毒理学实验
毒理学实验报告

毒理学实验报告实验目的本实验旨在通过毒性实验评估不同物质对生物体的毒性作用,为了解它们对健康和环境的影响提供科学依据。
实验原理毒理学是研究物质对生物体产生有害影响的科学。
毒理学实验可以通过实验动物(如小鼠、大鼠、兔子等)或细胞培养试验来评估物质的毒性。
这些实验以确定剂量-反应关系、急性毒性和慢性毒性等为主要指标。
实验设计本实验设计了以下几个实验组:1.对照组:不暴露于任何物质的实验组,用于比较确定物质对生物体的影响。
2.低浓度实验组:被暴露于低浓度物质的实验组。
3.中浓度实验组:被暴露于中等浓度物质的实验组。
4.高浓度实验组:被暴露于高浓度物质的实验组。
每个实验组采用适当数量的实验动物或细胞进行测试,实验周期为一定时间。
实验过程中记录下实验动物或细胞的生长情况、行为表现和生理指标等数据。
实验步骤1.动物实验:–预先准备好实验动物(如小鼠)并适应实验环境。
–根据实验设计将动物随机分为不同实验组。
–注射不同浓度的物质或通过其他途径让动物接触到物质。
–观察和记录动物在实验期间的行为和生理反应。
–完成实验后,进行动物解剖并采集必要的器官(如肝脏、肺等)样本。
–对样本进行相关分析,评估物质对不同器官的影响。
2.细胞实验:–预先准备好细胞培养试验所需的细胞系。
–根据实验设计将细胞分为不同实验组。
–添加不同浓度的物质到相应实验组的培养基中。
–在一定时间内观察和记录细胞的生长情况、细胞形态和细胞代谢等指标。
–根据实验设计,进行进一步的细胞分析(如细胞凋亡检测、细胞周期分析等)。
–对结果进行统计和数据分析,评估物质对细胞的毒性作用。
实验结果及讨论根据实验数据和观察结果,可以得到以下结论:1.不同浓度的物质对实验动物(或细胞)的生长和行为表现产生不同程度的影响。
2.高浓度物质组对实验动物(或细胞)造成更明显的损害,如生长受限、器官功能异常等。
3.急性毒性指标显示,高浓度物质组的急性毒性作用较低浓度物质组更为显著。
4.慢性毒性指标显示,在长期暴露下,高浓度物质组对实验动物(或细胞)的影响更为明显。
毒理学实验报告

毒理学实验报告毒理学实验报告引言:毒理学是研究毒物对生物体产生的有害效应的科学。
毒理学实验是评估和研究毒物对生物体的毒性的重要手段之一。
本文将介绍一项关于某种化学物质的毒理学实验。
实验目的:本实验的目的是评估化学物质X对小鼠的急性毒性和慢性毒性,并研究其可能的致癌性。
实验设计:1. 急性毒性实验:将实验小鼠分为不同剂量组和对照组,分别给予不同剂量的化学物质X。
观察小鼠在给药后的行为、体重变化、死亡情况等指标,以评估化学物质X的急性毒性。
2. 慢性毒性实验:将实验小鼠分为长期接触组和对照组,长期给予化学物质X。
观察小鼠在长期接触后的行为、体重变化、器官病变等指标,以评估化学物质X的慢性毒性。
3. 致癌性实验:将实验小鼠分为不同剂量组和对照组,长期给予化学物质X。
观察小鼠在长期接触后的肿瘤发生情况,以评估化学物质X的致癌性。
实验结果:1. 急性毒性实验结果显示,高剂量组的小鼠在给药后出现明显的中毒症状,如食欲减退、运动能力下降等。
部分小鼠在给药后短时间内死亡。
低剂量组的小鼠则没有出现明显的中毒症状,但体重增长速度较对照组较慢。
2. 慢性毒性实验结果显示,长期接触化学物质X的小鼠在行为上出现明显的异常,如活动减少、毛发脱落等。
体重增长速度较对照组明显减慢。
解剖观察发现,部分小鼠出现肝脏、肾脏等器官的病变。
3. 致癌性实验结果显示,长期接触高剂量化学物质X的小鼠中出现了肿瘤的发生。
