大鼠肝移植过程图
大鼠肝细胞微球皮下移植生成肝组织初探

大鼠肝细胞微球皮下移植生成肝组织初探张兰;李则学;刘海亮;李沛雨【摘要】目的探讨大鼠肝细胞微球皮下移植生成肝组织的可行性,为构建组织工程肝寻找新的方法。
方法新鲜分离的SD大鼠肝细胞接种在琼脂糖包被的培养皿上进行培养,待其形成肝细胞微球后采用直接注射方式植入大鼠腹股沟处皮下腔。
1 周后取腹股沟处组织,HE 染色法观察生成的肝组织形态。
结果体外培养3 d,肝细胞形成致密的肝细胞微球,直径大小在43 ~ 185 μm,HE 染色显示微球中的肝细胞保持天然肝细胞形态特征。
将其植入大鼠腹股沟处皮下腔1 周,HE 染色显示植入的肝细胞成活,并呈三维肝样组织团,肝细胞保持其特有形态特征:胞体为圆形,核大而圆,多为双核。
结论肝细胞微球皮下移植可形成肝组织,为组织工程肝的构建创建了新的方法。
【期刊名称】《解放军医学院学报》【年(卷),期】2014(035)005【总页数】3页(P493-495)【关键词】工程化肝组织;肝细胞微球;组织工程【作者】张兰;李则学;刘海亮;李沛雨【作者单位】解放军总医院普通外科研究所,北京100853;;;;【正文语种】中文【中图分类】R318.1对于先天性肝代谢紊乱及终末期肝病所致的急、慢性肝功能衰竭,肝移植是目前唯一有效的救治手段,但供体短缺严重制约该技术广泛应用[1-2]。
肝组织工程技术的发展为各种肝病治疗提供一种潜在方法[1-4]。
通过创建可植入工程化肝移植物体内再生工程化肝组织可为病损肝脏提供肝功能支持或直接对其进行修复[5-6]。
迄今为止已证实包括肝细胞/支架材料复合物、肝细胞片层等多种肝移植物体内植入后可再生有功能的工程化组织[7-12]。
肝细胞微球是肝细胞在非贴壁培养过程中相互聚集形成的三维类组织样细胞聚集体;体外研究表明肝细胞在形成微球后可更好的保持其活性和功能[13-15],但尚未见将其用于体内构建组织工程肝的报道。
本研究旨在评价肝细胞微球皮下移植形成肝组织的可行性。
大鼠原位肝移植胆道并发症的原因分析

1 O9
・
论
著 ・
大 鼠原 位 肝 移 植 胆道 并 发症 的原 因分 析
Ta —h L n Ha — n L L— o g, u —a Y 肌 一 0 , a —ig, n n, n u — inz u, i o mig, v ih n Xu J n y o, u d Xu Xio t n Mi Wa Y n l e,
D p r e t f He a bl r ugr Me oi s il o u Y t e U i ri , unzo e at n p t ia S re m o o iy y, m rl Ho t S n a sn nv sy G agh u a pa f — e t
51 20 01
【 bt c】 A s at r
O j t e T t yt as f i r cm laos ad e alh s b bei os d h cue o b iy o p ctn, n s bs t l cv u e s l a i i t i ae
M eh d to s 1 0 a e o ie t n p a t t n we e c s s f l r r s l n ai r 8 v a o
套法” 行大鼠原位肝脏移植 10例 , 8 即肝上下腔静脉 (v 采用连续缝合法 吻合 , s c) 门静 脉( V) P 以及 肝
模型稳定后 , 供肝冷
胆管 内支架管 的
缺血 时间为 (01 1 .) n 无肝 期为 (60 31mi, 体手术 时 间为 (44 1 .) n 术后 胆道 并 5 .- 20 mi, + 1.+ .) n 受 5 .+ 06 mi, 发症 的发生率为 4 %, 0 主要 表现为肝脓 肿 、 内外 胆管扩 张 、 肝 胆泥形成 等 。结论 选择以及手术技 巧是影响大 鼠肝移 植术后胆道并 发症发生发展 的重要 因素 。
大鼠减体积肝移植术后早期死亡的原因分析

a. Ten Dp r e tfHp t b ir p nr t ugr,G n eA ia dH si l K n n d a C lg ,K n 1 h £ eat n eao— iay- a c ai S re m o l e c y a m if l t o t umi Mei l ol e u — ie pao f g c e
osut n ( .% ) gs e blm ( . % ) l e d s nt n ( . % ) n u o oa ( . % ) p lo a net n bt co 24 r i , a m os i 18 , i r yf c o 1 8 ,p em t r v u i h x 18 , um nr if i y co
( . % )adecsi e a ig ( . % ) C n ls n T ecm o et a yd a as o t eue 12 n xes erw r n 12 . o c i h o m n s er et cue f a rdcd—s el e as v m uo l h r i vr n — z i t r
