动物蠕虫学粪便检查技术(一)
粪便病原检查技术
粪便病原检查技术粪便检查是诊断寄生虫病常用的病原学检测方法，要取得粪便检查的准确结果，必须注意：保证粪便新鲜，送检时间一般不超过24小时，对原虫滋养体检查应立即送检，或暂时保存在35~37℃条件下待查；盛粪便的容器须干燥、洁净，无尿液或水混入，无药物、泥土和其他杂物污染；严格按照粪检程序进行操作，特别是镜检时要熟悉各病原体的形态特点并遵循顺序观察的原则，以免漏检。
常用方法有以下几种：一、直接涂片法直接涂片法（direct smear methed）适用于检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
方法简便，由于用标本较少，故检出率较低，若连续图片3张，可提高检出率。
1、蠕虫卵检查取一清洁的载玻片，在玻片中央加一滴生理盐水。
再用竹签挑取绿豆（火柴头）大小的粪便一小块，均匀涂布于生理盐水中，涂片厚薄以透过涂片约能辨认书上的字迹为宜。
如果太厚，阻碍光线的透过，太薄则影响检查效果（必要时可加盖玻片）。
先用低倍镜观察，从左至右，由上到下顺序地移动载玻片或镜台推进器，仔细查找，找到被查物后，应将被查物移至视野中央，仔细辨认。
必要时可换高倍镜进一步观察。
观察粪便涂片时，镜台应平放，以免粪液下流污染镜台，同时影响观察。
镜检过程中应防止涂片干燥，如已干燥而不透明时，可再加生理盐水，涂匀后继续观察。
粪便中常有很多与蠕虫卵相似的杂质，如食物残渣、气泡、脂肪滴、动植物细胞、植物孢子、淀粉颗粒等，必须仔细地与虫卵鉴别，以免误诊。
至于属何种杂质，不必花费过多的时间去研究，以免因此而分散注意力。
蠕虫卵的形态特征：人体检查的蠕虫卵种类较多，但它们皆有一定的形态特征，即有一定的形状、大小、颜色，明显的卵壳及特有的内容物（如卵细胞、卵黄细胞、幼虫等）。
但上述特征可因虫卵位置、死活、个体差异、发育情况、新鲜程度等而有所变化，必须分析情况，做出正确判断。
由于受检的粪量少，检出率较低，故常规检查每份粪便应取不同部位粪便查三片，必要时连续送检三次（三送三检），才可做出报告。
动物寄生虫的实验检查法
通过实验室手段检查粪便或血液，可以确定宿主是否感染了体内寄生虫，及其感染种类和感染强度。
其中，粪便检查在寄生虫病诊断、流行病学调查和驱虫效果评定上均具有重要意义。
1小动物的体内寄生虫的检查小动物的体内寄生虫检查是通过检查粪便中的寄生虫卵进行。
应采用新鲜粪便样品进行检查，最好用粪环从直肠中采集粪便样品。
采集的粪样应置于密闭容器中，加注适当标识后送交诊断实验室。
寄送的粪样应固定在10%甲醛溶液中，也可在冷冻条件下寄送。
其他防腐剂（如乙酸钠甲醛、聚乙烯醇）能更好地保护原虫，也有助于特殊染色（如三色染色法、铁苏木精染色法）。
可采用粪便直接涂片法和粪便漂浮法进行粪常规检查。
通过在混合粪便样品中（用木制棉签的一头蘸取粪便）加1滴生理盐水（用于可游动的生物）直接制备涂片，然后加入卢戈氏液染色，以观察内部结构，如贾第鞭毛虫属寄生虫，并在载玻片上盖上盖玻片。
粪便漂浮法主要用于诊断，需要大约2g粪便，制备较为干净的样品。
常用的漂浮液是糖和硝酸钠。
采用硫酸锌漂浮法时，需要连续检查3d，这是检查贾第鞭毛虫包囊的首选方法，这种包囊随粪便排泄时呈间歇式排泄，故需多次检查。
