耐药细胞株的筛选
球体形成实验联合药物筛选建立耐顺铂胰腺癌干细胞株
（ ２ ． ４土０ ． ８ ）％ ，差异有统 计学意 义 （ ｔ ＝ １ ６ ． １ ３ ，尸＜０ ． ０ １ ） 。结论
耐 顺 铂 胰 腺 癌 细 胞 株 ，该 细 胞 株 能 高 效 富 集胰 腺癌 肿 瘤干 细 胞 。
球体形成实验联合顺铂 药物 筛选 能建立
［ 关键词］ 胰腺癌 ；肿瘤干细胞 ；球体形成 实验 ； 耐 药 ；筛选 ［ 中图分类号］Ｒ ３ ９ ２ ． １ ２ ［ 文献标识码］Ａ ［ 文章编号］ ｌ ０ ０ ７ — １ ９ ５ ４ （ ２ ０ １ ４ ） 一 ０ ０ ３ ８ — ０ ５
Ｃｈｉ ｎａ
Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｃ ｉ ｓ ｐ ｌ ａ ｔ ｉ ｎ ・ － ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｔ ｐ ａ ｎ ｃ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｃ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｆ ｒ ｏ ｍ Ｐ ＡＮ Ｃ・ － １ ａ ｎ ｄ￣ ｄ ｅ ｎ ・ －
小细胞肺癌耐药细胞的建立及生物学特性和多药耐药性鉴定
小细胞肺癌耐药细胞的建立及生物学特性和多药耐药性鉴定韩勇青;王正元;戴秀芬;王子冉;李静;戚欣【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2024(40)2【摘要】目的建立对顺铂与依托泊苷抵抗的小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)耐药细胞NCI-H446/EP,对其生物学特性和多药耐药性进行评价。
方法裸鼠皮下接种SCLC NCI-H446细胞构建异种移植瘤体内模型,给予SCLC一线EP方案治疗,诱导体内耐药,剥离瘤组织体外培养获得耐药细胞。
体外实验检测其耐药系数,细胞倍增时间,细胞周期分布,多药耐药基因(MDR1)、耐药相关蛋白的表达,体内验证其耐药性。
结果NCI-H446成瘤裸鼠给予EP治疗,8周后产生获得性耐药,经分离培养获得耐药细胞株NCI-H446/EP。
该细胞株对顺铂、依托泊苷、SN38和阿霉素的耐药系数分别是12.01、18.36、65.4和10.12。
与亲本细胞相比,耐药细胞G 0/G 1期比例明显增加,G 2/M期细胞比例减少,倍增时间延长。
耐药细胞MDR1在mRNA及蛋白水平均高于亲本细胞,在体内也具有耐药性。
结论成功构建了SCLC耐药细胞株NCI-H446/EP,该细胞具有多药耐药的基本特征,可用于抗SCLC药物筛选及耐药机制的研究。
【总页数】6页(P279-284)【作者】韩勇青;王正元;戴秀芬;王子冉;李静;戚欣【作者单位】中国海洋大学医药学院;青岛海洋科学与技术国家实验室-海洋药物与生物制品实验室【正文语种】中文【中图分类】R-332;R329.28;R734.2;R979.1【相关文献】1.顺铂诱导人小细胞肺癌多药耐药细胞系NCI-H446/CDDP的建立及其生物学特征分析2.人小细胞肺癌SH77多药耐药细胞系的建立及其生物学特征分析3.活性氧介导的线粒体功能不全与小细胞肺癌多药耐药细胞H446/CDDP对顺铂耐药性关系的研究4.人小细胞肺癌多药耐药细胞系H446/VP的建立及其生物学性状因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
