唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文3篇
唾液淀粉酶活性测定论文

唾液淀粉酶最适ph值的测定论文丁珂201140181 广西医科大学药学院2011级17班3组摘要:了解唾液淀粉酶的最适ph,把酶学知识应用于临床诊断与应用治疗。
本实验目的掌握精测唾液淀粉酶最适pH值的方法,熟悉缓冲溶液的配置,722分光光度计的使用。
首先配置缓冲溶液,然后获取唾液,稀释唾液,唾液稀释倍数的选取,淀粉的分解,吸光度的测量,最后记录数据,作图。
结果测得pH值在6.0~8.0范围内并且随着pH的增大先减小后增大,pH=6.8左右,吸光度值最低。
分析pH=6.8左右,酶的活性最大,淀粉被分解的最多,剩余底物的量最少,A值最小,过酸或过碱均会抑制酶的活性,使之分解的底物减少,A值增大。
关键词:淀粉酶 ph 吸光度前言:酶无论在生活中还是在医学领域都有很大的研究意义,研究酶可以很好应用酶的各种特性,在各种领域广泛应用。
影响酶反应活力的因素很多,影响胞外酶的因素主要包括PH值、温度和金属离子、抑制剂及其他小分子,以及酶浓度等因素。
PH值对酶反应活力的影响:1、酸或碱可以使酶的空间结构破坏,引起酶的活力丧失,这种丧失活力可以是可逆的或者是不可逆的,对可逆的来说,改变PH值后可使活力恢复。
2、酸或碱影响酶的活性部位催化基团的离解状态,使得底物不能分解成产物。
3、酸或碱影响酶的活性部位结合基团的离解状态,使得底物不能和它结合。
4、酸或碱影响底物的离解状态,或使底物不能和酶结合。
由于上述种种原因,各种酶的作用都有一个最适合的PH值范围。
实验原理:ph的改变对酶的催化影响很大,酶催化活性最高时,反应体系的PH值称为最适PH值。
本实验用唾液淀粉酶为材料来观察酶活性受ph影响的情况。
淀粉被分解越多,剩余底物越少,A值最小,过酸或过碱会抑制酶的活性,使底物分解减少,A值增大。
碘液与淀粉的不同程度水解的产物反应呈不同颜色,即:淀粉(蓝色)、紫色糊精(紫色)、红色糊精(红色)、麦芽糖及葡萄糖(黄色)。
利用朗伯—比尔定律,用分光光度计测量出各溶液在600nm处地吸光度A,从而间接测出唾液淀粉酶的最适PH值。
酶活性测定实验报告讨论(3篇)

第1篇一、实验背景酶作为一种生物催化剂,在生物体内起着至关重要的作用。
酶活性是指酶催化特定化学反应的能力,它是评价酶功能的重要指标。
本实验旨在通过测定唾液淀粉酶的活性,探讨环境因素对酶活性的影响,以及酶的高效性。
二、实验目的1. 了解环境因素(如温度、pH值等)对唾液淀粉酶活性的影响。
2. 掌握酶活性测定的基本原理和实验操作方法。
3. 讨论酶的高效性及其在生物体内的作用。
三、实验原理1. 酶催化原理:酶通过降低反应活化能,加速化学反应的进行。
唾液淀粉酶是一种消化酶,能够将淀粉水解为葡萄糖。
2. 酶活性测定:本实验采用碘液法测定唾液淀粉酶活性。
碘液与淀粉形成蓝色复合物,当淀粉被水解后,蓝色消失,通过测定溶液颜色深浅变化,可以计算出酶活性。
3. 环境因素影响:温度、pH值等环境因素可以影响酶活性。
在一定范围内,温度升高,酶活性增强;当超过最适温度时,酶活性降低。
pH值对酶活性也有显著影响,最适pH值下酶活性最高。
四、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响:实验结果显示,随着温度的升高,唾液淀粉酶活性先增加后降低。
在37℃时,酶活性达到最大值。
这表明唾液淀粉酶的最适温度为37℃。
2. pH值对酶活性的影响:实验结果显示,唾液淀粉酶的最适pH值为6.8。
在pH值低于或高于6.8时,酶活性显著降低。
3. 酶的高效性:与无机催化剂相比,酶具有极高的催化效率。
本实验中,唾液淀粉酶的催化效率比无机催化剂高106~1013倍。
五、讨论1. 温度对酶活性的影响:温度对酶活性有显著影响,过高或过低的温度都会导致酶活性降低。
这是因为温度会影响酶的空间结构,进而影响酶的催化能力。
