分子生物学原理--基因工程

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生物学优质课分子生物学与基因工程

生物学优质课分子生物学与基因工程

生物学优质课分子生物学与基因工程生物学优质课:分子生物学与基因工程随着科学技术的不断发展和进步,生物学作为一门重要的学科,经历了许多重大的突破和变革。

其中,分子生物学与基因工程作为生物学的重要分支,对于人类和其他生物的研究具有广泛的意义和影响。

本文将以分子生物学与基因工程为主题,探讨其在生物学领域的重要性和应用。

一、分子生物学的基本原理分子生物学是研究生物体内各种生物分子(如DNA、RNA和蛋白质等)的结构、功能和相互作用的学科。

它通过研究生物体内的基因组成、蛋白质合成和代谢途径等方面,揭示了生命活动的分子基础。

人们通过对分子生物学的研究,不仅可以深入了解生命现象的本质,还可以为基因工程和生物技术的发展提供理论支持。

二、基因工程的概念与应用基因工程是通过操作和改变生物体内的基因来实现对其性状的改良和调控的技术。

它充分利用了分子生物学的原理和技术,可以对生物体内的基因进行修改和调整,从而产生预期的目标物质或性状。

在生物农业、医学、工业以及环境保护等领域,基因工程的应用非常广泛。

例如,转基因作物的培育可以提高作物的抗病虫害能力和产量;基因治疗可以用来治疗遗传性疾病和某些癌症等。

三、分子生物学与基因工程在医学领域的应用分子生物学和基因工程在医学领域的应用非常丰富多样。

通过分子生物学技术,人们可以检测和诊断疾病的基因突变,以及寻找新的疾病标志物。

同时,基因工程技术也为疾病的治疗和预防提供了新的思路和方法。

例如,基因治疗可以用于修复受损的遗传物质,为某些无法根除的疾病提供治愈的可能。

四、分子生物学与基因工程在生物农业领域的应用在生物农业领域,分子生物学和基因工程的应用可谓广泛而深入。

通过合成新的基因组合,科学家们成功培育了许多具有抗虫、抗病和耐逆性等特点的转基因作物。

这些转基因作物具有更高的产量和更好的品质,为解决全球粮食安全等问题提供了重要的途径和手段。

五、分子生物学与基因工程在环境保护领域的应用除了在农业和医学领域,分子生物学和基因工程也在环境保护中发挥着重要的作用。

基因工程的主要技术原理

基因工程的主要技术原理

基因工程的主要技术原理基因工程是一种利用现代分子生物学和生物化学技术来对生物体进行基因组的修改、操作和调控的技术。

它的主要技术原理涉及到以下几个方面:1.DNA重组技术:DNA重组是基因工程的核心技术之一、它通过切割不同生物体中的DNA片段,然后重新组合、连接,将特定的基因或基因片段导入到目标组织、细胞或生物体中。

