微生物发酵制药技术
微生物发酵技术在生物制药中的应用
微生物发酵技术在生物制药中的应用随着医疗技术的不断发展和科技的进步，生物制药品的生产和研究越来越受到人们的关注。
生物制药的制造离不开微生物发酵技术，这种技术在制药生产中发挥着不可替代的作用。
本文将讨论微生物发酵技术在生物制药中的应用，包括其原理、优点和缺点等相关内容。
一、微生物发酵技术原理微生物发酵技术是指利用微生物在发酵过程中代谢产生的物质，合成需要的生物制品。
因为微生物具有较高的生物催化活性、显著的代谢多样性和较高的酶活性，所以其应用在制药生产中具有得天独厚的优势。
微生物发酵技术的原理是将微生物菌种引入培养基，通过培养控制pH、温度、营养物等条件，使微生物在培养基中进行生长和代谢，并合成所需要的生物产品。
发酵过程中，可选择性地添加抗生素或其他化合物，选择适当的微生物菌株以提高产品的纯度和产率。
最终，通过分离纯化、结晶、干燥等工艺手段，得到纯度高、活性强的生物制品。
二、微生物发酵技术在生物制药中的应用广泛，例如青霉素、链霉素、利福平等世界著名的生物抗生素，疫苗，多肽类药物等多种治疗药品均采用了这种技术。
下面我们分析微生物发酵技术在生物制药应用中的优势和缺点。
优势：1. 生产成本低。
由于微生物发酵生产操作简单、条件控制容易、生产周期短，使得生产成本较低，有助于降低生产成本和广泛应用生物制药。
2. 生产管理简单。
微生物发酵生产流程相对简单，不需要大量人力和机械设备，使生产管理变得容易。
3. 生产规模可控。
随着技术的发展，微生物发酵技术生产规模也越来越庞大，可以满足不同规模的生产需求。
缺点：1. 真菌或细菌中会存在多种代谢产物，有些可能会降低产品效价，还可能有毒性或过敏性反应。
2. 微生物发酵繁殖过程中，可能会受到环境条件的影响，导致成分的波动和产品的不稳定。
3. 容器需设计成消毒状态，微生物接触患者血液等情况下的风险会增加。
三、微生物发酵技术的发展前景随着制药生产的不断发展和技术的不断成熟，微生物发酵技术也将不断完善。
微生物发酵技术在制药中的应用
微生物发酵技术在制药中的应用制药，是通过化学和生物学的方法进行药物制备、加工和生产的过程。
随着科技的不断进步，越来越多的新技术被应用到制药中，其中微生物发酵技术是一个非常重要的技术。
本文将从微生物发酵技术的基本原理、在制药中的应用以及其发展前景三个方面，探讨微生物发酵技术在制药中的应用。
一、微生物发酵技术的基本原理微生物发酵技术是指利用微生物代谢物质的过程中，通过控制条件使产生的物质在微生物体内积累和分泌出来，达到制作特定产品的目的。
这是一种生化反应，其基本原理是微生物的代谢分为两个阶段：生长期和产物积累期。
在生长期，微生物繁殖迅速，并利用培养基中的营养物质进行代谢，产生能量和生长分子等。
而在产物积累期，微生物的增殖速率逐渐降低，此时代谢转化方向发生变化，合成一些新的代谢产物，并排出细胞外。
应用微生物发酵技术，制得的产品包括抗生素、基因工程药物、酶制剂、氨基酸、有机酸、醇类等，同时还可以生产消化系药物、缓释剂、控释剂、维生素等。
二、微生物发酵技术在制药中的应用非常广泛，下面就举几个具体的例子：（一）利用微生物发酵技术制造抗生素抗生素是一种由微生物产生的一类药物，是微生物发酵技术最早应用的领域之一。
抗生素可以有效地抵抗病原体，特别是某些细菌感染，对人类健康起到了至关重要的作用。
（二）基因工程药物的生产基因工程药物的设计和生产需要利用微生物发酵技术，涉及到的步骤有基因克隆及转染、表达优化、发酵、提纯和制剂等。
微生物发酵技术是基因工程药物能够量产的基石。