2. pH值对酶活性的影响:pH值对酶活性也有重要影响。
酶活性受到酸碱度的影响,最适pH值下酶活性最高。
这是因为pH值会影响酶活性中心的电荷状态,进而影响酶与底物的结合。
3. 酶的高效性:酶的高效性是其重要的生物特征之一。
酶的高效性源于其独特的催化机制,即通过降低反应活化能,加速化学反应的进行。
唾液消化淀粉实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的本实验旨在探究唾液淀粉酶对淀粉的消化作用,验证唾液在消化过程中的重要性,并分析影响淀粉消化的因素。
二、实验原理唾液中含有唾液淀粉酶,该酶能够将淀粉分解成麦芽糖,从而加速淀粉的消化。
实验过程中,通过观察淀粉与唾液混合后的颜色变化,可以判断淀粉是否被消化。
三、实验材料1. 试管:2个2. 淀粉糊:适量3. 唾液:适量4. 碘酒:适量5. 37℃温水:适量6. 温度计:1个7. 计时器:1个四、实验步骤1. 将淀粉糊分别加入两个试管中,编号为1号和2号。
2. 在1号试管中加入2ml唾液,2号试管中加入2ml清水作为对照组。
3. 将两个试管放入37℃温水中,恒温10分钟。
4. 将碘酒滴入两个试管中,观察颜色变化。
5. 记录实验结果。
五、实验结果1号试管:滴加碘酒后,颜色未发生变化,表明淀粉已被唾液淀粉酶分解。
2号试管:滴加碘酒后,颜色变为蓝色,表明淀粉未被分解。
六、实验分析1. 通过实验结果可知,唾液淀粉酶对淀粉具有消化作用。
在唾液的作用下,淀粉被分解成麦芽糖,从而使碘酒无法与淀粉发生反应,导致颜色未发生变化。
2. 对照实验结果显示,清水对淀粉没有消化作用,说明淀粉的消化需要唾液淀粉酶的参与。
七、影响淀粉消化的因素1. 温度:37℃是唾液淀粉酶的最适温度,过高或过低的温度都会影响淀粉的消化。
2. 酸碱度:唾液淀粉酶在中性条件下活性最高,酸性或碱性条件都会影响其活性。
3. 食物种类:不同食物中的淀粉含量和结构不同,会影响淀粉的消化速度。
八、实验结论1. 唾液淀粉酶对淀粉具有消化作用,是人体消化过程中的重要酶类。
2. 淀粉的消化受到温度、酸碱度和食物种类等因素的影响。
九、实验拓展1. 探究不同浓度唾液对淀粉消化的影响。
2. 研究唾液淀粉酶的最适pH值。
3. 比较不同酶对淀粉的消化作用。
十、实验反思本次实验成功验证了唾液淀粉酶对淀粉的消化作用,但在实验过程中也存在一些不足之处:1. 实验样本量较小,可能存在偶然性。
酶学实验实验报告唾液

一、实验目的1. 了解唾液淀粉酶的生物学特性及其在消化过程中的作用。
2. 掌握酶活性测定的基本原理和方法。
3. 通过实验观察和分析唾液淀粉酶活性受温度、pH值等因素的影响。
二、实验原理唾液淀粉酶是一种消化酶,主要存在于唾液中,负责将食物中的淀粉分解为麦芽糖,为后续消化提供能量。
酶活性是指酶催化反应的能力,受多种因素的影响,如温度、pH值、底物浓度等。
本实验通过测定不同条件下唾液淀粉酶对淀粉的分解速率,观察酶活性变化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 新鲜唾液- 淀粉溶液- 碘液- pH试纸- 温度计- 烧杯- 试管- 移液器2. 实验仪器:- 恒温水浴箱- 酶标仪- 移液器四、实验步骤1. 唾液淀粉酶活性测定:(1)取两只试管,分别加入2mL淀粉溶液。
(2)用移液器取1mL唾液,加入第一只试管中,混匀。
(3)将第一只试管放入37℃恒温水浴箱中,观察淀粉分解情况。
(4)每隔5分钟,用移液器取1mL反应液,加入碘液中,观察颜色变化。
(5)记录淀粉分解所需时间。
2. 温度对唾液淀粉酶活性的影响:(1)设置不同温度(如25℃、37℃、50℃、65℃)的水浴箱。
(2)重复步骤1,观察不同温度下淀粉分解所需时间。
3. pH值对唾液淀粉酶活性的影响:(1)用pH试纸测定唾液的pH值。
(2)调整唾液的pH值至不同水平(如4、5、6、7、8、9)。