DNA重组技术包括PCR、限制酶切、DNA连接等。

2.遗传转化技术:遗传转化是将外源DNA导入目标生物细胞或组织中的过程。

常用的转化方法包括细菌的转化、植物的遗传转化以及动物细胞的转染等。

3.基因克隆技术:基因克隆是指通过复制DNA片段来得到多个完全相同的基因分子或有关基因分子的方法。

基因克隆包含了DNA提取、DNA扩增、DNA定序等技术。

5.选择标记技术:为了辅助识别和选择已经被转化的细胞或生物体,常常需要在外源基因上引入选择标记基因。

选择标记基因通常携带特定抗性或基因标记,如抗生素抗性基因或荧光蛋白基因。

6.基因表达调控技术:为了使外源基因在目标生物体中得到高效表达,常需对其进行适当调控。

基因表达调控技术包括启动子的选择、转录因子的调控、信号通路的调节等。

7. 基因测序技术:基因测序是确定DNA序列的方法,可用于分析基因组结构、功能和演化。

目前,最主要的基因测序技术是高通量测序技术,如Illumina测序技术和PacBio测序技术。

8.产生转基因生物技术:基因工程的一个重要应用是产生转基因生物。

转基因生物是指通过基因工程技术将外源基因导入到目标生物体中,使其获得新的性状或功能。

常见的转基因生物包括转基因植物、转基因微生物等。

以上是基因工程的主要技术原理。

随着科学技术的不断进步,基因工程技术将进一步发展和应用,为解决人类面临的许多生物学和医学问题提供更好的解决方案。

分子生物学——原理与技术

分子生物学——原理与技术

分子生物学——原理与技术分子生物学是现代生物学中的一门重要科学,研究生物体的分子结构、功能和相互作用。

它是以DNA、RNA、蛋白质等重要分子为研究对象,探究它们的生物学意义,是基因工程和生物技术的理论基础,也是解决很多现代生物医学问题的关键。

一、 DNA、RNA和蛋白质分子生物学的研究对象包括DNA、RNA和蛋白质三种重要分子,这三种分子在细胞中各自发挥着至关重要的作用。

1. DNADNA(Deoxyribonucleic acid,脱氧核糖核酸),是构成基因的物质,是决定遗传信息及其表达的物质基础。

它由四种不同的碱基组成,分别是腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、鸟嘌呤(C)和胞嘧啶(G)。

DNA的结构像一条双链,两条链通过碱基互补配对而保持高度的稳定性和准确性,即A氢键与T 碱基配对,C氢键与G碱基配对。

2. RNARNA(Ribonucleic acid,核糖核酸),具有多种功能,如携带遗传信息、参与蛋白质合成、调节基因表达等等。

RNA的组成与DNA相似,同样由四种碱基组成,区别在于RNA中的胸腺嘧啶(T)被尿嘧啶(U)替代,且RNA是单链分子,而不是DNA的双链。

3. 蛋白质蛋白质是生物体内最重要的有机分子之一,也是分子生物学研究的重点之一。

蛋白质通过氨基酸的序列组成,不同的氨基酸序列决定了不同的功能和空间结构。

蛋白质在细胞中扮演着重要的角色,如酶催化反应、维持细胞结构、参与信号传导等等。

二、分子生物学基础技术分子生物学的研究方法主要包括分离、纯化、检测和克隆等技术手段。

下面就一些典型的实验方法进行说明:1. DNA分离与纯化方法(1)酚-氯仿:利用酚(Phenol)和氯仿(Chloroform)进行分离。

由于DNA对极性较弱,所以可以在酚-水界面处沉淀下来,然后利用氯仿分层,最后从水层中分离DNA。

(2)膜过滤:膜过滤法是利用孔径不同的膜进行分离纯化DNA。

一般使用微孔聚丙烯膜,按孔径大小可分为A、B、C三种不同的型号。

第3章 基因工程 期末复习知识点总结【新教材】人教版高中生物选择性必修三

第3章  基因工程 期末复习知识点总结【新教材】人教版高中生物选择性必修三

第3章基因工程1、什么是基因工程:基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。

2、基因工程的诞生(三个理论和三个技术):基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科基础上发展起来的,正是这些学科的基础理论和相关技术的发展催生了基因工程,具体有三大理论发现和三个技术突破。

1)理论基础:DNA是遗传物质;DNA分子的双螺旋结构和半保留复制;遗传密码的通用性和遗传信息传递的方式;2)技术基础:限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割;DNA连接酶的发现与DNA片段的连接;基因工程载体的构建与应用●理论上的三大发现⑴、发现了遗传物质——DNA1944年,艾弗里(O.T.Avery)的肺炎双球菌转化实验⑵、揭示了遗传物质的分子机制:DNA分子的双螺旋结构和半保留复制1953年,沃森(J.D.Watson)和克里克(F.Crick)的DNA双螺旋结构模型、半保留复制图,获1958年诺贝尔奖。

⑶、确立了遗传信息的传递方式:以密码形式传递1963年,美国尼伦伯格(M.W.Nirenberg)和马太(H.Matthaei)确立了遗传信息以密码形式传递,破译了编码氨基酸的遗传密码(3个核苷酸=1个密码子=1个aa)。

●技术上的三大突破⑴、世界上第一个重组DNA实验:实现不同来源DNA的体外重组1972年斯坦福大学化学家伯格(P.Berg)借助内切酶和连接酶将猴病毒SV40的DNA 和大肠杆菌λ噬菌体的DNA在试管中连接在了一起,第一次成功地实现了DNA的体外重组。

⑵、第一个基因克隆实验:重组DNA表达实验,是世界上第一个基因工程实验1973年美国斯坦福大学医学院遗传学家科恩(S.Cohen)将体外构建的含有四环素和卡那霉素抗性基因的重组质粒导入大肠杆菌,获得了具有双抗性的大肠杆菌转化子,成功完成了第一个基因克隆实验。