乳腺癌新辅助化疗耐药性研究进展
乳腺癌新辅助化疗耐药性研究进展1. 乳腺癌新辅助化疗简介乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，新辅助化疗作为乳腺癌综合治疗的重要组成部分，已经在临床实践中取得了显著的疗效。
新辅助化疗是指在手术之前对乳腺癌患者进行的系统性化疗，旨在缩小肿瘤体积、降低病理分期、评估治疗效果以及指导手术方案的选择。
新辅助化疗的主要目的是通过药物的作用，使癌细胞的生长和扩散受到抑制，从而提高手术切除的成功率和减少复发风险。
随着乳腺癌研究的不断深入，新辅助化疗的药物选择和治疗策略也在不断优化。
常用的新辅助化疗药物包括蒽环类、紫杉醇类、多柔比星类、环磷酰胺等。
这些药物可以通过不同的作用机制，如阻断DNA合成、干扰微管功能、诱导细胞凋亡等，抑制癌细胞的生长和扩散。
针对新辅助化疗耐药性的研究也取得了重要进展，耐药性是指肿瘤细胞在接受化疗药物作用后，出现对药物的抵抗现象，导致化疗疗效降低甚至失效。
新辅助化疗耐药性的产生可能与多种因素有关，如基因突变、信号通路异常、表皮生长因子受体(EGFR)变异等。
研究乳腺癌新辅助化疗耐药性的机制和靶点对于提高治疗效果具有重要意义。
针对新辅助化疗耐药性的研究主要集中在以下几个方面：一是寻找新的耐药靶点，如开发针对耐药性肿瘤的新药物；二是研究耐药性肿瘤的基因表达谱，以便为个体化治疗提供依据；三是探索联合用药策略，以提高化疗药物的疗效和降低耐药性的发生率；四是研究免疫治疗在乳腺癌新辅助化疗耐药性中的作用，以期为患者带来更多的治疗选择。
1.1 定义和作用乳腺癌新辅助化疗耐药性研究进展主要关注在乳腺癌治疗过程中，针对新辅助化疗药物的耐药性进行研究。
新辅助化疗是指在手术切除肿瘤之前，使用药物对肿瘤进行治疗，以缩小肿瘤体积、减轻手术难度、提高手术切除率以及评估患者预后等目的。
耐药性是指肿瘤细胞对化疗药物的抗药性，即化疗药物无法有效杀灭或抑制肿瘤细胞生长的能力。
乳腺癌新辅助化疗耐药性的研究对于提高治疗效果、延长患者生存期具有重要意义。
嘌呤霉素筛选细胞原理
嘌呤霉素筛选细胞原理
嘌呤霉素是一种广泛用于细胞生物学研究的抗生素，它通过特异性地抑制蛋白
质合成而对细胞产生影响。
嘌呤霉素筛选细胞原理主要是利用其对细胞的影响来筛选出对嘌呤霉素敏感或耐药的细胞株，从而为进一步研究细胞的生物学特性提供重要的工具和方法。
嘌呤霉素的作用机制是通过与细胞内的核糖体结合，阻止蛋白质的合成。
在细
胞中，核糖体是蛋白质合成的重要场所，而嘌呤霉素的结合会引起核糖体的功能受损，从而影响细胞的正常生物学活动。
因此，对嘌呤霉素敏感的细胞在其作用下会出现生长受抑制甚至死亡的现象，而对嘌呤霉素耐药的细胞则能够继续生长并繁殖。
在进行嘌呤霉素筛选细胞的实验中，首先需要将待筛选的细胞种植在含有嘌呤
霉素的培养基中，然后观察细胞的生长情况。
对于对嘌呤霉素敏感的细胞，其生长将受到明显的抑制，甚至会出现细胞死亡的现象；而对于对嘌呤霉素耐药的细胞，则会继续生长并形成细胞克隆。
通过这种方式，可以筛选出对嘌呤霉素敏感或耐药的细胞株，为后续的细胞生物学研究提供了重要的实验材料。
嘌呤霉素筛选细胞的原理不仅在细胞生物学研究中具有重要意义，同时也在药
物筛选和耐药机制研究中发挥着重要作用。
通过对细胞对嘌呤霉素的敏感性进行评估，可以为药物研发提供重要参考，同时也有助于深入了解细胞对抗生素的耐药机制，为临床治疗提供理论基础。