u i r v d o e a in, a d 1 0 r c ie mpo e . Re u t n mp o e p r t o n ( e ev d i r v d 3 sl s T n y— f e o 7 a s h vn e ev d r d c d— sz ie we t i f 1 0 r t a i g r c ie e u e v ie l r v
布 为 :腹 腔 出血 8只 ( . % ) 4 7 ,肠 梗 阻 4只 ( . % ) 气体 栓 塞 3只 ( . % ) 24 , 18 ,肝 功 能 不 良 3只 ( . % ) 18 ,气 胸 3只
大鼠原位肝移植模型建立的技术要点

大鼠原位肝移植模型建立的技术要点目的探讨大鼠肝移植手术技巧与处理要点, 减少术后并发症,建立稳定的大鼠肝移植模型。
方法Wistar大鼠240只(供受体各120只)行二袖套法原位肝移植。
结果120例大鼠原位肝移植术后48小时存活率88.3 % ,1周存活率86.7%,建立了稳定的大鼠肝移植模型。
结论掌握技术要点与处理方法,是建立稳定的大鼠肝移植模型的保证。
Abstract:ObjectiveTo explore the surgical skills of Orthotopic Liver Transplantation in Rats and reduce the complications. MethodsOrthotopic Liver Transplantation was performed in 240 rats using two-cuff technique.ResultsThe survival rate for 48 hours was 88.3 %, the survival rate for one week was 86.7 %, and established stable liver transplantation model in rats. ConclusionMaster the surgical skills of Liver Transplantation in rats can improve achievement ratio and the steady livability of rats with orthotopic liver transplantation.Key words:Liver transplantation;Model;Rats大鼠原位肝移植是研究免疫耐受、免疫排斥、器官保存、肝脏缺血再灌注损伤等方面常用动物模型,1979年Kamada首次提出了二袖套法建立大鼠肝移植模型,简化了手术方式,提高了生存率[1]。
大鼠30%小体积肝移植模型两种切肝方法的比较

大鼠30%小体积肝移植模型两种切肝方法的比较宋军;丁志龙;徐为;李文美;李向农;王学浩【摘要】Objective To establish an effective and available 30% small-for-size rat liver transplantation model. Methods 30% small-for-size liver transplantation models were performed according to Kamada' s two-cuff method without arterial reconstruction. Male SD rats were divided into two groups; group A (n =40) , 30% liver transplantation using right lobe, caudate lobe and triangle lobe graft; group B (n =40) , 30% liver transplantation using a median lobe graft. Three-day survival and technical complications were compared between two groups. Results Compared to group B, the time for liver lobe reduction in the group A was shorter ( P < 0. 01) , and inferior vena cava stricture was fewer ( P < 0.05 ) . There was no significant difference in the three-day survival rate between two groups ( P > 0. 