总酚含量测定
福林酚法测定总酚含量-操作流程图-实验图解-李熙灿-XicanLi
福林酚法测定总酚含量-操作流程图-实验图解-李熙灿-XicanLi福林酚法测定总酚含量-操作流程图2017.10【安全事项】本实验所⽤的福林酚试剂（或称Folin酚试剂、Folin-Ciocalteu试剂）有严重的腐蚀性。
【测定⽅法与操作流程图】【⽂献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Fl os Chrysanthemi Indici Protects against Hydroxyl-induced Damages to DNA and MSCs via Antioxidant Mechanism: A Chemistry Study. Journal of Saudi Chemical Society, 2015, 19, 454-460【溶液配制】(1)0.25mol/L 福林酚试剂的配制：取原装的福林酚试剂（浓度为2mol/L）2毫升，加蒸馏⽔14毫升，充分混合，得0.25mol/L的福林酚试剂,共16 毫升。
(2)15%Na2CO3溶液的配制：取Na2CO3?10 H2O溶3.0 克，溶于20毫升⽔中，混匀即得。
(3)连苯三酚1标准液的配制：精确称取连苯三酚标准品10毫克．⽤甲醇溶解并定容到50毫升，得0.2毫克/毫升的连苯三酚标准液。
(4)样品液的的配制：精确称取待测样品10毫克．⽤甲醇2溶解并定容到10毫升，得1毫克/毫升的样品液。
【连苯三酚标准曲线的绘制】1本⽂使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使⽤咖啡酸、槲⽪素、⼉茶素、芦丁等作为标准品，绘制标准曲线。
2也可以⽤⽆⽔⼄醇、95⼄醇、⽔，视样品的溶解性⽽度。
图Folin酚法测定多酚含量的标准曲线（以连苯三酚为例,平⾏测三次）（以连苯三酚为例，A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998，线性范围：连苯三酚0.00-0.06毫克/毫升，A值在0.039-1.928之间）。
总酚的测定方法
总酚的测定方法总酚是一种常用的化学指标，用于测定样品中酚类化合物的含量。
酚类化合物广泛存在于自然界和工业生产中，其测定方法的准确性和可靠性对于环境保护、药品研发和工业生产具有重要意义。
总酚的测定方法有多种，下面将介绍其中几种常用的方法。
一、分光光度法分光光度法是一种常用的总酚测定方法。
通过测量样品在特定波长下的吸光度，可以计算出其中酚类化合物的浓度。
该方法简便、快速，并且对于不同种类的酚类化合物具有较好的选择性。
二、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用样品中酚类化合物在固定相上的分离特性，通过检测其在流动相中的峰面积或峰高，可以计算出总酚的含量。
高效液相色谱法具有分离效果好、分析速度快的特点，广泛应用于食品、环境和药品等领域。
三、电化学法电化学法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用电极与样品中的酚类化合物发生氧化还原反应，通过测量电流或电势变化，可以计算出总酚的含量。
电化学法具有灵敏度高、选择性好的特点，广泛应用于环境监测和药品分析等领域。
四、发光法发光法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用特定荧光染料与酚类化合物发生反应产生发光信号，通过测量发光强度，可以计算出总酚的含量。
发光法具有灵敏度高、特异性好的特点，广泛应用于生物医学和环境监测等领域。
总酚的测定方法在实际应用中需要考虑多个因素，如样品的性质、测定的目的和要求等。
在选择合适的测定方法时，需要综合考虑这些因素，以确保测定结果的准确性和可靠性。
总酚的测定方法在环境保护、药品研发和工业生产中具有重要意义。
