有效磷的测定方法
土壤有效磷有机磷全磷测定方法
土壤有效磷有机磷全磷测定方法土壤中的磷是农业生产中必不可少的重要营养元素之一，它对作物的生长发育和产量具有重要影响。
磷在土壤中以有机磷和无机磷的形式存在，其中有机磷为植物较难直接吸收的形态，而无机磷则是植物较易吸收和利用的形态。
因此，准确测定土壤中的有效磷、有机磷和全磷含量对于指导农业生产和合理施肥具有重要意义。
常用的土壤有效磷测定方法有几种，包括离子交换膜法、Bray法、摇床浸提法等。
其中，离子交换膜法是一种常用的速测土壤有效磷的方法。
该方法的原理是利用离子交换膜对土壤中的有效磷进行吸附，并用酸溶解从而将其转化为可测定的形态，最后通过颜色反应或仪器测定得到有效磷含量。
这种方法具有快速、简单、准确的特点，但对土壤pH值较低或铁铝氧化物含量较高的土壤不适用。
有机磷是土壤中的一种重要形态，其测定的目的是为了了解土壤中有机磷的含量及其活性对植物的供磷能力。
常见的有机磷测定方法有NaOH浸提法、酶解法和硫酸浸提法等。
其中，NaOH浸提法是一种常用的测定土壤有机磷含量的方法。
该方法的原理是利用NaOH溶液将土壤中的有机磷转化为无机磷，然后通过酸溶解将其转化为可测定的形态，最后通过测定磷的浓度得到有机磷含量。
这种方法适用范围较广，操作简单，但对土壤中的无机磷和铁铝磷酸盐的干扰较大。
全磷是指土壤中所有形态的磷的总含量，包括有效磷、有机磷和难溶性磷。
常用的测定全磷的方法有硫酸浸提法、王水浸提法和微波消解法等。
其中，硫酸浸提法是最常用的测定全磷的方法之一、该方法的原理是利用浓硫酸和过量的遥浄溶解土壤中的磷，并通过酸浸液中磷含量的测定得到全磷含量。
这种方法操作简单，易于掌握，但对于含有较高铁铝氧化物的土壤不适用。
总之，准确测定土壤中的有效磷、有机磷和全磷含量对于合理施肥和农业生产具有重要意义。
要根据具体情况选择适合的测定方法，并注意排除干扰因素，以保证测定结果的准确性和可靠性。
通过定期监测磷素含量，还可以为农业生产提供科学依据，实现高产、高效、可持续发展的目标。
有效磷的测定
有效磷的测定有效磷是指在土壤中能够被植物吸收利用的磷元素。
测定土壤中的有效磷含量对于合理施肥和提高农作物产量具有重要意义。
本文将介绍有效磷的测定方法和意义。
一、有效磷的意义土壤中的磷是植物生长发育所必需的营养元素之一，但大部分磷以无机形态存在，难以被农作物直接吸收利用。
只有一小部分磷以可溶性无机磷的形式存在，被称为有效磷。
有效磷的含量直接影响着农作物对磷的吸收和利用效率，因此测定土壤中的有效磷含量对于科学施肥和提高农作物产量非常重要。
目前常用的有效磷测定方法包括树脂吸附法、离子交换膜法和亚乙酸溶解法等。
下面将分别介绍这三种方法的原理和操作步骤。
1. 树脂吸附法树脂吸附法是利用树脂对土壤中的有效磷进行吸附和提取的方法。
具体操作步骤如下：（1）取一定量的土壤样品加入一定量的树脂，并充分混合。
（2）将混合物放置一段时间，使树脂充分吸附土壤中的有效磷。
（3）用适当的溶液将树脂中吸附的有效磷进行洗脱。
（4）用适当的仪器测定洗脱液中的磷含量，即可得到土壤中的有效磷含量。
2. 离子交换膜法离子交换膜法是利用离子交换膜对土壤中的有效磷进行选择性吸附和提取的方法。
具体操作步骤如下：（1）将土壤样品与一定量的离子交换膜接触，使有效磷被膜吸附。
（2）用适当的溶液洗脱离子交换膜上的有效磷。
（3）用适当的仪器测定洗脱液中的磷含量，即可得到土壤中的有效磷含量。
3. 亚乙酸溶解法亚乙酸溶解法是利用亚乙酸将土壤中的有效磷进行溶解的方法。