（三）氨基酸的生产氨基酸作为一种生物化学物质，具有多种用途。
在制药业中能够合成天然的和人工的氨基酸，是利用微生物发酵技术实现的。
（四）酶制剂的生产酶是一种生物催化剂，能够在温和条件下加速某些化学反应的进行。
与传统的化学催化剂相比，酶具有温和的反应条件、高效率、高特异性和易回收等优点。
利用微生物发酵技术可生产出多种酶制剂，包括生物体内酶、生物外酶和微生物发酵培养液中所含的酶等。
微生物发酵制药工艺
3发酵制药的基本过程
菌种选育
孢子制备
实验室、种子库
种子制备
发酵工段
发酵车间
发酵控制
提炼工段
成品工段
预处理
分离提取
浓缩纯化
成品工段
提炼车间
包装车间
包装
原料药
2.2 微生物的生长特征
微生物发酵基本过程特征（批式）菌体生长与产物生成的特征，
三个阶段
❖
❖
❖
❖
❖
❖
发酵前期(fermentation prophase)
甲羟戊酸、糖类、不常见的氨基酸（如D－氨基酸、
β－氨基酸等）、环多醇和氨基环多醇等。
次级代谢产物的生物合成的基本过程
❖
次级代谢产物的合成基本过程包括构建单位
的聚合—再修饰—装配。在此过程中，次级
代谢产物的累积受合成途径中某些酶活性的
限制，这些关键酶活性大小与产量正相关。
（1）前体聚合
❖
微生物合成生源后，通过缩合反应形成聚酮体、寡肽、聚乙
菌体生长期（cell
发酵中期(fermentation metaphase)
产物合成（生产）期(product synthesis phase)
growth phase）
发酵后期(fermentation anaphase)
菌体自溶期(cell autolysis phase)
发酵前期特征
❖
❖
❖
❖
往往在静止期，加入诱导物，基因转录和产物表达，
所以产物生成速率和比速率分别为：
代谢产物的生物合成
❖
代谢（metabolism）是生物体内进行的生理生化反应的统称。
微生物发酵技术在生物制药中的应用
微生物发酵技术在生物制药中的应用生物制药是指利用生物体或其衍生物制备的药物，包括蛋白质、多肽、基因药物等。
随着生物科学的不断发展以及人们对健康的更高要求，生物制药的市场需求不断增长。
而微生物发酵技术作为生物制药生产的关键技术之一，已成为生物制药领域中不可或缺的产业。
一、微生物发酵技术的原理微生物发酵技术是指利用微生物（如细菌、真菌、酵母等）在特定条件下生产有用物质的技术。
其原理是在适宜的温度、pH值、氧气供应量等环境因素下，将某种微生物菌种培养在一定的营养基上，通过其自身代谢产生的酶类和代谢产物，使原料逐步转化为需要制备的目标物质。
这一过程通常会分为培养菌种、筛选合适的菌株、优化发酵条件、提取纯化目标产物等多个环节。
二、微生物发酵技术在生物制药中的应用非常广泛，涉及到各个领域，包括疫苗、抗体、蛋白质、酶、基因药物等制备。
1. 疫苗的制备对于疫苗制备，微生物发酵技术被广泛应用。
例如，乙型肝炎疫苗就是通过大肠杆菌发酵的方式制备而成。
在这个过程中，将乙型肝炎抗原基因插入到大肠杆菌的某个表达载体中，然后在适宜的发酵条件下进行培养生长，使其产生大量的乙型肝炎表面抗原（HBsAg），再经过一系列步骤制备成疫苗。
利用这种方法，生产效率高，成本也低廉。
2. 抗体和蛋白质的制备抗体和蛋白质在生物制药中的应用越来越广泛。
通过微生物发酵技术可以将某些抗体或蛋白质序列插入到某些高效表达载体中，然后利用适当的培养条件，使细胞大量生产该抗体或蛋白质。
例如，一些针对恶性肿瘤的治疗药物，就是利用这种方法制备而成的。
3. 酶的生产酶在工业生产中十分重要。