采用贝尔曼沉淀法可对能游动的线虫幼虫进行收集和浓缩；一种可用于小动物的简便方法是在一滤茶器放置几层纱布，在其锥形漏嘴的广口端装上橡胶管和开关，将约2g粪便置于纱布内，通过漏嘴加注温热的自来水或生理盐水，1h后取沉渣物进行检查。
幼虫由于重力作用而下沉，可从漏斗底部收集，并进行镜检。
检查寄生虫的幼虫时，由于幼虫不易漂浮，也可采用特殊程序，如福尔马林乙酸乙酯沉淀法。
采用饱和糖溶液漂浮法，聚焦到盖玻片下，即可检查到隐孢子虫卵囊（4~6μm）或弓形虫卵囊（12μm）。
在进行镜检前10min内，载玻片上的卵囊即可浮动到盖玻片的底面。
采集1滴血液直接制备血涂片，可用于检查能运动的犬恶丝虫的微丝蚴，但这不是唯一的检查方法。
更精确的血液检查方法是改良的诺茨检查法：在15mL试管中加入2%福尔马林溶液9mL，再加入1mL血液，以1500r·min-1离心。
寄生虫实验检验技术
实验检验技术一、病原检查1.粪便检查（1）直接涂片法：适用于蠕虫卵、原虫检查（活滋养体检查和包囊的碘液检查）。
（2）浓集法1）加藤厚涂片法。
2）沉淀法：自然沉淀法主要用于蠕虫的检查、离心沉淀法、倒置沉淀法适于比重较大的蠕虫卵检查、汞碘醛离心沉淀法适于原虫滋养体、包囊、蠕虫卵和幼虫的检查；醛醚沉淀法适于蠕虫卵和原虫包囊的检查。
3）漂浮法：饱和盐水漂浮法适于各种线虫卵、带绦虫卵等检查；硫酸锌离心漂浮法适于原虫包囊、多数蠕虫卵等检查；蔗糖溶液漂浮法适于原虫包囊、卵囊或孢子囊检查。
4）尼龙袋集卵法：主要适于血吸虫卵检查。
（3）虫卵计数法1）改良加藤厚涂片法：适于各种蠕虫卵计数。
2）小管浮聚计数法：适于大多线虫卵计数（4）毛蚴孵化法：适于血吸虫病原体检查。
（5）钩蚴培养法：检出率较直接涂片法高7倍。
（6）带绦虫孕节检查法：肉眼可观察。
（7）常用原虫检查染色法：劳氏酸性品红-固绿染色法适于阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫检查、福氏快速苏木精染色法适于阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫滋养体和包囊检查、金胺-酚染色法和改良抗酸染色法适于隐孢子虫卵囊检查。
2.肛门外检查（1）肛门周围蛲虫虫卵检查：有透明胶纸法、棉签拭子法，适于蛲虫、带绦虫检查。
（2）肛门周围蛲虫成虫检查：在肛门附近发现白色小虫，可进一步鉴定。
3.血液及骨髓检查（1）检查微丝蚴：①新鲜血片检查法；②厚血膜法；③活微丝蚴浓集法；④离心浓集法。
（2）检查疟原虫：①新鲜血片检查法：采血、制片（薄血膜，厚血膜）、固定、染色；②定量血沉棕黄色层（QBC）检查法；③疟原虫计数法。
4.其他排泄物与分泌物检查（1）痰液检查：适于肺吸虫卵、溶组织内阿米巴滋养体、蛔蚴等检查，方法有：直接涂片法、消化沉淀法。
（2）尿液和鞘膜积液检查：适于检查班氏微丝蚴，可用离心法。
（3）阴道分泌物检查：适于检查阴道毛滴虫等，可用直接涂片法、悬滴法、涂片染色法。
（4）前列腺液检查：适于检查男性泌尿生殖道的阴道毛滴虫。
粪便中寄生虫卵检查技术
考核项目六粪便中寄生虫卵检査技术【学习目的和要求】1.掌握线虫卵的特征。
2.掌握漂浮法和沉淀法两种操作技术。
【器材】铁架台、漏斗、铜筛网、烧杯、三角烧瓶、载玻片、盖玻片、家禽患寄生虫病后，除少数呈现典型症状外，家禽的多数寄生虫病在临床上仅表现消化机能障碍、消瘦、贫血、营养不良和发育受阻、生产性能降低等慢性、消耗性疾病的症状，虽不具特异性，但可作为早期发现疫病的参考。