生物学知识点 基因工程

生物学知识点 基因工程

生物学知识点基因工程基因工程是生物学中的一个重要分支,它涉及到对基因的操作和改造,以达到改良生物体的目的。

本文将介绍基因工程的基本概念、技术方法以及应用领域。

一、基因工程的概念与原理基因工程是指通过对生物体的基因进行人为的操作和改造,以达到改良生物体的目的的一门学科。

其基本原理是利用现代分子生物学的技术手段,对生物体的基因进行剪接、克隆、转移等操作,从而实现对生物体特性的调控和改变。

基因工程的核心技术是基因重组技术,即将不同生物体的基因进行重组,形成新的基因组合,然后将其导入目标生物体中,使其表达出新的特性。

基因重组技术主要包括以下几个步骤:1. DNA提取:从生物体中提取出含有目标基因的DNA片段。

2. 基因剪接:利用限制酶将目标基因与载体DNA进行剪接,形成重组DNA。

3. 转化:将重组DNA导入到宿主细胞中,使其表达出目标基因。

4. 选择与筛选:通过选择性培养基或标记基因等方法,筛选出带有目标基因的转基因细胞或生物体。

5. 鉴定与分析:对转基因细胞或生物体进行鉴定和分析,确认其是否成功表达目标基因。

二、基因工程的应用领域1. 农业领域:基因工程在农业领域的应用十分广泛。

通过基因工程技术,可以改良农作物的抗病性、耐逆性和产量等性状,提高农作物的品质和产量。

例如,转基因水稻可以提高抗虫性和耐盐碱性,转基因玉米可以提高抗除草剂和杂草的能力。

2. 医学领域:基因工程在医学领域的应用主要包括基因治疗和基因诊断。

基因治疗是指利用基因工程技术,将正常的基因导入到患者体内,以治疗遗传性疾病或其他疾病。

基因诊断是指通过对患者的基因进行检测和分析,以确定患者是否携带某种疾病的遗传基因。

3. 环境保护领域:基因工程可以应用于环境污染治理和生物修复。

通过基因工程技术,可以改造微生物,使其具有降解有机污染物的能力,从而实现对环境污染物的清除和修复。

4. 工业领域:基因工程在工业领域的应用主要包括生物制药和生物能源。

分子生物学与基因工程

分子生物学与基因工程

分子生物学与基因工程分子生物学与基因工程是现代生物科学领域中两个重要的研究方向。

分子生物学是研究生物体内基本生物分子如核酸、蛋白质等的结构、功能和相互作用的科学,而基因工程则是利用分子生物学的方法,对基因进行操作和改造的技术和方法。

一、分子生物学的发展分子生物学起源于20世纪的中期,随着DNA的发现和结构解析,科学家们对基因的了解有了重大的突破。

随后,人类基因组计划的启动将分子生物学推向了新的高度。

经过多年的努力,分子生物学的研究范围逐渐扩大,技术手段不断进步,如PCR、基因测序等技术的发展使得科学家们能够更加深入地研究生物分子的结构和功能。

二、基因工程的原理和应用基因工程是通过切割、插入、改造和转移DNA分子,实现对基因的改变和重组的技术。

它主要包括基因的克隆和表达、转基因技术、基因敲除和基因编辑等。

基因工程的应用广泛,可以用于农业、医学、环境保护等多个领域。

在农业方面,基因工程技术可以通过转基因作物的培育提高农作物的产量和抗性,有效解决粮食安全问题。

比如,通过转基因技术插入抗虫基因,使作物具备抗虫性,降低农药使用量,减少农药对环境的污染。

在医学领域,基因工程技术可以用于治疗遗传性疾病、癌症等疾病。

比如,基因编辑技术CRISPR-Cas9的出现,使得科学家们可以精准地修复人体基因,治疗一些遗传性疾病。

在环境保护方面,基因工程技术可以用于解决一些环境问题。

比如,通过转基因技术改造一些细菌,使其具备降解有毒物质的能力,用于处理工业废水和固体废物。

三、分子生物学与基因工程的关系分子生物学是基因工程的基础和核心科学。

分子生物学的研究成果为基因工程技术的发展提供了理论和实验依据。

分子生物学提供了基因工程技术所需的DNA分离、DNA序列分析等基本技术手段。

通过PCR技术,研究人员可以从大量的DNA样品中扩增目标片段,以便于后续的克隆和改造。

基于分子生物学的DNA测序技术,使得基因工程可以更加精确地进行基因编辑和改造。

基因工程的原理与应用

基因工程的原理与应用

基因工程的原理与应用基因工程是一门应用基因组学和分子生物学知识的科学领域,旨在改变生物体的遗传特性,为人类社会提供更多的经济和生态效益。

本文将介绍基因工程的原理以及其在农业、医药和环境保护等领域的应用。

一、基因工程的原理基因工程的核心原理是通过改变生物体DNA序列来改变其遗传特性。

主要有以下几个步骤:1. 基因的克隆:首先需要选择目标基因,并通过PCR等方法进行扩增。

然后将目标基因与载体DNA(如质粒)连接形成重组DNA,再将重组DNA转移到宿主细胞中。

2. 基因的表达:在宿主细胞中,重组DNA会被复制和转录成RNA,然后再翻译成蛋白质。

这样,目标基因的表达就实现了。