利用微生物发酵技术生产酶类已成为常用的方法。
常见的酶包括蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶等，这些酶都被广泛应用于制浆造纸、食品工业、洗涤剂、医药等各个行业。
4. 基因药物的制备基因药物是指通过基因工程技术制造出的药物，包括基因修饰的蛋白质、抗体和突变基因治疗药物等。
这些药物的生产依赖于微生物发酵技术。
微生物发酵技术在生物制药中的应用研究
微生物发酵技术在生物制药中的应用研究一、概述随着科技的不断进步，微生物发酵技术已经成为生物制药中不可或缺的一种技术手段。
发酵技术的应用在生物制药中已经有数十年的历史，而如今，它已经成为新药开发的重要环节。
发酵技术利用微生物进行生物转化，制造出生物产品，再经过提纯和加工，制成药品。
作为生物制药的主流工艺之一，它对于保证药品的质量和安全性具有极其重要的意义。
二、微生物在发酵过程中的作用微生物在发酵中起到了至关重要的作用，发挥着生产药物的核心功能。
首先，微生物可以分解原料中的有机物质，消除杂质和毒性物质，使得原料更易于进行下一步的处理。
然后，微生物可以利用这些原料进行繁殖和生长，释放出药物原料的代谢产物。
这些代谢物是药物的关键成分，并且也是药物质量的重要指标。
微生物在发酵过程中能够控制运动学过程，促进产物的生产并维持发酵稳定性，这是保证药物质量和药品功效的关键因素。
三、微生物发酵技术在药品生产中的应用1.抗生素的生产抗生素是生物制药中的一类主要产品，微生物发酵技术在抗生素的生产中起到了至关重要的作用。
发酵生产的抗生素通常都以细菌群的形式生产，而最常见的是泛霉素和大环内酯类抗生素。
这种生产方式可以通过改变不同微生物的培养条件，来调整产物的化学结构和生物活性，进而实现不同用途的药物生产。
2.靶向蛋白质的生产靶向蛋白质是具有重要医学和科学研究价值的生物制品，这些蛋白质通常都需要通过微生物发酵技术来生产。
这是因为微生物具有工艺学上的优势，包括生长速度、机械性能、发酵产物的稳定性和成本控制等方面。
这种技术可以用来生产从肽链到大分子复合物的所有规模的靶向蛋白质，在生物制药领域是具有广泛应用前景的。
3.疫苗生产疫苗是预防传染病和细胞损伤的重要方式，微生物发酵技术在疫苗生产中起到了至关重要的作用。
生物制药公司利用这种技术可以生产不同类型的疫苗，从蛋白质制备到整个病毒和细胞，能够简便快速地生产出可以预防多种疾病的疫苗。
生物制药中的发酵技术
生物制药中的发酵技术随着科技的不断发展，生物制药已经成为当今医学领域中不可或缺的重要组成部分。
生物制药通过使用生物体内的生化合成机制，生产出各种新型药物，这些药物具有高效、安全、稳定的特点，且对比传统药物，副作用更小、疗效更佳。
发酵技术是其中的核心部分。
发酵技术是利用微生物代谢产生药物的技术，是生物制药中得以实现的重要基础。
发酵技术不仅适用于生产生物药物，如抗体、酶、激素、疫苗等，还可生产各类生化产物、食品添加剂、饲料添加剂等。
发酵技术的发展历程早在公元前6000年，人类就已开始利用发酵技术，生产糖、酒、面包等食品。
到了20世纪初，生物制药工业开始逐渐发展起来。
20世纪50年代后期，随着微生物学的发展，人们意识到发酵技术在生产生物制药中的极其重要性。
已有许多常用的制药原料，如青霉素、链霉素、利福平、紫杉醇等，都是通过发酵技术生产出来的。
现代发酵技术现代发酵技术是利用生物工程学原理，对微生物菌株进行改造得出一些新的工业菌株。
比如，利用基因技术技术可以改造出结构与天然物质类似的功能更强、稳定性更好的抗体、酶、激素等，生产的效率也远高于传统的制药方法。