具体操作步骤如下：（1）取一定量的土壤样品加入一定量的亚乙酸溶液，并充分混合。
（2）将混合物在适当的温度下进行振荡或摇床处理一段时间。
（3）用适当的仪器测定溶液中的磷含量，即可得到土壤中的有效磷含量。
三、有效磷的测定结果解读测定得到土壤中的有效磷含量后，可以根据不同作物的需求量和土壤的肥力状况来进行合理施肥。
通常来说，土壤中的有效磷含量在15-25 mg/kg之间被认为是较为适宜的范围。
如果土壤中的有效磷含量过低，可以通过施用磷肥来提高土壤的有效磷含量；反之，如果土壤中的有效磷含量过高，可以减少磷肥的使用量，以避免磷的过量积累。
土壤有效磷的测定方法
土壤有效磷的测定方法一、引言土壤中的有效磷是指植物能够直接吸收和利用的磷元素，对于农作物的生长和产量具有重要影响。
因此，准确测定土壤中的有效磷含量对于农业生产至关重要。
目前常用的土壤有效磷测定方法有黄铵法、NaHCO3法和Bray法等。
本文将对这些方法进行详细介绍和比较。
二、黄铵法黄铵法是一种常用的土壤有效磷测定方法，其原理是利用氨水将土壤中的磷元素转化为可溶性形态。
具体操作步骤如下：1. 取适量土壤样品，将其与一定比例的氨水混合，使土壤中的磷元素与氨水反应。
2. 经过一定时间的反应后，用水洗涤土壤样品，将可溶性磷元素与水分离。
3. 通过分析水中的磷含量，计算土壤中的有效磷含量。
三、NaHCO3法NaHCO3法是另一种常用的土壤有效磷测定方法，其原理是利用碱性的NaHCO3溶液将土壤中的磷元素转化为可溶性形态。
具体操作步骤如下：1. 取适量土壤样品，将其与一定比例的NaHCO3溶液混合，使土壤中的磷元素与NaHCO3反应。
2. 经过一定时间的反应后，用水洗涤土壤样品，将可溶性磷元素与水分离。
3. 通过分析水中的磷含量，计算土壤中的有效磷含量。
四、Bray法Bray法是一种常用的土壤有效磷测定方法，其原理是利用酸性的Bray提取液将土壤中的磷元素转化为可溶性形态。
具体操作步骤如下：1. 取适量土壤样品，将其与一定比例的酸性的Bray提取液混合，使土壤中的磷元素与Bray提取液反应。
2. 经过一定时间的反应后，用水洗涤土壤样品，将可溶性磷元素与水分离。
3. 通过分析水中的磷含量，计算土壤中的有效磷含量。
五、方法比较1. 精度和准确性：黄铵法测定结果较为精确，但受到土壤pH值和温度的影响较大；NaHCO3法测定结果相对较稳定，但对土壤中的铁和铝等元素有干扰；Bray法测定结果相对准确，但对于pH值较高的土壤不适用。
2. 操作简便程度：黄铵法和NaHCO3法操作相对简单，适用于大规模的土壤样品测定；Bray法操作稍微复杂，适用于小规模的土壤样品测定。
土壤有效磷的测定ppt课件
五、操作步骤
注1:
如果吸取滤液10mL于50mL容量瓶中， 加水和钼锑抗试剂后，会产生大量的 CO2气体，由于容量瓶瓶口小， CO2气 体不易逸出，在摇匀过程中，常造成试 液外溢，导致测定误差。为了克服这个 缺点，可以准确加入提取液、水和钼锑 抗试剂于三角瓶中，混匀，显色。 34
五、操作步骤
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三、主要仪器设备
2、分光光度计
波长为880nm或700nm
波长不能达到880nm时可用
700nm，浸出液有颜色时可用
活性炭脱色。
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物质颜色和吸收光颜色的关系
物质颜色
吸
颜
色
收 波
光 长(nm)
黄绿 黄 橙 红
紫红 紫 蓝
绿蓝 蓝绿
