叶绿素的提取与分离

《叶绿体色素的提取和分离》实验报告

《叶绿体色素的提取和分离》实验报告
叶绿体是植物细胞中的一种细胞质器，主要功能是光合作用。

叶绿体包括一系列色素，其中最重要的是叶绿素。

在本实验中，我们将提取和分离叶绿体色素，以便进一步分析其
结构和功能。

实验步骤：
1. 从新鲜的叶子中剪下片段，用无菌蒸馏水洗涤。

2. 用离心机将叶片离心，离心速度为1000 rpm，时间为5分钟。

3. 将上清液取出并过滤，过滤剂为细孔过滤纸。

5. 将上清液取出，并用1ml无菌蒸馏水洗涤叶绿体色素。

7. 取出上清液，将其光度值调至0.4-0.6。

（400nm处）
8. 将上述上清液转入紫外吸收仪中，观察叶绿素的吸收曲线。

实验结果：
实验得出的叶绿体色素提取液中，吸收最强的波长为680nm和430nm。

这对应着叶绿
体和类胡萝卜素的吸收峰。

实验得到的叶绿体色素移液后，需要经过离心的过程，这样可去除混杂物质，获得更
为纯净的叶绿素。

通过以上实验，我们成功地提取和分离了叶绿体色素。

叶绿素是植物所特有的，它起
到了光合作用的关键作用。

实验中的提取和分离方法，可以为进一步的分析叶绿素的结构
和功能提供帮助。

实验九叶绿素的提取、分离

叶绿素的提取、分离一、实验目的1. 掌握从植物叶中提取叶绿素的方法。

2. 了解纸层层析的原理，掌握纸层析的一般操作和定性鉴定方法。

二、实验原理1. 叶绿素提取原理：叶绿素等是脂溶性的有机分子，根据相似相溶的原理，叶绿体中含有叶绿体色素（叶绿素a和b、胡萝卜素及叶黄素）等色素分子溶于有机溶剂而不溶于有极性的水。

故在研磨和收集叶绿色素时要用丙酮或乙醇等有机溶剂提取而不用水。

2. 色素分离的原理：纸层析是用滤纸作为载体的一种色层分析法，其原理主要是利用混合物中各组分在；流动相和固定相的分配比（溶解度）的不同而使之分离。

滤纸上吸附的水为固定相（滤纸纤维常能吸20%左右的水），有机溶剂如乙醇等为流动相，色素提取液为层析试样。

把试样点在滤纸的滤液细线位置上，当流动相溶剂在滤纸的毛细管的作用下，连续不断地沿着滤纸前进通过滤液细线时，试样中各组份便随着流动相溶剂向前移动，并在流动相和固定相溶剂之间连续一次有一次的分配。

结果分配比比较大的物质移动速度较快，移动距离较远；分配比较小的物质移动较慢，移动距离较近，试样中各组分分别聚集在滤纸的不同的位置上，从而达到分离的目的。

毛细管点样薄层色谱展开三、仪器和药品研钵、毛细管、漏斗、纱布、小烧杯、试管、培养皿等95%酒精、丙酮、石油醚碳酸钙，石英砂四、实验步骤（1）取菠菜或其他植物新鲜叶片20g左右，洗净，用滤纸擦干，去掉叶柄和中脉剪碎，放入研钵。

（2）研钵中加入少量碳酸钙和石英砂，加4-5ml 75％乙醇，研磨至糊状，再加10-15ml 75％乙醇充分混匀以提取叶片匀浆中的色素，15-20分钟后，过滤入50ml锥形瓶中加塞待用。

分离：（1）取圆形定性滤纸一张（直径15cm），将其剪成滤纸条（15cm×2cm），将其2cm一端剪去两侧，中间留一长约1.5cm，宽约0.5cm的窄条，并在滤纸剪口上方用铅笔画一条直线，作为画滤液细线的基准线（注意：滤液线必须距底边1-1.5cm）。

叶绿素的提取和分离

叶绿素的提取和分离
叶绿素是植物和藻类中存在的一种绿色色素，它的提取和分离可以通过以下步骤进行：
1. 鲜叶采集：选择新鲜健康的叶子样品，并尽量避免阳光暴晒和长时间储存。