此外，发酵技术中还涉及到物种的筛选、培养、菌种的传承、下游产品的提取等原理和技术，这些技术的进步和实践，为生物制药行业的发展和进步奠定了重要基础。
生物制药在临床应用中的优势作为新型药物在临床上的“硬核”助力，生物制药具有众多优点。
首先，生物制药可以专门靶向治疗许多疾病，如癌症、血友病、风湿热、糖尿病、心血管疾病等。
生物制药制品药效明显，不仅能够根据病人体内所缺失的物质进行替代，还可以因病人个体差异而进行针对性制药，提高治疗效果。
其次，生物制药对人体系统的不良反应和毒性小，尤其是对于动态组织和脆弱的全身、肝肾脏、心肺系统的治疗过程中，更加安全可靠。
最后，生物制药具有生物制品制备进程短、产量大、产成品较为纯净、治疗效果可控等特点，使得研制新型药物的迭代速度更快。
微生物发酵技术在制药和生物工程中的应用
微生物发酵技术在制药和生物工程中的应用微生物发酵技术是指利用微生物生物化学合成能力和代谢功能，通过优化培养基、控制发酵条件，使微生物在一定条件下进行生长繁殖、代谢产生需要的化合物的过程。
因其具有高效、环保、低成本等优势而被广泛应用于制药和生物工程等领域。
一、微生物发酵技术在制药中的应用1. 抗生素的生产抗生素是指可抑制或杀灭生物体中某些细菌的一类药物。
抗生素的生产利用了各种微生物的生物合成能力，如链霉菌发酵产生的青霉素、放线菌发酵产生的红霉素等。
此外，利用微生物在发酵过程中产生的化合物，可以进一步合成各种新型抗生素，如头孢菌素、青（黄）霉素等。
2. 激素的生产激素是神经系统、内分泌系统和免疫系统等多种生理系统中起调节作用的活性物质。
有些激素是人体无法合成的，需要通过发酵技术进行生产，如生长激素、胰岛素等。
3. 人类蛋白质类药物的生产人类蛋白质类药物包括生长因子、免疫调节剂、抗体等，具有特异性强、生物活性高、体内生存时间长等优点。
这些药物基本上都需要通过发酵技术进行生产，如重组人生长激素、重组人干扰素、单克隆抗体等。
二、微生物发酵技术在生物工程中的应用1. 生物酶的生产生物酶是一类可以加速生物反应速度的酶类物质。
利用微生物发酵技术合成酶，具有高产量、低成本、反应速度快等优点，广泛应用于制药、生化、食品加工、环境保护等领域。
如淀粉酶、葡萄糖氧化酶、抗体酶、纤维素酶等。
2. 生物质能的转化生物质能是指可转化为生物燃料或化学原料的生物物质。
利用微生物发酵技术将生物质能转化为生物酒精、乙酸、丙酮、酮等，可以替代传统化石能源，减少对环境的影响，开发可持续能源。
如生物柴油的生产，利用微生物对生物质进行发酵，生成油酸甲酯，再去水、纯化、异构等工艺制取生物柴油。
3. 基因工程基因工程是指通过对基因结构、序列进行修改、组合、转移等手段，使生物产生新的特性、新的功能的技术。
微生物发酵技术是基因工程的一个重要应用领域，可以将外源基因导入生物体中，利用其代谢和遗传特性生产各种转基因产物，如转基因大豆、转基因玉米、转基因棉花等。
微生物制药中的发酵技术研究进展
微生物制药中的发酵技术研究进展发酵技术作为微生物制药领域的核心技术之一，在药物开发和生产中起到了重要作用。
随着科学技术的不断进步和生物工程的快速发展，发酵技术在微生物制药中的应用也取得了长足的进展。
本文将针对微生物制药中的发酵技术的研究进展进行探讨。
一、发酵技术在药物开发中的应用发酵技术在药物开发中起到了至关重要的作用。
通过对微生物菌株进行优化改造，可以大幅提高目标药物的产量和纯度，从而降低药物的生产成本。
同时，发酵技术也可以通过调控菌株的代谢途径，提高药物的合成效率。