紫 蓝 绿蓝 蓝绿 绿 黄绿 黄 绿 红
400 ~ 450 450 ~ 480 480 ~ 490 490 ~ 500 500 ~ 560 560 ~ 580 580 ~ 600 600 ~ 650 650 ~ 750
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2、指标体系
测定方法
评价标准 低 中 高
单位：mg/kg
0.03mol/L NH4F- 0.5 mol/L 0.025mol/LHCl 法 NaHCO3法
﹤15 15-30 ﹥30
﹤6 6-10 ﹥10
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2、指标体系 因此，在报告有效磷结果时必
须同时说明所用的测定方法。
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3、Olsen法的影响因素
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四、试剂
2、无磷活性炭 活性炭常含有磷，应做空白试验，检验有 无磷存在。如含磷较多，须先用HCl（1+1） 浸泡过夜，在平板漏斗上抽气过滤，用蒸 馏水冲冼多次至无 Cl-为止；再用0.5 mol/L NaHCO3浸泡过夜，在平板漏斗上抽气过 滤，每次用少量蒸馏水淋洗多次，并检查 到无磷为止，烘干备用。 如含磷较少，则直接用NaHCO3 处理即可。
土壤有效磷的测定
土壤有效磷的测定土壤有效磷是土壤中肥力最重要的组分之一，它可以促进植物的生长发育和增产，并且它是植物的营养元素，是土壤肥力的重要指标。
因此，土壤有效磷的测定显得极为重要。
本文主要介绍了测定土壤有效磷的常用方法及其特点。
一、测定土壤有效磷的常用方法1、硫酸盐法：硫酸盐法是测定土壤有效磷的最常用的方法，也是最重要的测定方法之一。
它的原理是：硫酸盐法是通过适当的pH 值，将土壤中的有效磷转换成硫酸盐，然后将硫酸盐用酶法测定。
2、溴化钾法：溴化钾法是研究土壤有效磷含量的一种方法，它是利用溴酸盐缓慢溴化土壤中的有效磷，然后测定溴化产物中的钾含量。
3、比析分离法：比析分离法是基于土壤有效磷分子类型的不同，利用不同比析剂，将土壤中的有效磷分离出来，然后根据不同的分离方法测定有效磷的含量。
二、测定土壤有效磷的方法的特点1、硫酸盐法：硫酸盐法的特点是，该方法的测定灵敏度较高，可以探测低含量的土壤有效磷，同时该方法对环境友好，容易操作，成本也较低，但是精确度较低。
2、溴化钾法：溴化钾法的特点是，该方法可以测定出较高含量的土壤有效磷，同时它的精确度较高，可以用于高质量的测定，但是该方法的操作较复杂，测定周期较长，对环境的影响也较大。
3、比析分离法：比析分离法的特点是，该方法可以根据土壤有效磷的分子类型，将有效磷分离出来，并可以探测出低含量的土壤有效磷，但是该方法的操作复杂，测定周期较长，成本也较高。
综上所述，硫酸盐法、溴化钾法和比析分离法都是主要的测定土壤有效磷含量的三种方法，各有特点，有时还需要结合不同的测定方法，以获得更可靠的测定结果。
由于土壤有效磷的测定对农田土壤肥力的评价和调控具有重要的意义，因此，要求应用起来的测定方法要准确、可靠，才能确保测定的准确性和准确性。
总之，土壤有效磷的测定方法各有优缺点，正确选择会有助于获得更精确的测定结果。
另外，在应用测定方法的同时，要正确使用，以免影响测定结果的准确性和可靠性。
复混肥料中有效磷含量的测定及注意事项
复混肥料中有效磷含量的测定及注意事项
