放射性同位素在生物学中应用例析

数学模型在生物学中的应用

数学模型在生物学中的应用摘要数学模型是研究生命发展规律，发现和分析生命现状的工具。建立可靠的本文从生物数学的发展、分支了解生物数学的历史，紧接着又在数学模型在生物数学的地位中了解数学模型的地位，最后在数学模型的应用中知道了微分方程模型、差分方程模型以及稳定性模型.这将有助于在生物数学的研究中，依据数学模型的基础，建立符合规律的数学模型，在生命进程中验证新的规律、新的发现，使在研究生物学时更清晰、更明了. 关键词：数学模型；生物学；应用

Application of mathematical model in Biology Abstract: Mathematical models in biology such as a microscope can be found in biological mysteries, biological research through with the establishment of the mathematical rules of the law of development of life, which launched a new discovery, new rules and in biology established reliable model of the biological status of classified analysis and forecasting. The from the history of mathematical biology development, the branch of the understanding of mathematical biology, followed by another in the mathematical model in Mathematical Biology status in understanding the status of mathematical model. Finally, in the application of mathematical model know differential equation model, the differential equation model and the stability of the model. This will help in mathematical biology research, on the basis of the mathematical model, established in accordance with the law of the mathematical model, in the process of life to verify new rules, new found in biological research clearer, more clear. Keywords: mathematical mode;biology;application

医学免疫学与病原微生物学知识重点

免疫就是机体识别与清除抗原性异物得一种生理功能。包括对病原微生物及其毒性产物得识别与清除。免疫应答：机体对抗原性异物得识别与清除得过程。由体内得免疫系统与神经-内分泌系统共同协调完成。非特异性免疫得特征：①在种系进化过程中逐渐形成。②可以遗传。③对一切异物(包括抗原性与非抗原性)均有免疫作用。③各个体间得免疫能力仅有强弱之别。屏障作用: 皮肤黏膜得屏障作用,血—脑屏障, 胎盘屏障非特异性免疫中得免疫分子:补体系统 ,防御素,溶菌酶,细胞因子参与非特异性免疫中得免疫细胞包括: 吞噬细胞：包括中性粒细胞与单核—巨噬细胞，NK细胞：来源于骨髓造血干细胞，依赖于骨髓微环境发育成熟。 1、吞噬细胞吞噬病原体得过程：①募集与迁移②吞噬与杀菌③降解与消化 2、NK细胞得主要免疫生物学效应：①抗肿瘤②抗病毒与胞内寄生菌得感染③参与免疫病理损伤特异性免疫得特征：①就是机体在生活过程中接触抗原后形成②仅对相应得抗原有免疫效应③有明显得个体差异④不能遗传中枢免疫器官：骨髓、胸腺免疫细胞得来源与发育成熟得场所。免疫器官外周免疫器官：脾脏、淋巴结、黏膜免疫系统成熟得T、B细胞与其她免疫细胞存在得场所。淋巴细胞：T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞等。抗原提呈细胞：树突状细胞、巨噬细胞。免疫系统免疫细胞粒细胞：中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞。单核细胞：其她细胞：红细胞、血小板、肥大细胞。细胞分子可溶性分子：免疫球蛋白、细胞因子。膜免疫分子一、中枢免疫器官（一）骨髓骨髓得功能: 1、骨髓就是主要免疫细胞发生得场所: 多能造血干细胞包括：髓性多能干细胞(分化成粒细胞、单核细胞、红细胞、血小板)与淋巴性多能干细胞（分化成淋巴细胞，NK细胞） 2、骨髓就是B细胞分化成熟得场所 3、骨髓就是抗体产生得主要场所（二）胸腺 1、胸腺得组织结构：髓质（内层）：含大量得上皮细胞与少量得胸腺细胞、巨噬细胞、树突状细胞及呈环状得胸腺小体（胸腺正常发育得标志），发育成熟得T细胞存在于髓质中；皮质（外层）：主要就是未成熟T细胞（即胸腺细胞），含少量上皮细胞、巨噬细胞、树突状细胞等。 2、胸腺得细胞组成：胸腺细胞（95%以上得胸腺细胞就是αβ+胸腺细胞）；胸腺基质细胞TSC（以胸腺上皮细胞(TEC)为主） 3、胸腺微环境①分泌胸腺激素与细胞因子②胸腺上皮细胞与胸腺细胞得密切接触③细胞外基质 4、胸腺得功能：最主要得功能就是T细胞发育得主要场所。胸腺小体由上皮细胞、巨噬细胞与细胞碎片形成，就是胸腺正常发育得标志。胸腺微环境由基质细胞、细胞外基质、胸腺激素与细胞因子等组成，胸腺上皮细胞就是胸腺微环境得最重要组分。