例如，利用基因工程技术，可以将目标基因导入微生物细胞中，进而实现对目标药物产生的调控，从而满足不同药物需求。
二、发酵技术在生物制药中的应用发酵技术在生物制药中也得到了广泛应用。
通过对微生物菌株的筛选和优化培养条件的设计，可以实现对重要生物制药产品的高效生产。
发酵技术可以应用于多种生物制药产品的生产，如蛋白质药物、抗生素等。
在制药过程中，发酵技术的应用可有效控制产品的质量和纯度，并提高工艺的稳定性和可重复性。
三、发酵技术的创新进展随着科学研究的不断深入，微生物发酵技术在微生物制药中也取得了一系列创新进展。
一方面，在菌株改良方面，利用基因编辑和基因组学技术的引入，可以实现对目标菌株代谢能力的提升和调控。
另一方面，在发酵过程的监测与控制方面，先进的仪器设备和自动化技术的应用，使发酵过程更加可控、稳定和高效。
四、发酵技术的挑战与前景虽然发酵技术在微生物制药领域取得了巨大进展，但仍面临一些挑战。
首先，发酵过程中菌株的稳定性和产量仍然是关注的重点。
其次，如何降低生产成本、提高药物的纯度和质量也是亟待解决的问题。
对于这些挑战，我们需要进一步深入研究和探索，以实现微生物制药领域的长期发展。
展望未来，发酵技术在微生物制药中仍然具有广阔的前景。
随着工程生物学和基因工程技术的发展，发酵技术将更好地发挥其在创新药物的发现和生产中的作用。
同时，研究者们需要不断加强合作，加大投入力度，以加速发酵技术的创新与突破，为微生物制药行业的发展贡献更多的力量。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
30
发酵制药流程
31
发酵制药工艺
32
五、微生物发酵基本过程特征
菌体生长与产物合成的三个阶段： 发酵前期（fermentation prophase) 菌体生长期（cell growth phase) 发酵中期(fermentation metphase) 产物合成期（product synthesis phase) 发酵后期（ fermentation anahase） 菌体自溶期（cell autolysis phase)
维生素B12、氨基酸、核苷酸类药物生产中常用
的菌种，也是酶法合成生产辅酶A的菌种。
细菌之棒状杆菌属(Corynebacterium)
生产氨基酸、核苷酸类药物，用于甾体转化
是谷氨酸和其他氨基酸的高产菌， 如北京棒杆菌AS1.299钝齿棒杆菌AS1.542
细菌之芽孢杆菌属(Bacillus)
1。稀释涂布
2。平板划线纯化
43
斜面传代
44
防止菌株衰退的措施
菌种退化：菌种的发酵能力降低、繁殖能力降低、发酵 产品的得率降低. 1、衰退的可能原因 （1）、基因突变 （2）、分离现象 2、防止菌种衰退的方法 A、从菌种选育方面考虑；B、尽量减少传代次数 C、创造良好的培养条件；D、利用不易衰退的细胞传代; E、采用有效的菌种保藏方法
33
发酵前期特征
从接种至菌体达到一定临界浓度的时间，包括延滞 期、对数生长期和减速期。 代谢特征：碳源、氮源等基质不断消耗 生长特征：菌体不断地生长和繁殖，生物量增加。 溶氧变化：不断下降，菌体临界值时，浓度最低。 pH变化：先升后降－以氨基酸为碳源，释放氨，后 氨被利用。先降后升－以糖为碳源，释放出丙酮酸 等有机酸，后被利用。
生产青霉素，也可用来生产葡萄糖氧化酶、葡
萄糖酸、柠檬酸和抗坏血酸
真菌之头孢霉菌属(Cephalosporium)
产黄头孢霉(Cephalosporium chrysogen)、
顶孢头孢霉菌(Cephalosporium