总的来说，嘌呤霉素筛选细胞的原理是基于其对细胞的特异性影响，通过观察
细胞在其作用下的生长情况来筛选出对嘌呤霉素敏感或耐药的细胞株。
这一原理不仅在细胞生物学研究中具有重要意义，同时也在药物研发和耐药机制研究中发挥着重要作用，为进一步的科学研究和临床治疗提供了重要的实验基础和理论支持。
青海耐药细胞株说明书
青海耐药细胞株说明书一、产品概述青海耐药细胞株是一种经过长期培养和筛选，对某种特定药物产生耐药性的细胞株。
该细胞株可用于耐药性相关研究、新药筛选及临床治疗等领域。
二、产品特点1. 耐药性稳定：青海耐药细胞株经过长期培养和筛选，对某种特定药物产生的耐药性非常稳定，能够保持较长时间。
2. 稳定生长状态：青海耐药细胞株在适宜的培养条件下，能够保持良好的生长状态。
3. 反应灵敏度高：青海耐药细胞株对于某种特定药物的反应灵敏度高，可用于新型抗癌药物的筛选及相关研究。
三、产品规格1. 细胞类型：人类肺癌细胞2. 耐药性：对顺铂具有明显的耐受性3. 培养基：DMEM/F12（1:1）4. 培养条件：- 温度：37℃- CO2浓度：5%- 湿度：95%5. 存储条件：液氮保存四、产品用途1. 耐药性相关研究：青海耐药细胞株可用于对肿瘤耐药机制的研究，探索肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性的原因。
2. 新药筛选：青海耐药细胞株可用于新型抗癌药物的筛选，为临床治疗提供新的治疗方案。
3. 临床治疗：青海耐药细胞株可用于指导肺癌患者化疗方案的选择，提高治疗效果。
五、使用方法1. 细胞培养：- 取出冻存管中的青海耐药细胞株，快速解冻并加入培养基中。
- 将细胞移植到含有10% FBS和适量抗生素的培养基中。
- 将培养皿放置在37℃恒温箱内，CO2浓度为5%。
- 按需更换培养基，观察细胞状态并进行下一步实验。
2. 耐药性检测：- 取出青海耐药细胞株和敏感细胞株（如A549细胞），分别接种到培养皿中。
- 分别加入不同浓度的顺铂，观察两种细胞株的生长状态并记录。
- 计算两种细胞株的IC50值，比较其对顺铂的敏感性差异。
六、注意事项1. 青海耐药细胞株为生物实验材料，需要遵守相关安全规定，避免对人体造成危害。
2. 细胞培养过程中需要注意无菌操作，避免污染影响实验结果。
3. 建议在适宜的培养条件下进行实验，以保证实验结果准确可靠。
七、贮存与保管1. 青海耐药细胞株为液氮保存，需在液氮罐中保存，并定期更换液氮。
耐药细胞株构建实验
耐药细胞株构建实验
实验目的：采用体外低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击方法诱导肿瘤细胞对药物产生耐药性
实验材料：
试剂：培养基（GIBCO），血清（CIBCO）
仪器：超净工作台、CO 2培养箱、生物倒置显微镜
实验内容与方法：
1.体外低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击方法诱导细胞的耐药性
2.MTT法测定药物对亲本细胞和耐药细胞的IC50，计算耐药指数
实验信息：
1．生长状况良好的亲本细胞株，并提供细胞特性，培养条件及相关注意事项。
2．诱导剂
服务周期：6个月
结果提交：提交实验报告书（耐药指数、实验试剂与设备、实验过程、结果分析、原始数据、细胞图片等）、耐药细胞株、亲本细胞株[晶莱生物]。
超声波逆转肿瘤细胞多药耐药优化参数的筛选