肿瘤种类包括肺癌、肝癌等。
低剂量组和对照组的小鼠中未观察到肿瘤的发生。
讨论:根据实验结果,可以得出以下结论:1. 化学物质X对小鼠具有急性毒性和慢性毒性。
高剂量给药会导致小鼠出现明显的中毒症状和死亡,低剂量给药会导致小鼠体重增长速度减慢。
2. 长期接触化学物质X会引起小鼠行为异常、体重减慢和器官病变。
这表明化学物质X对小鼠的慢性毒性较明显。
3. 长期接触高剂量化学物质X会增加小鼠发生肿瘤的风险,表明化学物质X可能具有致癌性。
结论:本实验结果表明,化学物质X对小鼠具有急性毒性、慢性毒性和致癌性。
毒理学实验技术总结

毒理学实验技术总结毒理学是一门研究外源化学物、物理因素和生物因素对生物体产生有害作用的科学。
而毒理学实验技术则是研究这些有害作用的重要手段。
通过一系列的实验操作和观察,我们能够评估物质的毒性、确定安全剂量范围,为保护人类健康和环境安全提供科学依据。
接下来,让我们详细了解一下毒理学实验技术。
一、急性毒性实验急性毒性实验是毒理学中最常见的实验之一,其目的是测定化学物质在短时间内(通常为 24 小时至 14 天)对生物体造成的损害。
实验通常采用两种方法:经口急性毒性实验和经皮急性毒性实验。
经口急性毒性实验是将化学物质以特定的剂量灌胃给予实验动物,然后观察动物在短期内出现的中毒症状和死亡情况。
通过计算半数致死剂量(LD50)来评估物质的毒性强度。
LD50 越小,说明物质的毒性越强。
经皮急性毒性实验则是将化学物质涂抹在动物的皮肤上,观察其对皮肤的刺激性以及可能产生的全身性毒性反应。
在进行急性毒性实验时,需要严格控制实验条件,包括实验动物的种类、年龄、体重、性别等,以及化学物质的给予方式和剂量。
同时,要对实验动物进行密切观察,记录其症状出现的时间、严重程度和持续时间等。
二、亚慢性和慢性毒性实验与急性毒性实验不同,亚慢性和慢性毒性实验的观察周期较长。
亚慢性毒性实验的观察期通常为 90 天左右,而慢性毒性实验则可能持续一年甚至更长时间。
这些实验旨在评估化学物质在长期低剂量暴露下对生物体产生的潜在危害,如对器官功能的影响、致癌性、致畸性等。
实验过程中,需要定期监测实验动物的体重、饮食、行为、血液生化指标等,并在实验结束时对动物进行解剖,检查各个器官的病理变化。
三、遗传毒性实验遗传毒性实验用于检测化学物质对生物体遗传物质的损害作用,包括基因突变、染色体畸变和 DNA 损伤等。
常见的遗传毒性实验方法有:1、细菌回复突变实验(Ames 实验):通过检测化学物质对细菌基因突变的诱导作用,来评估其遗传毒性。
2、微核实验:观察细胞中微核的形成,以判断化学物质是否导致染色体损伤。
常用的毒理学研究方法

常用的毒理学研究方法一。
毒理学研究那可是关乎咱们生命健康的大事儿!要搞清楚各种物质对咱们身体的影响,就得靠一系列靠谱的研究方法。
1.1 动物实验。
这可是毒理学研究的老把式啦!把小动物们,像小白鼠、兔子啥的,拿来做实验。
给它们喂不同剂量的东西,看看会有啥反应。
比如说,会不会生病、器官有没有损伤。
这就像咱们打仗前的侦察兵,先探探路,了解个大概。
但也有个问题,动物和人总归不是完全一样,有时候结果不能完全照搬到人身上。
1.2 细胞实验。
在实验室里培养一堆细胞,让它们接触要研究的东西。
看看细胞会不会死啦、功能会不会出问题。
这就好比在微观世界里搞侦查,能更细致地了解那些物质是咋捣乱的。
细胞毕竟不是一个完整的生命体,也有局限性。
二。
2.1 流行病学调查。
这就得上大街、进社区,找真正接触过那些可能有毒物质的人来研究。