微生物学与免疫学复习资料-超全

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1、微生物、三大类型微生物、列举6种原核细胞型微生物、免疫、免疫功能。答：微生物：一大群微小生物的总称。三大类型微生物：非细胞型、原核细胞型、真核细胞型 6种原核细胞型微生物: 细菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体、立克次体免疫：指机体免疫系统识别抗原.并通过免疫应答排除抗原性异物.以维持机体内环境平衡的功能。（正常时对机体有利.异常时对机体有害。）免疫功能：（1）免疫防御（2）免疫自稳（3）免疫监视 2、你对微生物与免疫学的研究内容以及应用意义、研究现状有何认识？答：微生物学与免疫学既与人们的生活密切相关.也与感染性疾病有关.还与药物生产及药物保存和微生物污染有关。合理地开发和利用微生物及其代谢产物.有利于提高人体免疫功能.保障人类健康；反之则会严重危害人类健康甚至危机生命.如近年来所出现的药品与食品安全的问题.其中多数都与微生物污染和超敏反应有关。另外.还有众多的微生物及其代谢产物以及免疫应答的产物等都有待进一步开发利用。研究如何将微生物和免疫应答产物作为药物资源来开发.将为解决与感染有关疾病的防治问题作出大贡献。第一章思考题 1、抗原答：抗原是指能刺激机体产生免疫应答.并与免疫应答产物特异性结合的物质。 2、抗原的基本特性答：1、免疫原性 2、抗原性 3、影响抗原免疫原性的条件答：（一）异物性（二）理化性状（三）完整性（进入途径）（四）宿主的应答能力与免疫方法 4、表位答：抗原分子中决定抗原特异性的基本结构或化学基团。（是TCR/BCR及抗体特异性结合的基本单位） 5、异嗜性抗原答：存在于不同生物之间的共同抗原。 6、佐剂答：佐剂是一类非特异性免疫增强剂。与抗原同时或预先注入体内.可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。

微生物学与免疫学重点

《微生物学与免疫学》考试重点一：名词解释 1. 免疫：是指对抗体识别与排除抗原性异物，维持机体生理平衡的一种功能，正常情况下，对抗体有力利：免疫功能失调时，会产生对机体有害的反应。 2. 抗原：是一类能刺激抗体的免疫系统产生特异性免疫应答，并能与免疫应答的产物在体内外产生特异性结合的物质。 3. 抗原决定簇：是存在于抗原分子表面，决定抗原特异性的特殊化学集团，又称表位，它的种类，数目，空间构型决定了抗原的特异性。 4. 异嗜性抗原：是指在无种属关系生物间存在的共同抗原。 5. 抗体：是机体的免疫系统受抗原刺激后，B细胞转化为浆细胞，由浆细胞产生的能与相应抗原发生特异性结合的球蛋白。 6. 免疫球蛋白：是指具有抗体活性或化学结构上与抗体相似的球蛋白

7. 单克隆抗体：是指对一个抗原决定簇，由一个B细胞分化增值的子代细胞集团，即单一纯系细胞合成的抗体。 8. 补体系统：是存在于正常人和动物血清中及组织具有酶活性的一组与免疫有关的球蛋白所组成的酶反应系统，它包括多种因子。 9. LAK细胞：淋巴因子激活的杀伤细胞，NK细胞或部分Tc在体外培养时，在高剂量IL2 诱导下，成为对多种肿瘤细胞有杀伤作用的细胞，称LAK细胞。 10. 免疫细胞：指所有参加免疫应答有关的细胞及前体细胞。 11. 细胞因子：是指由活化的免疫细胞或非免疫细胞合成与分泌的，具有多种生物学效应的小分子多肽。 12. APC即抗原提呈细胞，能表达被特异性T细胞识别的抗原肽：MHC 复合物的所有细胞，主要包括单核吞噬细胞，树突状细胞, B细胞 13. 免疫应答：是指免疫细胞识别抗原，自身的活化，增殖分化，产生效应物质，将抗原破

数学模型在生物学中的应用修订稿

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Application of mathematical model in Biology Abstract: Mathematical models in biology such as a microscope can be found in biological mysteries, biological research through with the establishment of the mathematical rules of the law of development of life, which launched a new discovery, new rules and in biology established reliable model of the biological status of classified analysis and forecasting.The from the history of mathematical biology development, the branch of the understanding of mathematical biology, followed by another in the mathematical model in Mathematical Biology status in understanding the status of mathematical model. Finally, in the application of mathematical model know differential equation model, the differential equation model and the stability of the model.This will help in mathematical biology research, on the basis of the mathematical model, established in accordance with the law of the mathematical model, in the process of life to verify new rules, new found in biological research clearer, more clear. Keywords: mathematical mode;biology;application

免疫沉淀与免疫共沉淀原理及方法

免疫沉淀与免疫共沉淀原理及方法一、基本概念免疫沉淀（immunoprecipitation）是利用抗体可与抗原特异性结合的特性，将抗原（常为靶蛋白）从混合体系沉淀下来，初步分离靶蛋白的一种方法。免疫共沉淀（coimmunoprecipitation）是一种在体外探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理是如果两个蛋白在体外体系能够发生特异性相互作用的话，那么当用一种蛋白的抗体进行免疫沉淀时，另一个蛋白也会被同时沉淀下来。与酵母双杂交技术不同，免疫共沉淀技术所利用的是抗原和抗体间的免疫反应，是一种基于体外非细胞的环境中研究蛋白质与蛋白质的相互作用的方法。不难看出，免疫共沉淀与免疫沉淀技术所使用的原理与方法大致相似，所不同的是，在免疫共沉淀中，对靶蛋白的结合与沉淀由另一个与之发生相互作用的蛋白替代。在免疫共沉淀或免疫沉淀的基础上，通过进一步与其它技术的结合，如聚丙烯酰胺凝胶电泳，还可进一步对靶蛋白的的分子量等特性进行鉴定。二、抗体的选择（一）多克隆抗体多克隆抗体因其制备相对简单，可与靶蛋白分子的多个位点结合，所形成的抗原抗体复合物较稳定因而应用的最为广泛。但多克隆抗体的缺点在于非特异性结合较多，常会导致反映本底（是否是背景）升高和一定的假阳性结果。（二）单克隆抗体与多克隆抗体相比，单克隆抗体往往只结合一种抗原表位，具有单一结合特异性，所以发生非特异结合的机会少，可被用于确定靶蛋白上某一部位的特殊结构，甚至可被用于区分相同靶蛋白的不同形式如构象变化和修饰。但反过来，单克隆抗体仅与单一表位结合的特性也会引起具有同一表位的不同靶蛋白间的交叉反应。三、免疫沉淀方法免疫沉淀的靶蛋白一般来自细胞裂解液，可以是被同位素标记的也可以是未被标记的。若为前者，免