(3)重复步骤1,观察不同pH值下淀粉分解所需时间。
五、实验结果与分析1. 唾液淀粉酶活性测定:在37℃恒温水浴箱中,淀粉分解所需时间为10分钟。
2. 温度对唾液淀粉酶活性的影响:随着温度升高,淀粉分解所需时间逐渐缩短,说明唾液淀粉酶活性随温度升高而增强。
在50℃时,淀粉分解所需时间最短,说明50℃为唾液淀粉酶的最适温度。
3. pH值对唾液淀粉酶活性的影响:随着pH值升高,淀粉分解所需时间逐渐缩短,说明唾液淀粉酶活性随pH值升高而增强。
在pH值为7时,淀粉分解所需时间最短,说明pH值为7为唾液淀粉酶的最适pH值。
实验三、 唾液淀粉酶的活性观察

注意事项
1.在制备唾液淀粉酶时,根据实际情况,可 用纱布或滤纸过滤一下收集滤液使用。
2.酶容易失活,因此实验用品必须清洁干燥, 避免金属离子和有机溶剂等对实验结果的 干扰。
3.为确保实验效果,加试剂宜在水浴条件下 进行,尤其是高温时要注意。
的物质称为酶的激活剂 能降低酶活性却又不使酶变性的物质叫酶的
抑制剂。
本实验用唾液淀粉酶为材料来观察酶活性受理化 因素影响的情况。唾液中含有唾液淀粉酶,唾液 淀粉酶的底物是淀粉。淀粉在该酶的催化下会随 着时间的延长而出现不同程度的水解,从而得到 各种糊精乃至麦芽糖、少量葡萄糖等水解产物。 而碘液能指示淀粉的水解程度。
四、操作
1..唾液淀粉酶应用液的制备 (1)每人取一个干净的饮水杯,装上蒸馏水。 (2)先用蒸馏水漱口,将口腔内的食物残渣清
理干净。 (3)口含约20mL蒸馏水,做咀嚼动作1-2min,
以分泌较多的唾液。然后将口腔中的唾液吐入 一个干净的小烧杯中。
2.温度对酶活性的影响
(1)取3支试管,按表4-2进行实验。
管号
1
2
3
0.5%淀粉溶液 (mL)
3
3
3
pH6.8缓冲液(mL)
0.5
0.5
0.5
1%硫酸铜镕液 (mL)
—
1`
1%氯化钠溶液 (mL)
—
1
—
蒸馏水(mL)
1
—
稀释唾液(mL)
1
1
1
(2)将各管摇匀后,一起放入37℃水浴保温。
(3)每隔1min从第2支试管中取出1滴反应液滴于 白瓷板上,滴加稀碘液1滴,观察其颜色变化。
唾液淀粉酶活性的观察实验报告

唾液淀粉酶活性的观察实验报告一、实验目的观察唾液淀粉酶在不同条件下的活性变化,探究温度、pH 值和底物浓度等因素对唾液淀粉酶活性的影响。
二、实验原理唾液淀粉酶可将淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖等小分子物质。
淀粉遇碘液会呈现蓝色,而麦芽糖和葡萄糖等小分子物质遇碘液不显色。
通过观察不同条件下反应液与碘液作用后的颜色变化,可以判断唾液淀粉酶的活性。
三、实验材料和仪器1、材料新鲜唾液质量分数为 2%的淀粉溶液碘液pH 缓冲液(pH 值分别为 3、5、7、9、11)恒温水浴锅沸水浴锅2、仪器试管滴管量筒温度计四、实验步骤1、唾液的收集先用清水漱口,然后含一口清水,在口腔中停留约 1 分钟,将口腔中的杂质清除干净。
之后将口中的水吐掉,紧闭双唇,尽可能多地分泌唾液,将唾液收集到小烧杯中备用。
2、温度对唾液淀粉酶活性的影响(1)取 5 支洁净的试管,编号为 1、2、3、4、5,分别向每支试管中加入 2 mL 质量分数为 2%的淀粉溶液。
(2)将 1 号试管放入 0℃的冰水混合物中,2 号试管放入 37℃的恒温水浴锅中,3 号试管放入 60℃的恒温水浴锅中,4 号试管放入 80℃的恒温水浴锅中,5 号试管放入 100℃的沸水浴锅中,保温 5 分钟。
(3)分别向 1、2、3、4、5 号试管中加入 1 mL 新鲜唾液,摇匀后,继续在各自温度下保温 5 分钟。
(4)取出各试管,分别滴加 2 滴碘液,观察并记录各试管中溶液的颜色变化。
3、 pH 值对唾液淀粉酶活性的影响(1)取 5 支洁净的试管,编号为 6、7、8、9、10,分别向每支试管中加入 2 mL 质量分数为 2%的淀粉溶液。