调查寄生虫病的流行因素，了解发病情况，摸清寄生虫病的传播和流行动态，为确立诊断提供依据。
实验室诊断实验室诊断是确诊寄生虫病的重要依据，主要包括如下内容：一、粪便内虫卵检查法粪便检查是寄生虫病生前诊断的最基本、最常用的方法。
多种寄生虫如吸虫、绦虫、线虫、棘头虫、球虫等，寄生于畜禽的消化系统或呼吸系统，某一发育阶段的病原体，常随畜禽的粪便排出，因此，检查粪便发现有寄生虫的虫卵、幼虫、虫体或虫体断片，可确诊畜禽消化系统（包括肝脏）、呼吸系统和泌尿生殖系统的寄生虫病。
粪便内虫卵检查法分直接涂片检查法和集卵法。
（一）直接涂片检查法是最简便和常用的方法，但是，当畜禽体内寄生虫数量不多而粪便中虫卵少时，有时不能查出虫卵。
本法是在载玻片上滴一些50%甘油或清洁常水的等量混合液，再用银子或牙签挑取少量粪便加入其中，混匀，夹去较大的或过多的粪渣，最后使玻片上留有一层均匀的粪液，其浓度的要求是将此玻片放于报纸上，能通过粪便液膜模糊地辨认其下的字迹为合适。
在粪膜上覆以盖玻片，置低倍显微镜下检查。
检查时，应顺序地查遍盖玻片下的所有部分。
该法简便易行，适用于检查各种蠕虫的虫卵、球虫卵囊等，但检出率较低。
（二）集卵法1.沉淀法该法的原理是虫卵比水重，可自然沉于水底，便于集中检查和提高检出率。
主要用于吸虫卵和棘头虫卵的检查，也可用于其他寄生虫卵和球虫卵囊等的检查。
方法：取粪便5〜10g置于烧杯中，加清水100ml以上，搅匀成粪汁, 通过260〜250pm （40〜60目）铜筛或两层纱布过滤，滤液收集于另一三角烧瓶或烧杯中，静置沉淀20〜40min,倾去上层液，保留沉渣。
动物寄生虫病学兽医寄生虫实验技术
⑥ 倾去上层液体，换加饱和盐水；
⑦ 再次离心后，再倾去上层液体；
⑧ 再换加饱和盐水，如此反复操作，直到上层液体完全 清澈为止；
⑨ 倾去上层液体，将沉渣全部分别滴于数张载玻片上；
⑩ 检查全部所制的载玻片，统计其虫卵总数，以总数乘 以4，即为每克粪便中的肝片形吸虫虫卵数。
在进行牛粪便肝片形吸虫虫卵的计数时，操作步骤基本同上， 但用粪量改为30g。加入离心管中的粪液量为5ml，因此，最 后计得虫卵总数乘以2，即为每克粪便中虫卵总数。 在马，当线虫卵数量达到每克粪便中含卵500枚时，为轻感染； 800～1 000枚时为中感染；l 500～2 000枚时为重感染。
沉淀法示意图
2）注意事项：
① 注意此法粪量少，一次粪检最好多看几片，以 提高检出率。 ② 可将离心沉淀法和漂浮法结合起来应用。如可先 用漂浮法将虫卵和比虫卵轻的物质漂起来，再用离 心沉淀法将虫卵沉下去；或者选用沉淀法使虫卵及 比虫卵重的物质沉下去，再用漂浮法使虫卵浮起来， 以获得更高的检出率。
（4）锦纶筛兜淘洗法
① 在一小玻璃容器上（如小三角烧瓶或大试管）， 在容量为56ml和60ml处各作一个标记； ② 先取0.4％（或0.1mol/L）的氢氧化钠溶液注入 容器内到56ml处； ③ 再加入被检粪便使液体升到60ml处；
④ 加入一些玻璃珠，振荡使粪便完全破碎混匀； ⑤ 以1mL的吸管吸取粪液0.15mL，滴于2～3张载玻片 上，覆以盖玻片； ⑥ 在显微镜下循序检查，统计其中虫卵总数；
麦克马斯特氏计数法示意图
（引自秦建华，李国清等，2005）
3) 片形吸虫卵的计数法