复混肥料中有效磷含量的测定可以采用以下方法：
1. 酸解浸取法：将待测样品取适量加入酸性溶液中（如硝酸和盐酸的混合液），用加热或摇床等方式进行浸取。
然后，使用分光光度计或原子吸收光谱仪对浸取液中磷的含量进行测定。
2. 羊毛滤纸法：将待测样品加入一定量的羊毛滤纸中，并加入一定量的酸性溶液，用黑白光比色计对滤液中磷的含量进行测定。
在进行有效磷含量测定的过程中，需要注意以下几点：
1. 样品的取样要具有代表性，应对不同批次的复混肥料进行随机取样，以确保测定结果的准确性。
2. 在酸解浸取过程中，要控制溶液的浓度和酸解时间，以避免因浓度过高或酸解时间过长导致磷的损失。
3. 在进行测定时，要根据所选测定方法的要求，进行适当的前处理操作，以保证测定结果的准确性。
4. 在使用分光光度计或原子吸收光谱仪等仪器进行测定时，要注意校正仪器的零点和比色池的清洁度，确保获得准确可靠的测定数据。
5. 最后，要根据测定结果计算有效磷的含量，并结合复混肥料的其他特性，评估其适用性和使用效果。
有效磷的测定
四、实验步骤
1、土壤样品预处理 、 称 取 风 干 土 壤 样 品 1g （ 精 确 至 0.01g ） , 放 入 50~100mL小塑料瓶（或50mL带塞比色管）中， 小塑料瓶（ 带塞比色管） 小塑料瓶 带塞比色管 加 入 0.03mol·L-1NH4F-0.25mol·L-1HCl 溶 液 20mL， 稍摇匀 ， 立即放在振荡机上 ， 振荡 ， 稍摇匀， 立即放在振荡机上， 振荡30 分钟。 用无磷干滤纸过滤， 分钟 。 用无磷干滤纸过滤 ， 滤纸承接于盛有 100g·L-1H3BO3溶液 滴的 溶液15滴的 滴的50mL 三角瓶中，摇 三角瓶中， 动瓶内溶液（ 防止F 动瓶内溶液（加H3BO3防止 -1对显色的干扰和 腐蚀玻璃仪器） 腐蚀玻璃仪器）。
三、主要仪器和试剂
1、 仪器：721分光光度计，25mL容量瓶， 、 仪器： 分光光度计， 容量瓶， 分光光度计 容量瓶 吸量管，振荡机，漏斗，滤纸。 吸量管，振荡机，漏斗，滤纸。 2、 试剂： 、 试剂： 溶液（ （1） HCl溶液（0.5mol/L） ） 溶液 ） 溶液（ （2） NH4F溶液（1mol/L） ） 溶液 ） （3） 提 取 剂 ： 分 别 移 取 15mL 溶液和25mL 0.5mol/LHCl溶液， 溶液， 1mol/LNH4F溶液和 溶液和 溶液 假 如 460mL 蒸 馏 水 中 ， 配 制 成 0.03mol/L NH4F-0.025mol/L HCl溶液。 溶液。 溶液 溶液（ （4） H3BO3溶液（100g/L） ） ）
3．工作曲线的制作 ． 分别准确移取5µg·mL-1 磷标准溶液 ， 1.0， 磷标准溶液0， ， 分别准确移取 2.0， 3.0， 4.0， 5.0mL于 6个 25mL容量瓶中 ， 容量瓶中， ， ， ， 于 个 容量瓶中 025mol HCl溶液 mol·L 溶液5 加入0.03mol·L-1NH4F-0.025mol L-1HCl溶液5-10 加入 L mL（按所取滤液毫升数而定） mL（按所取滤液毫升数而定），用吸量管加钼 酸铵-盐酸溶液5mL，加蒸馏水至瓶颈刻度， 酸铵-盐酸溶液5mL，加蒸馏水至瓶颈刻度，并 摇动后， 滴加25 L 氯化亚锡3 25g 滴加 25g·L-1 氯化亚锡 3 滴 ， 摇动后 ， 至溶液有 深蓝色出现，用水稀释至刻度，摇匀，放置15 深蓝色出现，用水稀释至刻度，摇匀，放置15 分钟，与土样溶液同时显色，测其吸光度。 分钟，与土样溶液同时显色，测其吸光度。 以磷的微克数为横坐标， 以磷的微克数为横坐标，相应的吸光度为 纵坐标，绘制标准曲线， 纵坐标，绘制标准曲线，并从标准曲线上查出 土样中磷的含量。 土样中磷的含量
