血清4型禽腺病毒病诊断技术
腺病毒的检测与鉴别技术简介
１ 形态和 分类
（ １ ）腺病 毒 是 直径 在 ７ ０ — １ ０ ０ ｎ ｍ的无 囊 膜 廿面 体 粒 子 。主要 的 结构蛋 白是六 邻粒 上 的纤丝 。所有 哺乳动 物 腺病 毒只有一条连在五邻粒上 的纤丝 ，而Ｆ Ａ Ｖ 有 一独特的 形态 ，每个 五邻 粒上 有两条 纤丝 。纤 丝 的顶 端是 蛋 白远 端 的Ｃ 末端 部分 ，带有特 异ｖ 抗原 ，它具有 相应 的血凝 活
关病 原体 的直接 检测 。和其 它病 毒一样 ，对 腺病 毒诊 断 所选择 的方法亦 是Ｐ Ｃ Ｒ。因此，本文主要讨论腺病毒 的直 接检测和媒剂的识别 。 腺病毒（ Ｆ Ａ Ｖ） 是 一种多血清 群病原体 ，它给禽 业生产 带来 了各种 困扰 。在很 长一 段 时间 内，诊 断腺病 毒感染 绝大部 分局 限于 各种血 清学 方法 ，近年 来 ，有报 道用 限
腺 病毒 科分 为哺 乳动物 腺病 毒和 禽腺病 毒两 个属 。 有 关病 毒的形 态 、基 因的长度 、基 因的 组成等 与鉴 别相 关 的病毒特 征 各型腺 病毒 是不 同的 。因此 ，鸡腺 病毒 、 火鸡 的出 血性肠 炎病 毒和减 蛋病 毒等 腺病 毒 的鉴 别 由于 经济 价值 的原 因而 具有不 同 的意义 。 由于 腺病毒 抗体 的 产 生，血 清学 方法成 为腺病 毒诊 断 中的重 要方法 之～ 。
能经 污染 的疫苗 传入鸡 群 的。本病 已经在 欧洲 、亚洲和 南美洲的许多 国家有所报道 。
性 。 六 邻 粒 蛋 白是 确 定 无 囊 膜 廿 面 体 病 毒 属 型 、 群 还 是
特异亚群 的主 要壳蛋 白。（ ２ ）病毒粒子含有２ ５ ， － － ４ ３ ． ８ ｋ ｐ ｂ 大 小不 等 的基 因片断 。根据排 序 资料和 基 因组 的构 成 ，腺 病毒 的最 终分类 还在 讨论之 中，但有 许多报 道建 议将 其 分 为三个 不 同的属 。基 因序 列 的研究 与分 子学诊 断有 直 接 的关系 ，因为 它为 创建核 酸探 针 、寡核苷 酸等 工具提 供 了必要 的基 因信息 。（ ３ ）腺病 毒分 为三个 不 同的群 反 应 了该病毒 生物 学 的多样性 。 Ｉ群腺病 毒包 括从 鸡 、火
安卡拉病诊治与防控
2021年第2期 吉林畜牧兽医·禽业专栏·QinYe ZhuanLan安卡拉病诊治与防控王三立河北省廊坊市廊坊职业技术学院，河北廊坊 065001摘 要：安卡拉病主要病变是心包积液、心室扩张；肝脏肿大、变脆，有大小不等的出血斑；HE染色病理切片，观察到肝细胞内包涵体可基本确诊。
尽早注射抗体是最有效的治疗方法，同时防止继发感染、利尿强心、保肝护肾、抗应激反应、提高免疫力。
规范肉杂鸡雏生产、改善饲养环境条件、严格落实兽医卫生防疫制度、做好种鸡和商品仔鸡的疫苗免疫等是防控本病的重要措施。
关键词：安卡拉病；诊断；肉仔鸡；防控近年来，以禽腺病毒属（I亚群禽腺病毒）禽腺病毒血清IV(FAV-4)为主要病原引起的安卡拉病[1]成为常发病，多发于肉仔鸡，青年蛋鸡和成年蛋鸡也有发生。
发病日龄越早，死淘率越高，死淘率达30%～60%，造成较大的经济损失。
1 流行特点本病多发生于3～6周龄的肉仔鸡，1周龄左右也见发病，肉杂鸡发病显著高于快大型白羽肉仔鸡，病程长达一周以上，日死亡率达2%～3%，死淘率达20%～30%。
发病日龄越小，死淘率越高；与传染性法氏囊炎、球虫混发较为常见，死淘率增加，死淘率达50～60%。
蛋鸡主要发生在25～80日龄的青年鸡，没有基础免疫的青年鸡一旦出现心包积液死亡率都在30%以上。
300日龄左右的产蛋鸡也有发生，但死亡率低。
2 临床症状本病发病急，死亡快。
发病鸡群前期采食不见明显下降，鸡群精神状态没有明显变化，基本没有呼吸道症状，粪便稀，发黄或发绿。
鸡只突然发病，表现症状后仅几小时即死亡，可见病鸡委顿，蹲伏，羽毛蓬松，冠髯和面部皮肤苍白，排黄绿色稀便。