《医学微生物与免疫学》期末考试试卷附答案

《医学微生物与免疫学》期末考试试卷附答案一、选择题(答题时选一个最准确的答案。（20小题*3=60） 1.免疫是指( ) A抗感染的作用 B清除衰老死亡细胞的作用 C抗肿瘤作用 D清除一切抗原异物的作用 E移植物被排斥的作用 2半抗原是 ( ) A异种抗原 B具有反应原性的物质 C具有免疫原性的物质 D化学结构简单的物质 E分子量大的物质 3类毒素具有的特征为( ) A. 有毒性和免疫原性 B有免疫原性 C. 无毒性 D无免疫原性、无毒性 E有免疫原性、无毒性 4.人或动物体内代表个体特异性的能引起强烈而迅速排斥反应的抗原称为( ) A组织相容性抗原 B移植抗原 C主要组织相容性复合体 D主要组织相容性抗原 E.半抗原 5免疫球蛋白与抗原特异性结合部位是( ) A.Fc段 B.Fab段 C.CH1段 D.CH2段 E.CL区 6能直接产生抗体的细胞是( ) A、B细胞 B.T细胞 C.浆细胞 D.巨噬细胞 E.NK细胞 7.在血清中含量最高的免疫球蛋白是( ) A. lgM B.IgA C.IgD D.IgE E.lgG 8.在人类胎儿最早合成的免疫球蛋白是( ) A. IgE B.IgM C.IgG D.IgA E.IgD 9.免疫应答的全过程包括( ) A.感应阶段和效应阶段 B.感应阶段和反应阶段 C.反应阶段和效应阶段

D.记忆阶段和效应阶段 E.感应阶段、反应阶段和效应阶段 10.下述哪项不是细胞免疫现象( ) A.迟发型超敏反应 B.免疫复合物病 C.抗肿瘤免疫 D.移植排斥反应 E.对细胞内致病菌的抗感染作用 11.能特异性杀伤靶细胞的免疫细胞是( ) A.K细胞 B.NK细胞 C.巨噬细胞 D.单核细胞 E.Tc细胞 12.机体抗感染的第—道防线是( ) A.血脑屏障 B.皮肤粘膜屏障 C.胎盘屏障 D.吞噬细胞 E.补体 13.下述哪项不是补体的生物学作用( ) A. 溶菌作用 B.免疫粘附作用 C.中和外毒索作用 D.趋化作用 E.中和病毒作用 14.参与I型超敏反应的细胞是( ) A.中性粒细胞 B.单核细胞 C.肥大细胞 D.K细胞 E.NK细胞 15.具致病作用的细菌的代谢产物是（） A、毒素 B、热原质 C、侵袭性酶 D、色素 E、A+B+C 16.免疫应答是指（） A、免疫应答是B细胞对Ag分子的识别，自身的活化、分化及产生效应的过程 B、免疫应答是T细胞对Ag分子的识别，自身的活化、分化及产生效应的过程 C、免疫应答是机体准确识别自己和非己、维持自身稳定的过程 D、免疫应答是机体免疫细胞准确识别病原微生物、发挥抗感染的过程 E、免疫应答是机体免疫细胞对Ag分子的识别，自身的活化、增殖分化和产生效应的过程 17.抗原的异物性是指（）

微生物学与免疫学复习超全

1、微生物、三大类型微生物、列举6种原核细胞型微生物、免疫、免疫功能。答：微生物：一大群微小生物的总称。三大类型微生物：非细胞型、原核细胞型、真核细胞型 6种原核细胞型微生物: 细菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体、立克次体免疫：指机体免疫系统识别抗原，并通过免疫应答排除抗原性异物，以维持机体内环境平衡的功能。（正常时对机体有利，异常时对机体有害。）免疫功能：（1）免疫防御（2）免疫自稳（3）免疫监视 2、你对微生物与免疫学的研究内容以及应用意义、研究现状有何认识？答：微生物学与免疫学既与人们的生活密切相关，也与感染性疾病有关，还与药物生产及药物保存和微生物污染有关。合理地开发和利用微生物及其代谢产物，有利于提高人体免疫功能，保障人类健康；反之则会严重危害人类健康甚至危机生命，如近年来所出现的药品与食品安全的问题，其中多数都与微生物污染和超敏反应有关。另外，还有众多的微生物及其代谢产物以及免疫应答的产物等都有待进一步开发利用。研究如何将微生物和免疫应答产物作为药物资源来开发，将为解决与感染有关疾病的防治问题作出大贡献。第一章思考题 1、抗原答：抗原是指能刺激机体产生免疫应答，并与免疫应答产物特异性结合的物质。