ｓｒ ｓｏ ｄ ｔ ｃｃ ｓ １％ 、０ 、０ 、０ 、０ 、０ 、０ 、０ 、０ 、０ ％ ） ６ ％ ｄ ｔ ｃｃ ｘｉｉ ｄａｂｔ ｒ ｅｅ ａ ｅ ｅ ｆ ｕｙ ｙｌ （０ ２ ％ ３ ％ ４ ％ ５ ％ ６ ％ ７ ％ ８ ％ ９ ％ １０ ，Ｏ ｉ ｅ ｕｙ ｙｌ ｅｈｂ ｅ ｅｔ ｖｒｌ ｅ ｔ ｅｒ ｓ
【 关键词 】 超声 波； 参数 ； 肿瘤细胞 ； 多药耐药 【 中图分类号】 Ｒ７ — ３ ３３ 【 文献标 识码 】 Ａ 【 文章编号 】 １０－ ０ （００ ０ － ９－ ０４ ５ １２ １）３ ２ １ ３ ０ ０ ０
Ｏｐ ｉ ｚ ｔ ｎ ｏ ｌｒ ｓ ｕ ｄ ｐ ｒ ｍ ｅ ｅ ｓ ｆ ｒ ｒ ｖ ｒ ｉ ｇ ｔ ｍｏ ｅｌ ｍｕ ｔ ｄ ｕ ｅ ｉｔ ｎｃ ． Ａ Ｇ ｏ ｄ ｎ Ｓ ＡＯ － ｔ ｍｉａ ｏ ｆ ｕ ｔ ａ ｏ ｎ ａ ａ ｔ ｒ ｏ ｅ ｅ ｓｎ ｕ ｒ ｃ ｌ ｉ ｌｉ ｒ ｇ ｒ ｓｓａ ｅ ＸＩ ｕ — ｏ ｇ ， Ｈ － Ｚｅ
四川 医 学 ２ １ ０ ０年 ３月 第 ３ ｌ卷 （ ３期 ） Ｓ ｈ ａ 第 ￣ ｕｎＭｅ ＆ Ｊ ｕｎｌ２ １ Ｖ１３ ， ｏ３ ｄ ｄ ｏｒａ，０ ０，ｏ． １ Ｎ ．
・２９ｌ ・
论 著
超 声 波逆 转 肿瘤 细 胞 多药 耐药 优 化 参 数 的筛 选
夏 国栋 邵 泽 勇 辛 ， ， 建 周 贤 伍 ， ， 烽 △
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耐药细胞株构建步骤
耐药细胞株构建步骤
构建耐药细胞株的步骤通常包括以下几个步骤：
1.选择合适的抗生素或药物：首先需要确定要构建的耐药细胞
株所需要具备的耐药性。
根据目标抗生素或药物的类型和机制，选择适用的耐药基因或耐药突变体。
2.导入耐药基因或耐药突变体：可以通过转染、电转化或基因
敲入等方法将耐药基因或耐药突变体导入到目标细胞内。
转染方法通常包括化学转染、病毒转染或电穿孔等。
3.筛选并扩增耐药细胞：转染后，将细胞培养在含有目标抗生
素或药物的培养基中，筛选出对抗生素或药物具有耐药性的细胞。
4.确认耐药细胞株：对筛选出的耐药细胞进行进一步验证，例
如通过基因检测、检测细胞对目标药物的生长抑制程度或分子靶点的表达水平等方法，确认细胞株确实具备所需的耐药性。
5.保存和维护耐药细胞株：将经验证的耐药细胞株保存并维护
在适当的条件下，以备后续实验或应用。
不同实验室和研究领域可能存在一些细微的差别和特定的步骤，但以上步骤是构建耐药细胞株的基本流程。
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耐药细胞株的筛选
一种是脂质体转染后，单克隆筛选稳定细胞株。
另外一种是应用逆转录病毒，慢病毒转染，筛选稳定细胞株。
脂质体转染：在转染24小时后，消化XXX细胞并计数。
将细胞种到96孔板，保证每个孔2-3个细胞，这样才能得到单克隆。
待细胞贴壁后，加入抗生素筛选。
筛选时间和浓度视细胞而定。
一般G418（Geneticin,遗传霉素）作用一个星期，嘌呤霉素作用2-3天。
脂质体法筛单克隆时间较长，且效率低，大概只有1%。
慢病毒转染：先要用包装细胞，一般为293细胞，包装出病毒，再用病毒转染目的细胞。
包装病毒视不同类型的病毒而定，一般要3-5天的时间。
包装好的病毒要测滴度，根据滴度决定转染目的细胞的病毒量。
转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株。