发病鸡群初期表现为死亡突然增高，3～5 d内出现成批死亡，持续1～2周后逐渐恢复正常。
3 剖检变化剖检病变主要在心脏、肝脏、肾脏和肺脏。
心脏特征：心包蓄积大量黄色液体，严重者心包膨胀如气球状，心室扩张，心肌松软脆弱。
少数出现心包内黄色液体呈胶冻状，剥离心包后，心脏形似荔枝。
禽腺病毒的结构及其血清4型检测方法研究进展
禽腺病毒的结构及其血清4型检测方法研究进展
王凯莉;刘成;楚肖冉;司振书;路建彪;李玉保;曹胜亮
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2023(44)1
【摘要】近年来,由血清4型禽腺病毒引起的肝炎-心包积液综合征给养禽业带来严重的经济损失,该病毒的主要结构蛋白有六邻体、纤突和五邻体,可通过琼脂胶聚免疫扩散试验(AGIDT)、聚合酶链反应(PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等进行诊断,其中聚合酶链反应是最常用的分子生物学诊断方法;血清学检测方法中将禽腺病毒重组蛋白作为包被抗原建立的ELISA方法最为常用。
论文对禽腺病毒基因组和蛋白结构及FAdV-4检测方法进行了综述,以期为该病的快速检测及科学防控提供理论和技术支持。
【总页数】6页(P111-116)
【作者】王凯莉;刘成;楚肖冉;司振书;路建彪;李玉保;曹胜亮
【作者单位】聊城大学农学院
【正文语种】中文
【中图分类】S852.659.1;S852.657
【相关文献】
1.Ⅰ群禽腺病毒血清4型TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
2.禽腺病毒血清4型纳米PCR检测方法的建立与初步应用
3.禽腺病毒血清4型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用
4.血清4型禽腺病毒POCT荧光微
球免疫层析检测方法的建立5.禽腺病毒血清4型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立与应用
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
禽腺病毒4型感染的诊断与防制
禽腺病毒4型感染的诊断与防制作者：张磊张宇李巧杨兴武张鸿鑫陈红英来源：《安徽农学通报》2016年第10期摘要：2015年8月，河南新郑某鸡场30日龄肉鸡突然出现死亡。
病死鸡心包内存在大量积液，肝脏充血、肿大。
PCR检测禽腺病毒4型核酸，呈现阳性，结合发病情况和剖检病变，诊断为禽腺病毒4型感染。
然后对该鸡场采取了综合防制措施，取得了较好的效果。
关键词：心包积液；禽腺病毒4型；诊断；防制中图分类号 S852.65 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2016）10-0116-02Diagnosis and Preventive Treatment of Fowl Adenovirus-4 InfectionZhang Lei1，2 et al.（1College of Animal Science and Veterinary Medicine，Henan Agricultural University，Zhengzhou 450002，China；2Henan Vocational College of Agriculture，Zhengzhou 451450，China）Abstract：In August 2015，some thirty-day-old broilers in Henan Province were affected with a disease characterized by an accumulation of near-amber fluid in the pericardial sac and an enlarged