3. 基因的编辑:利用CRISPR-Cas9等技术,可以精确地编辑目标基因的DNA序列,实现精准的基因改造。

二、基因工程在农业领域的应用1. 转基因作物:通过导入抗虫、抗病、耐旱等基因,提高作物的产量和品质。

例如,转Bt基因的棉花能够抵抗棉铃虫的侵害,减少农药的使用。

2. 植物工厂:利用基因工程技术改变植物的生长特性,实现高效、节能、无害的植物生产系统。

例如,通过调控植物的光合效率和营养吸收能力,提高植物的生长速度和产量。

三、基因工程在医药领域的应用1. 基因治疗:通过将正常基因导入患者体内,修复或替代缺陷基因,以治疗遗传性疾病和某些慢性疾病。

例如,用基因工程技术治疗SCID (严重联合免疫缺陷症)等免疫系统缺陷疾病。

2. 药物生产:利用基因工程技术生产重组蛋白质药物,如胰岛素、生长激素和抗体。

这种方法比传统方法更快、更安全,并可以大规模生产药物。

四、基因工程在环境保护领域的应用1. 生物降解:通过改造微生物等生物体的基因,使其能够降解或利用污染物,达到净化环境的目的。

例如,利用基因工程技术改造的细菌可以降解石油类污染物。

2. 生物修复:利用基因工程技术改造植物和微生物,用于修复受到污染的土壤和水体。

例如,用转基因的植物吸收土壤中的重金属,或者用基因工程技术改造的微生物降解有机污染物。

生物学分子生物学与基因工程

生物学分子生物学与基因工程

生物学分子生物学与基因工程生物学分子生物学是研究生物体内分子结构、功能和相互作用的学科,而基因工程是应用分子生物学的原理和技术来改造和利用生物系统的领域。

本文将探讨分子生物学与基因工程之间的关系以及它们在当代生物学和生物技术中的重要性。

一、分子生物学分子生物学是对生物体内分子组成、结构和功能的研究。

它涉及DNA、RNA、蛋白质等生物大分子的结构和功能,以及这些分子在细胞内的相互作用和调控过程。

分子生物学的发展为我们深入理解生命的本质提供了重要的工具和理论基础。

1. DNA结构与复制DNA是生物体中存储遗传信息的分子,其双螺旋结构的发现揭示了遗传信息的传递机制。

分子生物学的研究表明,DNA复制是生物体遗传信息传递的基础,也是细胞分裂和生殖过程中的重要环节。

2. RNA的功能与调控RNA是DNA的转录产物,它参与了蛋白质的合成过程。

除了作为信息中介分子外,RNA还具有调控基因表达和参与细胞内信号传导的重要功能。

分子生物学的研究揭示了RNA的多种类型和功能,在基因表达调控和疾病研究中具有重要意义。

3. 蛋白质的结构与功能蛋白质是生物体内最重要的功能分子,它们参与了几乎所有生命活动的过程。

分子生物学的研究揭示了蛋白质的结构与功能之间的关系,促进了蛋白质结构预测、酶催化机制研究和蛋白质工程的发展。

二、基因工程基因工程是利用分子生物学技术来修改和利用生物体的基因的过程。

它可以用于改良农作物、生产药物、疾病诊断和治疗等领域。

1. 重组DNA技术重组DNA技术是将不同物种的DNA片段组合在一起形成新的DNA分子的技术。

利用该技术,可以将具有特定功能的基因导入不同生物体中,实现对其性状和特性的改变。

重组DNA技术的应用广泛,涵盖了农业、医学、环境保护等多个领域。

2. 基因治疗基因治疗是利用基因工程技术来治疗遗传性疾病和其他疾病的治疗方法。

通过将正常功能基因导入患者的细胞中,可以修复病因基因缺陷,从而达到治疗的效果。

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分子生物学原理
DNA重组体的筛选与鉴定
• 根据重组载体的表型进行筛选: 如质粒的抗药性、营养素的依赖型
• DNA限制酶切图谱分析: 提取经粗选后的宿主DNA,用限制性内 切酶切割后与原来载体比较。
• 利用核酸杂交和放射自显影进行鉴定: 用目的基因作探针监测宿主DNA是否重
组体。
06.02.2021
易于从一个细菌转移入另一个细菌。 有两三个抗药性基因。 06.0有2.202一1 个限制性内切分子生酶物学切原理口。
• pBR322: 常用的 质粒
质粒
06.02.2021
分子生物学原理
噬菌体载体
• 噬菌体 、 M13 噬菌体 • 易于感染大肠杆菌 • 噬菌体DNA比质粒大,对限制性内切
酶有不止一个切口,需经过改造。
分子生物学原理
显影
基因工程策略
06.02.2021
分子生物学原理
第三节、基因工程的应用
• 生命科学研究趋势 • 基因诊断和基因治疗 • 基因工程产品的开发和应用
06.02.2021
分子生物学原理
生命科学研究趋势
• 基因的结构与功能研究 • 基因表达的调控 • 各种生物大分子之间的识别及结合 • 了解生命的奥秘
转入反义GnT-Ⅴ基因
观察其迁移、侵袭、粘附等生物学行为
转移 06.02.2021
转移 分子生物学原理
06.02.2021
基因克隆
分 切 接 转 筛