2、抗原的基本特性答：1、免疫原性 2、抗原性 3、影响抗原免疫原性的条件答：（一）异物性（二）理化性状（三）完整性（进入途径）（四）宿主的应答能力与免疫方法 4、表位答：抗原分子中决定抗原特异性的基本结构或化学基团。（是TCR/BCR及抗体特异性结合的基本单位） 5、异嗜性抗原答：存在于不同生物之间的共同抗原。 6、佐剂答：佐剂是一类非特异性免疫增强剂。与抗原同时或预先注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。 7、MHC 答：主要组织相容性复合体，是指一组紧密连锁的基因群，其功能与控制免疫应答和移植排斥有关。 8、简述HLA复合体的结构和产物

分子生物学地研究及发展

分子生物学的应用及发展摘要：本文在文献检索的基础上，对分子生物学的发展简史，基本原理，研究领域等作了简单介绍，阐述了分子生物学在人们日常生活中的应用并结合药学专业着重讨论了其在药学及中药开发发面的应用，并进一步对分子生物学未来的研究技术、方向和前景做了展望。一前言生物以能够复制自己而区别于非生物。生命现象最基本的特征是进行“自我更新”。进行“自我更新”体现了一种最高级和最复杂的运动状态。这种运动就是生物机体从环境中摄取物质和能量，以更新本身的物质组成，而山现生长、繁殖，在这样的过程中保证了将自身的特征传给历代；同时也不断地向环境输送一些物质和释放能量。在生物机体的组成物质中，防水分外，有各种无机盐类和各种有机化合物。其中生物大分子——核酸和蛋白质在进行自我更新运动中，以其功能的重要性占第一位。为探索生命现象的本质问题，产生了分子生物学这一学科[1]。分子生物学(molecular biology)是从分子水平研究生命本质为目的的一门新兴边缘学科，它是研究核酸、蛋白质等生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学，是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域[2]。分子生物学的最终目标是远大的，从产生基本细胞行为类型的各种分子的角度，来理解这五类行为类型：生长、分裂、分化、运动和相互作用。即分子生物学力图完整地描述细胞大分子的结构、功能和相互联系，从而理解细胞为什么要采取这种方式[3]。分子生物学作为一门新兴的边缘学科。它的迅速发展及其在整个生命科学领域的广泛渗透和应用，促使人们对生物学等生命科学的认识从细胞水平进入分子水平。在农业、畜牧、林业、微生物学等领域发展十分迅速，如转基因动植物等。在医学领域，为医学诊断、治疗及新的疫苗、新药物研制等开辟了新的途径，使医学科学中原有的学科发生分化组合，医学分子生物学等新的学科分支不断产生，使医学科学发生了深刻的变革，不认识到这一点就很难跟上科学发展的步伐。分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会，也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。二分子生物学发展简史分子生物学的发展大致可分为三个阶段[4-7]：

微生物与免疫学考试重点

一、概念： 1.微生物：是一群形体微小，结构简单，分布广泛，增殖迅速，肉眼不能直接观察到，需借助显微镜放大几百倍，乃至数万倍才能看到的微小生物。 2.免疫：机体识别和清除非己异物，通过应答，产生生物学效应，以维持内环境稳定的生理功能。 3.抗原：凡能与机体的淋巴细胞抗原受体特异性结合，使机体免疫系统产生特异性免疫应答，并能与相应的免疫应答产物（抗体或效应T细胞）在体内外发生特异性反应的物质。 4.半抗原：仅具备免疫反应性而不具有免疫原性的物质被称为半抗原，又称不完全抗原。 5.抗原表位：（抗原决定族）:抗原分子中决定抗原特异性的基本结构或化学基团。与抗体特异性结合的基本单位。：胸腺依赖性抗原刺激B细胞产生抗体需要Th细胞辅助半抗原（B表位）+载体（T表位）大多数蛋白质，例：病原微生物、血细胞、血清蛋白：胸腺非依赖性抗原刺激B细胞产生抗体不需要Th细胞辅助由多个重复B表位组成，例：多糖 8.抗体：由B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的一类糖蛋白，主要存在于血液和组织液中，为体液免疫的重要效应分子. 9.免疫球蛋白：具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白. 10.单克隆抗体:由单一B细胞克隆所产生的，只作用于某一特定抗原表位的均一抗体称为单克隆抗体. 11.补体：存在人和动物血清中的一组与免疫功能有关，活化后具有酶活性的蛋白质。 12.细胞因子：由多种细胞，特别是活化的免疫细胞合成分泌的一类具有多种生物学活性的小分子多肽或糖蛋白。、BC：T细胞（T淋巴细胞），胸腺发育成熟的，执行特异的细胞免疫和辅助体液免疫功能的淋巴细胞。 B细胞（B淋巴细胞）骨髓发育成熟的，执行特异的体液免疫和抗原提呈功能的淋巴细胞。 14.抗原抗体反应：在体外，抗原与相应的抗体特异性结合，在辅助物质的参与下，出现可见现象的反应。又称血清学反应。应用广泛，敏感性可达