discolored liver with foci of hemorrhage. Fowl adenovirus-4 was positive for PCR detection. Combined with the epidemiology investigation，and autopsy results，infection of fowl adenovirus-4 was diagnosed. Then the situation had been effectively controlled by the integrated prevention measures.Key words：Hydropericardium；Fowl adenovirus-4；Diagnosis；Preventive treatment禽心包积水-包涵体肝炎综合征（Hydropericardium Syndrome-Inclusion Body Hepatitis，HPS-IBH）是主要由禽腺病毒4型（Fowl Adenovirus-4，FAV-4）引起的一种高度传染性和高死亡率的新型家禽疾病。
血清4型禽腺病毒对SPF鸡的致病特性及其排毒规律
52中国兽医杂志2020年(第56卷)第10期Chinese Journal of V eterinaj Medicine血清4型禽腺病毒对SPF鸡的致病特性及其排毒规律殷国政，王凯莉，刘成，路建彪，吴昊，李玉保，司振书(聊城大学农学院，山东聊城252059)摘要:为研究血清4型禽腺病毒(FAdVP)的致病性及传播途径，采用FAdVP分离株(SDLC201601"人工感染SPF鸡,利用病学及PCR方法,检测感染组鸡器官的病理学变化、病毒在器官的分布及排毒情况。
，感染组鸡与未感染同居组鸡分别在感染后3d和4d死亡,且死亡率均为60%&感染组死亡鸡肝脏、心脏、肺脏及肾脏等器官病变;感染组死亡鸡的肝脏、心脏、脾脏、胰、小肠、肾脏等脏器均检测到该病毒阳性;感染组鸡于感染后3d泄殖腔拭子检测病毒阳性,感染后7d头拭子检测病毒阳性。
，该病毒株感染性强，具一定的泛嗜性，致死率高，水平传播能力强，泄排毒是其最的排毒，做好排泄物的消毒控制该病尤为％关键词:血清4型禽腺病毒；心-肝炎征；病学；排毒中图分类号：R511.8文献标志码:A文章编号：0529—6005(2020)10—0052—03Pathogenicity and Excretion of Serotype4Fowl Adenovirus inSpecific Pathogen Free ChickensYIN Guv-zheng，WANG Kyi-Ji，LIN Cheng，LU Jian-biav，WU Hav，LI Yu-bav，SI Zhen-shu(Institude of Ag/culture，Liaocheng University，Liaocheng252059，China) Abstraci:To evvluate the pathogenicity and transmission mechanism of serotype4fowl adenovirus(FAdVP)，the FAdVP strain (SDLC201601)wasused ioineeciSPFchickensaoiieiciay.Hisiopaihoogica,changes，and viousii s uedisioibuiion and eicoeiion weoedeiecied byihemeihodsoehisiopaihoogyand PCR.Deaihsoccu o ed ai3and4daysaeieoineeciion in ineecied gooup and in ihe gooup unineecied buiived iogeiheo，oespeciivey，and ihe mo oia i iy oa ie was60%.The main auiopsy