植物组织培养试题 第4章

第4章《胚胎培养及离体授粉》复习题及参考答案

一、填空：

★1、胚胎培养包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。

2、离体胚的培养分为二种类型：成熟胚培养和幼胚培养。

★3、胚珠培养分二类：受精胚珠的培养和未受精胚珠的培养。受精胚珠培养目的一是打破种子的休眠；二是挽救胚的发育，以获得杂交种。未受精胚珠培养的目的是获得单倍体植株。

4、子房培养分授粉子房培养和未授粉子房的培养。前者培养的目的是挽救杂种胚，后

者培养的目的是获得单倍体植株。

5、离体授粉的类型有离体柱头授粉、离体子房授粉、离体胚珠授粉。

★6、离体胚培养方法：成熟胚和幼胚培养

7、胚珠培养的培养基：Nitsch或N5,B5,MS，子房培养的培养基：N6,MS

二、名词解释：

★1、胚胎培养（embryo culture）：指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成完整植物的技术。包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。

★2、胚培养（embryo culture）：采用人工的方法将胚从种子、子房或胚珠中分离出来，再放在无菌的条件下，让其进一步生长发育，以至形成幼苗的过程。

★3、胚乳培养（endosperm culture）：是指将胚乳从母体上分离出来，放在无菌的人工环境条件下，让其进一步生长发育，以至形成幼苗的过程。

4、胚珠培养（ovule culture）：是指将胚珠从母体上分离出来，在无菌的人工环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。

5、子房培养（ovary culture）：是指将子房从母体上分离出来，在无菌的人工环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。

6、植物离体授粉：指将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来，进行无菌培养，并以一定的方式授以无菌花粉，使之在试管内实现受精的技术。

三、问答题：

★1、胚培养的作用有哪些？

1)在远缘杂交育种中的应用:克服杂种胚不能正常发育

2)克服珠心胚的干扰,提高育种效率

3)缩短育种周期

4)测定休眠种子的萌发率

5)理论研究中的应用

2、简述离体授粉的程序。（课件上没有）

（1）确定开花、花药开裂及授粉时间

（2）去雄后将花蕾套袋隔离

（3）制备无菌子房或胚珠

（4）制备无菌花粉

（5）胚珠或子房的试管内授粉

★3、胚胎培养的操作步骤。

●取子房

●常规表面消毒

●解剖镜下，取胚珠、去珠被、取出完整幼胚。

●固体培养

★4、幼胚的发育方式：

1）胚性发育：继续进行正常的胚胎发育

2）早熟发育：迅速萌发成幼苗

3）产生愈伤组织：再分化形成多个胚状体或芽原基。

★5、胚胎培养的意义

①、克服远缘杂种的不育性

②、使胚胎发育不完全的植株获得后代

③、缩短育种年限，提高育种效率

★6、胚乳培养过程

⏹胚乳外植体制备:种子消毒---取出胚乳

⏹培养:White或MS诱导培养基---加入2，4-D或NAA0.5～2.0mg/L，BA 0.1～1.0mg

／L——25-27℃--暗或弱光

⏹发育:约6～lOd胚乳开始膨大，再诱导形成愈伤组织----转到分化培养基上培养，分

化培养基可加入0.5～3.0mg／L的BA及少量的NAA。待愈伤组织长出芽后，切下不定芽，插入生根培养基中，光下培养10～15d，切口处可长出白色的不定根。

★7、检查胚乳植株的染色体数目的方法

●取根尖、幼叶或愈伤组织

●0.2%-0.5%秋水仙素碱溶液在25℃浸泡4-8hr

●流水冲洗5-10min

●卡诺氏液或FAA液固定

●1mol盐酸，60 ℃水浴8-10min

●染色、压片、镜检、计数

★8、胚珠培养的基本过程

1）、首先从花中取出子房进行表面消毒，

2）、然后在无菌的条件下进行解剖，取出胚珠，放在培养基上进行培养，

将胚珠培养成植株的关键是选择胚的发育时期，实验证明发育到球形胚期的胚珠较易培养成功，另外为了培养成功，可取用带胎座甚至带部分子房的胚珠进行培养。

★9、子房培养的培养过程

●1、制备外植体：在开花前后适宜时期取子房或幼花，消毒

●2、子房培养：固体或液体培养均可

★10、子房的发育的发育途径。

☐性细胞（卵细胞、助细胞、极核、反足细胞）----胚状体或愈伤组织----单倍体植株；

☐体细胞（珠被、子房壁）---胚状体或愈伤组织----二倍体植株；

★11、胚珠的发育途径。

1）、受精胚珠：一是形成种子；二是形成愈伤组织

2）、未受精胚珠：形成单倍体植株。