05 ). The incidence rate of liver cross-section bleeding, bile leakage and infection showed no significant differences. Conclusion Using improved method of lobe resection, a more viable and effective 30% small-for-size rat liver transplantation model with a right lobe, caudate lobe and triangle lobe graft can be established.%目的探讨建立理想的成功率较高的大鼠30%小体积肝移植模型的可靠方法.方法采用改良“二袖套法”非动脉化法建立大鼠30%小体积肝移植模型.实验组分为两组:A组,右叶+三角叶+尾状叶做供肝的30%小体积肝移植组,共40例;B组,中叶做供肝的30%小体积肝移植组,共40例.观察两组术后并发症和术后3d生存率.结果 A、B组切肝时间分别为(11±3)、( 14 ±3) min,P<0.01;术后发生肝后下腔静脉狭窄分别有2例、8例,P<0.05;术后3d生存率分别为53%(21/40)、40%(16/40),P>0.05;断面出血、胆漏和感染的发生率两组无明显差异.结论通过技术改良,可以以右叶+三角叶+尾状叶为供肝建立稳定的大鼠30%小体积肝移植模型.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2011(051)052【总页数】3页(P16-18)【关键词】肝移植;模型,动物;小体积;大鼠【作者】宋军;丁志龙;徐为;李文美;李向农;王学浩【作者单位】徐州医学院附属医院,江苏徐州221002;徐州医学院附属医院,江苏徐州221002;徐州医学院附属医院,江苏徐州221002;徐州医学院附属医院,江苏徐州221002;徐州医学院附属医院,江苏徐州221002;南京医科大学第一附属医院【正文语种】中文【中图分类】R657.3近年来,供肝短缺促使活体肝移植在临床上得到广泛的开展。
建立大鼠异位辅助性肝移植模型的研究

、
1 材 料 : s r 鼠, . Wi a 大 t 雄性 , 重 2 0 4 肝 素生 理盐 水 冲出肝 内残 留血 液 , 体 5 ℃ 纱 可得 到较 好 的灌 注效 果 。
-
2 0g 购 于 北 京 卫 生 部 生 物 所 实 验 动 7 (
布包 裹 , 用 。( ) 者 手 术 : 前 处 理 待 3受 术
总管 固定 。游 离 肝 下 下 腔 静 脉 . 右 肾 少 静 脉 血 栓 的 形 成 。 左 静 脉 。游 离 门静 脉 至肠 系 膜 上 静 脉 , 引
一
显 微手 术器 械 购 自上 海 手 术 器 械 厂 , 清
洁 手术 。
4 供 肝 置 入 :供 肝 在 置 入 过 程 中 . .
3 套 管技 术 : 断 受 者 门静 脉 及 肝 . 剪
物 中心 ) 每 笼 4只 , 意 进 食 颗 粒 饲 料 , 随
和 饮 水 。 术 前 禁 食 1 , 限 饮 水 , 2h 不 门静
同供 者 。腹 部 正 中 切 口, 右 侧 腹 壁 自 下下 腔静 脉 应 尽 量 保 留血 管 壁 , 入 门 左 插 制 拉 钩横 向拉 开 , 位 于肝 下 间 隙 内小 静脉 套 管时 , 将 应将 胆总 管置 于其 左侧 , 这 肠 提 出腹 腔 , 湿纱 布 包裹 , 置 于 左侧 腹 时便 很少 有 可能 扭 曲门 静脉 。套 管不 仅 放
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C i Or nT asl t Jl 02 V 1 3 N . h J g r p n, u2 0 . o. . o4 n a n a 2
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2 5 ・ 5
建 立 大 鼠 异 位 辅 助 性 肝 移 植 模 型 的研 究
单人行大鼠原位肝移植手术难点及技巧的探讨

c p o p r t n t n n e a i tmewe e ( 7 2 ± 1 0 ) m i S ( 6 4 土 1 1 ) mi e t ro e a i i a d a h p t i r 2 . 2 o me e .3 nV 2.7 .6 n, ( O 5 士 3 1 ) mi S ( 8 1 ± 5.8 .O nV 4.8 3 7 ) mi , ( 1 6 .0 n 1 . O士 0 1 ) mi S ( 1 2 士 0 0 ) mi . Th u c s f lr t , o e we k s r i a a e o e mo t u vv l . 1 nV 1.8 .8 n e s c e s u a e n - e u vv lr t , n - n h s r i a
福建医药杂志 21 0 0年 6月 第 3 2卷 第 3期
F j nM e ,Jn 0 0 ui dJ u e2 1 ,Vo 3 ,No a l2 .