esionsweoeobseoved in iveo，heaoi，,ungand kidneyin ihedead chickens.DNA oeFAdV-4waseound in vaoiousvisceoaoeihedead chickenseoom iheineecied gooup，inc,uding iveo，heaoi，sp een，pancoeas，sma,iniesiineand kidney.DNA oeFAdV-4wasdeiecied in coacaswab oeineecied gooup chicken eoom3daysaeieoineeciion and in ioachea,swab eoom7daysaeieoineeciion.Theoesu isshowed ihaiihevioussioain was highly pathogenic，pantmpicaCy，highly lethaCty rate and strong ho/zontal transmission.The cloacal was the most important way of eicoeiion.Topoeveniihedisease，disineeciion oeeicoeiaispaoiicueaoe impooiani.Key wordt:serotype4fowl adenovirus；HHS；pathological histology；excretionCorresponding authort:LI Yu-bao，E-mail:***************.cn；SI Zhen-shu，E-mail:**************禽腺病毒(Fowl adenovims，FAdV)属于腺病毒科(AdenoviTdav)，禽腺病毒属(Aviadenovirus)%根据限制性酶切和交叉中和试验将其分为5个种(FAdV琼〜FAdVP)和12个血清型(FAdVP〜8a，收稿日期：2019—03—04基金项目：山东省自然科学基金(ZR2016CM40)；聊城大学博士启动基金(318051310)&聊城大学科研基金(318011503)；国家大学生创新创业训练项目(201610447031)；山东省重点研发计划(公益类)项目(2019GNC106082)作者简介:殷国政(1991-)，男，硕士生,从事家禽疫病诊断与防控技术研究工作，E-mail:1029165099@通讯作者:李玉保，E-mail：1i yuboo@；司振书，E-mail: **************8b~FAdV-11)[1]，其中FAdVP可引起鸡心包积液-肝炎综合征(Hydmpe/cardium-hepatitis syndmma，HHS)O1987年巴基斯坦的报道了该病,主要病为心和肝脏性坏死[2]o2015年以来HHS在我国河南、河北、山东、江苏、、广东等地和流行，鸡业带了的经济损失魚。
禽腺病毒病的诊断与防控
禽腺病毒病的诊断与防控禽腺病毒病（Avian adenovirus disease）是由禽腺病毒引起的一种禽类传染病。
本文将介绍禽腺病毒病的诊断方法以及预防控制措施。
禽腺病毒病的诊断方法主要包括临床症状观察、病理学观察、病毒学检测和免疫学检测等。
通过临床症状观察可以初步判断禽类是否感染了禽腺病毒。
禽腺病毒感染的禽类常常出现呼吸道症状，比如喷嚏、鼻泡、喉结炎等，还可引起肠道症状，如拉稀、腹泻等。
进行病理学观察可以进一步确认禽腺病毒感染。
病理学观察主要是通过解剖禽类尸体，观察禽类器官的病变情况。
禽腺病毒感染会导致禽类肠道的病变，如出血、溃疡等，还可引起呼吸道和消化道的病变。
对禽类进行病毒学检测是确诊禽腺病毒病的重要手段。
病毒学检测主要采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术，通过检测禽类体内的病毒基因来确定是否感染了禽腺病毒。