对于羊，操作如下： ① 取羊粪10g，置于300ml的容量瓶中； ② 加入少量1.6％的氢氧化钠溶液，静置过夜； ③ 次日，将粪块搅碎，再加入1.6％的氢氧化钠溶 液到300ml刻度处； ④ 摇匀，立即吸取此粪液7.5ml注入到一离心管内； ⑤ 在离心机内以每分钟1 000转速，离心2min；
寄生虫病学
3 斯氏虫卵计数法
用小的特制球状烧瓶，在瓶的下颈部有两个刻度，下面 为56ml，上面为60ml。 加入0.1mol/L（或4%）NaOH溶液至56ml处→徐徐加入捣 碎的粪便（大约4g）使液面达 60ml处为止→加入10多个玻 璃小球，充分振荡，呈细致均匀的粪悬液→吸管吸取0.15ml 置载玻片上 →盖上盖玻片（不小于22mm×40mm）镜检计数 →所见虫卵总数乘以100，即为每g粪便中的虫卵数（EPG） （计算过程：0.15ml×4g/60ml=0.01g 1g/0.01g=100）
2.循序沉淀法---适宜于大多数吸虫卵
取5g被检粪便放于烧杯中→加5倍量清水，搅拌均匀 →用粪筛过滤粪汁于另一烧杯中，粪渣弃之→粪汁静 置沉淀约30min→倾去烧杯内上层液体，再加清水搅 拌→再次静置沉淀约30min→反复进行2或3次，直至 上清液清亮为止→倾去大部分上清液，留约为沉淀物 1/2的溶液量→胶帽吸管吹吸均匀后，吸取适量粪汁 （2滴左右）置于载玻片上→加盖玻片镜检
寄生虫病学实验
主讲教师: 杨光友
实验一 动物蠕虫虫卵的检查与定 量测定
一 实验目的
1.掌握动物蠕虫学常见的实验室粪便虫卵检查技 术。 2.在光学显微镜下区分虫卵和异物。 3.认识吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等蠕虫虫卵，掌 握其一般特征。
二 实验原理
1.漂浮法：采用密度高于虫卵的漂浮液，使粪便中 的虫卵与粪便渣子分开而浮于液体表面，然后进 行检查。 2.沉淀法：利用虫卵密度比水大的特点，让虫卵在 重力的作用下，自然沉于容器底部，然后进行检 查。
2 贝尔曼氏法 ①用一根乳胶管两端分别连接漏斗和小试管，然后 置漏斗架上。 ②通过漏斗加入40℃的温水，水量约达漏斗中部。 ③漏斗内放上置有被检材料的粪筛。 ④静置1h后，拿下小试管，吸弃掉上清液，吸取管 底沉淀物，镜检。
反刍动物寄生虫粪便检查技术
三、沉淀法（Fecal Sedimentation）
1.将被检家畜粪便定量（5g），用定量粪便3～5倍体积的水调成羹。 2.用铜筛网过滤，并用适量水边冲洗边过滤。 3.将滤液沉淀20min，弃上清夜，再加水沉淀，重复三次。D.弃适量上 清液，用量筒对该沉淀液定量（Y ml）。 4.充分摇匀沉淀液后，迅速将部分沉淀液移至“计数器”的两计数室内。 5.在显微镜下，观察计数器两计数室内的寄生虫虫卵，并计数。
A 前端 B 尾端 18.小型艾美球虫卵囊
粪检中镜下常见杂质
1.植物导管：梯纹、网纹、
孔纹
2.螺纹和环纹
3.管胞
4.植物纤维
5.小麦的颖毛
6.真菌的孢子
7.谷壳的一些部分
8.稻米胚乳
9.植物的薄皮细胞
10.植物的薄皮细胞
11.淀粉粒
12.花粉粒
பைடு நூலகம்13. 植物线虫的一些虫卵
11
14.螨的卵（未发育）
15.螨的卵（已发育）
羊体内的寄生虫卵 1.肝片吸虫卵 2.大片吸虫卵 3.前后盘吸虫卵 4.双腔吸虫卵 5.胰阔盘吸虫卵 6.莫尼茨绦虫卵 7.乳突类圆线虫卵 8.毛首线虫卵 9.钝刺细颈线虫卵 10.奥斯特线虫卵 11.捻转血矛线虫卵 12.马歇尔线虫卵 13.毛圆形线虫卵 14.夏伯特线虫卵 15.食道口线虫卵 16.仰口线虫卵 17. 丝状网尾线虫幼虫