有效磷的测定
土壤有效磷的测定0.5molL -1NaHCO 3 浸提—钼锑抗比色法）一、实验目的土壤中有效磷的含量，随土壤类型、气候、施肥水平、灌溉、耕作栽培措施等条件的不同而异。
通过土壤有效磷的测定，有助于了解近期内土壤供应磷的情况，为合理施用磷肥及提高磷肥利用率提供依据。
土壤速效磷的测定中，浸提剂的选择主要是根据土壤的类型和性质测定。
浸提剂是否适用，必须通过田间试验来验证。
浸提剂的种类很多，近20 年各国渐趋于使用少数几种浸提剂，以利于测定结果的比较和交流。
我国目前使用最广学的浸提剂是0.5molL-1NaHCO3溶液（Olsen法）,测定结果与作物反应有良好的相关性［注1］，适用于石灰性土壤、中性土壤及酸性水稻土。
此外还使用0.03molL-1NH4F-0.025molL-1HCI 溶液（Bray I法）为浸提剂，适用于酸性土壤和中性土壤。
同一土壤用不同的方法测得的有效磷含量可以有很大差异，即使用同一浸提剂，而浸提时的土液比、温度、时间、振荡方式和强度等条件的变化，对测定结果也会产生很大的影响。
所以有效磷含量只是一个相对的指标。
只有用同一方法，在严格控制的相同条件下，测得的结果才有相对比较的意义。
在报告有效磷测定的结果时，必须同时说明所使用的测定方法。
二、实验原理石灰性土壤中磷主要以Ca-P（磷酸钙盐）的形态存在。
中性土壤Ca-P、Al-P （磷酸铝盐）、Fe-P（磷酸铁盐）都占有一定的比例。
0.5molL-1NaHCO3、（pH8.5）可以抑制Ca2+的活笥，使某些活性更大的与Ca结合的P浸提出来；同时，也可使比较活性的Fe-P和Al-P起水解作用而被浸出。
浸出液中磷的浓度很低，须用灵敏的钼蓝比色法测定，其原理详见土壤全磷的测定章节。
当土样含有机质较多时，会使浸出液颜色变深而影响吸光度，或在显色出现浑浊而干扰测定，此时可在浸提排荡后过滤前，向土壤悬液中加入活性碳脱色，或在分光光度计800nm 波长处测定以消除干扰。
比色法测定有效磷原理
比色法测定有效磷原理比色法是一种常用的分析方法，适用于测定溶液中某种物质的浓度。
而有效磷是指溶液中的磷元素的浓度，它在环境监测、水质检测等领域具有重要的意义。
本文将介绍以比色法测定有效磷的原理和步骤。
一、原理比色法测定有效磷的原理基于磷酸酯酶技术。
有效磷溶液中的磷元素与显色剂反应生成可见光吸收的染色体，通过光学测量染色体的吸光度，可以间接测定溶液中磷的浓度。
二、步骤1. 样品处理：将待测样品进行前处理，通常是通过酸化、氧化等方法将有机磷转化为无机磷。
样品处理的目的是将磷元素转化为可测量的无机磷。
2. 显色反应：取适量的样品，加入磷酸酯酶底物和显色剂，充分混合后静置一段时间。
在此过程中，磷酸酯酶催化底物分解产生染色体，染色体的颜色与磷的浓度成正比。
3. 比色测量：使用分光光度计或比色计对反应体系进行光学测量。
根据显色剂的特性，选择适当的测量波长，测量吸光度。
吸光度与磷的浓度呈线性关系，通过标准曲线可以计算出样品中磷的浓度。
三、注意事项1. 样品处理的方法需要根据具体情况进行选择，确保转化率高、干扰物少。
2. 显色剂的选择应根据样品特性和检测要求进行，不同的显色剂对磷的灵敏度和选择性有所差异。
3. 测量时要注意控制反应时间和温度，保证反应充分进行，避免温度对测量结果的影响。
4. 建立标准曲线时，要选取一系列不同浓度的磷标准溶液，测量其吸光度并绘制标准曲线，以便后续计算样品中磷的含量。