通过免疫学检测可以了解禽类是否对禽腺病毒有免疫力。
免疫学检测主要包括酶联免疫吸附试验（ELISA）和中和试验等。
这些检测方法可以检测禽类血清中的抗体水平，判断禽类对禽腺病毒的免疫状况。
针对禽腺病毒病的防控，首先要严格管理禽类的饲养环境，保持环境卫生和饲养设施的清洁。
禽腺病毒容易在脏污环境中存活和传播，因此保持饲养环境的卫生对预防禽腺病毒病至关重要。
加强禽类免疫力的提高也是防控禽腺病毒病的重要措施。
通过给禽类接种相关疫苗可以增加禽类对禽腺病毒的抵抗力，减少禽类感染禽腺病毒的风险。
禽类的健康监测也是防控禽腺病毒病的重要手段。
定期对禽类进行临床观察和病原学检测，及时发现禽腺病毒感染的禽类，并采取相应的措施进行隔离和治疗。
禽腺病毒病的诊断主要通过临床症状观察、病理学观察、病毒学检测和免疫学检测等方法进行。
而预防控制禽腺病毒病的关键措施包括加强禽类饲养环境的管理、提高禽类的免疫力以及进行健康监测等。
Ⅰ群禽腺病毒4型IgG抗体间接ELISA检测方法的建立
Ⅰ群禽腺病毒4型IgG抗体间接ELISA检测方法的建立张启龙;孙丹;韦海涛;宋彦军;周德刚;冯小宇;王林【摘要】利用纯化的Ⅰ 群禽腺病毒4型重组Hexon蛋白,通过各反应条件筛选,建立了Ⅰ 群禽腺病毒4型IgG抗体间接ELISA检测方法.结果显示,抗原最佳包被浓度为1μg/mL;最佳封闭液为1％牛血清白蛋白;待检血清最佳作用浓度是400倍稀释,37℃孵育60 min;酶标抗体的最佳作用条件为稀释度1:8000,37℃孵育60 min;最佳显色时间为10 min.用所建方法对160只临床鸡只进行检测,同时与拭子PCR检测对比,一致性较好,表明该方法可有效用于临床检测.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2019(053)008【总页数】7页(P1-7)【关键词】Ⅰ群禽腺病毒4型;Hexon蛋白;间接ELISA;检测【作者】张启龙;孙丹;韦海涛;宋彦军;周德刚;冯小宇;王林【作者单位】北京市动物疫病预防控制中心,北京 102629;北京市兽药监察所,北京102629;北京市动物疫病预防控制中心,北京 102629;北京市动物疫病预防控制中心,北京 102629;北京市动物疫病预防控制中心,北京 102629;北京市动物疫病预防控制中心,北京 102629;北京市动物疫病预防控制中心,北京 102629【正文语种】中文【中图分类】S852.65肝炎-心包积液综合征(Hepatitis and hydropericardium syndrome，HHS)是由禽腺病毒4型(Fowl adenovirus serotype 4, FAdV-4)新基因型引起的以禽心包积液、肝脏黄染、肿大和出血为特征的传染病[1]。
HHS首次于1987年在巴基斯坦的安卡拉地区发生，又名安卡拉病，随后在亚洲、欧洲和南美洲等地区流行[2-4]。
2013年以来该病在我国河南、山东、江苏、河北、陕西等地大面积流行，给家禽养殖业造成了巨大经济损失[5-7]。
禽腺病毒病的诊断与防控
禽腺病毒病的诊断与防控禽腺病毒病（IBD）是一种由禽腺病毒引起的急性、亚急性或慢性传染病，主要发生在家禽中，如鸡、鸭、鹅等。
禽腺病毒病对家禽养殖业造成了很大的危害，因此对其进行及时的诊断与防控是十分重要的。
一、禽腺病毒病的病原学特点禽腺病毒（IBDV）是一种属于双链RNA病毒的禽疫病毒。
它主要通过粪口途径传播，感染后会在淋巴系统内复制，并引起免疫抑制和淋巴器官的明显病变。
感染禽腺病毒的鸡群出现不同程度的免疫抑制，导致次生感染的发生率增加，严重时可能导致鸡群大规模死亡。
二、禽腺病毒病的临床症状禽腺病毒病的临床症状多种多样，主要表现为急性型和慢性型两种。
1. 急性型：主要表现为鸡群突然死亡，发病率可高达20-30%，患病鸡在发病后呈现明显的疲惫、食欲不振、腹泻、呼吸困难等症状，死亡率较高。
2. 慢性型：表现为生长缓慢、体重减轻、肝脾肿大、腹泻等症状，严重时可导致早衰、贫血、免疫抑制等并发症。