看看他们的健康状况和接触的东西有没有关系。
这就像从现实生活中抓“真凶”,直接、实在。
但要搞清楚因果关系,可不容易,干扰因素太多啦。
2.2 体外替代实验。
现在科技发达了,有了不少新招。
比如用计算机模拟、用器官芯片啥的。
不用真的动物和人,也能猜猜那些东西可能有多毒。
这是在创新的路上大步走,不过新技术还得不断完善,才能让人更放心。
2.3 毒物代谢研究。
得弄清楚那些有毒的玩意儿进了身体后,是咋被处理的。
是被分解啦、排出去啦,还是留在身体里捣乱。
这就像追踪敌人的行踪,知己知彼,才能百战百胜。
三。
3.1 联合应用。
别指望一种方法能解决所有问题,得把几种方法结合起来。
就像打组合拳,威力更大。
互相补充、互相验证,这样得出的结果才更靠谱。
3.2 未来展望。
毒理学研究这路还长着呢,随着技术进步,肯定会有更多更好的方法出现。
咱们得紧跟时代步伐,不断创新,为保护大家的健康出更多力!毒理学研究就像是一场和毒物的战斗,咱们得用各种武器和战术,才能打赢这场保卫健康的战争!。
毒理学实验操作规程

毒理学实验操作规程一、实验目的毒理学实验的目的是评估化学物质、生物制剂、物理因素等对生物体的潜在有害影响,为制定安全标准、环境保护政策、药物研发和风险评估提供科学依据。
二、实验准备(一)实验动物的选择根据实验目的和研究对象的特点,选择合适的动物种类、品系、年龄、性别和体重。
常用的实验动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔子等。
实验动物应来自具有资质的供应商,并经过检疫和适应性饲养。
(二)实验动物的饲养环境提供适宜的饲养条件,包括温度、湿度、光照周期、通风和清洁卫生。
动物笼具应定期清洗和消毒,给予充足的饮水和营养均衡的饲料。
(三)实验试剂和仪器准备所需的化学试剂、药品、标准品等,确保其质量和纯度符合实验要求。
同时,检查和校准实验所需的仪器设备,如移液器、离心机、分光光度计、显微镜等。
(四)实验人员的培训实验人员应接受毒理学相关知识和实验操作技能的培训,熟悉实验流程、安全注意事项和应急预案。
三、实验设计(一)剂量设计根据预实验结果或相关文献资料,确定合适的剂量范围和剂量组。
通常包括低剂量组、中剂量组和高剂量组,有时还设置对照组。
(二)给药途径根据研究对象的性质和实际应用情况,选择合适的给药途径,如口服、腹腔注射、静脉注射、吸入、皮肤涂抹等。
(三)观察指标确定全面、敏感和特异性的观察指标,包括动物的一般状况(如外观、行为、饮食、体重等)、生理指标(如体温、血压、心率等)、生化指标(如肝肾功能、血液学指标等)、组织病理学检查等。
(四)实验周期根据实验目的和观察指标的变化特点,确定合理的实验周期。
急性毒性实验一般为数小时至数天,亚慢性和慢性毒性实验则可持续数周、数月甚至数年。
四、实验操作流程(一)动物分组和标记将实验动物随机分组,每组动物数量应根据实验要求和统计学原则确定。
采用适当的标记方法对动物进行个体标识,如耳标、染色、纹身等。
(二)给药操作按照预定的给药途径和剂量,准确地给予实验动物受试物。
给药过程中应注意操作的规范性和准确性,避免药物损失和交叉污染。
第十章-毒理学实验基础

(2)人和实验动物的生物学过程包括化 学物的代谢,与体重或体表面积相关。
2. 实验动物必须暴露于高剂量,这是发 现对人造成潜在危害的可靠方法。
3. 染毒途径的选择,应尽可能模拟人接 触该受试物的方式
毒理学实验的局限性
--动物实验结果外推到人的不确定性
(2)组织病理学检测.