acremonium)
都生产头孢菌素C
真菌之酵母菌属(Saccharomyces)
57
（2）矿物油保藏法 将生长好的斜面在无菌条件下倒入已灭菌的液体石 蜡，油层高于斜面末端1cm，然后放于冰箱中保存。 适用菌种：适用于除细菌外的其它菌种 （3）砂土管保藏法 利用土壤颗粒对微生物起保护作用，提高微生物的 存活率。其包括砂土制备和真空抽干两步。 适用菌种：产孢子的微生物，对于一些对干燥敏感 的细菌（奈氏球菌、弧菌、假单胞杆菌）以及酵母 不适用。
（1）准性生殖育种
概念：准性生殖 范围：放线菌，半知菌纲的真菌 过程： 两条菌丝 相互结合 异核体 二倍体 重组单倍体 对氟苯丙氨酸
产黄青霉：提高青霉素产量������ 灰黄链霉菌：灰黄霉素产量
准性生殖是指异核体（单个生物个体中含有两 种或两种以上基因型）细胞中两个遗传物质不 同地细胞核可以结合成杂合二倍体地细胞核。 这种杂合二倍体的细胞核在有丝分裂过程中可 以发生染色体和单倍体化,最后形成遗传物质重 组的单倍体的过程。也就是不经过减数分裂就 能导致基因重组的生殖过程。
放线菌之诺卡氏菌属 (Norcadia)
生产利福霉素、蚊霉素等
放线菌之小单胞菌属 (Micromonospora)
多种可产抗生素，如棘孢小单胞菌(M. echinospora)产庆大霉素。
放线菌之游动放线菌属 （Actinoplanes）
典型代表：济南游动放线菌 (Actinoplanes
诱变育种流程
出发菌种
高产菌株 复筛 生产
单孢子悬液
单菌落初筛 稳定性特性
诱变处理
稀释涂板
中试放大
投入
杂交育种
概念：
两个不同基因型的菌株，通过结合或原生质体融合 ，使遗传物质发生重新组合，从中分离筛选出具有 优良性状的新菌株。
������ 特点：有一定的定向性。 ������ 种类： 准性生殖 接合 原生质体融合
菌体衰老，细胞开始自溶的一段时间 合成产物能力衰退，生产速率减慢 氨基氮含量增加，pH上升 发酵必须结束，否则产物被破坏，菌体自溶 给过滤和提取带来困难
36
第二节 制药微生物与产物的生物合成
制药微生物的选择 制药微生物的选育 微生物菌种的保藏 微生物代谢产物的生物合成 微生物生物合成的调节
34
发酵中期特征
以次级代谢产物或目标产物的生物合成为主的 一段时间。 菌体生长恒定就进入产物合成阶段。 呼吸强度：无明显变化，菌体数目不增加。 产物量：逐渐增加，生产速率加快，至最高峰 后合成能力衰退。 对外界变化敏感:容易影响代谢过程，从而影响 整个发酵过程。
35
发酵后期特征
与菌体生长不相伴随，以初级代谢的中间产物为原料而合成
抗生素、生物碱、毒素、色素、胞外多糖等
结构常较复杂对环境条件敏感
三、常见的制药用微生物
细菌
放线菌 真菌
细菌之大肠杆菌属(Escherichia coli)
生产天冬氨酸、苏氨酸、缬氨酸等氨基酸类药 物 基因工程的载体
细菌之短杆菌属(Brevibacterium)
tsinanesisn) 产创新霉素(creatmycin；1964)
真菌之根霉属(Rhizopus)
生产甾体激素、延胡索酸及酶制剂等。
真菌之曲霉属(Aspergillus)
生产枸橼酸、葡萄糖酸、有机酸类、抗生素， 进行甾体转化。
真菌之青霉属(Penicillum)
产黄青霉(Penicillum chrysogenum)
45
诱变育种
定义：人为创造条件（诱变剂处理），使菌种 发生变异，筛选优良个体，淘汰劣质个体。 ������ 物理类：紫外线，快中子，激光，太空射线。 ������ 化学类：碱基类似物，嵌合剂，亚硝酸。������ 生物类：噬菌体，转座子。������ 特点：快速，简单，效益大。������ 缺点：无定向性。