2. 研磨：将采集的叶子样品用搅拌机或者研钵研磨成细碎的绿色浆状物。

3. 植物组织破碎：将研磨好的样品浆液通过高速离心或搅拌法破碎细胞结构，并释放叶绿素。

4. 提取：将破碎的植物组织样品置于溶剂中，通常可以选择乙醇、丙酮、二甲亚砜或乙酸乙酯等有机溶剂。

在室温下浸泡一段时间，使叶绿素溶解到有机溶剂中。

5. 离心：将溶解了叶绿素的有机溶剂进行低速离心，以分
离溶剂和植物残渣。

6. 过滤：将离心后得到的溶剂进行滤过，以去除悬浮的杂质。

7. 浓缩：将过滤后的溶剂用恒温浓缩器或蒸发器进行浓缩，使其体积减小。

8. 纯化：对浓缩后的叶绿素溶液进行进一步纯化，可以使
用柱层析、薄层层析或高效液相层析等技术，以分离和纯
化叶绿素。

9. 干燥：将纯化后的叶绿素溶液进行干燥，可以通过喷雾
干燥、真空干燥或冷冻干燥等方法。

10. 得到叶绿素提取物：经过上述步骤后，叶绿素提取物便可以得到，并可以用于进一步的分析和应用。

需要注意的是，以上步骤仅为提取和分离叶绿素的一种常用方法，具体操作步骤和参数可根据实际情况进行调整。

同时，对于更为复杂的样品和目的，可能需要选择其他提取和分离技术进行操作。

植物生理学实验叶绿体色素的提取、分离

3 铜代反应
取上述色素乙醇提取液少许于试管中，1 滴1滴加入浓盐酸，观察颜色变化。然后加醋酸铜晶体少许，酒精灯上慢慢加热溶液，观察色素颜色的变化。
叶绿素的提取
叶绿素是一种酯，因此不溶于水。通常用含有少量水的有机溶剂如80％的丙酮，或者 95%乙醇，或丙酮∶乙醇∶水＝4.5∶4.5∶1的混合液来提取叶片中的叶绿素，用于测定叶绿素含量。之所以要用含有水的有机溶剂提取叶绿素，这是因为叶绿素与蛋白质结合牢，需要经过水解作用才能被提取出来。提取方法研磨法浸提法研磨法提取光合色素
制作绿色标本方法：用50%醋酸溶液配制的饱和醋酸溶液浸渍植物标本(处理时可加热)
当溶液变褐色后，投入醋酸铜粉末，微微加热，形成铜代叶绿素
提取液的分离：因吸附剂对不同物质的吸附力不同，当用适当的溶剂推动时，混合物中各种成分在两相（固定相和流动相）间具有不同的分配系数，所以移动速度不同，经过一定时间后，可将各种色素分开。
二、材料、仪器设备及试剂
（一）材料：常春藤叶（二）仪器设备：研钵；漏斗；三角瓶或试管；剪刀；滴管；玻棒；圆形滤纸（直径11cm）：酒精灯（三）试剂： 95％乙醇；石英砂；盐酸；醋酸铜推动剂：按石油醚；丙酮：苯（10:2:1）比例配制（V／V）。
2. 叶绿体色素的分离（1）取圆形定性滤纸一张（直径11cm），用毛细滴管吸取或玻棒蘸取乙醇叶绿体色素提取液点于滤纸中心，使色素扩散，风干后，再重复操作数次。（2）用吸管吸取推动剂滴在滤纸中间，当推动剂前沿接近滤纸边缘时，即可看到分离的各种色素。风干滤纸，剪取一条分开的色素带，标明各种色素的位置及颜色，作为结果贴于实验报告上。
0.1g叶+10ml混合液浸提

实验六叶绿素的提取、分离

叶绿素的提取、分离一、实验目的1.掌握从植物叶中提取叶绿素的方法。

2. 了解纸层层析的原理，掌握纸层析的一般操作和定性鉴定方法。

二、实验原理1. 叶绿素提取原理：叶绿素等是脂溶性的有机分子，根据相似相溶的原理，叶绿体中含有叶绿体色素（叶绿素a和b、胡萝卜素及叶黄素）等色素分子溶于有机溶剂而不溶于有极性的水。