(2)向 6 号试管中加入 2 mL pH 为 3 的缓冲液,向 7 号试管中加入 2 mL pH 为 5 的缓冲液,向 8 号试管中加入 2 mL pH 为 7 的缓冲液,向 9 号试管中加入 2 mL pH 为 9 的缓冲液,向 10 号试管中加入 2 mL pH 为 11 的缓冲液。
唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文3篇

唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文3篇An experimental report on salivary amylase activity唾液淀粉酶活性的观察实验报告范文3篇小泰温馨提示:实验报告是把实验的目的、方法、过程、结果等记录下来,经过整理,写成的书面汇报。
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二、基本原理1.酶是生物催化剂,具有极高的催化效率,其催化效率比一般催化剂高106~1013.在生物体内过氧化氢酶能催化H2O2分解成H2O和O2,铁粉地H2O2分解也有催化作用,但其效率远低于酶。
2.酶的活性受温度的影响。
在一定的温度范围内,温度升高,酶的活性也会增大。
当到了最大值后,此时温度为酶的最适温度,由于温度过高,酶开始失活,导致酶的效率降低,最后完全失活。
3.酶的活性受PH值的影响。
酶在一定范围的PH值下才有活性,高于或低于最适PH,都会使酶的活性降低。
4.酶活性常受到某些物质的影响。
有些物质能使酶的活性增加,称为激活剂,有些物质能使酶的活性降低,称为抵制剂。
5.碘液指示淀粉水解程度的不同色变化:淀粉淀粉酶紫色糊精淀粉酶暗褐糊精淀粉酶红色糊精淀粉酶麦芽糖+少量葡萄糖加碘后:蓝色紫红色暗褐色红棕色黄色三、试剂与器材篇章2:唾液淀粉酶活性的测定文档【按住Ctrl键点此返回目录】影响唾液淀粉酶活性的研究摘要:讨论了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异,实验结果表明,影响唾液淀粉酶活性的因素很多,必须在适宜的条件下,才能发挥最佳催化作用;淀粉酶具有高度专一性,其活性受温度、pH值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素的影响;每个人产生唾液淀粉酶的量不同,活性强弱也有差异。
唾液定性实验报告

一、实验目的1. 了解唾液淀粉酶的生物学特性及其在消化过程中的作用。
2. 掌握唾液淀粉酶活性定性的实验方法。
3. 通过实验,验证唾液淀粉酶对淀粉的分解作用。
二、实验原理唾液淀粉酶是一种消化酶,主要存在于唾液中,能够将淀粉分解为麦芽糖,从而为人体提供能量。
在实验中,通过观察淀粉在唾液作用下的变化,可以定性分析唾液淀粉酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:唾液、淀粉糊、碘液、烧杯、试管、滴管、温度计。
2. 实验仪器:恒温水浴锅、显微镜、离心机、pH计。
四、实验方法1. 取两支试管,分别编号为甲、乙。
2. 在甲试管中加入2ml唾液,乙试管中加入2ml清水。
3. 分别向甲、乙试管中加入2ml淀粉糊。
4. 将甲、乙试管放入37℃恒温水浴锅中,保温5分钟。
5. 取出试管,用滴管分别向甲、乙试管中加入1滴碘液。
6. 观察甲、乙试管中溶液的颜色变化。
五、实验现象1. 甲试管中加入唾液后,淀粉糊颜色变浅,碘液滴加后,溶液呈淡黄色。
2. 乙试管中加入清水后,淀粉糊颜色无变化,碘液滴加后,溶液呈蓝色。
六、实验结果与分析1. 通过实验现象可知,唾液对淀粉具有分解作用,而清水对淀粉无分解作用。
2. 根据实验原理,唾液中的唾液淀粉酶将淀粉分解为麦芽糖,导致溶液颜色变浅。
3. 实验结果表明,唾液淀粉酶活性较高,能有效地分解淀粉。
七、实验讨论1. 实验过程中,温度对唾液淀粉酶活性有一定影响。
在37℃恒温水浴锅中,唾液淀粉酶活性最高,因此选择此温度进行实验。