三、禽腺病毒病的诊断方法1. 临床症状：通过观察鸡群的临床症状，包括死亡率、生长情况、腹泻情况、肝脾肿大等来初步判断是否有禽腺病毒病的可能。
2. 病原学检测：采集患病鸡的粪便、肠道组织等样本，通过PCR、ELISA等分子生物学方法来检测禽腺病毒的存在。
3. 病理学检测：对死亡或临床表现异常的鸡进行尸检，并对病变组织进行病理学检测，观察组织病变的情况来辅助诊断。
四、禽腺病毒病的防控措施1. 加强饲养管理：做好饲养环境的清洁卫生工作，保持饲养场所的通风和干燥，避免交叉感染。
2. 合理饲料营养：合理配制饲料，保证饲料的全价营养，提高鸡群的免疫力。
3. 疫苗预防：目前已有有效的禽腺病疫苗可供使用，可根据鸡龄和养殖环境合理选用疫苗进行预防接种。
4. 限制活动范围：对于患病鸡舍采取限制活动范围，避免交叉感染。
5. 多种预防：对于鸡群进行多种预防措施，包括预防感染、提高免疫力等。
禽腺病毒病的诊断与防控工作是十分重要的，只有通过及时的诊断和有效的防控措施，才能有效避免该疾病的危害，确保禽类养殖业的稳定发展。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
血清4型禽腺病毒病诊断技术Diagnostic techniques for the disease of serotype4fowl adenovirus目次前言 (V)引言 (V)1范围 (1)2规范性引用文件 (1)3缩略语 (1)4临床诊断 (1)4.1流行病学 (1)4.2临床症状 (2)4.3剖检病变 (2)4.4临床诊断 (2)5PCR诊断 (2)5.1器材 (2)5.2试剂 (2)5.3操作方法 (3)5.4结果判定 (3)6病毒分离 (3)6.1器材 (3)6.2细胞 (4)6.3试剂 (4)6.4操作方法 (4)6.5结果判定 (4)7间接免疫荧光鉴定 (5)7.1器材 (5)7.2细胞 (5)7.3试剂 (5)7.4操作方法 (5)7.5结果判定 (6)8血清抗体检测 (6)8.1器材 (6)8.2试剂 (6)8.3操作方法 (6)8.4结果判定 (7)9综合判定 (7)附录A（规范性）溶液配制 (8)A.1磷酸盐缓冲液的配制 (8)A.2组织研磨液的配制 (8)A.3细胞培养液的配制 (8)A.4细胞维持液的配制 (8)A.5细胞固定液的配制 (8)A.650×TAE缓冲液的配制 (8)A.71%琼脂糖凝胶的配制 (9)附录B（资料性）血清4型禽腺病毒感染鸡群临床解剖症状 (10)B.1FAdV-4感染鸡群典型临床解剖症状判定标准图例 (10)附录C（资料性）阳性对照病毒 (11)C.1阳性对照病毒来源 (11)附录D（资料性）PCR检测引物及判定标准 (12)D.1血清4型禽腺病毒PCR检测引物 (12)D.2引物的稀释 (12)D.3PCR检测判定标准图例 (12)D.4PCR扩增片段参考序列 (13)附录E（资料性）间接免疫荧光鉴定用单克隆抗体及判定标准 (14)E.1单克隆抗体的来源 (14)E.2间接免疫荧光鉴定判定标准图例 (14)附录F（规范性）血清4型禽腺病毒抗体检测ELISA试剂盒使用溶液的配制 (15)F.1包被缓冲液 (15)F.2封闭液 (15)F.3样品稀释及洗涤液 (15)F.4终止液 (15)附录G（规范性）血清4型禽腺病毒抗体检测ELISA试剂盒抗原包被板及阴性、阳性对照血清的制备 (16)G.1血清4型禽腺病毒抗体检测试剂盒抗原包被板的制备 (16)G.2阴性对照血清的制备 (16)G.3阳性对照血清的制备 (16)血清4型禽腺病毒病诊断技术1范围本标准规定了血清4型禽腺病毒病诊断技术的要求。
本标准规定的临床症状和病理变化适用于血清4型禽腺病毒病的初步诊断；聚合酶链式反应（PCR）检测方法适用血清4型禽腺病毒的核酸鉴定；病毒分离技术适用于血清4型禽腺病毒的分离培养；间接免疫荧光（IFA）检测方法适用于血清4型禽腺病毒的病原鉴定；间接ELISA抗体检测方法适用于血清4型禽腺病毒自然感染鸡群血清学诊断及免疫鸡群抗体水平监测。