通过准确测定总酚的含量，可以评估样品的污染程度、药品的质量和工业生产的效果，为相关领域的研究和应用提供科学依据。
总酚的测定方法是化学分析领域的重要内容之一，随着科学技术的不断发展和创新，新的测定方法也在不断涌现。
这些方法的应用将进一步推动总酚分析技术的发展，为环境保护、药品研发和工业生产等领域提供更加精确和可靠的数据支持。
水中总酚含量的测定国标
水中总酚含量的测定国标摘要：一、引言二、水中总酚含量测定的国标方法1.样品采集与处理2.试剂与仪器3.分析步骤4.结果计算与表示三、国标方法的优缺点四、结论正文：一、引言水污染问题日益严重，对人类健康和生态环境造成极大威胁。
其中，水中酚类化合物作为一种常见的有机污染物，其含量的高低直接影响到水质的好坏。
为了保障水质安全，我国制定了水中总酚含量的测定国标方法。
本文将详细介绍水中总酚含量测定的国标方法，以期为水质监测和污染治理提供科学依据。
二、水中总酚含量测定的国标方法1.样品采集与处理样品采集应遵循国家相关规定，确保样品具有代表性。
采集后的水样应尽快进行分析，如不能立即分析，应采取适当措施保存，以免影响测定结果。
水样处理主要包括预处理和净化处理，目的是去除杂质和有害物质，保证测定结果的准确性。
2.试剂与仪器国标方法中涉及到的试剂主要有：硫酸、盐酸、氢氧化钠、氧化剂、萃取剂等。
仪器主要包括：蒸馏装置、滴定仪、光谱仪、pH计等。
3.分析步骤（1）样品预处理：将水样过滤，去除悬浮物和沉淀物；（2）蒸馏：将预处理后的水样进行蒸馏，收集蒸馏液；（3）测定：用氧化剂将蒸馏液中的酚类化合物氧化，然后通过滴定法测定剩余的氧化剂的量，从而计算出水中的总酚含量。
4.结果计算与表示水中总酚含量计算公式为：总酚含量（mg/L）=（V2 - V1）× C / V1，其中V1为滴定过程中消耗的氧化剂体积，V2为空白试验中消耗的氧化剂体积，C为氧化剂的浓度。
测定结果应表示为mg/L。
三、国标方法的优缺点优点：国标方法具有较高的准确度和精密度，能较好地反映水中总酚含量的真实情况。
同时，该方法操作简便，适用于大批量样品分析。
缺点：国标方法对样品的前处理要求较高，对测定人员的技术水平有一定要求。
此外，氧化剂的选择和使用条件较为严格，不合适的水质条件可能导致测定结果偏差。
四、结论水中总酚含量测定国标方法为我国水质监测提供了有效的技术手段。
总酚的测定
样本和咀嚼片总酚（total phenols，TP）的测定
一、测定意义：
酚类物质具有清除自由基，抗氧化衰老的作用，具有较高的营养价值和医疗保健作用，被广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。
二、测定原理：
在碱性条件下，酚类物质能将钨钼酸还原，产生蓝色化合物，在760nm处有特征吸收峰，测760nm处的吸光值，即可得样品总酚含量。
三、试剂盒组成及配置：
提取液：60%乙醇
试剂一：液体6ml✖️1瓶
试剂二：液体15ml✖️1瓶
四、实验仪器：
电子天平，烘箱，量筒，试管，分光光度计
五、实验步骤：
1、提取液的配置
取30ml无水乙醇加20ml蒸馏水配置60%的乙醇提取液。
2、总酚的提取
称取0.1g研碎的试样，加入2.5ml提取液，涡旋混匀10min，静止，取上清液，用提取液定容至2.5ml，待测。
六、总酚含量计算公式：
总酚含量（mg／g）＝0.178✖️（A760➖0.0012）✖️2.5✖️20➗样品质量＝8.905✖️A760➗样品质量
试剂一对皮肤具有一定刺激性，请操作时注意做好防护措施。
饮食安全与健康 教案 葡萄酒中总酚含量的测定方法
饮食安全与健康——葡萄酒中总酚含量的测定方法教学目标：1. 了解葡萄酒中总酚含量的概念及其对人体健康的影响。
2. 掌握葡萄酒中总酚含量的测定方法。
3. 培养学生的实验操作能力和团队协作精神。
教学重点：1. 葡萄酒中总酚含量的测定方法。
2. 实验操作步骤和注意事项。
教学难点：1. 实验操作的准确性和熟练度。
2. 数据分析与处理。