生物数学

生物数学生物数学是生物与数学之间的边缘学科。它是用数学方法研究和解决生物学问题,并对与生物有关的数学方法进行理论研究的学科。如果把生物学的分支领域看作一个集合,数学的分支领域看作另一个集合,生物数学就是这两个集合导出的乘积空间。因而生物数学的分支内容非常丰富,从研究使用的数学方法划分,生物数学可分为生物统计学、生物信息论、生物系统论、生物控制论和生物方程等分支。此外,由于生命现象极为复杂,从生物学中提出的数学问题往往也十分复杂,需要进行大量计算工作,因此计算机是解决生物数学问题的重要工具。一、生物数学的发展生物数学产生和发展的历史，要追溯到16世纪。中国明朝的著名科学家徐光启(1562 - 1633)曾用数学的方法估算过人口的增长，他说:“头三十年为一世”, 即人口大致每30年增加一倍。这是把数学应用于生态问题的最早史例。1662年, J. Graunt研究了伦敦人口的出生和死亡率,通过计算后认为:如果略去移民，伦敦的人口每64年将增加一倍。1789年英国神父在他的著作中提出了人口按几何级数增长的理论等。这些都是早期的生物数学的零碎工作。1900年,意大利著名数学家V olterra在罗马大学的一次题为“应用数学于生物和社会科学的尝试”的演讲, 1901 年英国统计学家Pearson创办了《生物统计杂志》(Biometri2k a) ,标志了生物数学发展的一个里程碑。人们根据生命现象的普遍特点:多次重复、大量出现、随机性等,以生物统计学为基础解决生命现象所面临的问题。这一阶段的工作局限于对生命现象作静止的、定量的简单描述, 研究的数学手段也仅仅是统计学、几何学和一些初等的解析方法。DA.W. Thompson对这一阶段的研究成果作了总结,写出一部巨著《论生长与形式》, 作为生物数学萌芽阶段的代表作。在这本著作中提出了许多古典的生物数学问题, 直到今天仍然引起某些学者的关注，进行讨论和研究。20世纪20年代开始, 数学在生物中的应用不再局限于静止、孤立的描述生命现象, 开始分析生命现象复杂的过程, 并探索其规律性。人们开始使用各种数学工具, 建立起各种各样的数学模型模拟各种生命过程。数学物理方法把许多微分方程模型带进了生物学领域, 生物数学的发展进入第二阶段。美国生态学家Lotka在1921年研究化学反应和意大利数学家Volterra在1923年研究鱼类竞争时分别提出了现在已经成为生物数学研究中的经典模型之一的Lotka - Volterra 系统。同时代的另外代表人物还有: Kostitzyn、Kolmogorov、Rashevsky等。20世纪40年代末电子计算机的发明和普及应用, 使生物数学的发展进入又一个新的时期。由于生命现象的复杂性, 给生物数学带来大量运算, 只有利用电子计算机,一些生物数学问题的求解才成为可能, 因而计算机成为发展生物数学的基础。在此基础上许多生物数学的分支学科, 如数量分类学、生物控制论、生物信息论等在20世纪50年代以后如雨后春笋般相继产生, 并得到了发展。20世纪70年代随着电子计算机的发展和进一步的普及, 以此为后盾的生物数学如虎添翼飞速发展。从古典的初等数学到近代数学, 从抽象数学到应用数学, 生物数学已经把数学学科的绝大部分内容置于自己的基础之中, 具有了完整的数学理论基础。特别是70年代中期, 微分方程及动力系统的新理论和新方法大量的应用于种群生态学、种群遗传学、神经生物学、流行病学、免疫学、生理学以及环境污染等问题的研究中。生物数学在利用数学工具解决问题的同时, 又提出了更为现实的问题。20