八、毒理学实验的统计学基础
• 统计学要点: 实验设计遵循原则:随机、重复、对照. 包括: (1)剂量水平数目及间隔; (2)每个剂量点的实验单位数,实验单位确定要
保证样本的独立性、代表性; (3)对照设置; (4)非实验因素条件的均一性:样本足够数量、
适当重复、盲法观察等。 结果统计分析:方法选择,可用不同方法处理.
第十章 毒理学实验基础
一、毒理学实验的原则 二、毒理学实验的目的 三、实验动物的选择和处置 四、剂量设置和对照 五、结果处理
教学目标
• 1.掌握食品毒理学实验的原则和局限性 • 2.掌握实验动物选择的基本原则 • 3.掌握食品毒理学实验设计的三大原则 • 4.了解量反应资料和质反应资料的统计方法
一、毒理学实验的原则和局限性
二、毒理学实验的目的
1. 受试物毒作用的表现和性质(描述毒理学) 在急性或慢性实验中观察动物异常,发现有害 作用
1. 剂量-反应(效应)研究 参毒通数性过和评动剂以价物量期和对-评安反外价全应源化性(化学评效学物价应物对的)的人基线毒的础的性危;斜反害得率应和到,危多向险种人性毒外性推,
1. 确定毒作用的器官 阐明毒作用特点,为机制研究和毒性防治提供
• refinement优化:必须 使用动物时,减少非人道 程序的影响
《毒理学实验基础》课件
通过统计图表(如柱状图、折线图、散点 图等)直观地展示实验数据和分析结果。
05
毒理学实验的应用与展望
毒理学实验在药物研发中的应用
药物安全性评价
毒理学实验是药物研发过程中评 估药物安全性的重要手段,通过 动物实验观察药物对机体的毒性 作用,为新药上市提供安全性依
据。
药物作用机制研究
毒理学实验可以帮助研究药物的 作用机制,了解药物在体内的代 谢、转化和毒性作用机制,为新
生态风险评估
毒理学实验可以帮助评估人类活 动对生态环境的潜在风险,预测 污染物对生物多样性和生态平衡 的影响,为环境保护和可持续发 展提供支持。
环境修复与治理
毒理学实验可以用于环境修复与 治理过程中,研究生物修复技术 的有效性,评估治理措施对环境 的影响,提高环境治理的效果。
毒理学实验的发展趋势与展望
实验动物的选择
实验动物种类
01
选择适合的实验动物种类,如小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等,以
满足实验需求。
实验动物品系
02
根据实验目的和要求,选择不同品系的实验动物,以确保实验
结果的准确性和可靠性。
实验动物年龄与性别
03
根据实验目的和要求,选择不同年龄和性别的实验动物,以确
保实验结果的准确性和可靠性。
染毒方法与途径
盲法原则
实验过程中应保持盲态,避免主观偏见对实 验结果的影响。
实验数据的收集与整理
数据记录
准确、完整地记录实验数据,包括实验对象的基本信息、实验条件、观察指标等。
数据整理
对实验数据进行分类、排序、筛选等处理,使其更易于分析和解释。
数据核对
对实验数据进行核对,确保数据的准确性和完整性。
数据保密
毒理学实验
毒理学实验毒理学实验是一项重要的科学研究方法,用于评估化学物质对生物体的毒性。
通过实验可以了解化学物质对人体的潜在危害以及其对环境的影响,从而制定相应的防护措施和规定。
本文将介绍毒理学实验的基本原理、常见的实验设计和评估方法,并探讨其在毒理学研究中的应用。
毒理学实验的基本原理:毒理学实验是通过将动物或细胞系统暴露于不同剂量的化学物质中,观察其对生物体造成的伤害和影响来评估其毒性。
实验中通常包括急性毒性、亚慢性毒性和慢性毒性等不同类型的实验。
常见的实验设计:1.急性毒性实验:该实验通过口服、注射或吸入等途径将化学物质暴露给动物,观察其可能导致的突发反应和致死效应。