二、饱和盐水浮卵法（Fecal Flotation）
1、称取2克被检粪便于一小烧杯中，加入10ml饱和盐水，搅匀，再加 入50ml饱和盐水混匀。
2、用80目铜筛网过滤。 3、将滤液混匀后，用移液管将粪液加入麦氏计数板的2个计数室内，置
计数板于显微镜载物台上，静置1～2分钟后，按下图中虚线顺序， 对该2个室内的虫卵或卵囊计数。 4、求出其被检粪便中的虫卵EPG或卵囊OPG值（每克粪便中的虫卵或 卵囊数）。OPG =2个计数室内的虫卵或卵囊总数×150
动物蠕虫学粪便检查技术（一）
实验一动物蠕虫学粪便检查技术(一)一、实验目的及要求1．掌握动物蠕虫学常见的实验室粪便虫卵检查技术。
2．在光学显微镜下区分虫卵和异物。
3．认识吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等蠕虫虫卵，掌握其一般特征。
二、实验器材载玻片，盖玻片，镊子，平皿，烧杯，塑料杯或纸杯，漏斗，漏斗架，胶帽吸管，离心管，试管，玻璃棒，粪筛，纱布，平底管（青霉素小瓶），玻璃珠，三角小烧瓶，100ml球状烧瓶，火柴棍，特制铁丝圈，虫卵计数板，普通离心机，光学显微镜等。
甘油，饱和食盐水，0.1N（或4%）NaOH，家畜新鲜粪便等。
三、实验方法、步骤和操作要领(直接涂片法、漂浮法、沉淀法、虫卵计数法)（一）直接涂片法（Examination of Direct Smears）在清洁的载玻片上滴1-2滴水或1滴甘油与水的等量混合液（加甘油的好处是能使标本清晰，并防止过快蒸发变干），其上加少量粪便，用火柴棍仔细混匀。
再用镊子去掉大的草棍和渣子等，之后加盖玻片，置光学显微镜下观察虫卵或幼虫。
(图1-1)图1-1 直接涂片法示意图另一方法是直接涂片法的改良法叫回旋法。
取2～3g粪样加清水2～3倍，充分混匀成悬液。
后用玻璃棒搅拌0.5—1min，使之成回旋运动，在搅拌过程中迅速提起玻璃棒，将棒端附着的液体放于载片上涂开，加上盖片在镜下检查。
检查时多取几滴悬液。
该方法的原理是由于回旋搅动的结果，可使玻璃棒端悬液小滴中附有较多量的寄生虫卵或幼虫。
（二）漂浮法（Method Involving Flotation）其原理是采用比重高于虫卵的漂浮液，使粪便中的虫卵与粪便渣子分开而浮于液体表面，然后进行检查。
漂浮液通常多采用饱和盐水，其方法简便、经济、易行。
饱和盐水漂浮法对大多数线虫卵、绦虫卵及某些原虫卵囊均有效，但对吸虫卵、后圆线虫卵和棘头虫卵效果较差。
饱和盐水漂浮方法操作步骤：取新鲜粪便2g放在平皿或烧杯中，用镊子或玻璃棒压碎，加入10倍量的饱和盐水，搅拌混合，用粪筛或纱布过滤到平底管中，使管内粪汁平于管口并稍隆起为好，但不要溢出。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
动物蠕虫学粪便检查技术(一)一、实验目的及要求1．掌握动物蠕虫学常见的实验室粪便虫卵检查技术。
2．在光学显微镜下区分虫卵和异物。
3．认识吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等蠕虫虫卵，掌握其一般特征。