2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。
NY/T541-2016兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范。
3缩略语下列缩略语适用于本文件。
FAdV-4血清4型禽腺病毒（Fowl adenovirus serotype4）PCR聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）PBS磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer Saline）PBST吐温磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer Saline with Tween）DNA脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleic acid）LMH细胞鸡肝癌细胞（Leghorn male hepatocellular cells）ELISA酶联免疫吸附试验（Enzyme linked immunosorbent assay）TMB四甲基联苯胺（3,3',5,5'-tetramethyl-benzidine）TCID50半数细胞感染量（Median tissue culture infective dose）CPE细胞病变效应（Cytopathic effect）4临床诊断4.1流行病学感染一般发生于3~6周龄肉鸡及10~20周龄蛋鸡，但各种日龄鸡只均可感染FAdV-4。
FAdV-4强毒自然感染潜伏期为1~2天，感染后3~5天出现死亡率高峰；死亡率一般为20%~80%，有时甚至达到100%。
4.2临床症状突发高死亡率，家禽临床症状表现：精神沉郁、食欲不振、嗜睡、拉黄绿色稀粪、黄疸。
4.3剖检病变心包积液：心包囊出现无色或黄绿色积液。
肝炎：肝脏肿大、质脆、边缘钝圆、出血，有大理石状花斑，并有明显坏死灶。
肾炎：肾脏肿胀、有些出血点。
4.4临床诊断当禽出现4.2及4.3（判定标准图例参见附录B.1）部分或全部情形时，可判定为FAdV-4感染疑似病例。
确诊需要实验室诊断。
5PCR诊断5.1器材5.1.1PCR扩增仪5.1.2组织研磨仪5.1.3台式低温高速离心机5.1.4核酸电泳仪5.1.5核酸电泳槽5.1.6电泳凝胶成像仪5.1.7冰箱：4℃、-20℃、-80℃5.1.80.2~2μL、2~20μL、20~200μL和200~1000μL移液器5.2试剂5.2.1商品化DNA提取试剂盒5.2.2商品化PCR试剂盒5.2.3商品化核酸染料及DNA Marker5.2.4引物FAdV-4F和FAdV-4R（附录D.1）5.2.5灭菌去离子水5.2.6PBS缓冲液（附录A.1）5.2.7组织研磨液（附录A.2）5.2.81×TAE缓冲液（附录A.6）5.2.91%琼脂糖凝胶（附录A.7）5.3操作方法5.3.1样品准备空白对照样品：高压处理过的去离子水。
阴性对照样品：其他禽源病毒基因组。
阳性对照样品：SD15毒株基因组（参见附录C），或其他背景清楚的FAdV-4毒株基因组。
待检样品：取待检样品1.0g，加入1mL组织研磨液充分研磨，制成混悬液后于37℃水浴锅反应30min；在4℃条件下以12000rpm离心20min后，取上清，以0.22μm滤器过滤，转移至1.5mL离心管，即为肝组织研磨上清液。
采用商品化的DNA提取试剂盒，按说明书完成核酸DNA提取。
5.3.2PCR反应按照商品化PCR试剂盒说明书要求，在反应体系加入各成分中，混匀。
反应程序为95℃预变性5min；95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸10min，反应结束后置4℃冰箱保存备用。