教学准备：1. 实验室器材：移液器、试管、滴定管、分析天平等。
2. 实验试剂：葡萄酒样品、Folin-Ciocalteu 试剂、硫酸铁溶液、碳酸钠溶液等。
3. 教学课件和实验操作视频。
教学过程：一、导入（5分钟）1. 引导学生关注饮食安全与健康问题。
2. 介绍葡萄酒中总酚含量的概念及其对人体健康的影响。
二、知识讲解（10分钟）1. 讲解葡萄酒中总酚含量的测定方法——Folin-Ciocalteu 试剂滴定法。
2. 阐述实验原理和操作步骤。
3. 强调实验注意事项。
三、实验操作（15分钟）1. 学生分组，每组分配实验试剂和器材。
2. 跟随实验操作视频，进行葡萄酒样品的处理和总酚含量的测定。
3. 实验过程中，教师巡回指导，解答学生疑问。
四、数据分析与处理（10分钟）1. 学生将实验数据进行整理和分析。
2. 讨论实验结果，总结葡萄酒中总酚含量与健康的关系。
五、总结与反思（5分钟）1. 学生总结本次实验的收获和不足。
2. 教师对实验情况进行点评，提出改进措施。
教学延伸：1. 邀请葡萄酒行业专家进行讲座，加深学生对葡萄酒的了解。
2. 组织学生进行葡萄酒品鉴活动，提高他们对葡萄酒品质的鉴赏能力。
教学反思：本节课通过讲解和实验操作，使学生掌握了葡萄酒中总酚含量的测定方法。
在实验过程中，学生动手操作能力得到锻炼，团队协作精神得到提升。
由于实验时间有限，部分学生可能未能完全掌握实验操作要领，需要在课后加强练习。
教学中可以引入更多实例，让学生了解葡萄酒中总酚含量对健康的影响，提高他们的饮食安全意识。
紫外分光光度法测定水中总酚的含量
紫外分光光度法测定水中总酚的含量苯酚是工业废水中一种有害物质，如果流入江河，会使水质受到污染，因此在检验饮用水的卫生质量时，需对水中酚含量进行测定。
一、实验目的1．掌握紫外分光光度法测定酚的原理和方法。
2．熟悉紫外分光光度计的基本操作技术。
二、方法原理具有苯环结构的化合物在紫外光区均有较强的特征吸收峰，在苯环上的第一类取代基(致活基团)使吸收更强，而苯酚在270nm处有特征吸收峰，其吸收程度与苯酚的含量成正比，因此可用紫外分光光度法，根据Lambert—Beer定律直接测定水中总酚的含量。
三、仪器与试剂1．紫外分光光度计；2．苯酚标准溶液，250mg/L：准确称0.0250g苯酚于250 mL烧杯中，加去离子水20 mL使之溶解，移入100mL容量瓶，用去离子水稀释至刻度，摇匀。
四、内容与步骤1、标准系列溶液的配置取5支25ml比色管，分别加入1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 mL苯酚标准溶液，用去离子水稀释至刻度摇匀待测。
2．吸收曲线的测量取上述标推系列溶液中任一溶液，用1cm石英比色皿，以溶剂空白作参比，在220～350 nm波长范围内，每5nm测量一次吸光度。
3．标准曲线的测量在苯酚的最大吸收波长(λmax)下, 用1cm石英比色皿，以溶剂空白作参比，测量标准系列溶液的吸光度。
4．水样的测定与测量标准系列溶液的相同条件下，测量水样的吸光度五、数据记录与处理1．列表记录不同波长下同一标准溶液的吸光度值，以吸光度为纵坐标，波长为横坐标绘制吸收曲线，找出λmax，计算其 max。
2．列表记录标冶系列溶液与水样的吸光度，以吸光度为纵坐标，标准系列溶液浓度为纵坐标，绘制标推曲线；根据水样的吸光度查找出其相当的标准溶液的浓度并算出水样中苯酚的含量(g／L)。
六、问题与讨论1．紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同?部件有何异同?。
以没食子酸为对照品 ( FC酚法)总酚的含量测定方法
Folin－ Cioealteu 比色法( FC酚法）一、仪器UV- 2401 PC 型紫外分光光度计;超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司KQ- 2508型) ;恒温水浴锅二、试剂没食子酸标准品; 钨酸钠,磷钼酸, 85%磷酸, Na2 CO3, 以上试剂均为分析纯; 水为蒸馏水。