放线菌之链霉菌属 ( Streptomyces )
灰色链霉菌(Streptomyces griseus) 产链霉素
金霉素链霉菌(Streptomyces aureofaciens) 产金霉素 红霉素链霉菌(Streptomyces erythreus) 龟裂链霉菌 (Streptomyces rimosus) 产红霉素 产土霉素
37
一、制药微生物的选择
（1）所需培养基易得，价格低廉； （2）培养和发酵条件温和（糖浓度、温度、pH、溶解氧、 渗透压等） （3）生长速度和反应速度较快，发酵周期短 （4）单产高 （5）抗病毒能力强 （6）菌种纯粹，不易变异退化，稳定性好 （7）菌体不是病源菌，不产生任何有害的生物活性物质 和毒素（包括抗生素、激素和毒素），保证安全
55
菌种保藏的方法
斜面保藏法、矿物油保藏法、 砂土保管保藏法、真空冷冻干燥法、 冷冻法、液态真空干燥法、 琼脂穿刺封口保藏法、曲法保藏、 麦粒保藏法、无水硅胶保藏法。
56
（1）斜面保藏法：
在4℃左右的冰箱保藏，每隔一定时间进行移 植培养后再继续保藏，如此反复。 优点：方法简单、存活率高，具有一定的保藏 效果。 缺点：菌种仍有一定的强度的代谢活动条件， 保存时间不长（1－6个月），传代多，菌种容易变 异。 适用菌种：细菌、酵母、防线菌、霉菌
38
生产菌的自然分离
来源：大陆土壤、海洋水体 样品的采集：表层土壤(0-10cm)，海洋（0-100m） 预处理：根据分离目的和微生物的特性 1）温度 2）化学：SDS－酵母膏，CaCO3，NaOH处理，减少细菌， 有利于放线菌分离；乙酸乙酯、氯仿、苯处理，除去 真菌。 3）离心、膜分离。
第三阶段
20世纪40年代初，第二次世界大战爆发，青霉
素迅速工业大规摸生产。
深层培养、生产大规模化、多种抗生素、氨基 酸、核酸发酵成功。
发酵罐发酵
7
摇床发酵
立式
卧式
8
静置发酵
9
二、
10
初级代谢产物： 与菌体生长相伴随的产物、对菌体生长、分化和繁殖是必须的 氨基酸、核苷酸、维生素、糖类等 菌体对其合成反馈控制严密，一般不过量积累 次级代谢产物：
胆碱和腐胺等生物碱。 灵芝属：灵芝多糖、灵芝多肽、三萜类、16种氨基酸(其 中含有七种人体必需氨基酸)、蛋白质、甾类、甘露醇、 香豆精苷、生物碱、有机酸（主含延胡索酸），以及微 量元素Ge、P、Fe、Ca、Mn、Zn等。
四、发酵制药的基本过程
菌株选育、发酵和分离纯化或提炼是发酵制药 的三个主要工段。
第二章 微生物发酵制药工艺
1
第一节 概述
2
一、发酵
发酵：通过微生物培养而获得产物的过程 微生物发酵制药：利用微生物技术，通过高度工程化 的新型综合技术，以利用微生物反应过程为基础，依 赖于微生物机体在反过分离纯化进行提取精制，并最终
制剂成型来实现药物产品的生产
40
二、制药微生物菌种的选育
1、选育的目的 改善菌种的特性，使产量提高，改进质 量、降低成本、改革工艺、方便管理及综合 利用等 2、选育的方法： A、自然选育； B、诱变育种 C、杂交育种
41
自然选育
定义：不经过人工诱变处理，根据菌种的自然突变而 进行的菌种筛选过程。
42
菌种分 离纯化
生产氨基酸、核苷酸、抗生素类、维生素B12、 用于甾体转化等。
细菌之假单胞菌属 (Pseudomonas)
生产维生素B12、氨基酸、核苷酸类； 进行类固醇（甾体）转化；
有些菌株可利用烃类生产单细胞蛋白。
细菌之乳酸杆菌属 (Lactobacillus)
生产抗癌类药物