mz2, M表示溶液中各种离子的物质的量浓度,z为各种离子的价数。

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