免疫沉淀技术的原理和抗体选择

免疫沉淀技术的原理和抗体选择随着生物技术的发展，蛋白质与基因之间的互作逐渐成为科研人员的关注热点，染色免疫沉淀技术由此而生，并被应用到各个科研领域当中。本文聚焦染色质免疫沉淀技术的原理、应用和抗体选择等问题，让您对其有更全面的了解和认识。随着人类基因组测序工作的基本完成，功能基因组学的研究逐渐成为研究的热点。而基因表达的调控又是功能基因组学的一个重要研究领域。研究某个蛋白因子的调控功能，可以通过对蛋白活性(激活或抑制其活性)，蛋白数量(过表达Overexpression或基因缺陷型Knockout), 以及蛋白功能(功能缺陷型蛋白Dominant-negative mutation)的控制，影响下游基因的表达，而下游基因的变化又可以通过基因芯片(cDNA Microarray)，抑制消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization)，差异显示RT-PCR等方法进行研究。然而这些方法都无法提供证据证明这些变化是受某个蛋白因子直接调节的，还是间接的其他变化导致的结果。所以，要想提供蛋白因子直接调控的证据，就要直接检测蛋白质-DNA的相互作用。传统的方法包括转录因子结合实验(Transcription Factor Assay)，电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay)，DNase I 足印法(DNase I footprinting)，酵母单杂交系统等。但这些方法都有一定的局限性，不能充分反映生理情况下DNA与蛋白相互作用的真实情况，而且很难捕捉到在染色质水平上基因表达调控的动态瞬时事件。染色质免疫沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation，简称ChIP)是研究体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性，可以真实地反映体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。特别是近年来由于该技术不断的发展和完善，其应用范围已经从研究目的蛋白与已知靶序列间的相互作用，发展到研究目的蛋白与整个基因组的未知序列的相互作用;从研究一个目的蛋白与DNA 的相互作用，发展到研究两个蛋白与DNA共同结合的相互作用;从研究启动子区域的组蛋白的修饰，发展到研究结合在DNA序列上的蛋白复合物。随着对基因功能研究的不断深入，这项技术正越来越多的被应用于科研的各个领域。 ChIP技术的原理染色质免疫沉淀技术的原理是：在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起，通过超声或酶处理将染色质切为小片段后，利用抗原抗体的特异性识别反应，将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来。染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定，染色质断裂，染色质免疫沉淀，交联反应的逆转，DNA的纯化，以及DNA的鉴定。因为ChIP实验涉及的步骤多，结果的重复性较低，所以对ChIP实验过程的每一步都应设计相应的对照，而且对结果的分析也需要有一定的经验。对于刚刚开始使用ChIP技术的研究人员来说，使用成熟的商品化试剂盒和相关的技术服务会达到事半功倍的效果，比如millipore.html' target='_blank'>Millipore公司的EZ-ChIP试剂盒就是专门为初学者设计的入门产品。下面我们就最基本的实验步骤，实验中的小技巧以及需要注意的问题简单介绍一下。

世界生物学发展史

世界生物学发展史生物学的发展经历了萌芽期、古代生物学时期、近代生物学时期和现代生物学时期。生物学发展的萌芽时期是指人类产生（约300万年前）到阶级社会出现（约4000年）之间的一段时期。这时人类处于石器时代，原始人开始了栽培植物、饲养动物并有了原始的医术，这一切为生物学发展奠定了基础。到了奴隶社会（约4000年前开始）和封建社会后期，人类进入了铁器时代。随着生产的发展，出现了原始的农业、牧业和医药业，有了生物知识的积累，植物学、动物学和解剖学还停留在搜集事实的阶段。但在搜集的同时也进行了整理，并被后人叫做所谓的古代生物学。古代的生物学在欧洲以古希腊为中心，著名的学者有亚里士多德研究（形态学和分类学）和古罗马的盖仑（研究解11剖学和生理学），他们的学说在生物学领域内整整统治了1000年。中国的古代生物学，则侧重研究农学和医药学。从15世纪下半叶到18世纪末是近代生物学的第一阶段，这一时期，在生物学研究中，主要的有维萨里等人的解剖学，哈维的生理学，林耐的分类学以及从18世纪末并继续到19世纪初的拉马克等人的进化学说。 19世纪的自然科学，进入了全面繁荣的时代。近代生物学的主要领域在19世纪都获得重大进展。如细胞的发现，达尔文生物进化论的创立，孟德尔遗传学的提出。巴斯德和科赫等人奠定了微生物学的科学基础，并在工农业和医学上产生了巨大影响。17世纪建立起来的动物（包括人体）生理学到19世纪有了明显的进展，著名学者有弥勒、杜布瓦·雷蒙、谢切诺夫和巴甫洛夫等人。由于萨克斯、普费弗和季米里亚捷夫的努力，使植物生理学在理论上达到了系统化。 20世纪的生物学即属于现代生物学的范畴，始于1900年孟德尔学说的重新