故在研磨和收集叶绿色素时要用丙酮或乙醇等有机溶剂提取而不用水。

2. 色素分离的原理：纸层析是用滤纸作为载体的一种色层分析法，其原理主要是利用混合物中各组分在；流动相和固定相的分配比（溶解度）的不同而使之分离。

滤纸上吸附的水为固定相（滤纸纤维常能吸20%左右的水），有机溶剂如乙醇等为流动相，色素提取液为层析试样。

把试样点在滤纸的滤液细线位置上，当流动相溶剂在滤纸的毛细管的作用下，连续不断地沿着滤纸前进通过滤液细线时，试样中各组份便随着流动相溶剂向前移动，并在流动相和固定相溶剂之间连续一次有一次的分配。

结果分配比比较大的物质移动速度较快，移动距离较远；分配比较小的物质移动较慢，移动距离较近，试样中各组分分别聚集在滤纸的不同的位置上，从而达到分离的目的。

毛细管点样薄层色谱展开三、仪器和药品研钵、毛细管、漏斗、纱布、小烧杯、试管、培养皿等剪纸形状滤液基线95%酒精、丙酮、石油醚碳酸钙，石英砂四、实验步骤（1）取菠菜或其他植物新鲜叶片20g左右，洗净，用滤纸擦干，去掉叶柄和中脉剪碎，放入研钵。

（2）研钵中加入少量碳酸钙和石英砂，加4-5ml 无水乙醇，研磨至糊状，再加10ml 无水乙醇充分混匀以提取叶片匀浆中的色素，15-20分钟后，过滤入50ml锥形瓶中加塞待用。

分离：（1）取圆形定性滤纸一张（直径15cm），将其剪成滤纸条（15cm×2cm），将其2cm一端剪去两侧，中间留一长约1.5cm，宽约0.5cm的窄条，并在滤纸剪口上方用铅笔画一条直线，作为画滤液细线的基准线（注意：滤液线必须距底边1-1.5cm）。

从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇

从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇从菠菜中提取叶绿素实验报告 (1)1.1 仪器与试剂仪器：研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240紫外分光光度计试剂：石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目～160目)1.2 提取与分离1.2.1 浸泡法提取色素在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶，加入20 mL3：2(体积比)石油醚—乙醇混合液，适当研磨(不要研成糊状，否则会给分离造成困难)，用倾析法将提取液转移到分液漏斗中，每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。

洗涤时要轻轻旋荡，以防乳化。

弃去水乙醇层，石油醚层用无水硫酸钠干燥，干燥后滤入小圆底烧瓶，在水浴上蒸发浓缩至大约l m L。

1.2.2 薄层层析取四块显微载玻片，硅胶G经0.5％羧甲基纤维素钠调制后制板，在室温下晾干后在110°C活化1h。

选取效果最好的一块进行点样。

展开剂：（1）石油醚—丙酮=8:2（体积比）（2）石油醚—乙酸乙酯=6:4（体积比）取活化后的层析板，点样，放入预先选定展开剂的广口瓶。

瓶的内壁贴一张高5cm，绕周长4/5的滤纸，下部浸入展开剂中，盖上瓶盖。

待展开剂上升至规定高度时，取出层析板，晾干，做出标记。

分别用两种展开剂展开，比较不同展开剂的展开效果。

观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。

注意更换展开剂时，需干燥层析瓶，不允许前一种展开剂带入后一系统。

1.2.3 柱层析取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后，挤压除去气泡，放在层析柱底部。

在层析柱中加15cm石油醚。

加入中性氧化铝8克，打开柱下活塞，保持石油醚高度不变，氧化铝在柱子中堆积。

装完后，打开下端活塞，放出溶剂，直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止（不能使氧化铝表面露出液面）。

将浓缩液用滴管加到柱顶部，打开下端活塞，让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞，加数滴石油醚，打开活塞，使液面下降，几次反复，使色素全部进入柱体。

绿叶素的提取实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习从植物叶片中提取叶绿素的方法。

2. 了解叶绿素的性质和功能。

3. 掌握层析技术的基本原理和操作方法。

4. 通过实验，加深对绿色植物光合作用的理解。

二、实验原理叶绿素是绿色植物进行光合作用的重要色素，主要存在于植物的叶绿体中。

叶绿素分子由卟啉环和长链脂质组成，具有亲水和亲脂性。

在提取过程中，利用有机溶剂（如丙酮、乙醇等）可以将叶绿素从植物组织中溶解出来。

层析技术是分离混合物中各组分的一种常用方法，通过不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异，实现分离。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜绿色植物叶片、无水乙醇、丙酮、层析纸、层析缸、滤纸、镊子、剪刀、研钵、研杵、移液管、滴管、天平等。