1.3 福林试剂的配制在250mL的圆底烧瓶内加入20g 钨酸钠、5g 钼酸钠、140mL 蒸馏水，85%的浓磷酸10mL 及浓盐酸20mL，充分混匀，以小火回流10h，再加入3g 硫酸锂及15mL 双氧水，开口继续煮沸15min，待双氧水完全挥发，呈亮黄色。
冷却后移入250mL 容量瓶中，定容置于棕色试剂瓶中，放入冰箱中备用。
1.4 溶液的配制称取40gNa CO3, 溶于200mL 蒸馏水中, 即为20%的溶液。
二、方法与结果1.对照品溶液的制备并绘标准曲线精密称取没食子酸标准品0.0110g，用蒸馏水溶解并定容至100mL，得浓度为0.11mg /mL 的标准液。
准确吸取0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL 置于25mL 的棕色容量瓶中，加蒸馏水至6.0mL，然后分别加入FC 试剂0.5mL，混匀，在0.5～8min内加入1.5mL20% 的Na2CO3溶液，充分混合后定容，30℃避光放置0.5h，以不加标准液的6.0mL 蒸馏水为空白对照，760nm 下测定吸光值，每个样品平行测定三次。
2、供试品溶液的制备样品溶液总酚含量的测定: 准确量取制备好的乙醇粗提液0.5mL 于50mL 容量瓶中，加入9.5mL 蒸馏水，摇匀，再加入0.5mL 福林试剂，混匀，在0.5 ～8min 内加入1.5mL 20%的Na2CO3溶液，充分混合后定容， 30℃避光放置0.5h，以没食子酸标准液为空白对照， 760nm 下测定吸光值，每个样品平行测定6 次(A为6次平行测得的吸光度）。
4、以没食子酸在反应体系中的质量浓度C为横坐标，吸光度值A为纵坐标，绘制标准曲线。
枣叶和酸枣叶的总酚、总黄酮以及抗氧化能力含量测定
枣叶和酸枣叶的总酚、总黄酮以及抗氧化能力含量测定一、本文概述本文旨在测定枣叶和酸枣叶中的总酚、总黄酮含量，并评估其抗氧化能力。
酚类和黄酮类化合物是植物中常见的次生代谢产物，具有广泛的生物活性，如抗氧化、抗炎、抗癌等。
枣树和酸枣树作为常见的果树，其叶片中含有丰富的酚类和黄酮类化合物，因此具有一定的药用和保健价值。
本研究通过化学方法提取枣叶和酸枣叶中的总酚和总黄酮，并采用标准曲线法对其含量进行测定。
通过DPPH自由基清除实验和ABTS 自由基清除实验评估其抗氧化能力。
通过对比枣叶和酸枣叶中总酚、总黄酮含量及抗氧化能力的差异，为进一步开发利用这两种植物资源提供理论依据。
本研究的结果将为枣叶和酸枣叶的开发利用提供重要参考，同时也有助于深入了解植物次生代谢产物的生物活性及其与人体健康的关系。
本研究还将为植物资源的综合利用和农业可持续发展提供新的思路和方法。
二、材料与方法本实验所用的枣叶和酸枣叶采自同一地区、相同生长条件下的健康植株。
采样时间为春季，选择新鲜、无病虫害的叶片，经过清洗、干燥、粉碎后备用。
实验所用试剂包括福林酚试剂、碳酸钠、铝离子试剂、芦丁标准品等，均为分析纯。
实验仪器包括紫外可见分光光度计、电子天平、离心机、恒温水浴锅等。
采用福林酚法测定总酚含量。
取适量样品粉末，加入一定浓度的福林酚试剂，充分反应后，测定吸光度值，根据标准曲线计算总酚含量。
采用铝离子比色法测定总黄酮含量。
取适量样品粉末，加入铝离子试剂，充分反应后，测定吸光度值，根据标准曲线计算总黄酮含量。
采用DPPH自由基清除法测定抗氧化能力。
取适量样品粉末，加入DPPH自由基溶液，充分反应后，测定吸光度值，根据公式计算DPPH 自由基清除率，从而评估样品的抗氧化能力。
实验数据采用Excel软件进行整理与计算，采用SPSS软件进行统计分析。
所有数据均以平均值±标准差表示，不同样品间的比较采用t检验。
通过本实验方法，我们可以对枣叶和酸枣叶的总酚、总黄酮以及抗氧化能力进行定量测定，为深入研究这两种植物的药理活性提供科学依据。
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一、测定方法概述