2. 实验过程中,唾液浓度对淀粉分解速度也有一定影响。
实验中采用2ml唾液,可以使淀粉糊颜色变浅,便于观察。
3. 实验过程中,碘液的作用是检测淀粉分解程度。
当淀粉被分解为麦芽糖后,碘液与麦芽糖反应,溶液颜色变浅。
八、实验结论通过本次实验,验证了唾液淀粉酶对淀粉的分解作用。
实验结果表明,唾液中的唾液淀粉酶活性较高,能有效地分解淀粉,为人体提供能量。
九、实验注意事项1. 实验过程中,要注意操作规范,避免污染。
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本文简要目录如下:【下载该文档后使用Word打开,按住键盘Ctrl键且鼠标单击目录内容即可跳转到对应篇章】1、篇章1:唾液淀粉酶活性观察实验报告文档2、篇章2:唾液淀粉酶活性的测定文档3、篇章3:淀粉酶活性测定实验报告文档篇章1:唾液淀粉酶活性观察实验报告文档2 唾液淀粉酶活性观察实验报告一、实验目的1.了解环境因素对酶活性的影响及酶的高效性;2.掌握酶定性分析的方法和注意事项。
二、基本原理1.酶是生物催化剂,具有极高的催化效率,其催化效率比一般催化剂高106~1013.在生物体内过氧化氢酶能催化H2O2分解成H2O和O2,铁粉地H2O2分解也有催化作用,但其效率远低于酶。
2.酶的活性受温度的影响。
在一定的温度范围内,温度升高,酶的活性也会增大。
当到了最大值后,此时温度为酶的最适温度,由于温度过高,酶开始失活,导致酶的效率降低,最后完全失活。
3.酶的活性受PH值的影响。
酶在一定范围的PH值下才有活性,高于或低于最适PH,都会使酶的活性降低。
4.酶活性常受到某些物质的影响。
有些物质能使酶的活性增加,称为激活剂,有些物质能使酶的活性降低,称为抵制剂。
5.碘液指示淀粉水解程度的不同色变化:淀粉淀粉酶紫色糊精淀粉酶暗褐糊精淀粉酶红色糊精淀粉酶麦芽糖+少量葡萄糖加碘后:蓝色紫红色暗褐色红棕色黄色三、试剂与器材篇章2:唾液淀粉酶活性的测定文档【按住Ctrl键点此返回目录】影响唾液淀粉酶活性的研究摘要:讨论了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异,实验结果表明,影响唾液淀粉酶活性的因素很多,必须在适宜的条件下,才能发挥最佳催化作用;淀粉酶具有高度专一性,其活性受温度、pH值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素的影响;每个人产生唾液淀粉酶的量不同,活性强弱也有差异。
关键词:淀粉酶;活性;温度;抑制剂;激活剂;专一性2影响唾液淀粉酶的活性的因素(一)实验目的观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。
观察温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。
(二)实验原理人唾液中淀粉酶为α-淀粉酶,在唾液腺细胞中合成。
在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解,经过一系列被称为糊精的中间产物,最后生成麦芽糖和葡萄糖。
变化过程如下:淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色、麦芽糖和葡萄糖遇碘不变色。
淀粉与糊精无还原性,或还原性很弱,对班氏试剂呈阴性反应。
麦芽糖与葡萄糖是还原性糖,与班氏试剂共热后生成红棕色氧化亚铜的沉淀。
唾液淀粉酶的最适温度为37-40°C,最适pH为6.8.偏离此最适环境时,酶的活性减弱。
低浓度的Cl-离子能增加淀粉酶的活性,是它的激活剂。
Cu2+等金属离子能降低该酶的活性,是它的抑制剂。
(三)器材及试剂1、器材:试管、酒精灯、烧杯、恒温水浴锅、量筒、冰浴、玻璃棒、试管夹、白磁板、试管架、铁三脚架、唾液淀粉酶2、试剂:1%淀粉溶液、碘液、班氏试剂、0.4%HCl溶液、0.1%的乳酸溶液、1%NaCl溶液、1%CuSO4溶液、0.1%淀粉溶液(四)操作步骤1、淀粉酶活性的检测:取一只试管,注入1%淀粉溶液5mL与稀释的唾液0.5-2mL。