5.3.3PCR产物凝胶电泳配置1.0%琼脂糖凝胶（含核酸染料），带加样孔的一端放置在电泳槽的阴极，倒入1xTAE缓冲液浸泡过胶面，依次点样（DNA Marker、阳性对照样品、阴性对照样品、空白对照样品、待检样品）中进行电泳，恒压120V，电泳约40min，在电泳凝胶成像仪中观察、拍照、记录结果。
5.4结果判定5.4.1试验成立的判定空白对照或阴性对照样品无扩增条带，阳性对照样品出现约280bp的条带，则试验成立（判定标准图例参见附录D.3）。
5.4.2试验结果的判定在试验成立的前提下，待检样品无条带（参见附录D.3），则判定待检样品为FAdV-4核酸阴性；在试验成立的前提下，待检样品出现约280bp的条带（参见附录D.3），则判定待检样品为FAdV-4核酸阳性；必要时，将目的条带进行胶回收后克隆测序，待测样品的测序结果和参考序列（参见附录D.4）进行核苷酸同源性比较，同源性在95.0%以上判为阳性。
6病毒分离6.1器材6.1.1倒置显微镜6.1.20.2~2μL、2~20μL、20~200μL和200~1000μL移液器6.1.3细胞培养箱6.1.4台式低温高速离心机6.1.56孔细胞培养板6.1.637℃恒温箱6.1.7冰箱：-80℃6.2细胞6.2.1LMH细胞6.3试剂6.3.10.25%胰酶6.3.2PBS缓冲液（附录A.1）6.3.3细胞培养液（附录A.3）6.3.4细胞维持液（附录A.4）6.4操作方法6.4.1细胞准备感染前一天将生长状态良好的LMH细胞以PBS洗涤一次，弃去PBS，以0.25%胰酶消化为单个细胞后加入适量的细胞培养液，以吸头吹散细胞，并按2mL/孔培养于6孔板，置于37℃、5%CO2细胞培养箱培养过夜，待细胞长至70%时（12-16h）开始进行感染。
6.4.2样品准备待检样品：按5.3.1处理的PCR阳性肝组织混悬液上清，以细胞维持液稀释10、20倍待用。
阴性对照：细胞维持液。
6.4.3样品接种和培养弃细胞培养液，以PBS洗一遍。
取1mL6.4.2所述样品均匀铺满细胞，每个样品做2个重复孔，每块板子设置2个以上阴性对照孔，吸附2h后，以PBS洗一遍，弃去PBS，加入2mL细胞维持液。
培养3-5天后，观察细胞是否出现CPE。
6.5结果判定6.5.1试验成立的判定阴性对照样品保持正常细胞形态，则试验成立。
6.5.2试验结果的判定每日在倒置显微镜下观察细胞培养是否出现CPE。
如出现CPE，即LMH细胞形态变圆、皱缩、脱落等典型病变，可判定病毒分离成功；如未出现CPE，将细胞培养物冻融3次，离心取上清接种LMH进行盲传，直至出现CPE。
将出现CPE的细胞培养物于-80℃反复冻融3次，离心收集细胞培养物上清，即分离得到的病毒。
分离得到的病毒需进一步通过PCR诊断（5）或间接免疫荧光鉴定（7）是否为FAdV-4。
7间接免疫荧光鉴定7.1器材7.1.1荧光显微镜7.1.20.2~2μL、2~20μL、20~200μL和200~1000μL移液器7.1.3细胞培养箱7.1.496孔细胞培养板7.1.537℃恒温箱7.2细胞7.2.1LMH细胞7.3试剂7.3.10.25%胰酶7.3.2PBS缓冲液（附录A.1）7.3.3细胞维持液（附录A.4）7.3.4细胞固定液（附录A.5）7.3.5FAdV-4特异性单克隆抗体1D7（附录E.1）7.3.6商品化的FITC标记的羊抗鼠IgG7.4操作方法7.4.1样品准备待检样品：5.3.1中PCR阳性样品（肝组织研磨液上清）或6.5.2中细胞分离得到的病毒样品（细胞培养物上清）感染的LMH细胞。
样品的接种与培养，见6.4.3。
阴性对照样品：未感染的LMH细胞。
阳性对照样品：毒株SD15，或其他背景清楚的FAdV-4毒株感染的LMH细胞。
7.4.2间接免疫荧光试验7.4.2.1弃去细胞培养液，室温下以固定液固定细胞5min，每孔50μL。
7.4.2.2弃去固定液，室温下自然吹干2h，以PBS洗涤一次。