二、实验器材载玻片，盖玻片，镊子，平皿，烧杯，塑料杯或纸杯，漏斗，漏斗架，胶帽吸管，离心管，试管，玻璃棒，粪筛，纱布，平底管（青霉素小瓶），玻璃珠，三角小烧瓶，100ml球状烧瓶，火柴棍，特制铁丝圈，虫卵计数板，普通离心机，光学显微镜等。
甘油，饱和食盐水，0.1N（或4%）NaOH，家畜新鲜粪便等。
三、实验方法、步骤和操作要领(直接涂片法、漂浮法、沉淀法、虫卵计数法)（一）直接涂片法（Examination of Direct Smears）在清洁的载玻片上滴1-2滴水或1滴甘油与水的等量混合液（加甘油的好处是能使标本清晰，并防止过快蒸发变干），其上加少量粪便，用火柴棍仔细混匀。
再用镊子去掉大的草棍和渣子等，之后加盖玻片，置光学显微镜下观察虫卵或幼虫。
(图1-1)图1-1 直接涂片法示意图另一方法是直接涂片法的改良法叫回旋法。
取2～3g粪样加清水2～3倍，充分混匀成悬液。
后用玻璃棒搅拌0.5—1min，使之成回旋运动，在搅拌过程中迅速提起玻璃棒，将棒端附着的液体放于载片上涂开，加上盖片在镜下检查。
检查时多取几滴悬液。
该方法的原理是由于回旋搅动的结果，可使玻璃棒端悬液小滴中附有较多量的寄生虫卵或幼虫。
（二）漂浮法（Method Involving Flotation ）其原理是采用比重高于虫卵的漂浮液，使粪便中的虫卵与粪便渣子分开而浮于液体表面，然后进行检查。
漂浮液通常多采用饱和盐水，其方法简便、经济、易行。
饱和盐水漂浮法对大多数线虫卵、绦虫卵及某些原虫卵囊均有效，但对吸虫卵、后圆线虫卵和棘头虫卵效果较差。
饱和盐水漂浮方法操作步骤：取新鲜粪便2g放在平皿或烧杯中，用镊子或玻璃棒压碎，加入10倍量的饱和盐水，搅拌混合，用粪筛或纱布过滤到平底管中，使管内粪汁平于管口并稍隆起为好，但不要溢出。
静置30分钟左右，用盖片蘸取后，放于载片上，镜下观察；或用载片蘸取液面后翻转，加盖图1-2 漂浮法示意图除上述漂浮方法外，还有一种简单的漂浮技术．它可以检查含卵量少的粪便（每g粪便少于50个虫卵）。
具体步骤如下：即取3g粪便放于一塑料杯或烧杯内，加进50ml漂浮液后．用玻璃棒搅匀，通过粪筛或双层纱布过滤到另一个杯中．漂浮10分钟．然后用一试管插在滤液的中央底部，并迅速提起。
把附在上面的液滴滴落在载片上，加上盖片镜检。
（三）沉淀法（Sedimentation Technique ）其原理是利用虫卵比重比水大的特点，让虫卵在重力的作用下，自然沉于容器底部，然后进行检查。
沉淀法可分为离心沉淀法和自然沉淀法两种。
1．离心沉淀法。
通常采用普通离心机进行离心，使虫卵加速集中沉淀在离心管底，然后镜检沉淀物。
方法是取5g被检粪便，置于平皿或烧杯中，加5倍量的清水，搅拌均匀。
经粪筛和漏斗过滤到离心管中。
置离心机上离心2-3分钟（电动离心机转速约为500转/分），然后倾去管内上层液体，再加清水搅匀，再离心。
这样反复进行2-3次，直至上清液清亮为止，最后倾去大部分上清液，留约为沉淀物1/2的溶液量，用胶帽吸管吹吸均匀后，吸取适量粪汁（2滴左右）置载玻片上，加盖玻片镜检。
2．自然沉淀法。
操作方法与离心沉淀法类似，只不过是将离心沉淀改为自然沉淀过程。
沉淀容器可用大的试管进行。
每次沉淀时间约为半小时左右。
自然沉淀法缺点是所需时间较长，但其优点是不需要离心机，因而在基层乡下操作较为方便。
（四）虫卵计数法（Egg Counting Method ）虫卵计数法主要用于了解畜禽感染寄生虫的强度及判断驱虫的效果。
方法有多种，这里介绍二种常用的计数方法。