实验通常在短时间内完成,并根据动物的反应判断化学物质的急性毒性。
2.亚慢性毒性实验:该实验通过连续或间歇地将化学物质暴露给动物一段较长时间,观察其对生物体各个器官和系统的影响。
实验通常持续几周或几个月,并通过检测血液生化指标、器官病变和行为变化等来评估化学物质的亚慢性毒性。
3.慢性毒性实验:该实验通过长期暴露动物或细胞系统于化学物质,观察其对生物体的长期影响。
实验通常持续数月至数年,并通过观察癌症发生率、器官功能变化等来评估化学物质的慢性毒性。
评估方法:1. LD50(半致死量):通过给动物不同剂量的化学物质,观察其在一定时间内造成50%动物死亡的剂量,从而评估其急性毒性。
2.组织病理学:通过组织切片和显微镜观察,评估化学物质对动物器官和组织结构的病变情况。
3.血液生化指标:通过检测动物体内的生物标志物,如肝功能指标、肾功能指标等,评估化学物质对生物体各个系统的影响。
4.外部观察和行为测定:通过观察动物的外貌和行为变化,评估化学物质对其行为、神经系统的影响。
毒理学实验在毒理学研究中的应用:1.安全评估:毒理学实验可用于确定化学物质的安全剂量和无效剂量范围,从而为制定相关安全规定和生产标准提供科学依据。
2.毒性机制研究:通过毒理学实验可以了解化学物质对生物体的具体作用机制,从而推测其毒性途径和潜在的毒性效应。
毒理学实验报告
毒理学实验报告毒理学是研究毒物对生物系统的毒性效应的学科。
在本次实验中,我们选择了常见的某种毒物进行实验,以观察毒物对实验动物的毒性作用及影响,从而了解其毒性机制并为安全用药提供参考。
实验方法:首先,我们选取实验动物作为研究对象,将其分为实验组和对照组。
实验组动物接受一定浓度的毒物处理,而对照组则不受任何处理,以便对比观察。
在实验过程中,我们严格按照实验室安全操作规范进行,以确保实验的准确性和可靠性。
接下来,我们对实验动物进行一系列生理、行为、病理等方面的观察和检测。
记录实验动物在毒物处理后的反应情况,包括食欲、运动、体重变化等,并定期进行血液化验、组织切片检测等。
通过这些观察和检测,我们可以初步了解毒物对实验动物的毒性效应。
实验结果:经过一段时间的观察和检测,我们得出了如下实验结果:1. 实验组动物在接受毒物处理后出现明显的生理或行为异常,如食欲下降、运动减少等。
而对照组动物则未出现这些异常情况。
2. 实验组动物的血液化验结果显示,某些生理指标出现异常,如白细胞计数降低、血红蛋白含量下降等。
这些异常指标反映了毒物在实验动物体内的毒性作用。
3. 组织切片检测结果显示,实验组动物的部分器官组织结构发生了变化,如肝脏出现坏死现象、肾脏功能受损等。
这进一步证明了毒物对实验动物的毒性影响。
结论:通过本次毒理学实验,我们验证了所选毒物的毒性效应,从而可以得出以下结论:1. 某种毒物对实验动物的毒性作用明显,可能导致生理功能障碍或器官损伤。
2. 在使用该毒物时,应该严格控制剂量和使用方法,以减少潜在的毒性风险。
3. 进一步研究该毒物的毒性机制,可以为毒物识别、防范和治疗提供重要依据。
总结:毒理学实验是了解毒物毒性效应的重要手段,通过本次实验,我们对某种毒物的毒性作用有了初步了解。
未来,我们将进一步深入研究该毒物的毒性机制,为保障人类健康和安全提供更多科学依据。
希望通过我们的努力,毒物的安全使用和管理能够得到更好的保障和促进。
毒理学实验
七、毒理学实验(一)、急性毒性试验的定义、目的和意义急性毒性试验,又称单次给药急性毒性实验,是指在24h内一次或多次给予动物受试物后,所产生的毒性反应。
(二)、基本内容和技术要求1、实验动物可根据不同情况选用不同的实验动物,例如大鼠、小鼠、犬。