1.依据酚类物质可以被高锰酸钾氧化的性质，高锰酸钾滴定法
2.酚类化合物在碱性条件下可以与4-氨基安替比林反应生成红色染料，比色
3.酚羟基可与酒石酸铁中的铁离子反应生成蓝色络合物比色
4.酚类物质还原福林试剂生成蓝紫色物质，比色
二、高锰酸钾滴定法测多酚此方法多应用在茶叶上
原理：酚类物质可以被高锰酸钾氧化，烟叶中还有一些酚类衍生物和非酚类物质也可以被高锰酸钾氧化，会使测定结果偏高。
因此滴定须分两步进行：第一步滴定待测液中总还原性物质，第二步用明胶盐溶液将酚类物质沉淀后，测定待测液中其它还原性物质含量，二者之差就是样品中多酚含量。
但是绿原酸不能被沉淀，因此，此法不易用来测定烟草多酚。
0.1%靛红作指示剂。
酚类提取：采用沸水浴方法提取。
三、氨基安替比林比色法
此方法用来测样品中挥发性酚类化合物，常常应用在食品，水等挥发酚的测定。
灵敏度最高高。
原理：酚类化合物在碱性溶液中，当有氧化剂铁氰化钾存在时，可以与4-氨基安替比林生成一种红色染料，用分液漏斗将红色染料萃取到氯仿层，在460nm处比色。
用苯酚作标准曲线，计算出样品中挥发性酚类物质含量。
1此方法酚的提取步骤比较麻烦：
先在2.5mol/L硫酸溶液中加热回流1小时，将样品中中挥发酚提取出来。
通入水蒸气把酚蒸馏出来，收集并定容。
2苯酚腐蚀性强，为结晶体，不好秤取。
3蒸馏装置不能漏气，且所用的橡皮类物质需要事前用碱水浸泡，并水煮10min。
四、酒石酸比色法
原理：酚类物质的羟基与酒石酸铁中的铁离子生成蓝色络合物，根据络合物溶液颜色深浅，在540nm处比色，可测出烟叶中酚类物质含量。
以儿茶酚或没食子酸乙酯作标准溶液。
可以用来测定烟草中的多酚。
此方法酚的提取与福林法测多酚提取步骤一样。
五、福林法测烟叶多酚/总酚
1.原理; 在碱性条件下利用多酚的还原性，多酚可以将磷钨钼酸还原成蓝色，蓝色深浅与多酚含量城正相关，可以用分光广度计进行测定。
2.试剂和仪器：
试剂：儿茶酚或没食子酸乙酯，钼酸钠，磷钨酸，Na2CO3
仪器：水浴锅，721分光光度计，试管，三角瓶，漏斗，滤纸，移液管。
3. 操作步骤：
3.1待测液制备：50mg烟样于150mL三角瓶中，加入80℃蒸馏水50mL，80℃以上温度水浴提取30min（期间需要摇晃几次），取出冷却，过虑并定容至100mL容量瓶中。
此为待测液。
3.2 测定：2支干试管，各加入5ml待测液，一支加福林试剂5ml，一支加5ml代替福林试剂，摇匀3分钟后，各加入5ml10％Na2CO3,振荡，室温下显色1h，以不加福林试剂的试管管为对照，700nm比色。
3.3 绘制标准曲线：
儿茶酚母液：1mg/ml，再依次配制成100ml中含有儿茶酚0.5，1.0，1.5，2.0mg的4种不同浓度的标液。
取5支试管，分别加入上述标液5ml，对照加蒸馏水5ml，然后各加福林试剂5ml，摇匀3分钟后，各加入5ml 10％Na2CO3,振荡，室温下显色1h，700nm比色。
7总酚含量测定参考韩富根的方法，略有改动，
7.1样品处理：取鲜叶0.5g，加3ml 95%乙醇研磨成匀浆状，再加5ml 95%乙醇过滤，用95%乙醇定容至25ml。
以儿茶酚作标准曲线。
7.2样品测定：取2 ml待测液于10ml离心管中，再加入2 ml福林试剂，摇匀，3min后加入10%碳酸钠2 ml振荡。
静置1 h后700 nm处比色测定，以2ml蒸馏水代替待测液作为空白。
根据标准曲线计算总酚含量。
【七种与小麦近缘的野生植物对禾谷缢管蚜抗性的生化机制】
7.3试剂配制
①福林试剂：将钨酸钠25g、磷钼酸5g，磷酸12．5ml同蒸馏水188ml一道回流煮沸2h，冷却后用蒸馏水定容至1L。
②10%碳酸钠溶液：用无水碳酸钠配制，冬季气温低时会析出碳酸钠结晶，可在温水浴上加热溶解后使用。
③酚标准溶液：先配制成100ml含儿茶酚60mg的溶液，再依次配制成100ml中含儿茶酚不同浓度0.5 1.0 1.5 2.0mg
(临用时再配)。
10mg/100ml为母液
标准系列的配置。