1．麦克马斯特氏法（McMaster's Method）。
计数板的构造：计数板是由二片载玻片组成，其中一片较另一片窄一些（便于加液）。
在较窄的玻片上有1cm见方的刻度区二个，每个正方形刻度区中又平分为5个长方格。
另有厚度为1.5mm的几个玻璃条垫于二个载玻片之间，以树脂胶粘合。
这样就形成了二个计数室，每个计数室的容积为0.15ml （0.15cm3）。
(图1-3)计数方法：取2g粪便混匀，放入装有玻璃珠的小瓶内，加入饱和盐水58ml充分振荡混合，通过细的粪筛过滤，后将滤液边摇晃边用吸管吸出少量滴入计数室内，置于显微镜台上，静置几分钟后，用低倍镜将二个计数室内见到的虫卵全部数完，取平均值，再乘以200，即为每克粪便中的虫卵数（EPG）。
图1-3 麦克马斯特氏计数板示意图2．斯陶尔氏法（Stoll's Method）。
用小的特制球状烧瓶，在瓶的下颈部有二个刻度，下面为56ml，上面为60ml（没有这种球状烧瓶，可用大的试管或小三角烧杯代替，但须事先标好上述二个刻度）。
计数时，先加入0.1N（或4%）NaOH溶液至56ml处，再徐徐加入捣碎的粪便，使液面达60ml处为止（大约加进4g粪便）。
然后加入10多个玻璃小球，充分振荡，使呈细致均匀的粪悬液（也可以过滤）。
后用吸管吸取0.15ml置载玻片上，盖以不小于22×40mm的盖玻片镜检计数（没有大盖片，可用若干张小盖片代替；或将0.15ml粪液滴于2～3张载片上，分别进行计数后，再加起来即可）。
所见虫卵总数乘以100，即为每克粪便中的虫卵数。
(图1-4)图1-4 斯陶尔氏法示意除上述方法之外，也可以用漂浮法或沉淀法来进行虫卵计数。
即称取一定量粪便(1～5g)，加入适量(10倍量)的漂浮液或水后，进行过滤，尔后或漂浮或进行反复水洗沉淀，最后用盖片或载片沾取表现虫卵或沉渣全部看完为止。
然后将见到的虫卵总数除以粪便克数，即为每克粪便虫卵数。
四、实验注意事项1.直接涂片法。
做直接涂片时，涂片的厚薄以在载玻片的下面垫上有字的纸时，纸上的字迹隐约可见为宜。
直接涂片法的优点是简便、易行、快速、适合于虫卵量大的粪便检查；缺点是对虫卵含量低的粪便检出率低。
因此在实际工作中，需多检几片，以提高检出率。
检查虫卵时，先用低倍镜顺序查盖玻片下所有部分，发现疑似虫卵物时，再用高倍镜仔细观察。
因一般虫卵（特别是线虫卵）色彩较淡，镜检时视野宜稍暗一些（聚光器下移）。
2．漂浮法。
饱和盐水漂浮法漂浮时间约为30分钟左右较为适宜。
时间过短（少于10分钟）漂浮不完全；时间过长（大于1小时）易造成虫卵变形、破裂，难以识别。
另外，漂浮液必须饱和；盐类的饱和溶液须保存在不低于13℃的情况下，才能保持较高的比重；否则效果难以保证。
除饱和盐水漂浮液以外，其他一些漂浮液也可用于一些特殊虫卵的检查。
如饱和硫酸锌溶液（饱和度为1000ml水中溶解920g硫酸锌）漂浮力强，检查猪肺丝虫卵效果较好；饱和硫酸镁溶液（饱和度为1000ml水中溶解440g硫酸镁）多用于结肠小袋纤毛虫包囊的检查；饱和蔗糖溶液（饱和度为1000ml 水中溶解1280g蔗糖）性温和，可适于多种虫卵和卵囊的漂浮。
漂浮法检查多例粪便时，如用铁丝圈蘸取漂浮液面，则检查完一例，再蘸取另一例时，需先在酒精灯上烧过铁丝圈后再用之，以免相互污染，影响结果的准确性。
另外，如用载玻片或盖玻片蘸取虫卵，则使用的载玻片或盖玻片一定要干净无油腻，否则难以蘸取。
3．沉淀法。