本实验随机选用健康成年的12只大鼠和12只小鼠,要求雌雄分别对半,动物初始体重不超过或低于平均体重的20%。
2、给药途径由于本品为浓缩丸,因此选用口服进行实验。
给药前将实验动物禁食24h。
3、给药剂量将大鼠和小鼠分别两只一组,分大鼠6组,小鼠6组。
然后编号。
分剂量0g/kg,1g/kg,2g/kg,3g/kg,4g/kg,5g/kg对小鼠和大鼠进行灌胃口服,20ml/kg。
然后观察小鼠反应。
一般认为口服5g/kg时未见急性毒性或死亡,可不必提高剂量进行实验。
4、观察时间及指标给药后几小时内应严密观察动物反应,之后每天上下午各观察一次,至少连续观察14d。
5、在口服给药24h后,如果没有实验动物死亡,则每组各选一只动物进行病理组织学检查;如果有动物死亡,则将死亡动物和未死亡的动物小组中选一只动物进行病理学检查。
6、实验动物临床表现与器官系统的关系急性毒性试验一般指征观察参考表(三)、长期毒性实验实验要求和内容1、实验药品要求选用符合相关制剂要求的同一批药品。
2、实验动物选用正常、健康、雌雄各半和动物体重应在平均体重的20%之内的成年各20只大鼠和小鼠。
将每种动物平均分四组,分别为高、中、低、和对照组。
3、实验动物饲养按照动物室正常标准进行饲养。
4、药物剂量根据相应动物急性毒性的最大无症状剂量(MTD)、1/3MTD、1/10MTD 分别设高中低三个剂量。
对照组为空白对照。
5、给药方法将药物加入到饲料中,依据确定的量进行。
6、给药时间给药6个月。
7、观察指标(1)一般指标实验动物的体重,和解剖后相关脏器的重量。
每周固定时间测1次大鼠体重及摄食量,试验期间详细观察大鼠一般状况,包括外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便等,必要时应测定大鼠饮水量。
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卫生毒理学实验所必需的基本理论知识
(一)实验动物的选择
1.实验动物种属与品系的选择:实验动物种属的选择原则是:对外来化学物的毒作用反应与人类一致,易于获得,易于品系纯化,易于饲养、管理,便于操作,价格合理。
为了有利于预测化学物对人体的毒性作用,通常要求选择二种或二种以上的实验动物,如一种为啮齿类,一种为非啮齿类.
2.实验动物个体的选择:(1).年龄:急性实验一般选用成年动物,慢性实验多选用年幼动物。
(2).性别:如无特殊要求,宜选用雌雄各半。
实验动物(以大、小鼠为例)性别的辨认方法是:大鼠与小鼠主要依肛门与生殖孔的距离区分。
间距大者为雄性,小者为雌性。
成年雌性在腹部还可见乳头,雄性动物卧位时可见到睾丸。
(3).体重:小鼠:18~25g,大鼠:180~240g,组内个体间体重差异应小于10%,各组间平均体重差异不应超过5%。
(4).健康状况:实验动物必须是健康的.健康的标志是:健康动物外观为体型丰满,发育正常,被毛浓密有光泽,紧贴体表,眼睛明亮,行动迅速,反应灵活,食欲与营养状况良好。
(5).生理状况:一般毒理实验中,通常不用怀孕或授乳的动物,但在某些特殊的毒理实验则必须选择。
一般实验中常将雌雄分笼饲养。
(6).数量:依实验的目的及满足统计学要求来确定数量。
(二)实验动物的编号与分组:编号:(1)染色法:可用苦味酸或品红 (2)剪耳法
2.随机分组为了得到客观的剂量—反应关系,应将一群动物依据统计学原随机分配到各试验组中,可按随机数目表方法随机分组。
:
设30只雄性动物平均分成A、B、C、D、E、F六组,每组5只动物。