混匀后插入1支玻璃棒,将试管连同玻璃棒置于37°C水浴中。
不是的用玻璃棒从试管中取出1滴溶液,滴加在白磁板上,随即滴加1滴碘液,观察溶液呈现的颜色。
此实验延续至溶液仅表现碘被稀释后的微黄色为止。
记录淀粉在水解过程中,遇碘后溶液颜色的变化。
向上面的剩余溶液中加2mL班氏试剂,放入沸水中加热10分钟左右,观察现象2、pH对酶活性的影响:取4支试管,分别加入0.4%盐酸、0.1%乳酸、蒸馏水与1%碳酸钠各2mL,再向以上四支试管中各加2mL1%淀粉溶液及2mL淀粉酶试剂,在沸水浴中加热,根据生成红棕色沉淀的多少,说明淀粉水解的强弱。
3、温度对酶活性的影响:取3支试管,各加3mL1%淀粉溶液;另取3支试管,各加1mL淀粉酶液。
将此6支试管分为3组,每组中盛淀粉溶液与淀粉酶液的试管各1支,三组试管分别置于0°C、37°C与70°C的水浴中。
5分钟后,将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中,继续维持原温度条件5min后,立即加2滴碘液,观察溶液颜色的变化。
根据观察结果说明温度对酶活性的影响。
4、激活剂与抑制剂对酶活性的影响:取3支试管,按下表加入各种试剂。
混匀后,置于37°C水浴中的保温。
从1号试管中用玻璃棒取出1滴溶液,置于白磁板上用碘液检查淀粉的水解程度。
待1号试管内的溶液遇碘不再变色后,立即取出所有的试管,各加碘液2滴,观察溶液颜色的变化,并解释之。
2.PH值对酶活性影响:1号深红色,2号为红棕色,3号为砖红色,4号为偏蓝。
因为PH=1时,超出了淀粉酶有效PH 范围,使得酶完全失活,淀粉没有被分解。
2号是因为PH=5时,不是淀粉酶的最适范围。
3号是因为PH7时,为淀粉酶分解的最适PH,淀粉被酶迅速分解生成麦芽糖和葡萄糖。
而4号则是因为PH=9超出了淀粉酶的适宜PH,活性受到或者是部分失活,使淀粉分解较慢。
3.温度对酶的影响:1号显紫红色,2号为淡黄色,3号为深蓝色。
当温度为0度时,蛋白质分子的热运动减慢,即酶分子的活性受到了抑制,使酶的活性降低了,淀粉分解减慢,生成紫红色的糊精;2号处于37度,接近人体温度,酶的活化性能较高,淀粉被分解成麦芽糖和葡萄糖就越快,所以是淡黄色,而当温度为70度时,由于酶是蛋白质,遇到高温时会失活,所以淀粉没有被分解。
4.激活剂和抑制剂对酶的影响:3号作为对照实验组,显红棕色,1号显浅黄色,2号显深蓝色。
因为在1号溶液中,NaCl对酶的活性在增加作用,激活了淀粉酶,淀粉酶迅速把淀粉分解成麦芽糖和葡萄糖,滴加碘液时,溶液显浅黄色,而对照组显示红棕色,表明淀粉被分解成了糊精,在1号中,溶液中的淀粉没有被分解遇碘变蓝,通过对比1和3号,2和3号,由颜色的变化,判断淀粉水解程度为1<3<2,说明了NaCl具有激活作用,CuSO4具有抑制作用。
结论:酶催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体。
是生物催化剂,能通过降低化学反应的活化能加快反应速率,但不改变反应的平衡点。
篇章3:淀粉酶活性测定实验报告文档【按住Ctrl键点此返回目录】一、研究背景及目的酶是高效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋白,几乎所有的生化反应都离不开酶的催化,所以酶在生物体内扮演着极其重要的角色,因此对酶的研究有着非常重要的意义。
酶的活力是酶的重要参数,反映的是酶的催化能力,因此测定酶活力是研究酶的基础。
酶活力由酶活力单位表征,通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称,按照其水解淀粉的作用方式,可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶等。