分子生物学原理
载体和目的基因
• 载体:vector 在宿主细胞内可独立复制的完整DNA分 子。但必须利用宿主的酶系统,才能有 进一步的基因表达能力。
06.02.2021
分子生物学原理
• 转化: 由外来 DNA引 起生物 类型改 变的过 程称为 转化。
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转化
细菌的转化
分子生物学原理
转化
• 病毒癌基因 感染宿主细 胞后,可整 合到宿主染 色体上,从 而使宿主细 胞癌变。
细胞的转化
转染:噬菌体感染宿主菌后,核酸进入菌体
内的过程。 06.02.2021
分子生物学原理--基因工程
第十四章 基因重组与基因工程
06.02.2021
分子生物学原理
基因重组:genomic recombination 重组DNA:recombinant DNA
06.02.2021
分子生物学原理
第一节、自然界的基因重组
• 转化:transformation • 整合:integration • 转导:transduction • 转位:transposition
将细菌涨破。 06.02.2021
分子生物学原理
• 溶原 和裂 解可 以相 互转 变。
06.02.2021
整合
分子生物学原理
转导
• 溶原菌中 DNA可以原样地切离出来, 也可以把邻近的宿主DNA在切离时带走 一部分。后者称转导。
• 带有宿主DNA的噬菌体称转导噬菌体。 • 来源于宿主的基因称转导基因。
分子生物学原理
第五节、聚合酶链反应
• 聚合酶链反应:PCR polymerase chain reaction
• 耐热细菌:DNA聚合酶能耐高温,在 70~80℃有很高的催化力。
• 原理:以目的DNA为模板,快速合成大 量的DNA,用于检测、制备、研究。
06.02.2021
分子生物学原理
第五节、聚合酶链反应
06.02.2021
分子生物学原理
粘 端 连 接
06.02.2021
分子生物学原理
尾 接 法
06.02.2021
分子生物学原理
重组体的转化
• 基因的转移: 重组体进入宿主细胞的过程,已开发了很多 方法。
• 化学法:CaCl2转移法、碱金属离子转移法 • 物理法:显微注射法、基因枪法、电穿孔法 • 生物学法:逆转录病毒载体、腺病毒载体
06.02.2021
分子生物学原理
基因诊断和基因治疗
06.02.2021
分子生物学原理
基因工程产品的开发和应用
• 基因工程疫苗:安全廉价 乙肝疫苗、甲肝疫苗 巨细胞病毒、流行性出血热、轮状病毒、
• 基因工程生产激素类: 胰岛素、生长激素
• 细胞因子: 生长因子、肿瘤坏死因子、造血因子、 干扰素
06.02.2021
• 变性:
95 ℃、15s
• 引物粘合:
55 ℃、30s
• 引物延伸:
72 ℃、1.5m
06.02.2021
分子生物学原理
后 共
同 学 习
会 相
互 提 高
有 期
06.02.2021
分子生物学原理
转位
• 转位:一个或一组基因从一处转到基因 组的另一个位置。
• 这些游动的基因称为转位子(transposon)。
06.02.2021
分子生物学原理
转 位
06.02.2021
分子生物学原理
第二节、基因工程
• 基因工程:是用分离纯化或人工合成的 DNA在体外与载体DNA结合,成为重组 DNA,用以转化宿主,筛选出能表达重 组DNA的活细胞,加以纯化、传代、扩
• 常用的载体有: 质粒、 噬菌体 、 M13 噬菌体 逆转录病毒DNA、昆虫病毒DNA
• 载体与宿主共培育可大量生成,经纯化
后可用于基因工程。
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分子生物学原理
质粒
• 质粒:plasmid 环形双链DNA,大小约为数千碱基对, 存在于大多数细菌的胞质中。
• 拷贝数:每个细菌能容纳的质粒数目。 • 质粒的性质:
06.02.2021
分子生物学原理
重组体的转化
• 转化:重组载体导入宿主后,利用宿主 的酶系统表达的过程。即改变宿主性状 的过程。
06.02.2021
分子生物学原理
基因工程的表达体系的发展
第一代 第二代 第三代 第四代
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载体
宿主
质粒、噬菌体 细菌
穿梭质粒
酵母
动植物病毒、组织培养细胞 昆虫载体 DNA直接导入 生殖细胞
分子生物学原理
整合
• 整合: 噬菌体感染大肠杆菌的第一步
噬菌体粘附于细胞壁上,将自身的 DNA注入菌体中。 此 DNA可与细菌染 色体重组,成为细菌染色体的一部分。
• 溶原菌:整合了噬菌体基因组的细菌。
• 裂解: 噬菌体感染大肠杆菌的第二步
DNA利用菌体的酶系统,复制自身及
外壳蛋白,组装成大量新 噬菌体,并
限制性内切酶的应用
限制性 内切酶