将已称重编好号的动物,依号码用随机数目表分配(随机数目表见表3)。
如随机数目表第二行,从第一个数目开始,依次抄下30个数目(依横行、纵行、甚至斜行抄录均可)。
将各数目一律以组数6除,以余数1、2、3、4、5、0代表应分配于A、B、C、D、E、F各组的动物,结果如下表(从第二行随机数表开始)。
表1 动物随机分组表
动物号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
随机数目 97 74 24 67 62 42 81 14 57 20 42 53 32 37 32
除6余数 1 2 0 1 2 0 3 2 3 2 0 5 2 1 2
归组 A B F A B F C B C B F E B A B
动物号 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30
随机数目 27 07 36 07 51 24 51 79 89 73 16 76 62 27 66
除6系数 3 1 0 1 3 0 3 1 5 1 4 4 2 3 0
归组 C A F A C F C A E A D D B C F
按上法分组后,A组有动物7只,B组7只,C组6只,D组与 E组各2只,F组6只。
为使各组动物数均达到5只,再依随机分配原则选A组2只,C组1只给D组。
B组选2只, F组选1只给B组。
继续抄下随机数字分别除以A、 B、 C、F各组动物数。
计算如下,56/7除尽,即将A组第7只动物(25号)给D组;再下50/6,余数为2,即将A组第2只动物(4号)给D组;再下26/6余数为2,即将C组第2只动物(9号)给D组。
余类推,最后调整归组如下表(表2):
雌性动物也依上法分组,然后将雌、雄动物合组进行实验
表2 30只小鼠随机分组
组别鼠号
A 1 14 17 19 23
B 5 8 10 8 15
C 7 6 20 22 29
D 4 9 25 26 27
E 2 6 12 24 28
F 3 11 18 21 30
(三)实验动物染毒方法:实验中需要由何种途径染毒,则依毒物的形态(气体、液体或粉尘等)、实验的目的、毒物的性质及其作用特点和该物质的用途等因素而定。
常用的染毒方法(1).灌胃法:染毒剂量能够准确掌握,操作也不太复杂,多用于急性、亚急性实验。
灌胃应当在动物空腹时进行且一次灌胃量一般不应超过动物体重2-3%。
小(大)白鼠灌胃:用左手将小白鼠固定(用布包好大鼠,左手抓大鼠背侧包布固定),尽可能使小(大)鼠呈垂直体位,右手持连接好注射器的针头,使弯曲面向腹侧,将针头对准正中线插入口腔,沿咽后壁中线徐徐向后向下插入,切不可偏斜,遇有阻碍则后退稍许,再徐徐进针,一般插入约2-2.5cm(3-4cm)即可到达食道下端。
此时可将注射器向外抽去,如无气体抽出,则可确证针头已插入食道中,即可将一定量毒液注入;如有大量气泡抽出则证明针头插入气管,须立即拔出针头,重插。
(2).喂饲法(3). 静式染吸入毒(4).动式吸入染毒(5).腹腔注射染毒:吸收很快,操作也较简便,在急性实验中比较研究某些物质的毒性或实验治疗研究中有时采用。
大、小白鼠腹腔注射:左手拇指及食指提起鼠耳及头后皮肤,以无名指及小指将鼠尾捏在手掌间,使鼠头部略向下,腹部朝上,右手持接有5号针头的注射器,将针头自腹部下外侧向头部方向水平刺入少许,再该为垂直向深部刺入腹腔,抽动注射器针芯,如无回血及尿液,即可注射。
(6).皮下注射染毒:大、小白鼠皮下注射部位可为颈后、两肩胛骨之间或腹部皮肤。
左手持镊子或用拇食二指夹起皮肤,右手持注射器水平刺入皮下,回抽针芯如无回血,即可注入。