四、优缺点比色法测定有效磷具有操作简便、快速、灵敏度高等优点。
同时，该方法还能够测定多种样品类型，适用范围广泛。
然而，比色法也存在一些局限性，例如对样品的前处理要求较高，样品中可能存在的干扰物会对测量结果产生影响。
总结：比色法是一种常用的测定有效磷浓度的方法，利用磷酸酯酶技术和显色剂的作用，通过光学测量样品中染色体的吸光度来间接测定磷的浓度。
该方法操作简便、快速、灵敏度高，适用范围广泛。
但需要注意样品处理方法的选择、显色剂的选用以及控制反应条件等因素，以确保测量结果的准确性和可靠性。
土壤有效磷的测定方法
土壤有效磷的测定方法摘要：土壤中的有效磷是植物生长所必需的关键养分。
准确测定土壤中的有效磷含量对于农业生产和土壤管理至关重要。
本论文将介绍几种常用的土壤有效磷测定方法，以及它们的原理和应用。
引言土壤中的有效磷是植物生长所需的重要养分之一。
磷是DNA、RNA、ATP等生物分子的组成部分，对植物的生长和发育至关重要。
因此，测定土壤中的有效磷含量对于农业生产和土壤管理非常重要。
第一部分：常用的土壤有效磷测定方法1. 离子交换树脂法：这是一种常用的土壤有效磷测定方法。
它利用带电的离子交换树脂吸附土壤中的磷，并测定吸附在树脂上的磷含量。
2. Bray法：这种方法使用Bray试剂溶解土壤中的磷，然后通过比色法或光度法测定磷的浓度。
3. Olsen法：Olsen试剂与土壤中的磷反应，生成可溶性磷，然后使用比色法或光度法测定磷的浓度。
第二部分：测定方法的原理和应用1. 离子交换树脂法原理：该方法利用离子交换树脂对土壤中的磷进行吸附，并通过浸泡树脂样品后测定吸附在树脂上的磷含量。
这种方法适用于不同类型的土壤。
2. Bray法和Olsen法原理：这两种方法都基于酸性溶液与土壤中的磷反应，将磷从土壤中溶解出来。
然后，使用比色法或光度法测定磷的浓度。
这些方法适用于不同pH值的土壤。
3. 应用：这些土壤有效磷测定方法可用于评估土壤中的磷含量，指导农业生产中的磷肥施用和土壤管理决策。
它们有助于确保植物获得足够的磷以支持生长，同时减少过度施用对环境造成的不利影响。
结论准确测定土壤中的有效磷含量对于农业生产和土壤管理至关重要。
离子交换树脂法、Bray法和Olsen法是常用的土壤有效磷测定方法，它们可以适用于不同类型的土壤和不同pH值条件下。
通过这些方法，农民和土壤科学家可以更好地了解土壤中的磷含量，以制定科学的施肥计划，提高农产品产量并减少环境污染。
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有效磷的测定方法
方法1、钼锑抗比色法
解磷菌发酵菌液（用什么培养基？？）经离心处理后，取上清液，用2，4．二硝基酚作为指示剂加入1．2滴，上清液中可溶性磷酸盐可与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，于适宜波长处进行比色测定，根据标准曲线计算出有效磷的含量，通过有效磷的浓度大小表示微生物溶磷能力的高低。
1、实验所用溶液
(1)钼锑抗贮存液的制备
首先量取硫酸153ml(p=约1.84g/ml)缓缓地倾入约400ml蒸馏水中，搅拌、冷却。
然后称取lO.0g钼酸铵溶于约60℃的300m1水中，冷却。
然后将上述硫酸溶液缓缓加入此钼酸铵溶液中，再加入5g/L酒石酸锑钾溶液100ml，最后用水稀释至l L，盛于棕色瓶中，放于阴暗处保存。
(2)钼锑抗显色剂
准确称量抗坏血酸1.5g，溶于lOOml钼锑抗贮存液中。
此溶液必须现配现用，有效期为1d.