6 3
单 人 行 大 鼠原位 肝 移植 手术 难 点及 技 巧 的探 讨
福 建 医科 大学 第 一 临床 医学 院肝 病 中 心 ( 州 3 00 ) 黄 启 明 吴 燕 斌 福 50 5 刘景 丰 邱 明链
e a i g d fiu t s a d t c n q e .M e h d A o a f 0 d l l D a swe ea o t d Th d l se t b ih d wi e r tn if l e n e h iu s c i to s t tl 0 a u tmae S r t r d p e . emo e o 2 wa s a l e t r — s h f r d t — u fme h d b i g e o e a o n o b e o e a o s Fi y c s s o a r h t p c l e r n p a t t n r e — o me WO c f t o y sn l p r t r a d d u l p r t r . f a e f r to t o o i i r t a s ln a i s we e p r t v o f r d wi n i e y a h g o p Re u t I i g e o e a o r u n o b e o e ao sg o p, d n ro e a i n tme r — o me t u ad d e e e c r u . h sl s n sn l p r t r g o p a d d u l p r t r r u o o p r t i , e o
大鼠原位肝移植模型的研究进展

症 等几 个方 面仍 需要进 行 大量 的研 究 , 稳定 的 动物 实 验模 型 的建立 就 故
显得 至关 重要 , 是研 究这 些 问题 的有 效 途 径 L 。 与 其 他实 验 动 物 相 比 , 2 ] 大 鼠具 有解 剖结 构类 似 于人 类 , 易 饲养 , 殖 较 快 , 于 观 察 等 优 点 , 容 繁 便 故 大 鼠肝移植 模 型是 目前 基 础 与 临床 中最 常 用 的 动 物模 型。 大 鼠肝 移 植术 式 模 型大 体 的分 型 有大 鼠原 位肝 移 植 ; 鼠异 位 肝移 植 ; 鼠慢 性 大 大 排斥 反 应 的建 立 ; 他 的模 型 ( 体积 式 、 助性 原 位 部分 、 心 跳供 体 其 减 辅 无 等) 3。本 文仅对 大 鼠的原 位 肝移 植实 验研 究 的进 展作 一 综述 L ] 1 大 鼠模 型 的优点 基础 和 临床 的肝移 植模 型 主要 以 鼠为造 模对 象 , 鼠原 位 肝 移植 模 大 型是 目前 最常 用 的动物 模型 。RO TM 主 要有 以下 优 点 : 与 较 大 的实 L ① 验动 物 ( 、 ) 比 , 管肝 移植 实 验在 技术 上更 容 易 实施 , 得 益于 显 狗 猪 相 尽 但 微外 科 的发 展 , 助 手术 显 微 镜 的放 大 , 借 使用 精 细 的 显微 手 术 器械 及 缝 合材 料 ( 管) 对 细小 的组 织 进 行精 细 手术 , R TM 的建 立 成 为 可 套 , 使 OL 能[ 。②有 大批 基 因型 明确 的纯 系 大 鼠 供 我们 选 择 , 近 交 系动 物 、 I ] 如 封 闭群 和杂 交群 等 。