免疫共沉淀技术的研究进展_郭纯

免疫共沉淀技术的研究进展 S t u d y P r o g r e s s o f C o-i m m u n o p r e c i p i t a t i o n T e c h n o l o g y 郭纯 (湖南省人民医院,湖南　长沙　410005) [摘要]　免疫共沉淀(c o-i m m u n o p r e c i p i t a t i o n)技术是检测蛋白质间相互作用的经典方法,也是较常用的方法。文章对近10余年有关免疫共沉淀技术的原理和应用及其优缺点的分析进行文献综述。 [关键词]　免疫共沉淀;蛋白质;相互作用;技术 [A b s t r a c t]　C o-i m m u n o p r e c i p i t a t i o n t e c h n o l o g y i s c l a s s i c a l m e t h o dt o e x a m i n e t h e i n t e r a c t i o na m o n g p r o t e i n s,a l s o ac o m m o n m e t h o d.T h e p a p e r m a d e a l i t e r a t u r er e v i e w,w h i c hr e f e r r e dt ot h e p r i n c i p l e o f c o-i m m u n o p r e c i p i t a t i o nt e c h n o l o g y a n di t sm e r i t o r f l a w. [K e y w o r d s]　C o-i m m u n o p r e c i p i t a t i o n;P r o t e i n;I n t e r a c t i o n;T e c h n o l o g y [中图分类号]R392-33　[文献标识码]A　[文章编号]1672-951X(2007)12-0086-04 蛋白质间的相互作用控制着大量的细胞活动事件,如细胞的增殖、分化和死亡。通过蛋白质间相互作用,可改变细胞内蛋白质的动力学特征。如底物结合特性、催化活性;也可产生新的结合位点,改变蛋白质对底物的特异性;还可失活其它蛋白质,调控其它基因表达。因此,只有使蛋白质间相互作用顺利进行,细胞的正常生命活动过程才有保障。由于蛋白质间相互作用具有如此重大的意义,因此其检测方法的研究也备受重视由生化方法,如蛋自质亲和层析(p r o t e i n a f f i n i t y c h r o m a t o g r a p h y)、亲和印迹(a f f i n i t yb l o t t i n g)、免疫沉淀(i m m u n o p r e c i p i t a t i o n)及交联(c r o s s-l i n k i n g),发展到当今的分子生物学方法,如以基因文库为基础的蛋白探测(p r o-t e i np r o b i n g)、噬菌体显示(p h a g e d i s p l a y)及双杂交系统(t w o -h y b r i ds y s t e m)等。另外,还发展了可定性和定量检测蛋白质间相互作用的简便又快捷的方法,如表面胞质团共振(s u r-f a c e p l a s m o n r e s o n a n c e)等。通过这些方法的联合使用,实验得出的蛋白质间的相互作用的结论显得更为可靠[1]。 1　免疫共沉淀基本原理细胞裂解物中加入抗体,这样可与已知抗原形成特异的免疫复合物,若存在与已知抗原相互作用的蛋白质,则免疫复合物中还应包含这种蛋白质,经过洗脱,收集免疫复合物,然后分离该蛋白质,对该蛋白质进行N端氨基酸序列分析,推断出相应的核苷酸序列。将包含活性物质的组织或细胞构建成c D N A文库,以上述核苷酸序列为探针从c D N A文库中分离出c D N A克隆。 1.1　免疫共沉淀技术的主要步骤 1.1.1　用磷酸盐缓冲液洗30块10c m培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1m l冰冷的E B C裂解缓冲液中。 1.1.2　将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上4℃以最大速度离心15m i n。 1.1.3　收集上清(约30m l)并加入30μg的适当抗体,4℃摇动免疫沉淀物1h。 1.1.4　加入0.9m l的蛋白质A-S e p h a r o s e悬液,4℃摇动免疫沉淀物30m i n。 1.1.5　用含900m m o l/L N a C l的N E T N洗蛋白A-S e p h a r o s e 混合物,再重复洗5次。最后,用N E T N洗1次。 1.1.6　吸出混合物的液体部分。加入800μl的1×S D S胶加样缓冲液到球珠中,煮沸4m i n。 1.1.7　将样品加入到大孔的不连续S D S-P A G E梯度胶中,在10m A的恒定电流下电泳过夜。 1.1.8　通过考马斯蓝染色观察蛋白质泳带。 1.1.9　从胶上切下目标带,将其放到微量离心管中,用1m l 50%乙腈洗两次,每次3m i n。 1.1.10　用胰蛋白酶消化胶中的蛋白质,再将肽电洗脱。 1.1.11　通过窄孔高效液相色谱分离肽。将收集的肽在A B I 477A或494A机器上进行自动E d m a n降解测序。 2　免疫共沉淀技术的应用 2.1　肿瘤　鼻咽癌细胞中p53相结合蛋白质的分离与鉴定:免疫共沉淀与L C2E S I2M S/M S分析相结合的方法对H N E1细胞蛋白条带3鉴定的p53相互作用蛋白之一H S P78进行了验证。首次在鼻咽癌细胞中鉴定了9个p53结合蛋白,为阐明鼻咽癌中p53蛋白聚集及失活的机制提供了重要第13卷第12期中　医　药　导　报 2007年12月V o l.13　N o.12 G u i d i n g J o u r n a l o f T C M D e c e m b e r.2007 DOI:10.13862/https://www.360docs.net/doc/807617949.html, https://www.360docs.net/doc/807617949.html,43-1446/r.2007.12.038