沉淀法对各种蠕虫卵及幼虫均可查到，特别适用于检查比重大的虫卵（如吸虫卵等）。
注意此法粪量少，一次粪检最好多看几片，以提高检出率。
另外，也可将离心沉淀法和漂浮法结合起来应用。
如可先用漂浮法将虫卵和比虫卵轻的物质漂起来，再用离心沉淀法将虫卵沉下去；或者选用沉淀法使虫卵及比虫卵重的物质沉下去，再用漂浮法使虫卵浮起来，以获得更高的检出率。
4．虫卵计数法。
做虫卵计数时，所取粪便应干净，不能掺杂砂土、草根等；操作过程中，粪便必须彻底粉碎，混合均匀；用吸管吸取粪液时，必须摇匀粪液，在一定深度吸取；采用麦克马斯特氏法计数时，必须调好显微镜焦距（计数室刻度线条可被看到）；计数虫卵时，不能有遗漏和重复。
为了取得准确的虫卵计数结果，最好在每天的不同时间检查三次，并连续检查三天，然后取其平均值。
这样就可以减少寄生虫在每昼夜间排卵不平衡的影响。
将每克粪便虫卵数乘以24小时粪便的总重量（g），即是每天所排虫卵的总数，再将此总数除以已知成虫每天排卵数（可查书得到），即可得出雌虫的大约寄生数量。
如寄生虫是雌雄异体的，则将上述雌虫数再乘以2，便可得出雌雄成虫寄生总数。
由于粪中虫卵的数目与宿主机体状况、寄生虫的成熟程度、雌虫数目及排卵周期、粪便性状（干湿）、是否经过驱虫及其它多种因素有关，所以虫卵计数只能是对寄生虫感染程度的一个大致推断。
五、实验报告1．记录粪检虫卵结果，并对各种方法做简要叙述和概括总结。
2．绘吸虫卵、绦虫卵、线虫卵各一个，并注明虫卵各部构造名称。
附: 参考资料（一）饱和盐水的配制精制盐配制的饱和盐水一般不必过滤，待冷却后即可使用（冷却后的溶液有食盐结晶析出，即为饱和）；粗制盐配制的饱和液可用滤纸、纱布或棉花过滤后备用。
（二）各类蠕虫卵特征描述1．吸虫卵（Trematode Eggs）。
吸虫卵多数呈卵圆形或椭圆形，为黄色、黄褐色或灰褐色。
卵壳由数层卵膜组成，比较厚而坚实。
大部分吸虫卵的一端有卵盖，卵盖和卵壳之间有一条不明显的缝（新鲜虫卵在高倍镜下时可看见）。
当毛蚴发育成熟时，则顶盖而出；有的吸虫卵无卵盖，毛蚴则破壳而出。
有的吸虫卵卵壳表面光滑；也有的有各种突出物（如结节、小刺、丝等）。
新排出的吸虫卵内，有的含有卵黄细胞所包围的胚细胞。
有的则含有成形的毛蚴。
(图1-5)1 2 3 4图1-5 各类蠕虫卵1.吸虫卵2.绦虫卵（有梨形器）3.线虫卵4.棘头虫卵2．绦虫卵（Cestode Eggs）。
园叶目绦虫卵与假叶目绦虫卵构造不同。
园叶目绦虫卵中央有一椭圆形具三对胚钩的六钩蚴。
六钩蚴被包在一层紧贴着的膜里，该膜称为内胚膜；还有一层膜位于内胚膜之外，叫外胚膜。
内外胚膜之间呈分离状态，中间含有或多或少的液体，并常含有颗粒状内含物。
有的绦虫卵的内层胚膜上形成突起，被称之为梨形器（灯泡样结构）。
各种绦虫卵卵壳的厚度和结构有所不同。
绦虫卵大多数无色或灰色，少数呈黄色、黄褐色。
假叶目绦虫卵则非常近似于吸虫卵。
3．线虫卵（Nematode Eggs）。
一般的线虫卵有四层膜（光学显微镜下只能看见二层）所组成的卵壳，壳内为卵细胞。
但有的线虫卵随粪排至外界时，已经处于分裂前期；有的甚至已含有幼虫。
各种线虫卵的大小和形状不同，常见椭圆形、卵形或近于圆形。
卵壳的表面也各有所不同，有的完全光滑，有的有结节，有的有小凹陷等。
各种线虫卵的色泽也不尽相同，从无色到黑褐色。
不同线虫卵卵壳的薄厚不同，蛔虫卵卵壳最厚；其它多数卵壳较薄。