③单 克隆 抗 体 可 以 特异 和灵 敏 的 鉴定 大 鼠在 免 疫 排 斥异 以及 免疫 耐受 方面 起重 要作 用 的淋 巴细 胞 , 们 目前 对 大 鼠 的免 疫 人 分子 的认 识越 来越 多 。④ 大 鼠繁 殖 快 ( 娠期 和哺 乳 期 较 短) 成 本 低 、 妊 、 易于饲 养 、 有较 强 的抗 病 能力 , 人 的解 剖结 构 类 似 。⑤ 建 立 的 模 型 具 和 具 有 良好 的重 复性 , 济性 , 经 并发 症与 大 动物 肝脏 移植 基本 相 同 。 2 大 鼠的 麻醉 动物 模型 的建 立是在 动 物 的麻 醉状 态下 进行 的 , 模 型 的建 立 过程 在 中, 凡是 能影 响麻 醉 效果 的 因素 都 会 对 模 型 的存 活 率 和成 功率 造 成影 响I 。由于 每种 动物对 不 同麻 醉药 的 反应 , s ] 以及 不 同剂量 的维 持 效 果不 同, 故在 动物 的麻 醉过 程中 , 应选择 对 动物 机 体影 响较 小 、 作用 持 续 时 间 短, 而且 对实 验结 果影 响小 的 的麻 醉剂 , 而 达到 维 持稳 定 的麻 醉 效 果 。 从 大 鼠原 位 肝移植 模 型 , 麻醉 用药 的选 择 及麻 醉深 度 的掌 握 是保 证 手 术顺 利 进行 的关 键之 一 , 时也 是减 少大 鼠术 中及 围手 术期 死 亡率 的关 键 因 同 素 之一 。目前用 于大 鼠肝 移植 模 型手 术 的麻 醉药 物种 类 较 多 , 要 有 乙 主 醚、 氯胺 酮和 戊 巴比妥 等 , 种麻 醉药 有各 自的优 缺点 和应 用 范 围L 。 每 6 J 2 1 麻 醉药 的使 用情况 : 鼠肝 移植 模 型建 立 过程 中, . 大 目前 主 要使 用 乙醚 和 氯胺酮 两种 麻醉 剂 。乙 醚采 用吸 人 式给 药 , 由于 其对 呼 吸 道 的 刺 激作 用 , 造成呼 吸 困难甚 至 窒息 , 会 因此 在 给药 前 , 行 肌注 阿 托 品 的 要 预 处理 L 。氯胺 酮 , 7 J 化学 名是 2 ( 一氯 苯 基) 一 2 一2甲胺 基 一环 己酮 盐酸 盐 , D mi 9 5年 引入 临床 后 , 自 o n 16 o 至今 仍 是 非 巴 比妥 类 静 脉 麻 醉 药镇 痛 效果 唯 一确定 的麻 醉药 [ 巴 比 妥类 麻 醉 药 目前仍 在 大 鼠 肝 移植 模 型 的建 立 中使 用 。 因其 比较 大 的 肝脏 毒 性 , 严 重 影 响肝 脏 的 功 能和 但 会 实 验结 果 , 故很 少使 用 。彭 勇[ 等 在 用改 进 的二袖 套 法制 作大 鼠模 型的 。 ] 过程 中, 大 鼠随机 分为 对 照 组 、 醚 组 、氯 胺 酮 组 、 合 氯 醛 组 巴 将 乙 水 戊 比妥组 , 观察 每 种麻 醉 剂 的麻 醉 过 程 、 大 鼠 生理 和肝 功 能的 影 响 以及 对 无肝 期 开 始后 的 死亡 率 , 出各 种麻 醉对 肝 移植 大 鼠均有 明显 影 响 , 得 但 乙 醚具有 对生 理 、 功影 响小 , 肝 期 开始后 死 亡率 低 的优 点 , 可作 为 肝 无 故 制作 大 鼠原位 肝 移植模 型 的首 选麻 醉 方法 。 国内外 许 多 文 献报 导 , 氯胺 酮在 大 鼠肝移 植 中的麻 醉多 见 于 供 体 , 受 体 多 用 乙 醚 。就其 原 因 , 而 是 由于大 鼠肝移 植要 经 历无 肝 期 这 一特 殊 过 程 , 肝 ��