(3)磷标准溶液(5 mg/L)
准备称取0.439g磷酸二氢钾在105℃烘箱中烘干2 h后冷却，溶于200 ml水中，加人5 m1硫酸(p约1．84g/ml)，转入l L容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线，即为磷标准液100mg/L。
取此溶液准确稀释20倍即为5 mg/L磷标准溶液，此溶液不宜久放。
2、工作曲线的绘制
分别吸取5mg/L磷标准溶液0、2、4、6、8、10、12ml于50m1容量瓶中，加水稀释大约至20m1，加入5ml钼锑抗显色剂，摇匀后定容，即得0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg/L 磷标准系列溶液，在室温20℃-25℃下放置4 h后，以0 mg/L磷标准液为对照溶液，其余磷标准溶液与待测液同时比色，并记录在该峰值下的吸光度。
以测得的吸光度为纵坐标，磷浓度(mgL)为横坐标，绘制成工作曲线。
3、菌液的制备
在300 ml三角瓶中分别加入50 m1培养基，121℃灭菌20 min。
无菌操作，每瓶接入已经活化的待测菌种，不接种菌种的作为空白对照，置于30℃摇床上，160 r／min振荡培养5 d~7 d后，取出测定有效磷含量。
4、样品的测试
发酵液在4000 r／min的条件下离心30 min，吸取上清液，用蒸馏水稀释适当倍数后，量取若干毫升加入50 ml容量瓶中，滴加2．3滴2，4-二硝基酚指示剂溶液，用1 mol/L氢氧化钠溶液或硫酸溶液调节pH至溶液刚呈现微黄色(小心缓加，边加边摇)，然后加入钼锑抗显色剂5m1摇匀，定容至刻度。
空白试验发酵液做相同的处理，在室温20．25℃下放置4 h左右，在721分光光度计上660 nm处比色，测定吸光度，以空白试验发酵液为对照液调零点，读取吸光度值，在工作曲线上查出磷标准液的浓度。
方法2 磷钼蓝比色法
(1)磷钼蓝比色法原理
在含磷的溶液中，加入钼酸铵，在一定酸度条件下，溶液中的磷酸与钼酸络合形成黄色的磷钼杂合酸一磷钼黄。
H3P04+12H2M004=H3[PMo l2040]+12H20
在适宜的试剂浓度下，加入适当的还原剂(sncl2或抗坏血酸)，使磷钼酸中的一部分M06+还原为Mo5+，生成磷钼蓝(磷钼杂多蓝)一H3P04·10Mn03·M0205或H3P04·8Mn03·2Mn205。
在一定的范围内，蓝色的深度与磷含量成形比，这是钼蓝比色法的基础。
用可见分光光度计在波长660nm处测定钼蓝的吸光值，以定量分析磷含量。
(2)绘制OD660一磷含量标准曲线：
准确吸取磷标准使用液O、0.2、O.4、O．6、O．8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0mL(相当于含磷O、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20υg)分别置于10mL具塞试管中，加入钼蓝比色混合液5mL，加水至刻度、混匀，于45℃水浴25min后，以O号管作空白，使用可见分光光度计在660nm波长处测定吸光度，以测出的吸光度对磷含量绘制磷标准曲线。
(3)培养液中可溶性磷含量的测定
接菌后分别在24、48、72、96、120小时取样，将培养液4500r／min离心15min，准确吸取5mL 上清液置于10mL具塞试管中，加入5mL比色混合液，于45℃水浴25min，使用紫外分光光度计在660nm波长处测定吸光度，利用OD660磷含量标准曲线计算培养液中的磷含量。
解有机磷的测定则是在上清液中加入过硫酸钾溶液，120℃下反应30min，然后重复以上过程。