2. 实验仪器：分析天平、紫外-可见分光光度计、显微镜等。

四、实验步骤1. 准备植物样品：取新鲜绿色植物叶片，洗净、晾干，用剪刀剪成小碎片。

2. 提取叶绿素：将剪碎的叶片放入研钵中，加入适量无水乙醇，用研杵充分研磨，使叶片充分溶解。

3. 过滤：将研磨后的溶液用滤纸过滤，收集滤液。

4. 蒸发溶剂：将滤液倒入蒸发皿中，在通风橱内蒸发溶剂，直至出现固体。

5. 层析分离：将得到的固体溶解于少量丙酮中，用移液管吸取少量溶液滴在层析纸上，待溶剂挥发后，将层析纸放入层析缸中，加入适量丙酮作为流动相，观察层析过程。

6. 观察与记录：观察层析纸上色素带的分布情况，记录色素带的颜色、位置和宽度。

五、实验结果与分析1. 叶绿素提取：通过研磨和过滤，成功从植物叶片中提取出叶绿素。

2. 层析分离：在层析纸上观察到三条明显的色素带，从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素和叶绿素。

3. 叶绿素性质：叶绿素具有绿色，在紫外-可见光范围内有特定的吸收光谱，可被分光光度计检测。

4. 光合作用：叶绿素是光合作用的主要色素，参与光能的吸收和转换。

六、实验讨论1. 叶绿素的提取：在提取过程中，有机溶剂的选择和用量对叶绿素的提取效果有较大影响。

植物生理学实验报告叶绿体色素的提取分离理化性质和叶绿素含量的测定

植物生理学实验报告叶绿体色素的提取分离理化性质和叶绿素含量的测定引言：叶绿体是植物细胞中的一个重要细胞器，其中主要存在着叶绿素等色素，它们在光合作用中起着重要的作用。

研究叶绿体色素的提取、分离、理化性质和叶绿素含量的测定，对于了解光合作用的机理以及研究植物生理生化过程具有重要意义。

本实验旨在通过实验手段提取叶绿体色素，进行色素的分离、理化性质的研究和叶绿素含量的测定。

材料与方法：材料：菠菜叶片、研钵、磨杵、丙酮、乙醇、石油醚、叶绿素提取液、测色皿、高锰酸钾溶液、浓硫酸。

方法：1.取适量菠菜叶片放入研钵中，加入适量丙酮，用磨杵捣碎成糊状。

2.将捣碎的菠菜糊状物转移到玻璃漏斗中，用石油醚冲洗3次，使叶绿体附着物进一步析出。

3.将漏斗中的上清液收集，并加入适量乙醇，振摇混合，使叶绿素慢慢析出。

4.将释放出的叶绿体颗粒通过离心机离心沉淀10分钟，收集沉淀。

5.取收集到的叶绿体沉淀，加入适量叶绿素提取液，用乳钙酸钠解离剂进行叶绿素含量的测定。

6.将其中一部分叶绿体溶液加入高锰酸钾溶液，观察颜色变化。

7.将其余叶绿体溶液与浓硫酸混合，观察颜色变化。

结果与讨论：通过上述方法，我们成功地提取并分离出菠菜叶片中的叶绿体色素。

加入石油醚可以去除一部分杂质，使叶绿体进一步纯化。

加入乙醇可以使叶绿素从叶绿体中溶出。

通过离心沉淀，我们收集到了叶绿体的沉淀物。

叶绿体的提取液与高锰酸钾溶液反应后呈现蓝色或紫色，这是由于高锰酸钾通过氧化反应将一些具有现菌酮结构的物质氧化为合成叶绿素的前体物质所引起的。

这种反应也证实了叶绿体的存在。

叶绿体溶液与浓硫酸混合后呈现蓝绿色，这是由于浓硫酸通过剥离叶绿体周围的蛋白质和其他有机物质，将叶绿素分子释放出来，产生颜色变化。

叶绿素的含量测定是通过与乳钙酸钠解离剂反应来进行的。

乳钙酸钠解离剂能够与叶绿体中的叶绿素结合，并形成稳定的叶绿素-乳钙酸钠络合物。

这种络合物通过光密度的测定，可以根据比色法来测量叶绿素的含量。