切载体 切目的基因
要点:避免切断目的基因
相同粘性末端 两者相连
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分子生物学原理
载体和目的基因的连接
• 人工连接器:linker 人工合成的寡核苷酸,安置有限制性内 切酶的识别序列。
• DNA连接酶:可用于连接碱基互补的二 段核酸链。
• 连接方式: 粘端连接方式 尾接法
• 一个切口:插入型载体。 • 二个切口:置换型载体。
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分子生物学原理
噬菌体载体
06.02.2021
分子生物学原理
目的基因的来源
• 直接从染色体DNA中分离:原核生物 • 人工合成:简单的多肽 • 从NA后建库。
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分子生物学原理
从mRNA合成cDNA
06.02.2021
分子生物学原理
限制性内切酶的应用
• 限制性内切酶可辨认4~6个核苷酸:回文结构
• 回文结构:palindrome DNA双链具有方向相反顺序一致的结构。
• 平端:blunt end 在同一水平上切断两条链。(钝型末端)
• 粘性末端:sticky end 碱基序列被酶以错开几个核苷酸的形式切开。
06.02.2021
分子生物学原理
限制性内切酶的应用
• Alu I 平端
….AGCT….. ….AG CT... …..TCGA….. ….TC GA...
•BamH I …GGATCC… ...G GATTC… 粘性 TAGG… …CCTAAG G… 末端
06.02.2021
分子生物学原理
分子生物学原理
DNA重组体的筛选与鉴定
• 灭活法 筛选重 组体。
06.02.2021
分子生物学原理
DNA重组体的筛选与鉴定
提取转化细胞DNA
限制性内切酶
琼脂糖凝胶电泳
与原来载体及重组体比较
06.02.2021
分子生物学原理
DNA重组体的筛选与鉴定
硝酸纤维素滤膜
探针
平板
06.02.2021
菌落
X线底片
增,成为克隆。也叫基因克隆或重组 DNA技术。
• 分子水平上操作,细胞水平上表达。
• 赋予重组DNA以新的生命力。
06.02.2021
分子生物学原理
基因工程
肿瘤细胞的转移与细胞表面的糖链类型有关, 而后者又与糖基转移酶的表达相关。 已经证实GnT-Ⅴ与转移有关。
肝癌细胞株SMMC7721
转入GnT-Ⅴ基因
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