如局部部位隆起,即证明已注入。
采血的主要方法:(1)大、小鼠的剪尾采血 (2)静脉取血法如兔耳缘静脉,大鼠尾静脉等。
(3)后眼眶静脉丛取血法操作者以左手拇、食两指紧紧握住大鼠或小鼠颈部压迫颈部两侧使眶后静脉丛充血,但用力要恰当,以防止动物窒息死亡。
右手持玻璃毛细管从右眼或左眼内眦部以45°角刺入,捻转前进,如无阻力可继续刺入,有阻力就抽出玻璃毛细血管调整方向后再刺入,直至出血为止。
右手持容器收集血液。
然后拨出毛细管,用干棉球压迫止血。
(4)抠眼球采血法(又称眶动脉或眶静脉采血)(5)动脉取血法(6)心脏穿刺取血法 (7)断头采血
急性毒性试验的目的:求出致死剂量及其他急性毒性参数;观察中毒表现、毒作用强度和死亡情况,初步评价毒物的毒效应特征 ;为其他毒理试验提供接触剂量和选择观察指标的依据;为毒理学机制研究提供线索急性毒作用带:Zac=LD50/Limac
LD50计算
改进寇氏法要求:
(1)各组n要一致,组距等比。
(2)死亡率呈正态分布。
(3)最低剂量组死亡率<20%, 最高剂量组死亡率>80%。
改进寇氏法计算公式:
logLD50 =m=Xk-i(∑p-0.5)
Sm=
Xk---最高剂量组对数值;
∑p---死亡率总和; q---1-p ; i---相邻两组剂量对数值之差 ; n---每组动物数
X = log-1 (logLD50 + 1.96 S logLD50) 或者 X = log-1 (m + 1.96 Sm)
致突变作用:广义概念是外来因素,特别是化学因子引起细胞核中的遗传物质发生改变的能力,而且此种改变可随同细胞分裂过程而传递。
简单地说,突变的发生及其过程即为致突变作用
致突变物:凡能引起生物体遗传物质发生改变的化学物质或任何环境因子,又称诱变剂。
遗传毒物;由于致突变物能损伤遗传物质,因此致突变物又称为遗传毒物。
观察效应终点的类型:
(1)DNA完整性改变 (2)DNA重排或交换 (3)DNA碱基序列改变(基因突变)
(4)染色体完整性改变(染色体畸变) (5)染色体分离改变(非整倍体和多倍体)
遗传学终点现象致突变试验
DNA完整性的改变形成加合物/断裂/交联细菌DNA修复试验
彗星试验
DNA重排或交换DNA修复合成、重组SCE试验
DNA碱基序列改变基因突变Ames试验
染色体完整性改变染色体受损断裂等微核试验, 染色体畸变分析
染色体分离改变整倍体或非整倍体微核试验、染色体畸变分析
Ames试验
原理:检测受试物诱发鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型突变株(his-)回复突变成野生型(his+)的能力。
即组氨酸突变菌(his-) 在不含组氨酸的最低营养平皿上不能生长;回复突变成野生型(his+),可在不含组氨酸的最低营养平皿上生长。
❖是应用最广泛的检测基因突变的体外试验。
微核实验:是用于染色体损伤和干扰细胞有丝分裂的化学毒物的快速检测方法。
微核是细胞内染色体断裂或纺锤丝受影响在细胞有丝分裂后期滞留在细胞核外的遗传物质。
致畸试验:是评价化学物质是否具有致畸作用的一种传统标准方法,即通过在器官形成期对妊娠动物染毒,在妊娠末期观察胎仔有无发育障碍和畸形来评价受试物致畸作用的方法。
致畸试验的头部检查:(四片刀法)切面1:经口沿舌上经耳后做一切面,检查上颚有无腭裂,有无舌缺失,裂舌或舌分叉。
切面2:切下颅顶部沿双眼球前沿垂直做额状切面,检查鼻道有无扩大或单鼻道,鼻中隔是否正常等。
切面3:沿双眼球正中垂直作第二个额状切面,检查是否存在少眼,小眼,无眼或异位等。
切面4;沿双眼球后沿垂直做第三个额状切面检查有无脑室扩大。