复习重点、试题-医学免疫学与微生物学期末复习1

一、名词解释１、免疫球蛋白：具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。２、病毒体：结构完整、具有感染性的病毒颗粒。特指病毒在细胞内增殖后释放到细胞外的成熟病毒颗粒，可短暂存活并感染新的宿主细胞。如HBV、HIV。３、菌毛：某些细菌菌体表面比鞭毛更细、多、短而直的蛋白性丝状物。按功能分为普通菌毛和性菌毛。前者是细菌的黏附结构，构成细菌毒力，如淋球菌依靠菌毛黏附在尿道上皮细胞表面而致病；后者传递细菌遗传物质。４、质粒：细菌染色体外的遗传物质，由双股环状DNA构成，控制细菌非生命必须性状。如控制性菌毛的F质粒，控制耐药性的R质粒，控制毒力的Vi质粒等。５、抗原：是能够刺激机体免疫系统使之产生特异性免疫应答，并能与相应免疫应答产物即抗体或效应T细胞在体内或体外发生特异性结合的物质。６、毒血症：病原菌在局部组织生长繁殖后，病原菌本身不侵入血流，只有其产生的毒素进入血流，到达易感的组织细胞，因其特殊的中毒症状。如白喉杆菌、破伤风杆菌等。７、Dane 颗粒：HBV是具有双层衣壳、直径为４２NM的球形颗粒。因Dane于１９７０年在乙肝感染者的血清中首次发现，故又称Dane颗粒。其结构由外向内依次为外衣壳、内衣壳、核心。Dane颗粒为HBV有感染性的完整颗粒。８、细胞因子：指由活化的免疫细胞或非免疫细胞合成分泌的、能调节细胞生理功能、介导炎症反应、参与免疫应答和组织修复等多种生物学效应的小分子多肽，是除免疫球蛋白和补体之外的有一类分泌型免疫分子。９、正常菌群：存在于身体各部的微生物在正常情况下对人体是有益无害的，故称之为正常菌群，对人体有营养作用、生物拮抗作用、免疫协调作用和抗肿瘤作用。１０、免疫：是指机体免疫系统识别“自己”与“非己”抗原物质，对“自己”物质耐受而排除“非己”抗原物质的生理过程。１１、非胸腺依赖性抗原（ＴＩ－Ａｇ）：只含B细胞抗原决定簇，不需要T细胞协助，可直接激活B细胞产生抗体的抗原。１２、消毒：杀死物体上病原微生物的方法，但芽胞可能存活。注射前的皮肤用酒精棉涂抹即为消毒。１３、真菌：一类不分根、茎、叶、不含叶绿素、具有细胞壁的真核细胞型微生物。按细胞结构分为单细胞真菌和多细胞真菌(又称为霉菌)。如引起各类癣症的多细胞真菌；引起深部组织感染的单细胞真菌有白色念珠菌和新型隐球菌。１４、脓毒血症：化脓性细菌侵入血流后在血液中大量繁殖，并播散到其它组织中引起新的化脓性病灶。如金黄色葡萄球菌引起的脓毒血症，可导致多脏器的化脓性感染，如肝脓肿、膈下脓肿等。１５、荚膜：某些细菌表面包裹的粘液性多糖或多肽类物质，可保护细菌抵抗体内吞噬细胞的吞噬和补体、溶菌酶的溶菌作用，是细菌的毒力构成因素之一。如肺炎球菌、新型隐球菌因荚膜而具有致病性。１６、抗体：机体免疫系统受抗原刺激后，B细胞分化成熟为浆细胞后，合成分泌

微生物学与免疫学简答题

免疫应答的基本过程识别阶段：T细胞和B细胞分别通过TCR和BCR精确识别抗原，其中T细胞识别的抗原必须由抗原提呈细胞来提呈；2.活化增殖阶段：识别抗原后的淋巴细胞在协同刺激分子的参与下，发生细胞的活化、增殖、分化，产生效应细胞（如杀伤性T细胞）、效应分子（如抗体、细胞因子）和记忆细胞；3.效应阶段：由效应细胞和效应分子清除抗原。 2体液免疫和细胞免疫的区别： 1.体液免疫清除的是游离在寄主细胞外的抗原及其产生的有毒物质；细胞免疫则摧毁侵入到寄主细胞内的病毒、胞内寄生菌或外来的组织团块、癌变的细胞等。 2.体液免疫是通过效应B细胞（浆细胞）分泌抗体，并与抗原发生特异性结合来清除抗原细胞免疫则是通过效应T细胞（杀伤T细胞）分泌穿孔素使靶细胞溶解死亡。体现体液免疫与细胞免疫的联系:在特异性免疫反应中，体液免疫和细胞免疫之间既各自有其独特的作用，又可以相互配合共同发挥免疫效应。当细菌、病毒等病原体侵入人体后，首先诱发体液免疫，因为T细胞不能识别入侵的病毒等抗原，只有当病毒或胞内寄生菌侵入宿主细胞，细胞表面出现了来自病毒等病原体的小分子蛋白质抗原，并与细胞表面的受体结合成复合物时，T细胞才能识别，进而引发细胞免疫，使靶细胞裂解，暴露出隐藏其中的病原体，再通过体液免疫将其清除。假若病原体不是胞内寄生物，则只能诱发体液免疫。人工自动免疫与人工被动免疫人工自动免疫是将疫苗、菌苗或类毒素接种于人体，使机体产生特异免疫力，主要用于预防接种。这种免疫力出现较慢，一般接种后2-4周才产生，但能维持半年到数年，接种次数一般1-3次。常用的接种有卡介苗、麻疹疫苗、小儿麻痹糖丸等。人工被动免疫是当机体感染以后，注射含有特异性抗体的免疫血清等免疫制剂，使机体立即获得特异性免疫，由于这些免疫物质不是病人自身产生的，所有免疫作用虽快，但维持时间只有2-3周，因此，人工被动免疫常用于紧急预防和治疗。常有的：破伤风抗毒素、胎盘球蛋白、丙种球蛋白、干扰素、胸腺素等。细菌生长繁殖的条件营养：水，碳源，氮源，无机盐，生长因子生长因子：是细菌在生长中必需的、自身不能合成的物质。酸碱度：多数细菌最适生长pH为7.2～7.6 温度：多数致病菌最适生长温度37℃ 气体：CO2、O2 （需氧菌、微需氧菌、厌氧菌、兼性厌氧菌）结核菌素试验原理：根据免疫力与迟发型超敏反应同时存在的原理，用结核菌素测定机体能否发生迟发性超敏反应，以判断机体对结核有无免疫力试剂：旧结核菌素（OT)和纯蛋白衍生物（PPD）方法：前臂1/3处偏内侧皮内注射PPDC/BCGPPD量0.1ml, 48-72h后观察结果结果：红肿硬结＞5mm，阳性（＞ 15mm，强阳性）红肿硬结＜5mm，阴性