培养基母液配制

培养基母液的配制

（一）激素母液

由于多数生长调节物质难溶于水，因此配法各不相同，激素母液可以在2~4℃冰箱中保存。在配制药品前，应准备好一定容积的小烧杯、玻璃棒，用纯净水冲洗干净方可使用：

1、IAA、IBA、GA3、ZT可先用少量95%酒精溶解，再加水

定容，摇匀后贮于试剂瓶中，贴上标签。

2、2,4-D、KT、可用少量10%的Noah溶解，再加水定容。

3、6-BA可用少量1mol/LHCl溶解后，再加水定容。

4、NAA可溶于热水或少量95%酒精中，再加水定容至一定

体积。

5、1mg/ml的2.4-D的配制：称取0.1g2,4-D，用少量1mol/LNaOH 溶解，然后定容到100ml容量瓶中。

6、1mg/ml的6BA的配制：称取0.1g6-BA，用少量1mol/LNaOH 溶解，然后定容到100ml容量瓶中。

7、1mg/ml的NAA的配制：称取0.1gNAA，用少量95%酒精助溶，然后定容到100ml容量瓶中。

8、1mol/L的HCl的配制：量取83.3ml盐酸加水稀释定容至1L。（一般、组培室用量少，配制500ml即可，即：称取盐酸41.65ml 稀释定容至500ml。配制盐酸时。需要带口罩、戴手套。）

9、10%的NaOH的配制：称取10gNaOH，加少量纯净水溶解，然后定容到100ml容量瓶中。

10、HgCl2 的配制：称量1g的HgCl2，加热水后进行溶解定容至1L。

二、培养基配制

配错培养基造成的危害比组培技术中其他任何失误都大。因此，配制培养基和称取其他成分必须绝对小心。为了降低配错培养基的风险，最好准备一张纸，详细地写出配制培养基过程中所需的成分和配置步骤。每配完一种成分或配完一种母液，划掉相应的记录。

1、一般而言，分化配方的配制：除萱草琼脂为5.5g/L外，其它植物为琼脂5g/L。白糖为30g/L。母液粉为4.74g/L。

用自己配制的母液配培养基时，大量母液（1号）50ml/L，微量（2~5号为5 ml/L）。

2、配制½的生根培养基，是大量母液（1号）减半为25ml/L，微量不变（2~5号为5 ml/L）。生根配方中，萱草、红掌白糖为25g/L，其他不变。

配制培养基步骤：

1、称量母液粉→加入少量水溶解→放入琼脂、糖溶解→

水开后关火→混合均匀定容→加生长调节物质（激素）→

调pH值→选用干净瓶子分装培养基（每瓶约30ml）→

培养基凝固→培养基封口→培养基高压灭菌→冷却→备用

2、加入一定量的纯净水→放入琼脂、糖溶解→水开后关火→加大量元素及微量元素→加激素→滴NaOH调pH值→选用干净瓶

子分装培养基（每瓶约30ml）→培养基凝固→培养基封口→培养基高压灭菌→冷却→备用