α-淀粉酶和β-淀粉酶是其中最主要的两种,存在于禾谷类的种子中。
β-淀粉酶存在于休眠的种子中,而α-淀粉酶是在种子萌发过程中形成的。
α-淀粉酶活性是衡量小麦穗发芽的一个生理指标,α-淀粉酶活性低的品种抗穗发芽,反之则易穗发芽。
目前,关于α-淀粉酶活性的测定方法很多种,活力单位的定义也各不相同,国内外测定α-淀粉酶活性的方法常用的有凝胶扩散法、3 ,5-二硝基水杨酸比色法和降落值法。
这3 种方法所用的材料分别是新鲜种子、萌动种子和面粉,获得的α-淀粉酶活性应该分别是延二、实验原理萌发的种子中存在两种淀粉酶,分别是α-淀粉酶和β-淀粉酶,β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化,而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6下则发生钝化。
本实验的设计利用β-淀粉酶不耐热的特性,在高温下(70℃)下处理使得β-淀粉酶钝化而测定α-淀粉酶的酶活性。
酶活性的测定是通过测定一定量的酶在一定时间内催化得到的麦芽糖的量来实现的,淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖,可用3,5-二硝基水杨酸试剂测定,由于麦芽糖能将后者还原生成硝基氨基水杨酸的显色基团,将其颜色的深浅与糖的含量成正比,故可求出麦芽糖的含量。
常用单位时间内生成麦芽糖的毫克数表示淀粉酶活性的大小。
然后利用同样的原理测得两种淀粉酶的总活性。
实验中为了消除非酶促反应引起的麦芽糖的生成带来的误差,每组实验都做了相应的对照实验,在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以校正。
在实验中要严格控制温度及时间,以减小误差。
并且在酶的作用过程中,四支测定管及空白管不要混淆。
三、材料、试剂与仪器萌发的小麦种子(芽长1厘米左右)仪器:722光栅分光光度计(编号990695)DK-S24型电热恒温水浴锅(编号L-304056)离心机(TDL-40B)容量瓶:50ml×1,100ml×1 小台秤研钵具塞刻度试管:15ml×6 试管:8支移液器烧杯试剂:① 1%淀粉溶液(称取1克可溶性淀粉,加入80ml蒸馏水,加热熔解,冷却后定容至100ml);② pH5.6的柠檬缓冲液:A液(称取柠檬酸20.01克,溶解后定容至1L) B液(称取柠檬酸钠29.41克,溶解后定容至1L)取A液5.5ml、B液14.5ml混匀即为pH5.5柠檬酸缓冲液;③ 3,5-二硝基水杨酸溶液(称取3,5-二硝基水杨酸1.00克,溶于20ml 1M氢氧化钠中,加入50ml蒸馏水,再加入30克酒石酸钠,待溶解后,用蒸馏水稀释至100ml,盖紧瓶盖保存);④ 麦芽糖标准液(称取0.100克麦芽糖,溶于少量蒸馏水中,小心移入100ml容量瓶中定容);⑤ 0.4M NaOH四、实验步骤称取2克萌发的小麦种子与研钵中,加少量石英砂,研磨至匀浆,转移到50ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度,混匀后在室温下放置,每隔数分钟振荡一次,提取15-20分钟,于3500转/分离心20分钟,取上清液备用。
2.α-淀粉酶活性的测定① 取4支管,注明2支为对照管,另2支为测定管② 于每管中各加酶提取液液1ml,在70℃恒温水浴中(水浴温度的变化不应超过±0.5℃)准确加热15min,在此期间β-淀粉酶钝化,取出后迅速在冰浴中彻底冷却。
③ 在试管中各加入1ml柠檬酸缓冲液④ 向两支对照管中各加入4ml 0.4M NaOH,以钝化酶的活性⑤ 将测定管和对照管置于40℃(±0.5℃)恒温水浴中准确保温15min再向各管分别加入40℃下预热的淀粉溶液2ml,摇匀,立即放入40℃水浴中准确保温5min后取出,向两支测定管分别迅速加入4ml 0.4M NaOH,以终止酶的活性,然后准备下步糖的测定。